Name: non-invasive optical imaging of the lymphatic vasculature of a mouse
Uploaded: 2013-03-08T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المنح التالية لSevick إيفا: NIH R01 R01 CA128919 وNIH HL092923.

أجريت جميع الدراسات على الحيوانات وفقا لمعايير من جامعة تكساس مركز العلوم الصحية (هيوستن، TX)، قسم الطب المقارن، ومركز التصوير الجزيئي بعد مراجعتها والموافقة عليها من البروتوكول كل منها رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة (IACUC) أو رعاية الحيوان اللجنة (AWC). <p class="...

<ol>
	<li>Alitalo, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+lymphatic+vasculature+in+disease.">The lymphatic vasculature in disease.</a> Nat. Med. 17, 1371-1380 (2011).</li><li>Rasmussen, J. C., Tan, I. C., Marshall, M. V., Fife, C. E., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic+imaging+in+humans+with+near-infrared+fluorescence.">Lymphatic imaging in humans with near-infrared fluorescence.</a> Curr. Opin. Biotechnol. 20, 74-82 (2009).</li><li>Rasmussen, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Lymphatic+Architecture+and+Dynamic+Transport+Imaged+Using+Near-infrared+Fluorescence.">Human Lymphatic Architecture and Dynamic Transport Imaged Using Near-infrared Fluorescence.</a> Transl. Oncol. 3, 362-372 (2010).</li><li>Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translation+of+near-infrared+fluorescence+imaging+technologies:+emerging+clinical+applications.">Translation of near-infrared fluorescence imaging technologies: emerging clinical applications.</a> Annu. Rev. Med. 63, 217-231 (2012).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+quantitative+imaging+of+lymph+function+in+mice.">Noninvasive quantitative imaging of lymph function in mice.</a> Lymphat. Res. Biol. 5, 219-231 (2007).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+phenotyping+with+near-infrared+fluorescence+lymphatic+imaging.">Mouse phenotyping with near-infrared fluorescence lymphatic imaging.</a> Biomed Opt Express. 2, 1403-1411 (2011).</li><li>Marshall, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescence+imaging+in+humans+with+indocyanine+green:+a+review+and+update.">Near-infrared fluorescence imaging in humans with indocyanine green: a review and update.</a> The Open Surgical Oncology Journal. 2, 12-25 (2010).</li><li>Davies-Venn, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Albumin-Binding+Domain+Conjugate+for+Near-Infrared+Fluorescence+Lymphatic+Imaging.">Albumin-Binding Domain Conjugate for Near-Infrared Fluorescence Lymphatic Imaging.</a> Mol. Imaging Biol. , (2011).</li><li>Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+imaging+of+lymph+function.">Quantitative imaging of lymph function.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, 3109-3118 (2007).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+lymphatic+imaging+in+tumor-bearing+mice.">Functional lymphatic imaging in tumor-bearing mice.</a> J. Immunol. Methods. 360, 167-172 (2010).</li><li>Karlsen, T. V., McCormack, E., Mujic, M., Tenstad, O., Wiig, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+quantification+of+lymph+flow+in+mice+and+rats+by+imaging+depot+clearance+of+near-infrared+albumin.">Minimally invasive quantification of lymph flow in mice and rats by imaging depot clearance of near-infrared albumin.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 302, 391-401 (2012).</li><li>Zhou, Q., Wood, R., Schwarz, E. M., Wang, Y. J., Xing, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+lymphatic+imaging+demonstrates+the+dynamics+of+lymph+flow+and+lymphangiogenesis+during+the+acute+versus+chronic+phases+of+arthritis+in+mice.">Near-infrared lymphatic imaging demonstrates the dynamics of lymph flow and lymphangiogenesis during the acute versus chronic phases of arthritis in mice.</a> Arthritis Rheum. 62, 1881-1889 (2010).</li><li>Adams, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+evidence+of+lymphatic+function+improvement+after+advanced+pneumatic+compression+device+treatment+of+lymphedema.">Direct evidence of lymphatic function improvement after advanced pneumatic compression device treatment of lymphedema.</a> Biomed. Opt. Express. 1, 114-125 (2010).</li><li>Tan, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+lymphatic+contractile+function+after+manual+lymphatic+drainage+using+near-infrared+fluorescence+imaging.">Assessment of lymphatic contractile function after manual lymphatic drainage using near-infrared fluorescence imaging.</a> Arch. Phys. Med. Rehabil. 92, 756-764 (2011).</li><li>Lapinski, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RASA1+maintains+the+lymphatic+vasculature+in+a+quiescent+functional+state+in+mice.">RASA1 maintains the lymphatic vasculature in a quiescent functional state in mice.</a> J. Clin. Invest. 122, 733-747 (2012).</li><li>Maus, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescence+imaging+of+lymphatics+in+head+and+neck+lymphedema.">Near-infrared fluorescence imaging of lymphatics in head and neck lymphedema.</a> Head Neck. 34, 448-453 (2012).</li><li>Galanzha, E. I., Tuchin, V. V., Zharov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+small+animal+mesentery+models+for+in+vivo+flow+cytometry,+dynamic+microscopy,+and+drug+screening.">Advances in small animal mesentery models for in vivo flow cytometry, dynamic microscopy, and drug screening.</a> World J. Gastroenterol. 13, 192-218 (2007).</li><li>Schramm, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cervical+lymph+node+preparation:+a+novel+approach+to+study+lymphocyte+homing+by+intravital+microscopy.">The cervical lymph node preparation: a novel approach to study lymphocyte homing by intravital microscopy.</a> Inflammation research : official journal of the European Histamine Research Society. 55, 160-167 (2006).</li><li>Hall, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+prostate+cancer+lymph+node+metastases+with+a+multimodality+contrast+agent.">Imaging prostate cancer lymph node metastases with a multimodality contrast agent.</a> Prostate. 72, 129-146 (2012).</li><li>Zhu, B., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimizing+excitation+leakage+and+maximizing+measurement+sensitivity+for+molecular+imaging+with+near-infrared+fluorescence.">Minimizing excitation leakage and maximizing measurement sensitivity for molecular imaging with near-infrared fluorescence.</a> J. Innovat. Opt. Health Sci. 4, 301-307 (2011).</li></ol>

