Name: subretinal injection of gene therapy vectors and stem cells in the perinatal mouse eye
Uploaded: 2012-11-25T14:00:00
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Takayuki नागासाकी से प्रायोगिक सहायता, अंधापन को रोकने के इस शोध अनुसंधान नेत्र और दृश्य अनुसंधान में जानवरों के इस्तेमाल के लिए ARVO वक्तव्य के साथ अनुपालन. KJW NIH 5T32EY013933 और 5T32DK007647-20 अनुदान द्वारा समर्थित है. VBM NIH अनुदान K08EY020530 द्वारा समर्थित है.

1. Subretinal इंजेक्शन के लिए उपकरणों को इकट्ठा <ol><li> खरीद या एक गिलास केशिका ट्यूब से एक 100 सुक्ष्ममापी व्यास सुई. Sutter P-97 pipet डांड़ी या अन्य इसी तरह के उपकरणों का उपयोग करके मैन्युअल रूप से किया जा सकता है. केशिका ट्य...

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	<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+the+retina+using+pigment+epithelial+cell+transplantation.">Regeneration of the retina using pigment epithelial cell transplantation.</a> Nihon Ganka Gakkai Zasshi. 106, 778-803 (2002).</li><li>Jacobson, S. G., Cideciyan, A. V., Ratnakaram, R., Heon, E., Schwartz, S. B., Roman, A. J., Peden, M. C., Aleman, T. S., Boye, S. L., Sumaroka, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+Leber+congenital+amaurosis+caused+by+RPE65+mutations:+safety+and+efficacy+in+15+children+and+adults+followed+up+to+3+years.">Gene therapy for Leber congenital amaurosis caused by RPE65 mutations: safety and efficacy in 15 children and adults followed up to 3 years.</a> Arch. Ophthalmol. 130, 9-24 (2011).</li><li>Schwartz, S. D., Hubschman, J. P., Heilwell, G., Franco-Cardenas, V., Pan, C. K., Ostrick, R. M., Mickunas, E., Gay, R., Klimanskaya, I., Lanza, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+stem+cell+trials+for+macular+degeneration:+a+preliminary+report.">Embryonic stem cell trials for macular degeneration: a preliminary report.</a> Lancet. 379, 713-720 (2012).</li><li>Wang, N. K., Tosi, J., Kasanuki, J. M., Chou, C. L., Kong, J., Parmalee, N., Wert, K. J., Allikmets, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+reprogrammed+embryonic+stem+cells+improves+visual+function+in+a+mouse+model+for+retinitis+pigmentosa.">Transplantation of reprogrammed embryonic stem cells improves visual function in a mouse model for retinitis pigmentosa.</a> Transplantation. 89, 911-919 (2010).</li><li>Song, B. J., Tsang, S. H., Lin, C. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+retinal+degeneration+and+targets+for+gene+therapy.">Genetic models of retinal degeneration and targets for gene therapy.</a> Gene Ther. Mol. Biol. 11, 229-262 (2007).</li><li>Tosi, J., Sancho-Pelluz, J., Davis, R. J., Hsu, C. W., Wolpert, K. V., Sengillo, J. D., Lin, C. S., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus-mediated+expression+of+cDNA+and+shRNA+slows+degeneration+in+retinitis+pigmentosa.">Lentivirus-mediated expression of cDNA and shRNA slows degeneration in retinitis pigmentosa.</a> Exp. Biol. Med. 236, 1211-1217 (2011).</li><li>Tucker, B. A., Park, I. H., Qi, S. D., Klassen, H. J., Jiang, C., Yao, J., Redenti, S., Daley, G. Q., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+adult+mouse+iPS+cell-derived+photoreceptor+precursors+restores+retinal+structure+and+function+in+degenerative+mice.">Transplantation of adult mouse iPS cell-derived photoreceptor precursors restores retinal structure and function in degenerative mice.</a> PLoS One. 6, e189992 (2011).</li><li>Mahajan, V. B., Mondino, B. J., Tsang, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A high-throughput Mouse Eye Phenomics System. , (2010).</li><li>Chang, B., Hawes, N. L., Hurd, R. E., Davisson, M. T., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinal+degeneration+mutants+in+the+mouse.">Retinal degeneration mutants in the mouse.</a> Vision Res. 42, 517-525 (2002).</li><li>Hawes, N. L., Smith, R. S., Chang, B., Davisson, M., Heckenlively, J. R., John, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+fundus+photography+and+angiography:+a+catalogue+of+normal+and+mutant+phenotypes.">Mouse fundus photography and angiography: a catalogue of normal and mutant phenotypes.</a> Mol. Vis. 5, 22 (1999).</li><li>Won, J., Shi, L. Y., Hicks, W., Wang, J., Hurd, R., Naggert, J. K., Chang, B., Nishina, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+resources+for+vision+research.">Mouse model resources for vision research.</a> J. Ophthalmol. 2011, 391384 (2011).</li></ol>

