Name: non-invasive optical imaging of the lymphatic vasculature of a mouse
Uploaded: 2013-03-08T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse at JoVE.com

NIH R01 CA128919 ve NIH R01 HL092923: Bu çalışma Eva Sevick için aşağıdaki bağışları ile desteklenmiştir.

Bütün hayvan çalışmaları Texas Sağlık Bilimleri Merkezi (Houston, Teksas), Karşılaştırmalı Tıp Anabilim Dalı, inceleme ve kendi Kurumsal Hayvan Bakım tarafından protokol onayından sonra Moleküler Görüntüleme Merkezi Üniversitesi standartlarına uygun olarak gerçekleştirilen ve Kullanım Kurulu yapıldı (IACUC) veya Hayvan Refahı Komitesi (AWC). 1. Görüntüleme öncesinde 24 Hr Hayvanlar hazırlanması Lenfatik görüntüleme gerçek...

<ol>
	<li>Alitalo, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+lymphatic+vasculature+in+disease.">The lymphatic vasculature in disease.</a> Nat. Med. 17, 1371-1380 (2011).</li><li>Rasmussen, J. C., Tan, I. C., Marshall, M. V., Fife, C. E., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic+imaging+in+humans+with+near-infrared+fluorescence.">Lymphatic imaging in humans with near-infrared fluorescence.</a> Curr. Opin. Biotechnol. 20, 74-82 (2009).</li><li>Rasmussen, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Lymphatic+Architecture+and+Dynamic+Transport+Imaged+Using+Near-infrared+Fluorescence.">Human Lymphatic Architecture and Dynamic Transport Imaged Using Near-infrared Fluorescence.</a> Transl. Oncol. 3, 362-372 (2010).</li><li>Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translation+of+near-infrared+fluorescence+imaging+technologies:+emerging+clinical+applications.">Translation of near-infrared fluorescence imaging technologies: emerging clinical applications.</a> Annu. Rev. Med. 63, 217-231 (2012).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+quantitative+imaging+of+lymph+function+in+mice.">Noninvasive quantitative imaging of lymph function in mice.</a> Lymphat. Res. Biol. 5, 219-231 (2007).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+phenotyping+with+near-infrared+fluorescence+lymphatic+imaging.">Mouse phenotyping with near-infrared fluorescence lymphatic imaging.</a> Biomed Opt Express. 2, 1403-1411 (2011).</li><li>Marshall, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescence+imaging+in+humans+with+indocyanine+green:+a+review+and+update.">Near-infrared fluorescence imaging in humans with indocyanine green: a review and update.</a> The Open Surgical Oncology Journal. 2, 12-25 (2010).</li><li>Davies-Venn, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Albumin-Binding+Domain+Conjugate+for+Near-Infrared+Fluorescence+Lymphatic+Imaging.">Albumin-Binding Domain Conjugate for Near-Infrared Fluorescence Lymphatic Imaging.</a> Mol. Imaging Biol. , (2011).</li><li>Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+imaging+of+lymph+function.">Quantitative imaging of lymph function.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, 3109-3118 (2007).</li><li>Kwon, S., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+lymphatic+imaging+in+tumor-bearing+mice.">Functional lymphatic imaging in tumor-bearing mice.</a> J. Immunol. Methods. 360, 167-172 (2010).</li><li>Karlsen, T. V., McCormack, E., Mujic, M., Tenstad, O., Wiig, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+quantification+of+lymph+flow+in+mice+and+rats+by+imaging+depot+clearance+of+near-infrared+albumin.">Minimally invasive quantification of lymph flow in mice and rats by imaging depot clearance of near-infrared albumin.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 302, 391-401 (2012).</li><li>Zhou, Q., Wood, R., Schwarz, E. M., Wang, Y. J., Xing, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+lymphatic+imaging+demonstrates+the+dynamics+of+lymph+flow+and+lymphangiogenesis+during+the+acute+versus+chronic+phases+of+arthritis+in+mice.">Near-infrared lymphatic imaging demonstrates the dynamics of lymph flow and lymphangiogenesis during the acute versus chronic phases of arthritis in mice.</a> Arthritis Rheum. 62, 1881-1889 (2010).</li><li>Adams, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+evidence+of+lymphatic+function+improvement+after+advanced+pneumatic+compression+device+treatment+of+lymphedema.">Direct evidence of lymphatic function improvement after advanced pneumatic compression device treatment of lymphedema.</a> Biomed. Opt. Express. 1, 114-125 (2010).</li><li>Tan, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+lymphatic+contractile+function+after+manual+lymphatic+drainage+using+near-infrared+fluorescence+imaging.">Assessment of lymphatic contractile function after manual lymphatic drainage using near-infrared fluorescence imaging.</a> Arch. Phys. Med. Rehabil. 92, 756-764 (2011).</li><li>Lapinski, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RASA1+maintains+the+lymphatic+vasculature+in+a+quiescent+functional+state+in+mice.">RASA1 maintains the lymphatic vasculature in a quiescent functional state in mice.</a> J. Clin. Invest. 122, 733-747 (2012).</li><li>Maus, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescence+imaging+of+lymphatics+in+head+and+neck+lymphedema.">Near-infrared fluorescence imaging of lymphatics in head and neck lymphedema.</a> Head Neck. 34, 448-453 (2012).</li><li>Galanzha, E. I., Tuchin, V. V., Zharov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+small+animal+mesentery+models+for+in+vivo+flow+cytometry,+dynamic+microscopy,+and+drug+screening.">Advances in small animal mesentery models for in vivo flow cytometry, dynamic microscopy, and drug screening.</a> World J. Gastroenterol. 13, 192-218 (2007).</li><li>Schramm, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cervical+lymph+node+preparation:+a+novel+approach+to+study+lymphocyte+homing+by+intravital+microscopy.">The cervical lymph node preparation: a novel approach to study lymphocyte homing by intravital microscopy.</a> Inflammation research : official journal of the European Histamine Research Society. 55, 160-167 (2006).</li><li>Hall, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+prostate+cancer+lymph+node+metastases+with+a+multimodality+contrast+agent.">Imaging prostate cancer lymph node metastases with a multimodality contrast agent.</a> Prostate. 72, 129-146 (2012).</li><li>Zhu, B., Sevick-Muraca, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimizing+excitation+leakage+and+maximizing+measurement+sensitivity+for+molecular+imaging+with+near-infrared+fluorescence.">Minimizing excitation leakage and maximizing measurement sensitivity for molecular imaging with near-infrared fluorescence.</a> J. Innovat. Opt. Health Sci. 4, 301-307 (2011).</li></ol>