نستخدم صغيرة مخصصة نظام التصوير الحيوان NIRF لالتقاط الصور من الأوعية الليمفاوية وصفت في الفئران. أفلام لبناء الحركة الليمفاوية، يتم جمع 300 أو أكثر الصور. لمفاوية من التحليل الوظيفي من الأفلام، ويتم رسمها يدويا رويس اثنين أو أكثر على طول سفينة الليمفاوية. يتم الاحتفاظ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> حلول والكواشف والمعدات </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> خضرة الإندوسيانين (ICG) </td><td> Patheon ITALIA SPA </td><td> NDC 25431-424-02 </td><td> إعادة إلى 645 ميكرومتر (5 μg/10 ميكرولتر) </td></tr><tr><td> دوري المجال ملزم الزلال (CABD) </td><td> Bachem </td><td> عرف </td><td> إعادة إلى 200 ميكرومتر (6.8 ميكرولتر μg/10) </td></tr><tr><td> IRDye800 </td><td> ليثيوم COR </td><td> IRDye 800CW </td><td> إعادة تصنيع وفقا لتعليمات و؛ المتقارن مع CABD بتركيزات equilmolar </td></tr><tr><td> معقمة للمياه </td><td> هوسبيرا، وشركة، وبحيرة الغابات، IL </td><td> NDC 0409-4887-10 </td><td></td></tr><tr><td> NAIR </td><td> الكنيسة وشركاه دوايت،شركة </td><td> متاجر المحلية </td><td> <a href="http://www.nairlikeneverbefore.com" target="_blank">www.nairlikeneverbefore.com</a> </td></tr><tr><td> نظام تصوير (مكونات أدناه) </td><td> مركز التصوير الجزيئي </td><td> N / A </td><td> بنيت خصيصا في المختبرات لدينا. </td></tr><tr><td> الإلكترون تتضاعف المسؤول إلى جانب جهاز (EMCCD) الكاميرا </td><td> برينستون الصكوك، ترينتون، NJ </td><td> الفوتون ماكس 512 </td><td></td></tr><tr><td> نيكون عدسة الكاميرا </td><td> شركة نيكون، ميلفيل، NY </td><td> نموذج رقم 1992، نيكور 28MM </td><td></td></tr><tr><td> تصفية البصرية </td><td> أندوفر شركة، سالم، NH </td><td> ANDV11333 </td><td> وتستخدم اثنين نانومتر ممر الموجة المرشحات 830.0/10.0 أمام عدسة </td></tr><tr><td> 785 نانومتر ليزر ديود </td><td> مكثفة المحدودة، شمال برونزويك، NJ </td><td> 1005-78503-9MM </td><td> 500 ميغاواط من انتاج البصرية </td></tr&gt; <tr><td> الموازاة البصريات </td><td> Thorlabs، نيوتن، NJ </td><td> C240TME-B </td><td> Collimates خرج ليزر قبل مرشح تنظيف </td></tr><tr><td> تنظيف فلتر </td><td> Semrock، وشركة، روتشستر، نيويورك </td><td> LD01-785/10-25 </td><td> يزيل الليزر في الفرقة الانبعاثات مضان </td></tr><tr><td> الناشر البصرية </td><td> Thorlabs، نيوتن، NJ </td><td> ED1-C20 </td><td> ينشر ليزر على الحيوان </td></tr><tr><td> V + + </td><td> بصريات الرقمية، البني خليج، أوكلاند، نيوزيلندا </td><td> الإصدار 5.0 </td><td> استخدام برنامج لمراقبة نظام الكاميرا وحفظ الصور إلى جهاز الكمبيوتر. <a href="http://digitaloptics.net/" target="_blank">http://digitaloptics.net/</a> </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> ويمكن استخدام البرمجيات التحليلية لأي من حزم البرامج التالية لتحليل الصور </td></tr><tr><td> يماغيج </td><td> الجهاز جرت مقاضاتها الوطنيةtutes للصحة في بيثيسدا، MD </td><td> أحدث إصدار متوفر </td><td> مجانية متاحة على <a href="http://rsbweb.nih.gov/ij/" target="_blank">http://rsbweb.nih.gov/ij/</a> </td></tr><tr><td> MATLAB </td><td> ماثووركس، ناتيك، MA </td><td> النسخة 2008A أو في وقت لاحق </td><td> <a href="http://www.mathworks.com/" target="_blank">http://www.mathworks.com/</a> </td></tr></tbody></table>

