Name: bioluminescent bacterial imaging in vivo
Uploaded: 2012-11-04T23:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo at JoVE.com

Les auteurs tiennent à remercier un soutien pertinent à ce manuscrit de la Commission européenne du septième programme-cadre (PIOF-GA-2009-255466) et le Conseil de la santé irlandais de recherche (HRA_POR/2010/138). Lux-étiqueté E. coli était un cadeau aimable de M. Cormac Gahan, University College Cork.

1. L&#39;induction des tumeurs <ol><li> Pour l&#39;induction de tumeurs de routine, la dose tumorigène minimale de cellules en suspension dans 200 ul de milieu de culture sans sérum a été injecté par voie sous cutanée (sc) dans le flanc de l&#39;infection gratuit 6-8 semaines vieilles femelles Balb / C ou athymiques souris MF1-nu/nu n = 6 (Harlan, Oxfordshire, Royaume-Uni) (1 x 10 6 cellules 4T1) en utilisant une aiguille de seringue de calibre 21. La viabilité des cellules utilisées pour l&#39;inoc...

<ol>
	<li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+in+vivo+bioluminescent+imaging+for+the+study+of+bacterial+tumour+targeting.">High resolution in vivo bioluminescent imaging for the study of bacterial tumour targeting.</a> PLoS One. 7, e30940 (2012).</li><li>Kuo, C., Coquoz, O., Troy, T. L., Xu, H., Rice, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+in+vivo+bioluminescent+sources+based+on+multispectral+imaging.">Three-dimensional reconstruction of in vivo bioluminescent sources based on multispectral imaging.</a> J. Biomed. Opt. 12, 024007 (2007).</li><li>Tangney, M., Ahmad, S., Collins, S. A., O'Sullivan, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+prostate+cancer.">Gene therapy for prostate cancer.</a> Postgrad Med. 122, 166-180 (2010).</li><li>Morrissey, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+targeting+with+systemically+administered+bacteria.">Tumour targeting with systemically administered bacteria.</a> Curr. Gene Ther. 10, 3-14 (2010).</li><li>Collins, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+vectors+in+cancer+immunotherapy:+which+vector+for+which+strategy.">Viral vectors in cancer immunotherapy: which vector for which strategy.</a> Curr. Gene Ther. 8, 66-78 (2008).</li><li>Yu, Y. A., Zhang, Q., Szalay, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+conditions+required+for+tumor+colonization+by+intravenously+delivered+bacteria.">Establishment and characterization of conditions required for tumor colonization by intravenously delivered bacteria.</a> Biotechnol. Bioeng. 100, 567-578 (2008).</li><li>Baban, C. K., Cronin, M., O'Hanlon, D., O'Sullivan, G. C., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacteria+as+vectors+for+gene+therapy+of+cancer.">Bacteria as vectors for gene therapy of cancer.</a> Bioeng. Bugs. 1, 385-394 (2010).</li><li>Cronin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orally+administered+bifidobacteria+as+vehicles+for+delivery+of+agents+to+systemic+tumors.">Orally administered bifidobacteria as vehicles for delivery of agents to systemic tumors.</a> Mol. Ther. 18, 1397-1407 (2010).</li><li>van Pijkeren, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+Listeria+monocytogenes-based+DNA+delivery+system+for+cancer+gene+therapy.">A novel Listeria monocytogenes-based DNA delivery system for cancer gene therapy.</a> Hum. Gene Ther. 21, 405-416 (2010).</li><li>Ahmad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+effective+antitumor+response+after+mucosal+bacterial+vector+mediated+DNA+vaccination+with+endogenous+prostate+cancer+specific+antigen.">Induction of effective antitumor response after mucosal bacterial vector mediated DNA vaccination with endogenous prostate cancer specific antigen.</a> J. Urol. 186, 687-693 (2011).</li><li>Riedel, C. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+luciferase+tagging+system+for+Listeria+monocytogenes+allows+real-time+monitoring+in+vivo+and+in+vitro.">Improved luciferase tagging system for Listeria monocytogenes allows real-time monitoring in vivo and in vitro.</a> Appl Environ Microbiol. 73, 3091-3094 (2007).</li><li>Cheng, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-targeting+prodrug-activating+bacteria+for+cancer+therapy.">Tumor-targeting prodrug-activating bacteria for cancer therapy.</a> Cancer Gene Ther. 15, 393-401 (2008).</li><li>Foucault, M. L., Thomas, L., Goussard, S., Branchini, B. R., Grillot-Courvalin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+intestinal+colonization+by+Escherichia+coli+in+mice.">In vivo bioluminescence imaging for the study of intestinal colonization by Escherichia coli in mice.</a> Appl. Environ. Microbiol. 76, 264-274 (2010).</li><li>Collins, S. A., Hiraoka, K., Inagaki, A., Kasahara, N., Tangney, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+Imaging+For+Gene+&amp;+Cell+Therapy.">PET Imaging For Gene &amp; Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li><li>Tangney, M., Francis, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+Optical+Imaging+in+Gene+&amp;+Cell+Therapy.">In vivo Optical Imaging in Gene &amp; Cell Therapy.</a> Curr. Gene Ther. , (2012).</li></ol>

