Name: 3-dimensional resin casting and imaging of mouse portal vein or intrahepatic bile duct system
Uploaded: 2012-10-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System at JoVE.com

Detta arbete har finansierats med bidrag från National Institutes of Health (NIH) till SSH (R01-DK078640), från Howard Hughes Medical Institute (HHMI) genom HHMI / Vanderbilt University Certificate Program i molekylär medicin till TJW (GRDOT56006779), den Vanderbilt Diabetes Research and Training Center (P30-DK020593) och Vanderbilt Digestive Disease Research Center (P30-DK058404) som ger Core Services.

1. Förbered kanyl <ol><li> Värm en 1-tums lång sektion av PE10 rör med fingertopparna och sträcka den så att slangen blir tunn. Anmärkning: fartygets storlek eller kanal som ska kanylerad kommer att avgöra graden av sträckning som krävs. Kanylen måste väl sträckt för gallgången kastar men får endast krävas att måttligt sträcks för att passa in i den större portvenen. </li><li> Skär sträckta slangen vid en diagonal för att generera en avfasad spets. </li><li> Skär den andra kant...

<ol>
	<li>Sparks, E. E., Perrien, D. S., Huppert, K. A., Peterson, T. E., Huppert, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defects+in+hepatic+Notch+signaling+result+in+disruption+of+the+communicating+intrahepatic+bile+duct+network+in+mice.">Defects in hepatic Notch signaling result in disruption of the communicating intrahepatic bile duct network in mice.</a> Dis. Model Mech. 4, 359-367 (2011).</li><li>Vanderpool, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+interactions+between+hepatocyte+nuclear+factor-6+and+notch+signaling+regulate+mouse+intrahepatic+bile+duct+development+in+vivo.">Genetic interactions between hepatocyte nuclear factor-6 and notch signaling regulate mouse intrahepatic bile duct development in vivo.</a> Hepatology. 55, 233-243 (2012).</li><li>Meyer, E. P., Ulmann-Schuler, A., Staufenbiel, M., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+morphology+and+3D+architecture+of+brain+vasculature+in+a+mouse+model+for+Alzheimer's+disease.">Altered morphology and 3D architecture of brain vasculature in a mouse model for Alzheimer's disease.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 3587-3592 (2008).</li><li>Van Steenkiste, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+corrosion+casting:+analyzing+wall+shear+stress+in+the+portal+vein+and+vascular+abnormalities+in+portal+hypertensive+and+cirrhotic+rodents.">Vascular corrosion casting: analyzing wall shear stress in the portal vein and vascular abnormalities in portal hypertensive and cirrhotic rodents.</a> Lab Invest. 90, 1558-1572 (2010).</li><li>Dickie, R., Cormack, M., Semmler-Behnke, M., Kreyling, W. G., Tsuda, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+pulmonary+lymphatics+in+immature+lungs.">Deep pulmonary lymphatics in immature lungs.</a> Journal of Applied Physiology. 107, 859-863 (2009).</li><li>Kelly, D. M., McEntee, G. P., McGeenery, K. F., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvasculature+of+the+pancreas,+liver,+and+kidney+in+cerulein-induced+pancreatitis.">Microvasculature of the pancreas, liver, and kidney in cerulein-induced pancreatitis.</a> Archives of Surgery. 128, 293-295 (1993).</li><li>Sparks, E. E., Huppert, K. A., Brown, M. A., Washington, M. K., Huppert, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signaling+regulates+formation+of+the+three-dimensional+architecture+of+intrahepatic+bile+ducts+in+mice.">Notch signaling regulates formation of the three-dimensional architecture of intrahepatic bile ducts in mice.</a> Hepatology. 51, 1391-1400 (2010).</li><li>Carlson, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+expression+of+constitutively+active+Notch4+elicits+reversible+arteriovenous+malformations+in+adult+mice.">Endothelial expression of constitutively active Notch4 elicits reversible arteriovenous malformations in adult mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 9884-9889 (2005).</li><li>Hemmeryckx, B., Emmerechts, J., Bovill, E. G., Hoylaerts, M. F., Lijnen, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+murine+venous+circulation.">Effect of ageing on the murine venous circulation.</a> Histochem. Cell Biol. , (2012).