non-invasive optical imaging of the lymphatic vasculature of a mouse

الأوعية الدموية اللمفية هو عنصر هام من عناصر جهاز الدورة الدموية التي تحافظ على التوازن السائل، ويوفر المراقبة المناعي، وتتوسط امتصاص الدهون في الأمعاء. لكن على الرغم من وظيفتها الجوهرية، هناك فهم قليل نسبيا لكيفية تكيف الجهاز اللمفاوي لخدمة هذه الوظائف في الصحة والمرض 1. مؤخرا، لقد أثبتنا القدرة على حيوي صورة العمارة اللمفاوي والليمفاوية &quot;ضخ&quot; العمل في مواضيع الإنسان العادي وكذلك في الأشخاص الذين يعانون ضعف اللمفاوي باستخدام إدارة أثر للصبغة الأشعة تحت الحمراء القريبة (NIRF) الفلورسنت والعادة، الجنرال III- تكثيف نظام تصوير 2-4. وأظهرت NIRF التصوير تغييرات جذرية في بنية ووظيفة اللمفاوية مع الأمراض التي تصيب البشر. يبقى من غير الواضح كيف أن هذه التغيرات تحدث ويتم تطوير نماذج حيوانية جديدة لتوضيح أساس الجينية والجزيئية. في هذا البروتوكول، نقدم NIRF اللمفاوي، قمول التصوير باستخدام الحيوانات 5،6 خضرة الإندوسيانين (ICG)، وهي الصبغة التي استخدمت لمدة 50 عاما لدى البشر 7، وصبغ المسمى NIRF دوري المجال ملزمة الزلال (CABD-IRDye800) الببتيد التي ترتبط بشكل تفضيلي الماوس و 8 الألبومين البشري . ما يقرب من 5.5 مرات أكثر إشراقا من ICG، CABD-IRDye800 لديه إزالة اللمفاوي مماثلة الشخصي ويمكن حقن جرعات أقل من في ICG لتحقيق إشارات كافية للتصوير NIRF 8. لأن كلا من ربط CABD-IRDye800 وICG لالزلال في الفضاء الخلالي 8، كلاهما قد تصور بالموقع النقل والبروتين إلى داخل الأوعية اللمفاوية. تدار داخل الأدمة (ID) الحقن (5-50 ميكرولتر) من ICG (645 ميكرومتر) أو CABD-IRDye800 (200 ميكرومتر) في المياه المالحة إلى الجانب الظهري من كل مخلب هند و / أو الجانب الأيسر والأيمن من قاعدة ذيل ماوس isoflurane-تخدير. تركيز صبغة مما أدى إلى الحيوان هو 83-1،250 ميكروغرام / كغ للICG أو 113-1،700 ميكروغرام / كغ للCABD-IRDye800. مباشرة بعد الحقن، ويجري التصوير الوظيفي للموارد البشرية اللمفاوي 1 حتى باستخدام صغيرة مخصصة نظام التصوير NIRF الحيوان. يمكن كله القرار الحيوان المكانية تصوير الأوعية اللمفاوية الفلورسنت من 100 ميكرون أو أقل، وصور الهياكل يصل إلى 3 سم في عمق يمكن الحصول عليها 9. يتم الحصول على الصور باستخدام برنامج V + + وتحليلها باستخدام برامج MATLAB أو يماغيج. أثناء التحليل، يتم رسمها المناطق متتالية من الفائدة (رويس) يشمل القطر بأكمله على طول السفينة سفينة الليمفاوية معين. يتم الاحتفاظ الأبعاد لكل ROI المستمر لسفينة معينة وكثافة NIRF يتم قياس العائد على الاستثمار لكل إجراء تقييم كمي &quot;الحزم&quot; من خلال الأوعية الليمفاوية تتحرك.