इस वीडियो तकनीक subretinal इंजेक्शन शल्य प्रक्रिया को सफलतापूर्वक पूरा करने, और यह सुनिश्चित करना है कि जीन थेरेपी सदिश या आवश्यक स्थान पर कुशलतापूर्वक नेत्र रोग के इलाज में स्टेम कोशिकाओं को रखा जाता है पर ...

<table border="1"><tbody><tr><td> नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूची </td><td> टिप्पणियां </td></tr><tr><td> 0.8-1.10 x 100 मिमी केशिका ट्यूब (कांच) </td><td> Kimble ग्लास इंक, </td><td> +३४,५०२ +९९ </td><td></td></tr><tr><td> ज्वलंत / ब्राउन micropipette डांड़ी </td><td> Sutter साधन </td><td> P-97 </td><td> Narishige microforge बजाय इस्तेमाल किया जा सकता है. कैटलॉग एमएफ-900 # </td></tr><tr><td> Sigmacote </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> SL2 - 25ml </td><td> सिलिकॉन </td></tr><tr><td> Dubecco फास्फेट कैल्शियम क्लोराइड और मैग्नेशियम क्लोराइड के साथ खारा Buffered </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 14040-133 </td><td></td></tr><tr><td> रक्त संग्रह सेट, सुरक्षा लोक 3/4G x 12 &quot;25 </td><td> BD Vacutainer </td><td> 367298 </td><td></td></tr><tr><td> 1 उप - क्यू मिलीग्राम 265/8G स्लिप युक्ति सिरिंज </td><td> बेक्टन, डिकिन्सन </td><td> 309597 </td><td></td></tr><tr><td> 0.5-10 μl Finnpipette द्वितीय समायोज्य मात्रा Pipetter </td><td> Fisherbrand </td><td> 21-377-815 </td><td></td></tr><tr><td> 1-200 μl प्राकृतिक Beveled टिप्स </td><td> अमरीका साइंटिफिक इंक, </td><td> 1111-1700 </td><td></td></tr><tr><td> Discovery.V8 स्टीरियो माइक्रोस्कोप </td><td> Zeiss </td><td> MC1500 </td><td></td></tr><tr><td> 60 मिमी x 15 मिमी शैली व्यवहार Polystyrene सेल संस्कृति डिश </td><td> Corning शामिल </td><td> 430166 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas विषमलिंगी कैंची </td><td> Storz ओफ्ताल्मिक्स </td><td> E3383 एस </td><td></td></tr><tr><td> घुमावदार नाजुक Serrations के साथ ड्रेसिंग संदंश </td><td> Storz ओफ्ताल्मिक्स </td><td> E1408 </td><td></td></tr><tr><td> 15 डिग्री Microsurgery चाकू </td><td> Wilsनेत्र कार्पोरेशन </td><td> 091204 </td><td></td></tr><tr><td> Ketamine </td><td> Ketaset III </td><td> 45-290 # नाडा </td><td></td></tr><tr><td> Xylazine </td><td> लॉयड प्रयोगशालाओं </td><td> 139-236 # नाडा </td><td></td></tr><tr><td> Bupivacaine (Marcaine) </td><td> एस्ट्राज़ेनेका </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> Buprenorphine </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> B9275 </td><td></td></tr></tbody></table>

subretinal injection of gene therapy vectors and stem cells in the perinatal mouse eye