</li><li>Hossler, F. E., Olson, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvasculature+of+the+nasal+salt+gland+of+the+duckling,+Anas+platyrhynchos:+quantitative+responses+to+osmotic+adaptation+and+deadaptation+studied+with+vascular+corrosion+casting.">Microvasculature of the nasal salt gland of the duckling, Anas platyrhynchos: quantitative responses to osmotic adaptation and deadaptation studied with vascular corrosion casting.</a> J. Exp. Zool. 254, 237-247 (1990).</li><li>Hossler, F. E., West, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+valve+anatomy+and+morphometry:+studies+on+the+duckling+using+vascular+corrosion+casting.">Venous valve anatomy and morphometry: studies on the duckling using vascular corrosion casting.</a> Am. J. Anat. 181, 425-432 (1988).</li><li>Hossler, F. E., Monson, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+blood+supply+of+intrinsic+lymph+nodes+in+the+wall+of+the+rabbit+urinary+bladder--studies+with+light+microscopy,+electron+microscopy,+and+vascular+corrosion+casting.">Structure and blood supply of intrinsic lymph nodes in the wall of the rabbit urinary bladder--studies with light microscopy, electron microscopy, and vascular corrosion casting.</a> Anat. Rec. 252, 477-484 (1998).</li><li>Hossler, F. E., Monson, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+unique+elastic+sheath+surrounding+the+vesicular+arteries+of+the+rabbit+urinary+bladder--studies+of+the+microvasculature+with+microscopy+and+vascular+corrosion+casting.">Evidence for a unique elastic sheath surrounding the vesicular arteries of the rabbit urinary bladder--studies of the microvasculature with microscopy and vascular corrosion casting.</a> Anat. Rec. 252, 472-476 (1998).</li><li>Hossler, F. E., Kao, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvasculature+of+the+urinary+bladder+of+the+dog:+a+study+using+vascular+corrosion+casting.">Microvasculature of the urinary bladder of the dog: a study using vascular corrosion casting.</a> Microsc. Microanal. 13, 220-227 (2007).</li><li>Wischgoll, T., Choy, J. S., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+morphometry+and+branching+angles+of+porcine+coronary+arterial+tree+from+CT+images.">Extraction of morphometry and branching angles of porcine coronary arterial tree from CT images.</a> Am J Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, H1949-H1955 (2009).</li><li>Hossler, F. E., Douglas, J. E., Douglas, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+morphometry+of+myocardial+capillaries+studied+with+vascular+corrosion+casting+and+scanning+electron+microscopy:+a+method+for+rat+heart.">Anatomy and morphometry of myocardial capillaries studied with vascular corrosion casting and scanning electron microscopy: a method for rat heart.</a> Scan Electron Microsc. , 1469-1475 (1986).</li><li>Hossler, F. E., Douglas, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Corrosion+Casting:+Review+of+Advantages+and+Limitations+in+the+Application+of+Some+Simple+Quantitative+Methods.">Vascular Corrosion Casting: Review of Advantages and Limitations in the Application of Some Simple Quantitative Methods.</a> Microsc. Microanal. 7, 253-264 (2001).</li><li>Mondy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-CT+of+corrosion+casts+for+use+in+the+computer-aided+design+of+microvasculature.">Micro-CT of corrosion casts for use in the computer-aided design of microvasculature.</a> Tissue Eng. Part C Methods. 15, 729-738 (2009).</li><li>Masyuk, T. V., Ritman, E. L., LaRusso, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Assessment+of+the+Rat+Intrahepatic+Biliary+System+by+Three-Dimensional+Reconstruction.">Quantitative Assessment of the Rat Intrahepatic Biliary System by Three-Dimensional Reconstruction.</a> The American Journal of Pathology. 158, 2079-2088 (2001).</li><li>Masyuk, T. V., Ritman, E. L., LaRusso, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Artery+and+Portal+Vein+Remodeling+in+Rat+Liver:+Vascular+Response+to+Selective+Cholangiocyte+Proliferation.">Hepatic Artery and Portal Vein Remodeling in Rat Liver: Vascular Response to Selective Cholangiocyte Proliferation.</a> The American Journal of Pathology. 162, 1175-1182 (2003).</li></ol>

