Name: rapid genetic analysis of epithelial-mesenchymal signaling during hair regeneration
Uploaded: 2013-02-28T12:30:00
Duration: 10 min 9 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי NIH NRSA 1F32CA14208701 (SXA) ומענקי NIH AR052785 וAR046786 (AEO ווו-MW).

<ol>
	<li>Bershteyn, M., Atwood, S. X., Woo, W. M., Li, M., Oro, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MIM+and+cortactin+antagonism+regulates+ciliogenesis+and+hedgehog+signaling.">MIM and cortactin antagonism regulates ciliogenesis and hedgehog signaling.</a> Dev Cell. 19, 270-283 (2010).</li><li>Driskell, R. R., Juneja, V. R., Connelly, J. T., Kretzschmar, K., Tan, D. W., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+growth+of+dermal+papilla+cells+in+hydrogels+reveals+intrinsic+differences+between+Sox2-positive+and+-negative+cells+in+vitro+and+in+vivo.">Clonal growth of dermal papilla cells in hydrogels reveals intrinsic differences between Sox2-positive and -negative cells in vitro and in vivo.</a> J. Invest. Dermatol. 132, 1084-1093 (2012).</li><li>Lee, L. F., Jiang, T. X., Garner, W., Chuong, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+procedure+to+reconstitute+hair-producing+skin.">A simplified procedure to reconstitute hair-producing skin.</a> Tissue Eng. Part C Methods. 17, 391-400 (2011).</li><li>Liang, Y., Silva, K. A., Kennedy, V., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparisons+of+mouse+models+for+hair+follicle+reconstitution.">Comparisons of mouse models for hair follicle reconstitution.</a> Exp. Dermatol. 20, 1011-1015 (2011).</li><li>Lichti, U., Anders, J., Yuspa, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+short-term+culture+of+primary+keratinocytes,+hair+follicle+populations+and+dermal+cells+from+newborn+mice+and+keratinocytes+from+adult+mice+for+in+vitro+analysis+and+for+grafting+to+immunodeficient+mice.">Isolation and short-term culture of primary keratinocytes, hair follicle populations and dermal cells from newborn mice and keratinocytes from adult mice for in vitro analysis and for grafting to immunodeficient mice.</a> Nat. Protoc. 3, 799-810 (2008).</li><li>Lichti, U., Weinberg, W. C., Goodman, L., Ledbetter, S., Dooley, T., Morgan, D., Yuspa, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+regulation+of+murine+hair+growth:+insights+from+grafting+defined+cell+populations+onto+nude+mice.">In vivo regulation of murine hair growth: insights from grafting defined cell populations onto nude mice.</a> J. Invest. Dermatol. 101, 124S-129S (1993).</li><li>Lutolf, M. P., Gilbert, P. M., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designing+materials+to+direct+stem-cell+fate.">Designing materials to direct stem-cell fate.</a> Nature. 462, 433-441 (2009).</li><li>Osada, A., Iwabuchi, T., Kishimoto, J., Hamazaki, T. S., Okochi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+culture+of+mouse+vibrissal+dermal+papilla+cells+and+de+novo+hair+follicle+induction.">Long-term culture of mouse vibrissal dermal papilla cells and de novo hair follicle induction.</a> Tissue Eng. 13, 975-982 (2007).