Biz farelerde etiketli lenf damarlarının görüntüleri yakalamak için özel, küçük hayvan NIRF görüntüleme sistemi kullanın. Lenf dolaşımı filmleri oluşturmak için, 300 veya daha fazla görüntü alınır. Filmlerde lenfatiklerin fonksiyonel analizi için, iki veya daha fazla ROI&#39;ler manuel lenf damarı boyunca çizilir. İB&#39;nin boyutları her bir kap için sabit tutulur ve yaklaşık olarak damar çapı vardır. Bütün hayvanlar uzaysal çözünürlüğü 100 mikron veya daha az olan floresan l...

<table border="1"><tbody><tr><td> Çözümler, Reaktifler ve Ekipmanları </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> İndosiyanin green (ICG) </td><td> Patheon Italia SPA </td><td> NDC 25431-424-02 </td><td> 645 uM (5 μg/10 mcL) için sulandırın </td></tr><tr><td> Döngüsel Albumin Bağlama Domain (cABD) </td><td> Bachem </td><td> Görenek </td><td> 200 uM (6.8 μg/10 uL) ile sulandırın </td></tr><tr><td> IRDye800 </td><td> Li-COR </td><td> IRDye 800CW </td><td> Üreticinin talimatlarına göre sulandırın; equilmolar konsantrasyonlarda cABD konjuge </td></tr><tr><td> Steril Su </td><td> Hospira, Inc, Lake Forest, IL </td><td> NDC 0409-4887-10 </td><td></td></tr><tr><td> Nair </td><td> Church &amp; Dwight Co,A.Ş. </td><td> Yerel Mağazaları </td><td> <a href="http://www.nairlikeneverbefore.com" target="_blank">www.nairlikeneverbefore.com</a> </td></tr><tr><td> Görüntüleme Sistemi (bileşenleri aşağıda) </td><td> Moleküler Görüntüleme Merkezi </td><td> N / A </td><td> Laboratuvarımızda özel olarak üretilmiştir. </td></tr><tr><td> Elektron-Çarpma şarj bağlı cihaz (EMCCD) kamera </td><td> Princeton Instruments, Trenton, NJ </td><td> Foton Max 512 </td><td></td></tr><tr><td> Nikon fotoğraf makinesi objektifi </td><td> Nikon Inc, Melville, NY </td><td> Model No 1992, Nikkor 28mm </td><td></td></tr><tr><td> Optik filtresi </td><td> Andover Corp, Salem, NH </td><td> ANDV11333 </td><td> İki 830.0/10.0 nm bant geçirici filtre objektif önüne kullanılmıştır </td></tr><tr><td> 785 nm lazer diyot </td><td> Yoğun Ltd, North Brunswick, NJ </td><td> 1005-9MM-78503 </td><td> Optik çıkış 500 mW </td></tr&gt; <tr><td> Collimating optikler </td><td> Thorlabs, Newton, NJ </td><td> C240TME-B </td><td> Öncesinde temizleme filtresi Collimates lazer çıkış </td></tr><tr><td> Temizlik-up filtre </td><td> Semrock, Inc, Rochester, NY </td><td> LD01-785/10-25 </td><td> Floresans bandında lazer emisyonu kaldırır </td></tr><tr><td> Optik difüzör </td><td> Thorlabs, Newton, NJ </td><td> ED1-C20 </td><td> Hayvan üzerinde lazer yayılır </td></tr><tr><td> V + + </td><td> Dijital Optik, Browns Bay, Auckland, Yeni Zelanda </td><td> Sürüm 5.0 </td><td> Yazılım kamera sistemi kontrol etmek ve görüntüleri bilgisayara kaydetmek için kullanılır. <a href="http://digitaloptics.net/" target="_blank">http://digitaloptics.net/</a> </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Aşağıdaki yazılım paketleri iki analitik yazılım görüntü analizi için kullanılabilmektedir </td></tr><tr><td> ImageJ </td><td> Ulusal EnstitüsününSağlık, Bethesda, MD kitapçığın ikinci bölümüne bakın </td><td> Mevcut en güncel sürümü </td><td> Az SORULAR mevcuttur <a href="http://rsbweb.nih.gov/ij/" target="_blank">http://rsbweb.nih.gov/ij/</a> </td></tr><tr><td> MATLAB </td><td> MathWorks, Natick, MA </td><td> Sürüm 2008a veya üstü </td><td> <a href="http://www.mathworks.com/" target="_blank">http://www.mathworks.com/</a> </td></tr></tbody></table>