<html> مثال على التصوير اللمفاوي NIRF في الفئران عندما يتم حقن ICG أو CABD IRDye800-ID في قاعدة ذيل الماوس العادي، يجب أن الأوعية الدموية اللمفية بين موضع الحقن عند قاعدة الذيل والعقدة الليمفاوية الأربية (LN) يمكن تصور فورا. بعد وقت قصير من الحقن (?...

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse at JoVE.com

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

قد وضعت مؤخرا تقنيات التصوير باستخدام الأشعة تحت الحمراء القريبة مضان (NIRF) المساعدة في الكشف عن دور الجهاز الليمفاوي ورم خبيث يلعب في السرطان، والاستجابة المناعية، وإصلاح الجرح، وغيرها من الأمراض المرتبطة اللمفاوية.

غير الغازية التصوير الضوئي من الأوعية الدموية اللمفية على فأرة الحاسوب

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

غير الغازية تصوير الزاجل كريات بيضاء والهجرة في الجسم الحي</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

استخدام اعتراض البصرية لدراسة التفاعلات المرضي المضيف الحيوي للخلية الحية التصوير

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

A Method for Labeling Vasculature in Embryonic Mice

A طريقة لوصفها الأوعية الدموية في الفئران الجنينية

The establishment of a functional blood vessel network is an essential part of organogenesis, and is required for optimal organ function. For example, in ...

Intravital Imaging of the Mouse Popliteal Lymph Node

Intravital التصوير من العقدة اللمفية الفأر المأبضية

Lymph nodes (LNs) are secondary lymphoid organs, which are strategically located throughout the body to allow for trapping and presentation of foreign ...

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

غير الغازية التصوير من المبيضات المنتشر في يرقات اسماك الزرد

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

نموذج غير الغازية من ممرض للأعصاب<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; العدوى في الأطفال حديثي الولادة الجرذ

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

التيموس كاملة في الجرذان الكبار مع غير الغازية التنبيب الرغامي

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

The Mesenteric Lymph Duct Cannulated Rat Model: Application to the Assessment of Intestinal Lymphatic Drug Transport

المساريقي الليمفاوية القناة مقنى نموذج الفأر: بالتطبيق على تقييم المعوية اللمفاوي النقل المخدرات

The intestinal lymphatic system plays key roles in fluid transport, lipid absorption and immune function. Lymph flows directly from the small intestine ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

التصوير غير الغازية من الاستجابة المناعية الفطرية في نموذج الزرد يرقات<em&gt; العقدية iniae</em&gt; العدوى

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

والطريقة غير الغازية ومن الناحية الفنية غير كثيفة للتحريض وPhenotyping التجريبية البكتيرية والالتهاب الرئوي في الفئران

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...