Dans le cadre de la thérapie génique, l&#39;utilisation d&#39;agents biologiques pour la livraison de gènes thérapeutiques aux patients a montré des résultats prometteurs 3-5. Comme les virus, les propriétés biologiques innés de bactéries permettre la délivrance d&#39;ADN efficace de cellules ou de tissus, en particulier dans le cadre du cancer. Il a été montré que les bactéries sont naturellement capables de ralliement pour des tumeurs lorsqu&#39;elles sont administrés par voie systémique r?...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Lignée cellulaire 4T1 </td><td> ATCC </td><td> CRL-2539 </td><td> Syngénique modèle du cancer du sein dérivée d&#39;une façon spontanée résultant BALB / c tumeur mammaire </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D6429 </td><td> Eagle modifié par Dulbecco à moyen </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D8537 </td><td> Phosphate Buffered Saline </td></tr><tr><td> Xenogen IVIS </td><td> Caliper Life Sciences </td><td></td><td> IVIS 100 pour l&#39;imagerie 2D; Spectre IVIS pour la 3D. </td></tr><tr><td> Luria Broth Miller (LB) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L2542 </td><td> Milieu de croissance pour E. coli </td></tr&gt; <tr><td> Érythromycine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> E5389 </td><td> Antibiotique </td></tr><tr><td> Streptomycine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S9137 </td><td> Antibiotique </td></tr><tr><td> Souris MF1nu/nu </td><td> Harlan (Royaume-Uni) </td><td> 069 (nu) / 070 (nu / +) </td><td> Hsd: athymique Nu-Foxn1nu </td></tr><tr><td> Souris Balb / c </td><td> Harlan (Royaume-Uni) </td><td> 066 </td><td> Haplotype H-2 d </td></tr><tr><td> Aiguille de gavage </td><td> Vet-Tech Solutions (UK) </td><td> DE009 </td><td> 22G x 38mm droite aiguille de gavage </td></tr><tr><td> Seringue pour injection IV </td><td> BD Biosciences </td><td> 309309 à 1 ml </td><td> Seringue à insuline avec 28 x G ½ pouces micro-aiguille fine IV. </td></tr><tr><td> Seringue pour inoculation de la tumeur </td><td> Braun </td><td> 9161376V </td><td> Omnifix 26 x G &amp;frac12; aiguille pouces </td></tr></tbody></table>

