Name: simultaneous intracellular recording of a lumbar motoneuron and the force produced by its motor unit in the adult mouse in vivo
Uploaded: 2012-12-05T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo at JoVE.com

Diese Arbeit wurde möglich dank der finanziellen Unterstützung der Fondation pour la Recherche Médicale (FRM), der Milton Safenowitz Postdoctoral Fellowship für ALS Forschung (ALS Association), NIH NINDS Grants NS05462 und NS034382 und ANR Stipendium HyperMND gemacht.

Ein. Step One Pre-Anästhesie Medikamente: 10-15 min vor der Einleitung der Narkose, injizieren Atropin (0,20 mg / kg) und methylprenidsolone (0,05 mg) subkutan den Speichelfluss und Ödeme bzw. zu verhindern. 2. Schritt Zwei Narkoseeinleitung: injizieren Pentobarbital-Natrium (70 mg / kg) oder ein Gemisch von Ketamin / Xylazin (100 mg / kg und 10 mg / kg) intraperitoneal. Lassen Sie die Maus unter, bis keine toe Prise reflex erhalten wer...

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Die Herstellung hier beschrieben ist das erste, das erlaubt, in der erwachsenen Maus, simultane Aufzeichnung eines intrazellulären lumbalen Motoneuron und die Messung der Kraft, die durch den Muskelfasern durch seine Axon innerviert hergestellt. Aufgrund der kleinen Größe des Tieres können die chirurgischen Fähigkeiten für diese Zubereitung zu schwierig zu erwerben. Sobald jedoch diese Fähigkeiten beherrscht werden, kann die gesamte Operation in drei Stunden durchgeführt werden, und ...

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Manuel Marin

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Erratum: Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In Vivo

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenzes </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare (optional) </td></tr><tr><td> Atropinsulfat </td><td> Aguettant </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Methylprenidsolone </td><td> Pfizer </td><td> Solu-Medrol </td><td></td></tr><tr><td> Natriumpentobarbiton </td><td> Sanofi-Aventis </td><td> Pentobarbital </td><td></td></tr><tr><td> Ketamin </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Xylazin </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Glucose </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Plasma-Expander </td><td> Roger Bellon </td><td> Plasmagel </td><td></td></tr><tr><td> Blunt Scheren </td><td> FST </td><td> 14079-10 </td><td></td></tr><tr><td> Blunt feinen Schere </td><td> FST </td><td> 15025-10 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas Federschere </td><td> FST </td><td> 15002-08 </td><td></td></tr><tr><td> Feinen Pinzette gezahnt </td><td> FST </td><td> 11370-32 </td><td></td></tr><tr><td> Feinen Pinzette gezahnt </td><td> FST </td><td> 11370-31 </td><td></td></tr><tr><td> Cunningham Spinal Adapter </td><td> Stoelting Co. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kwik-Cast Dichtstoff </td><td> WPI </td><td> # KWIK-CAST </td><td></td></tr><tr><td> Ventilator </td><td> CWE Inc </td><td> SAR-830/AP </td><td></td></tr><tr><td> Kapnograph </td><td> CWE Inc </td><td> μcapstar </td><td></td></tr><tr><td> Heizdecke </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 507221F </td><td></td></tr><tr><td> Intrazelluläre Verstärker </td><td> Axon Instruments </td><td> Axoclamp 2B </td><td></td></tr><tr><td> Pipette puller </td><td> Sutter Instruments </td><td> P-97 </td><td></td></tr><tr><td> KCl </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P9333-500G </td><td></td></tr></tbody></table>

simultaneous intracellular recording of a lumbar motoneuron and the force produced by its motor unit in the adult mouse in vivo