non-invasive optical imaging of the lymphatic vasculature of a mouse

Lenfatik damar sistemi, sıvı dengesinin korur bağırsaktaki immün gözetim ve aracılık yağ emilimini sağlar dolaşım sisteminin önemli bir bileşenidir. Oysa eleştirel fonksiyonuna rağmen, lenfatik sistem sağlığı ve hastalıkları 1 bu işlevlere hizmet adapte nasıl nispeten biraz anlayış vardır. Son zamanlarda, Gen III-, dinamik görüntü lenfatik mimarisi ve lenf gibi iz yakın kızılötesi floresan (NIRF) boya yönetim ve özel kullanarak lenfatik disfonksiyon muzdarip kişilerin yanı sıra normal insan deneklerde &quot;pompalama&quot; işlemi yeteneğini göstermiştir görüntüleme sistemi 2-4 yoğunlaştı. NIRF görüntüleme insan hastalıkları ile lenfatik mimarisi ve işlevi dramatik değişiklikler gösterdi. Bu değişikliklerin ortaya çıkar ve yeni hayvan modelleri kendi genetik ve moleküler temelini gün ışığına geliştirilmektedir nasıl belirsizliğini koruyor. Bu protokol, biz NIRF lenfatik, s sunmakalışveriş hayvan görüntüleme 5,6 green (ICG), insanlarda 7. 50 yıldır kullanılan bir boya ve tercihen fare ve insan albumin 8 bağlayan NIRF boya etiketli siklik albümin bağlanma alanı (cABD-IRDye800) peptid indosiyanin kullanarak . ICG göre yaklaşık 5.5 kat daha parlak, cABD-IRDye800 benzer bir lenfatik açıklık bir profile sahiptir ve görüntüleme 8 için yeterli NIRF sinyal elde etmek için ICG&#39;den daha küçük dozlar halinde enjekte edilebilir. Interstisyel boşluk 8 albümin hem cABD-IRDye800 ve ICG bağlama, her ikisi de içine ve lenfatikler içerisinde aktif bir protein taşıma tasvir edebilir çünkü. İntradermal (ID) ICG enjeksiyonu (5-50 ul) (645 uM) ya da tuzlu su içinde cABD-IRDye800 (200 uM), her bir arka ayak ve / veya tabanının sol ve sağ taraf dorsal ile uygulanırlar Bir izofluran-anestezi fare kuyruğu. Hayvanda çıkan boya konsantrasyonu 83-1,250 ug / kg veya ICG için 113-1,700 mg / kg &#39;dır içincABD-IRDye800. Hemen enjeksiyonları takiben, fonksiyonel lenfatik görüntüleme özelleştirilmiş, küçük hayvan NIRF görüntüleme sistemi kullanılarak en fazla 1 saat için yapılır. Tüm hayvan uzamsal çözünürlük derinliği 3 cm 9 elde edilebilir yapıların floresan lenfatik 100 mikron veya daha az olan gemiler ve görüntüleri tasvir edebilir. Görüntüleri V + + yazılımı kullanılarak kazanılmış ve ImageJ veya MATLAB yazılımı kullanılarak analiz edilmiştir. Analiz sırasında, tüm damar çapı kapsayan faiz (ROI) ardışık bölgeler belirli bir lenf damar boyunca çizilir. Her bir ROI için ölçüler kantitatif lenf damarları yoluyla hareket &quot;paketleri&quot; değerlendirmek için her bir ROI için ölçülür verilen damar ve NIRF yoğunluğu için sabit tutulur.