bioluminescent bacterial imaging in vivo

Cette vidéo décrit l&#39;utilisation de l&#39;imagerie du corps entier bioluminesce (BLI) pour l&#39;étude de la traite des bactéries chez des souris vivantes, avec un accent sur l&#39;utilisation de bactéries en thérapie génique et cellulaire du cancer. Les bactéries présentes une classe intéressante de vecteur pour la thérapie du cancer, qui possède une capacité naturelle à se développer de manière préférentielle dans les tumeurs après administration systémique. Bactéries génétiquement pour exprimer le gène lux cassette d&#39;autorisation BLI détection des bactéries et en même temps les sites tumoraux. L&#39;emplacement et les niveaux de bactéries au sein des tumeurs au fil du temps peut être facilement examinés, visualisées en deux ou trois dimensions. La méthode est applicable à une large gamme d&#39;espèces bactériennes et les types de xénogreffes de tumeurs. Cet article décrit le protocole d&#39;analyse des bactéries bioluminescentes dans les souris porteuses de tumeurs sous-cutanées. Visualisation des bactéries commensales dans le tractus gastro-intestinal (TGI) par BLI est également décrit. Ce puissant et pas cher, en temps réel représentation stratégie d&#39;imageriets une méthode idéale pour l&#39;étude des bactéries in vivo dans le cadre de la recherche sur le cancer, en particulier la thérapie génique et les maladies infectieuses. Cette vidéo décrit la procédure pour l&#39;étude de lux-étiqueté E. coli dans des souris vivantes, ce qui démontre la lecture spatiale et temporelle BLI réalisables en utilisant le système IVIS.

Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo at JoVE.com

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Cet article décrit l&#39;administration de<em&gt; Lux-étiqueté</em&gt; Les bactéries à des souris et ultérieures<em&gt; In vivo</em&gt; Analyse en utilisant l&#39;imagerie par bioluminescence IVIS.

Bioluminescent imagerie bactérienne<em&gt; In Vivo</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

L&#39;imagerie in vivo des parasites Leishmania transgéniques dans un hôte en direct

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Recherche

Immunologie et infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

L&#39;imagerie non invasive des Homing leucocytes et des migrations In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Assessing Stomatal Response to Live Bacterial Cells using Whole Leaf Imaging

Évaluer la réponse stomatique à Live cellules bactériennes en utilisant l&#39;imagerie feuilles entières

Stomata are natural openings in the plant epidermis responsible for gas exchange between plant interior and environment. They are formed by a pair of ...

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Utiliser l&#39;imagerie Bioluminescent chargé d&#39;enquêter sur une synergie entre Streptococcus pneumoniae Et virus Influenza A de souriceaux

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

'Bioluminescent' Reporter Phage for the Detection of Category A Bacterial Pathogens

Phage »Bioluminescent&quot; Reporter pour la détection des bactéries pathogènes de la catégorie A

Yersinia pestis and Bacillus anthracis are Category A bacterial pathogens that are the causative agents of the plague and anthrax, respectively 1. ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

La salive, les glandes salivaires, et Collection hémolymphe de tiques Ixodes scapularis

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

In Vivo Imaging Systems (IVIS) Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

In Vivo Imaging Systems IVIS Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

In Vivo Imaging Systems (IVIS) Détection d&#39;un neuro-invasive virus encéphalitique

Modern advancements in imaging technology encourage further development and refinement in the way viral research is accomplished. Initially proposed by ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo méthode d&#39;imagerie à distinguer inflammation aiguë et chronique

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Generation and Multi-phenotypic High-content Screening of Coxiella burnetii Transposon Mutants

Generation and Multi-phenotypic High-content Screening of Coxiella burnetii Transposon Mutants

Génération et multi-phénotypique criblage à haut contenu de<em&gt; Coxiella burnetii</em&gt; Mutants de transposon

Invasion and colonization of host cells by bacterial pathogens depend on the activity of a large number of prokaryotic proteins, defined as virulence ...

In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions

In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions

In vitro et in vivo modèle pour étudier l&#39;adhésion bactérienne au navire muraux dans des conditions de débit

In order to cause endovascular infections and infective endocarditis, bacteria need to be able to adhere to the vessel wall while being exposed to the ...