Name: subretinal injection of gene therapy vectors and stem cells in the perinatal mouse eye
Uploaded: 2012-11-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye at JoVE.com

بحث للوقاية من العمى، والمساعدة التجريبية من ناغازاكي تاكايوكي؛ هذا البحث يتفق مع بيان أرفو لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث البصرية. ويدعم KJW من المنح والمعاهد الوطنية للصحة 5T32EY013933 5T32DK007647 20-. ويدعم VBM من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح K08EY020530.

1. تجميع الأجهزة لحقن تحت الشبكية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شراء أو تقديم قطرها ميكرون 100 إبرة من أنبوب زجاجي الشعرية. ويمكن أن يتم ذلك يدويا باستخدام سوتر P-97 مجتذب الماصة أو معدات أخرى مماثلة. سيكون ساخنا نهاية الأنبوب الشعري وسحبت حتى تصل إلى ?...

<ol>
	<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+the+retina+using+pigment+epithelial+cell+transplantation.">Regeneration of the retina using pigment epithelial cell transplantation.</a> Nihon Ganka Gakkai Zasshi. 106, 778-803 (2002).</li><li>Jacobson, S. G., Cideciyan, A. V., Ratnakaram, R., Heon, E., Schwartz, S. B., Roman, A. J., Peden, M. C., Aleman, T. S., Boye, S. L., Sumaroka, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+Leber+congenital+amaurosis+caused+by+RPE65+mutations:+safety+and+efficacy+in+15+children+and+adults+followed+up+to+3+years.">Gene therapy for Leber congenital amaurosis caused by RPE65 mutations: safety and efficacy in 15 children and adults followed up to 3 years.</a> Arch. Ophthalmol. 130, 9-24 (2011).</li><li>Schwartz, S. D., Hubschman, J. P., Heilwell, G., Franco-Cardenas, V., Pan, C. K., Ostrick, R. M., Mickunas, E., Gay, R., Klimanskaya, I., Lanza, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+stem+cell+trials+for+macular+degeneration:+a+preliminary+report.">Embryonic stem cell trials for macular degeneration: a preliminary report.</a> Lancet. 379, 713-720 (2012).</li><li>Wang, N. K., Tosi, J., Kasanuki, J. M., Chou, C. L., Kong, J., Parmalee, N., Wert, K. J., Allikmets, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+reprogrammed+embryonic+stem+cells+improves+visual+function+in+a+mouse+model+for+retinitis+pigmentosa.">Transplantation of reprogrammed embryonic stem cells improves visual function in a mouse model for retinitis pigmentosa.</a> Transplantation. 89, 911-919 (2010).</li><li>Song, B. J., Tsang, S. H., Lin, C. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+retinal+degeneration+and+targets+for+gene+therapy.">Genetic models of retinal degeneration and targets for gene therapy.</a> Gene Ther. Mol. Biol. 11, 229-262 (2007).</li><li>Tosi, J., Sancho-Pelluz, J., Davis, R. J., Hsu, C. W., Wolpert, K. V., Sengillo, J. D., Lin, C. S., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus-mediated+expression+of+cDNA+and+shRNA+slows+degeneration+in+retinitis+pigmentosa.">Lentivirus-mediated expression of cDNA and shRNA slows degeneration in retinitis pigmentosa.</a> Exp. Biol. Med. 236, 1211-1217 (2011).</li><li>Tucker, B. A., Park, I. H., Qi, S. D., Klassen, H. J., Jiang, C., Yao, J., Redenti, S., Daley, G. Q., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+adult+mouse+iPS+cell-derived+photoreceptor+precursors+restores+retinal+structure+and+function+in+degenerative+mice.">Transplantation of adult mouse iPS cell-derived photoreceptor precursors restores retinal structure and function in degenerative mice.</a> PLoS One. 6, e189992 (2011).</li><li>Mahajan, V. B., Mondino, B. J., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A high-throughput Mouse Eye Phenomics System. , (2010).</li><li>Chang, B., Hawes, N. L., Hurd, R. E., Davisson, M. T., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+mutants+in+the+mouse.">Retinal degeneration mutants in the mouse.</a> Vision Res. 42, 517-525 (2002).</li><li>Hawes, N. L., Smith, R. S., Chang, B., Davisson, M., Heckenlively, J. R., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+fundus+photography+and+angiography:+a+catalogue+of+normal+and+mutant+phenotypes.">Mouse fundus photography and angiography: a catalogue of normal and mutant phenotypes.</a> Mol. Vis. 5, 22 (1999).</li><li>Won, J., Shi, L. Y., Hicks, W., Wang, J., Hurd, R., Naggert, J. K., Chang, B., Nishina, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+resources+for+vision+research.">Mouse model resources for vision research.</a> J. Ophthalmol. 2011, 391384 (2011).</li></ol>