Vi har beskrivit specifika exempel för hur portvenen och intrahepatiska galla system kanal i levern kan gjutas, men denna teknik kan tillämpas på nästan alla andra duktal eller kärlsystemet med smärre anpassningar. Tidigare arbete har visat att möjligheten att denna teknik i flera arter, inklusive mus 1,2,7-9, ankungar 10,11, 12,13 kanin, hund 14, och gris 15, och i många organ, inklusive nasal körtel 14, hjärta 16, 12,13 blåsa, och lever ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namn på reagens </td><td> Företag </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> PE10 polyetylenrör </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1417012P </td><td></td></tr><tr><td> 5-0 kirurgisk svart flätat silke </td><td> Roboz Kirurgiska </td><td> SUT-15-1 </td><td></td></tr><tr><td> Steriject 32 G x 13 mm nål </td><td> Air-Tite </td><td> TSK3213 </td><td></td></tr><tr><td> Spring sax </td><td> Fine Science Tools </td><td> 15.000-08 </td><td></td></tr><tr><td> Nummer 5 pincett </td><td> Fine Science Tools </td><td> 91.150-20 </td><td></td></tr><tr><td> MercOx II kit </td><td> Ladd Forskning </td><td> 21.247 </td><td></td></tr><tr><td> Bensylalkohol </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1816-04 </td><td> Ondast krävs för BABB-clearing </td></tr><tr><td> Bensylbensoat </td><td> MP Biomedicals, LLC </td><td> 154.839 </td><td> Endast för BABB-clearing </td></tr><tr><td> Fosfatbuffrad saltlösning (PBS) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Modellera </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Skala </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Laboratoriet sax </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 15 ml cap polypropenrör </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4% paraformaldahyde </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 15% kaliumhydroxid (KOH) </td><td></td><td></td><td> Endast för maceration </td></tr><tr><td> RAKBLAD </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 100% metanol </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 3 ml luer lock </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

3-dimensional resin casting and imaging of mouse portal vein or intrahepatic bile duct system

Med organ, är den korrekta arkitekturen av vaskulära och duktal strukturer oumbärlig för korrekt fysiologisk funktion, och bildandet och upprätthållandet av dessa strukturer är en mycket reglerad process. Analysen av dessa komplexa, 3-dimensionella strukturer har i hög grad beroende av antingen 2-dimensionell undersökning i avsnitt eller färgämne injektion studier. Dessa tekniker är dock inte kan ge en fullständig och kvantifierbar representation av duktal eller vaskulära strukturer som de är avsedda att belysa. Alternativt genererar arten av 3-dimensionella plastharts kastar en permanent ögonblicksbild av systemet och är ett nytt och brett användbar teknik för att visualisera och kvantifiera 3-dimensionella strukturer och nätverk. En avgörande fördel med hartset gjutsystemet är förmågan att bestämma den intakta och anslutna, eller kommunicerar, strukturen hos ett blodkärl eller kanal. Strukturen av vaskulär och ductal nätverk är avgörande för organfunktion, och denna teknik har potential att underlätta studier av vaskulära och duktal nätverk på flera sätt. Harts gjutning kan användas för att analysera normala morfologi och funktionella arkitektur av en luminal struktur, identifiera utvecklingsmässiga morfogenetiska förändringar och avslöja morfologiska skillnader i vävnad arkitektur mellan normala och sjukdomstillstånd. Tidigare arbete har utnyttjat harts gjutning studera till exempel arkitektoniska och funktionella defekter i musen intrahepatiska gallgången system som inte återspeglas i 2-dimensionell analys av strukturen 1,2, förändringar i hjärnans kärlsystem av Alzheimers sjukdom musmodell 3 , portvenen avvikelser i portalen hypertensiva och cirrotiska möss 4, utvecklande steg i råtta lymfatiska mognad mellan omogna och vuxna lungor 5, omedelbara mikrovaskulära förändringar i råtta lever, bukspottkörtel och njure som svar på kemisk skada6. Här presenterar vi en metod för att generera en 3-dimensionell harts avgjutning av en mus vaskulär eller duktal nätverk, med särskild inriktning på portalen ven och intrahepatisk gallgången. Dessa kastar kan visualiseras genom att rensa eller urlakning av vävnaden och kan sedan analyseras. Denna teknik kan tillämpas på praktiskt taget alla kärl eller duktal systemet och skulle vara direkt tillämpliga på någon undersökning frågat om utveckling, funktion, underhåll eller skada av en 3-dimensionell duktal eller vaskulär struktur.