दृष्टि की हानि संयुक्त राज्य अमेरिका में लगभग 3.4 लाख लोगों को प्रभावित करता है और आगामी वर्षों में वृद्धि की उम्मीद है 1 हाल ही में, जीन थेरेपी और स्टेम सेल प्रत्यारोपण रेटिना अपक्षयी रोगों से उत्पन्न अंधापन के इलाज के लिए महत्वपूर्ण चिकित्सकीय उपकरण बन गए हैं. ऑटोलॉगस प्रत्यारोपण की उम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन के लिए कई रूपों (AMD), आईरिस वर्णक उपकला कोशिका प्रत्यारोपण के रूप में उत्साहजनक परिणाम उत्पन्न किया है, और मानव नैदानिक ​​परीक्षणों जीन और स्टेम सेल उपचार के अन्य रूपों के लिए शुरू कर दिया है 2 इन RPE65 जीन प्रतिस्थापन शामिल हैं. Leber जन्मजात अंधता और RPE सेल है Stargardt रोग में मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (ते) का उपयोग कर प्रत्यारोपण के साथ रोगियों में चिकित्सा 3-4 अब यह है कि जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम कोशिकाओं रेटिना रोगों के साथ रोगियों के उपचार के लिए उपलब्ध हैं, यह महत्वपूर्ण है सत्यापित करने के लिए पशु मॉडल में इन संभावित उपचारों से पहले लागू होते हैंउन्हें मानव अध्ययन में रही है. माउस जीन थेरेपी और आंखों में स्टेम कोशिका प्रत्यारोपण वैक्टर की चिकित्सीय प्रभावकारिता परीक्षण के लिए एक महत्वपूर्ण वैज्ञानिक मॉडल बन गया है 5-8 इस वीडियो लेख में, हम जीन थेरेपी वैक्टर या स्टेम कोशिकाओं के subretinal अंतरिक्ष में इंजेक्षन तकनीक मौजूद है माउस आंख जबकि आसपास के ऊतकों को नुकसान को कम.

माउस आँख की एक बैठक प्रमुख संदर्भ के लिए लेबल की संरचनाओं के साथ दिखाया गया है, तीर दोनों intravitreal और subretinal इंजेक्शन शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं (arrowheads, चित्रा 1) के लिए स्थानों को प्रदर्शित करने के साथ. ज?...

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Subretinal Injection of Gene Therapy Vectors and Stem Cells in the Perinatal Mouse Eye

इस शल्य चिकित्सा तकनीक माउस आँख की subretinal अंतरिक्ष में जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम कोशिकाओं के इंजेक्शन को दिखाता है.

माउस आंख में जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम सेल के इंजेक्शन Subretinal

The loss of sight affects approximately 3.4 million people in the United States and is expected to increase in the upcoming years.1 Recently, gene therapy ...

Research

JoVE Journal

Medicine

High-Efficiency Transduction of Liver Cancer Cells by Recombinant Adeno-Associated Virus Serotype 3 Vectors

पुनः संयोजक एडिनो - एसोसिएटेड वायरस 3 वैक्टर सीरोटाइप द्वारा उच्च क्षमता लिवर कैंसर कोशिकाओं के transduction

Recombinant vectors based on a non-pathogenic human parvovirus, the adeno-associated virus 2 (AAV2) have been developed, and are currently in use in a ...

Establishment and Propagation of Human Retinoblastoma Tumors in Immune Deficient Mice

स्थापना और इम्यून कमी चूहों में मानव retinoblastoma ट्यूमर का प्रचार

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और कैंसर में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (ROS) की जांच उत्पादन

Reactive oxygen species include a number of molecules that damage DNA and RNA and oxidize proteins and lipids (lipid peroxydation). These reactive ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

एक भ्रूण माउस मॉडल में एक उपन्यास Bioactive एजेंटों Intratracheal प्रशासन के लिए शल्य दृष्टिकोण

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Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Subretinal Transplantation of MACS Purified Photoreceptor Precursor Cells into the Adult Mouse Retina

वयस्क माउस रेटिना में एमएएसएस शुद्ध फोटोरिसेप्टर अग्रदूत कोशिकाओं का उपरेटिनल प्रत्यारोपण

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Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

निलंबन में रेटिना वर्णक उपकला कोशिकाओं उद्धार करने के लिए कृन्तकों में subretinal इंजेक्शन प्रदर्शन

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

प्रायोगिक ग्लूकोमा चुंबकीय microspheres की नेत्र इंजेक्शन द्वारा प्रेरित

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

अग्नाशय के कैंसर नई उपचार रणनीतियों के विकास के लिए सेल के लक्षण स्टेम का अध्ययन

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Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

एक संयोजक एडिनो जुड़े वायरल वेक्टर के stereotactic इंजेक्शन के माध्यम से पार्किंसंस रोग के लिए एक अल्फा-synuclein आधारित चूहे मॉडल का विकास

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...