Farelerde NIRF Lenfatik Görüntüleme Örneği ICG veya cABD-IRDye800 normal bir fare kuyruk dibinde kimlik enjekte, kuyruk dibinde enjeksiyon yeri ve kasık lenf düğümü (LN) arasındaki lenfatik damar hemen görüntülenmiştir olmalıdır. Kısa bir süre sonra, enjeksiyon (birkaç saniye dakika), kasık LN ve koltuk altı LN arasında lenf damarı olarak, Şekil 2&#39;de görüldüğü görselleştirilmiş olmalıdır. Insanlarda olduğu gibi farelerde lenfatik hayvanda...

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse at JoVE.com

Non-invasive Optical Imaging of the Lymphatic Vasculature of a Mouse

Yakın kızılötesi floresans (NIRF) kullanarak en son geliştirilen görüntüleme teknikleri lenfatik sistem kanseri metastazı oynadığı rol, immün yanıt, yara onarımı ve diğer lenfatik ilişkili hastalıkların ortaya çıkmasına yardımcı olabilir.

Bir Mouse Lenfatik damarları Non-invaziv Optik Görüntüleme

The lymphatic  vascular system is an important component of the circulatory system that  maintains fluid homeostasis, provides immune surveillance, and ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Lökosit Homing Göç ve non-invaziv Görüntüleme In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

Dinamik Canlı Hücre Görüntüleme Konukçu-Patojen Etkileşimleri Çalışma Optik Tuzak

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

A Method for Labeling Vasculature in Embryonic Mice

Embriyonik Farelerde damarları Etiketleme Bir Yöntem

The establishment of a functional blood vessel network is an essential part of organogenesis, and is required for optimal organ function. For example, in ...

Intravital Imaging of the Mouse Popliteal Lymph Node

Intravital Görüntüleme Fare Popliteal Lenf Nodu

Lymph nodes (LNs) are secondary lymphoid organs, which are strategically located throughout the body to allow for trapping and presentation of foreign ...

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

Zebra balığı Larva yılında Dissemine Kandidiyazis non-invaziv Görüntüleme

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Neuropathogenic olmayan İnvaziv Modeli<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Yenidoğan Sıçan Enfeksiyon

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

Non-invaziv Endotrakeal Entübasyon Erişkin Sıçanlarda Komple Timektomi

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

The Mesenteric Lymph Duct Cannulated Rat Model: Application to the Assessment of Intestinal Lymphatic Drug Transport

Mezenterik Lenf Kanal Kanüllü Rat Modeli: Bağırsak Lenfatik İlaç Ulaştırma Değerlendirilmesine Uygulaması

The intestinal lymphatic system plays key roles in fluid transport, lipid absorption and immune function. Lymph flows directly from the small intestine ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Bir Zebra balığı Larva Modeli Doğuştan Bağışıklık Tepki Non-invaziv Görüntüleme<em&gt; Streptococcus iniae</em&gt; Enfeksiyon

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

Farelerde Deneysel Bakteriyel Pnömoni İndüksiyonunun ve fenotipleme bir Non-invaziv ve Teknik Olmayan yoğun Yöntem

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...