هذه التقنية الفيديو يقدم تعليمات على استكمال إجراءات الحقن تحت الشبكية الجراحية بنجاح، وضمان أن يتم وضع ناقلات العلاج الجيني أو الخلايا الجذعية في الموقع اللازمة لعلاج هذا المرض بكفاءة العيون. هذا الأسلوب يسمح للاستهداف خلايا الشبكية مثل RPE أو خلايا مستقبلة للضوء، ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> فهرس </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> 0،8-1،10 X 100 ملم أنابيب شعرية (زجاج) </td><td> كيمبل الزجاج، وشركة </td><td> 34502 99 </td><td></td></tr><tr><td> المشتعلة / براون Micropipette بولير </td><td> سوتر الصك </td><td> P-97 </td><td> ويمكن استخدام Narishige microforge بدلا من ذلك. كتالوج # MF-900 </td></tr><tr><td> Sigmacote </td><td> سيغما الدريتش </td><td> SL2-25ML </td><td> سيليكون </td></tr><tr><td> التخزين المؤقت للفوسفات Dubecco المالحة مع كلوريد الكالسيوم وكلوريد المغنيسيوم </td><td> Gibco-إينفيتروجن </td><td> 14040-133 </td><td></td></tr><tr><td> بالسلامة لوك 25 × 12 3/4G &quot;، وجمع الدم مجموعة </td><td> BD Vacutainer </td><td> 367298 </td><td></td></tr><tr><td> 1 مل الفرعي Q 265/8G الانزلاق تلميح الحقنة </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td> 309597 </td><td></td></tr><tr><td> 0،5-10 ميكرولتر Finnpipette II قابل للتعديل الحجم Pipetter </td><td> Fisherbrand </td><td> 21-377-815 </td><td></td></tr><tr><td> 1-200 ميكرولتر نصائح مشطوف الطبيعية </td><td> USA العلمية، وشركة </td><td> 1111-1700 </td><td></td></tr><tr><td> Discovery.V8 ستيريو المجهر </td><td> زايس </td><td> MC1500 </td><td></td></tr><tr><td> 60 مم X 15 مم شكل المعالجة زراعة الخلايا طبق البوليستيرين </td><td> كورنينج للإعلام </td><td> 430166 </td><td></td></tr><tr><td> مقص مستقيم Vannas </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E3383 S </td><td></td></tr><tr><td> منحني الملقط خلع الملابس مع التسنين حساس </td><td> STORZ Ophthalmics </td><td> E1408 </td><td></td></tr><tr><td> 15 درجة سكين المجهرية </td><td> Wilsعلى شركة العيون </td><td> 091204 </td><td></td></tr><tr><td> الكيتامين </td><td> Ketaset III </td><td> NADA # 45-290 </td><td></td></tr><tr><td> زيلازين </td><td> لويد المختبرات </td><td> NADA # 139-236 </td><td></td></tr><tr><td> بوبيفاكايين (Marcaine) </td><td> استرا زينيكا </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> البوبرينورفين </td><td> سيغما الدريتش </td><td> B9275 </td><td></td></tr></tbody></table>

subretinal injection of gene therapy vectors and stem cells in the perinatal mouse eye