Watch this Scientific Journal Video about 3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System at JoVE.com

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

En metod för visualisering och kvantifiering av 3-dimensionella strukturen av mus hepatisk portvenen eller intrahepatisk gallgången beskrivs. Detta harts gjutna teknik kan också tillämpas på andra duktala eller vaskulära system och medger<em&gt; In situ</em&gt; Visualisering eller kvantifiering av ett systems intakt kommunicera arkitektur.

3-dimensionell hartsgjutdel och avbildning av mus portvenen eller Intrahepatisk Bile Duct System

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct

Kanylering av Mouse submandibular spottkörteln via Whartons Duct

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their ...

Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion

Modellering och Imaging 3-dimensionell Kollektiv Cell Invasion

A defining characteristic of cancer malignancy is invasion and metastasis 1. In some cancers (e.g. glioma 2), local invasion into surrounding healthy ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Generation och 3-dimensionell kvantifiering av arteriell Skador i möss med användning av optisk Projection Tomography

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopisk Hjälp Rat Levertransplantation med Flow-reglerade Portal Vein Arterialization i akut leversvikt

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Bile Duct Tion hos möss: Induktion av inflammatoriska leverskada och fibros av obstruktiv Kolestas

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

Använda Multi-fluorerade gallsyror och<em&gt; In Vivo</em&gt; Magnetic Resonance Imaging att mäta gallsyratransporten

Along with their traditional role as detergents that facilitate fat absorption, emerging literature indicates that bile acids are potent signaling ...

Ileectomy-induced Bile Overaccumulation in Mouse Intestine

Ileectomy-inducerad galla Overaccumulation i mus tarmen

Intestinal resection is a common therapeutic approach for human diseases such as obesity, inflammatory bowel disease, Crohn's disease, and colon cancer ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Råtta modell av associera lever Partition och portalen ven Ligation stegvis Hepatectomy (ALPPS) förfarandet för

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Ablation of Ischemic Ventricular Tachycardia Using a Multipolar Catheter and 3-dimensional Mapping System for High-density Electro-anatomical Reconstruction

Ablation av ischemisk ventrikulär takykardi med en multipolär katetern och 3-dimensionella kartsystem för hög densitet Electro-anatomisk rekonstruktion

Ventricular tachycardia (VT) in patients with ischemic cardiomyopathy mainly results from endocardial scars after myocardial infarction; those scars ...

Laser Doppler Perfusion Imaging in the Mouse Hindlimb

Laser Doppler Perfusion Imaging i musen Hindlimb

Blood flow recovery is a critical outcome measure after experimental hindlimb ischemia or ischemia-reperfusion. Laser Doppler perfusion imaging (LDPI) is ...