</li><li>Rendl, M., Polak, L., Fuchs, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BMP+signaling+in+dermal+papilla+cells+is+required+for+their+hair+follicle-inductive+properties.">BMP signaling in dermal papilla cells is required for their hair follicle-inductive properties.</a> Genes Dev. 22, 543-557 (2008).</li><li>Ventura, A., Meissner, A., Dillon, C. P., McManus, M., Sharp, P. A., Van Parijs, L., Jaenisch, R., Jacks, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cre-lox-regulated+conditional+RNA+interference+from+transgenes.">Cre-lox-regulated conditional RNA interference from transgenes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 10380-10385 (2004).</li><li>Weinberg, W. C., Goodman, L. V., George, C., Morgan, D. L., Ledbetter, S., Yuspa, S. H., Lichti, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+hair+follicle+development+in+vivo:+determination+of+follicle+formation,+hair+growth,+and+hair+quality+by+dermal+cells.">Reconstitution of hair follicle development in vivo: determination of follicle formation, hair growth, and hair quality by dermal cells.</a> J. Invest. Dermatol. 100, 229-236 (1993).</li><li>Woo, W. -. M., Zhen, H. H., Oro, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shh+maintains+dermal+papilla+identity+and+hair+morphogenesis+via+a+Noggin-Shh+regulatory+loop.">Shh maintains dermal papilla identity and hair morphogenesis via a Noggin-Shh regulatory loop.</a> Genes Dev. 26, 1235-1246 (2012).</li><li>Young, T. H., Lee, C. Y., Chiu, H. C., Hsu, C. J., Lin, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembly+of+dermal+papilla+cells+into+inductive+spheroidal+microtissues+on+poly(ethylene-co-vinyl+alcohol)+membranes+for+hair+follicle+regeneration.">Self-assembly of dermal papilla cells into inductive spheroidal microtissues on poly(ethylene-co-vinyl alcohol) membranes for hair follicle regeneration.</a> Biomaterials. 29, 3521-3530 (2008).</li><li>Zheng, Y., Du, X., Wang, W., Boucher, M., Parimoo, S., Stenn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organogenesis+from+dissociated+cells:+generation+of+mature+cycling+hair+follicles+from+skin-derived+cells.">Organogenesis from dissociated cells: generation of mature cycling hair follicles from skin-derived cells.</a> J. Invest. Dermatol. 124, 867-876 (2005).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

מבחני כינון מחדש שיער לספק מודל התחדשות איבר ייחודי לבחינת מנגנון היווצרות זקיק שיער דה נובו. כאן, אנו מתארים assay שיער קאמרי שונה שימושי לקביעת תפקוד גן במבנה זקיק שיער. הבדיקה שלנו מבוססת על הבדיקה דיווחה הקאמרית שיער הכינון מחדש 5, 6,11, שאנו שונים כדי להציג את טכניקת ביטוי lentiviral להשיג ביטוי יתר מציאת גן או באחד משני סוגי תאי עור או האפידרמיס. הבדיקה שלנו מספקת חלופה מהירה ליצירת נוקאאוט הגנטי רקמות ספציפיות. בדיקה זו מאפשרת לנו להפגין תפקוד גן במבנה זקיק שיער קטן כמו 3 שבועות מהדבקת תאים ראשוניים עם lentivirus לאוסף שתל. הבדיקה שלנו ניתן להאריך להתייחס אינטראקציות גנטיות באמצעות שילוב shRNA / משלוח cDNA ידי lentivirus לסוג תא אחד 12, כמו גם מאפשר בדיקה של איתות בין תאי העור האופייני ואפידרמיסes. בדיקת השיער שלנו היא מתאימה ביותר לאיתור רווח או פסד--of-פונקצית פנוטיפים חזקים בהתחדשות זקיקי שיער, ואילו פגמים עדינים קשים יותר לצפות. אנחנו הוכחנו הצלחת תפקוד גן מסוים עור של כמה גנים באמצעות assay התחדשות השיער שלנו 1,12. בהתבסס על סמן GFP שיתוף הביע