فقدان البصر يؤثر على ما يقرب من 3.4 مليون شخص في الولايات المتحدة، ومن المتوقع أن تزداد في السنوات القادمة .. 1 في الآونة الأخيرة، والعلاج الجيني زرع الخلايا الجذعية أصبحت أدوات العلاجية لعلاج العمى الرئيسية الناجمة عن الأمراض التنكسية الشبكية. وقد ولدت عدة أشكال من الزرع الذاتي للتنكس البقعي المرتبط بالعمر (AMD)، مثل زرع القزحية الصباغ الخلايا الظهارية، نتائج مشجعة، وتجارب اكلينيكية على البشر بدأت لأشكال أخرى من العلاج بالخلايا الجذعية والجينات .. 2 وتشمل هذه RPE65 استبدال الجينات العلاج في المرضى المصابين بعمى جزئي خلقي وزرع الخلايا RPE باستخدام الجذعية الجنينية البشرية (ES) الخلايا في أمراض ستارغاردت 3-4 الآن أن هناك ناقلات العلاج الجيني والخلايا الجذعية المتاحة لعلاج المرضى الذين يعانون من أمراض شبكية العين، فمن المهم للتحقق من هذه العلاجات المحتملة في تطبيق النماذج الحيوانية قبلجي لهم في الدراسات البشرية. الماوس أصبح نموذجا هاما العلمية لاختبار الكفاءة العلاجية للناقلات العلاج الجيني وزرع الخلايا الجذعية في العين 5-8 في هذه المقالة الفيديو، نقدم تقنية لحقن ناقلات العلاج الجيني أو الخلايا الجذعية في الفضاء تحت الشبكية من العين الماوس مع تقليل الأضرار التي لحقت الأنسجة المحيطة بها.

ويرد الرسم من العين الفأر مع الهياكل الرئيسية مرقوم للإشارة، مع السهام عرض المواقع لإجراءات حقن كل intravitreal وتحت الشبكية الجراحية (النصال، الشكل 1). ويمكن حقن العلاج الجيني النواقل، مثل ناقلات lentiviral lacZ (الشكل 2)، وذلك باستخدام هذه المواقع. بالإضا?...

Watch this Scientific Journal Video about Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye at JoVE.com

Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye

هذه التقنية الجراحية يوضح حقن ناقلات العلاج الجيني والخلايا الجذعية في الفضاء تحت الشبكية للعين الماوس.

تحت الشبكية حقن المتجهات العلاج الجيني والخلايا الجذعية في العين ماوس

The loss of sight affects approximately 3.4 million people in the United States and is expected to increase in the upcoming years.1 Recently, gene therapy ...

Research

JoVE Journal

Medicine

High-Efficiency Transduction of Liver Cancer Cells by Recombinant Adeno-Associated Virus Serotype 3 Vectors

عالية الكفاءة تنبيغ الخلايا السرطانية الكبد المصلي المؤتلف الفيروسات الغدة المرتبطين 3 ناقلات

Recombinant vectors based on a non-pathogenic human parvovirus, the adeno-associated virus 2 (AAV2) have been developed, and are currently in use in a ...

Establishment and Propagation of Human Retinoblastoma Tumors in Immune Deficient Mice

إنشاء والدعوة للأورام الشبكية الإنسان في الفئران أن نقص المناعة

Culturing retinoblastoma tumor cells in defined stem cell media gives rise to primary tumorspheres that can be grown and maintained for only a limited ...

Production and Detection of Reactive Oxygen Species (ROS) in Cancers

Production and Detection of Reactive Oxygen Species ROS in Cancers

الإنتاج والكشف عن أنواع الاكسجين التفاعلية (ريوس) في السرطان

Reactive oxygen species include a number of molecules that damage DNA and RNA and oxidize proteins and lipids (lipid peroxydation). These reactive ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

وسيلة جديدة لإدارة الجراحية داخل الرغامى وكلاء الحيويه في نموذج الفأر الجنينية

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

شبكية العين مفرزة النموذجي في القوارض بواسطة حقن تحت الشبكية من هيالورونات الصوديوم

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Subretinal Transplantation of MACS Purified Photoreceptor Precursor Cells into the Adult Mouse Retina

زرع تحت الشبكية من MACS تنقية الخلايا السلائف مستقبلات ضوئية في شبكية العين الماوس الكبار

Vision impairment and blindness due to the loss of the light-sensing cells of the retina, i.e. photoreceptors, represents the main reason for disability ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

أداء تحت الشبكية الحقن في القوارض لتسليم خلايا الظهارة الصبغية الشبكية في تعليق

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

التجريبية الزرق المستحث بواسطة حقن العيني من المجهرية المغناطيسي

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

دراسة سرطان البنكرياس الجذعية خصائص الخلايا لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

تطوير وبناء الجرذ نموذج ألفا synuclein لمرض باركنسون عن طريق حقن المجسم من النواقل الفيروسية المؤتلف المرتبطة الغدة

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...