Das Rückenmark Motoneuron ist seit langem ein gutes Modell für die Untersuchung neuronaler Funktion, weil es ein Neuron des zentralen Nervensystems mit den einzigartigen Eigenschaften von (1) mit leicht identifizierbaren Ziele (die Muskelfasern) und daher eine sehr bekannte Funktion ist (die Muskelkontraktion steuern), (2) dass die konvergente Ziel vieler Wirbelsäulen-und absteigend Netzwerke, daher der Name &quot;gemeinsame Endstrecke&quot; und (3) mit einem großen soma, die es möglich, sie mit scharfen intrazellulären Elektroden eindringen lässt . Weiterhin, wenn es in vivo untersucht, ist es möglich, gleichzeitig aufnehmen die elektrische Aktivität der Motoneuronen und der Kraft, die durch ihre Muskelkraft Ziele entwickelt. Durchführen intrazelluläre Ableitungen von Motoneuronen in vivo daher legte den Experimentator in der einzigartigen Position, in der Lage zu studieren, zur gleichen Zeit, all die Fächer des &quot;Motor-Einheit&quot; (der Name des Motoneuron, dessen Axon unddie Muskelfasern es innerviert 1): Die Eingänge Auftreffen auf die Motoneuronen, die elektrophysiologischen Eigenschaften der Motoneuronen, und die Auswirkungen dieser Eigenschaften auf die physiologische Funktion der Motoneuronen, also die Kraft, durch die Motor-Einheit produziert. Allerdings ist dieser Ansatz sehr schwierig, da die Zubereitung nicht sein kann gelähmten und damit die mechanische Stabilität für die intrazelluläre Aufnahme reduziert wird. So hat diese Art von Experimenten nur bei Katzen und Ratten erzielt worden. Jedoch könnte die Untersuchung der Wirbelsäule motorische Systeme stellen eine enorme Sprung wenn es möglich war, ähnliche Experimente in normalen und genetisch modifizierten Mäusen durchzuführen. Aus technischen Gründen, die Untersuchung der Wirbelsäule Netzwerke in Mäusen meist hat für Neugeborene in vitro Präparaten, wo die Motoneuronen und die Wirbelsäule Netzwerke sind unreife beschränkt, werden die Motoneuronen von ihren Zielen getrennt, und wenn sie in Scheiben, die mo studierttoneurons werden von den meisten ihrer Eingänge getrennt. Bis vor kurzem waren nur ein paar Gruppen gelang es, intrazelluläre Ableitungen von Motoneuronen in vivo 2-4 durchzuführen, einschließlich unserem Team, ein neues Präparat, das uns zu einer sehr stabilen Aufnahmen von Motoneuronen in vivo zu erhalten, in erwachsenen Mäusen 5,6 erlaubt veröffentlicht. Allerdings wurden diese Aufnahmen in gelähmten Tieren, dh ohne die Möglichkeit, die Kraft Ausgang dieser Motoneurone aufzunehmen. Hier präsentieren wir eine Erweiterung dieser ursprünglichen Zubereitung, in denen wir waren in der Lage, um die gleichzeitige Aufnahmen der elektrophysiologischen Eigenschaften der Motoneurone und der Kraft, die durch ihre motorischen Einheit entwickelt zu erhalten. Dies ist eine wichtige Errungenschaft, da es uns um die verschiedenen Arten von Motoneuronen auf der Grundlage ihrer Kraft Profil zu identifizieren und damit Offenlegung ihrer Funktion ermöglicht. Gekoppelt mit genetischen Modellen stören Wirbelsäule segmentale Schaltung 7-9 oder Reproduktions menschlichen disease 10,11 rechnen wir diese Technik ein wesentliches Instrument für die Untersuchung der spinalen motorischen Systems.

Abbildung 1 zeigt, wie ein Motoneuron aus dem Triceps surae Gruppe nach dem Eindringen zu identifizieren. Bei niedrigen Stimulationsintensität, kann nur ein monosynaptischen EPSP (Abbildung 1A). Bei höheren Intensität könnte der EPSP groß genug sein, um eine &quot;orthodromen&quot; spike (1B) auszulösen. Bei noch höheren Stimulationsintensität, erscheint eine Alles-oder-Nichts-antidrome Spitze, mit einer kürzeren Latenzzeit als die monosynaptischen EPSP <strong...

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Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

Dieses neue Verfahren erlaubt die gleichzeitige intrazelluläre Aufnahme eines einzigen erwachsenen Maus Motoneuron und die Messung der Kraft, die von seiner Muskelfasern hergestellt. Die kombinierte Untersuchung der elektrischen und mechanischen Eigenschaften der Motoreinheiten in normalen und genetisch modifizierten Tieren ist ein Durchbruch für das Studium des neuromuskulären Systems.

Gleichzeitige Intrazelluläre Aufnahme eines Lumbar Motoneuron und dem Force durch seine Motor Unit in der adulten Maus Produziert<em&gt; In vivo</em

The  spinal motoneuron has long been a good model system for studying neural  function because it is a neuron of the central nervous system with the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

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Die Transfektion von Maus retinalen Ganglienzellen durch In vivo Elektroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

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Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

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The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

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