מוקטור lentivirus להביע shRNA 10, הראינו כי shRNA להביע תורם בתאי עור התמיד בשתלי השיער מחדש. תאי ה-GFP חיוביים נכחו בפטמית עורי (DP) של זקיקי שיער ההתחדשות (איור 3). התאים העקורים סבירים כללו רמות שונות של מציאת גן כתאים הביעו רמות שונות של GFP, ובכך הפנוטיפ זקיק השיער שנצפה היה ממגוון הגנטי hypomorph לnull. שיפור אחד assay זה יהיה להקים בחירה מהירה ויעילה לתאים הגבוהים shRNA להביע לפני graftinז כגון שימוש FACS לטהר תאים חזקים GFP להביע-. אלטרנטיבה היא להחליף תאי נוקאאוט מוטציה או מותנים בבדיקת 9 זה. מצד השני, מערכת תרבות שיכול לשמר את תפקוד תא DP היא מאוד שימושית כעצמת DP היא אבדה בהדרגה את תאי עורי פעם אחת העיקריים הם passaged. מערכות תרבות אפשריות כוללות שימוש בחומרים ביולוגיים הנגזרים מנישה מלאכותית או תרבויות צבירה 2,7,8,13. שיפור נוסף יהיה ליצור שיטה אמינה אפידרמיס תא קפוא עם שיעור החלמה גבוהה תא כמו זה יהיה להפחית את השימוש בסט השני של גורי עכברים (צעד 7) כדי לייצר הקרטינוציטים טריים באובדן או ספציפי לעור רווח-of- מחקרי פונקציות. בדיקת שיער תא זה מייצרת צפיפות ואיכות דומה לעור עכבר רגיל זקיק שיער, למרות שצמיחת שיער היא מעט פחות מסונכרנת וכיוון זקיק הוא יותר אקראי. כמה מגבלות של הבדיקה הגנטית התחדשות שיער includדואר הדרישה של כמות גדולה של lentivirus ומספרים סלולריים, וזה מאוד עבודה אינטנסיבית במונחים של שיטות ניתוחיות בהשוואה לצורות אחרות של מבחני כינון מחדש שיער כגון תיקון ומבחני דש 3,4,14. עם זאת, האיכות של זקיקי שיער וצייר זמן כדי לזהות צמיחת שיער היא מעולה למבחנים אחרים 4. assay התחדשות השיער הממוקד שלנו מספק לוויה מהירה ונוחה למודלים גנטיים קיימים.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם </td><td> חברה </td><td> קטלוג # </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Invitrogen </td><td> 14190-144 </td><td></td></tr><tr><td> HBSS </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-122 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 11995-065 </td><td></td></tr><tr><td> 0.25% טריפסין-EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-056 </td><td></td></tr><tr><td> CNT-07 </td><td> התא N Tec </td><td> CNT-07 </td><td></td></tr><tr><td> AminoMAX-C100 </td><td> Invitrogen </td><td> 17001-074 </td><td></td></tr><tr><td> מוסף AminoMAX-C100 </td><td> Invitrogen </td><td> 12556-015 </td><td></td></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 26140-079 </td><td></td></tr><tr><td> פניצילין / סטרפטומיצין </td><td> Invitrogen </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> Invitrogen </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td> Gentamycin </td><td> Invitrogen </td><td> 15710-064 </td><td></td></tr><tr><td> Dispase </td><td> רוש </td><td> 4942078001 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase, סוג 1 </td><td> סיגמא </td><td> C-0130 </td><td></td></tr><tr><td> Polybrene </td><td> סיגמא </td><td> 107689-10G </td><td></td></tr><tr><td> צלחת תרבית רקמה </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 08-772E </td><td></td></tr><tr><td> מספריים מבתרים </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 11-999 </td><td></td></tr><tr><td> מצבטים </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 10-275 </td><td> מעוקל </td></tr><tr><td> Scalpal </td><td> Medex אספקה </td><td> GRF-2975 # 10 </td><td> אין גודל. 10 </td></tr><tr><td> Stainer התא מיקרומטר 70 </td><td> VWR </td><td> 21008-952 </td><td></td></tr><tr><td> צינור צנטריפוגה חרוטים 15 מ&quot;ל </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 14-959-49D </td><td></td></tr><tr><td> מטליות אלכוהול </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 1368063 </td><td></td></tr><tr><td> מחט מד 23 </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 14-821-13F </td><td></td></tr><tr><td> חומר סיכת עין </td><td> CVS </td><td> 8883660 </td><td></td></tr><tr><td> מטליות Providone-lodine </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> NC0116841 </td><td></td></tr><tr><td> הסיליקון צ&#39;יימברס </td><td> רנר GmbH </td><td> F2U, 30268 </td><td></td></tr><tr><td> תפרים </td><td> Acuderm </td><td> SUP3524 </td><td></td></tr><tr><td> תחבושת גמישה </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><html><td> 22-363-100 </td><td></td></tr><tr><td> רוטב ללא חסיד </td><td> TELFA </td><td> 1050 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> חומרים </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> שטוף את הפתרון PBS 500 מיקרוגרם / המ&quot;ל פניצילין / סטרפטומיצין 12.5 מיקרוגרם / המ&quot;ל Fungizone 100 מיקרוגרם / המ&quot;ל Gentamycin פתרון Dispase HBSS 2.5 מ&quot;ג / המ&quot;ל הסופי Dispase 100 מיקרוגרם / המ&quot;ל Gentamycin תקשורת המנטרלת HBSS 15% (v / v) FBS פתרון collagenase 0.25% (w / v) collagenase, סוג 1 ontent &quot;&gt; 100 מיקרוגרם / המ&quot;ל פניצילין / סטרפטומיצין 2.5 מיקרוגרם / המ&quot;ל Fungizone 50 מיקרוגרם / המ&quot;ל Gentamycin פתרון Polybrene HBSS 8 מיקרוגרם / מ&quot;ל ​​(w / v) Polybrene </td></tr></tbody></table>

rapid genetic analysis of epithelial-mesenchymal signaling during hair regeneration

המורפוגנזה שיער זקיק, תהליך מורכב הדורש אינטראקציה בין הקרטינוציטים epithelia נגזרות וmesenchyme הבסיסי, היא מערכת מודל אטרקטיבית ללמוד פיתוח איברים ורקמות איתות ספציפית. למרות התפתחות זקיק שיער היא ניתוח גנטי צייתן, מהיר ושחזור של גורמים חיוניים לתהליך זה עדיין מהווה אתגר. כאן אנו מתארים הליך כדי להפיק ביטוי יתר ממוקד או מציאת shRNA בתיווך של גורמים באמצעות lentivirus באופן רקמות ספציפי. שימוש בגרסה שונה של מודל התחדשות שיער 5, 6, 11, אנחנו יכולים להשיג רווח או חזק ניתוח אובדן-of-פונקציה בהקרטינוציטים עכבר עיקריים או תאי עור כדי להקל על מחקר של מסלולי אפיתל-mesenchymal איתות שמובילים להמורפוגנזה זקיק שיער . אנו מתארים כיצד לבודד הקרטינוציטים טריים עיקריים עכברים ותאי עור, המכילים תאי פטמית עור ובין קודמיהם, לספק lentivirus contaiנינג או shRNA או cDNA לאחת מאוכלוסיות התאים, ולשלב את התאים לייצר זקיקי שיער שנוצרו באופן מלא על גבם של עכברים בעירום. גישה זו מאפשרת ניתוח של גורמי רקמה ספציפיות הנדרשים ליצירת זקיקי שיער בתוך שלושה שבועות ומספקת לוויה מהירה ונוחה למודלים גנטיים קיימים.

באיור 1 אנו מראים את התוצאה של מציאת shRNA lentiviral עור ספציפית של יתפוגג (SMO), רכיב איתות ששש קריטי, בשתל שיער רגנרטיבית שבועות 3 ישן. שתלי שליטה באמצעות וקטור lentiviral לבד להראות צמיחת שיער חזקה (איור 1 א). לעומת זאת, מציאת עור ספציפי של תוצאות SMO באובדן צמיחת שיער (1B איור). Hematoxylin וeosin כתם מתארים את השלב של זקיקי שיער בשליטה ובתנאי ניסוי (האיור 1C, ד). הפנוטיפ צמיחת השיער מטיפולים דומים יכול להיות משתנה בין ניסויים, כולל שליטה החיובית עם דלקת לבד וקטור lentiviral. שתלי בקרה חיוביים לכן תמיד צריכים להיות כלולים בכל ניסוי כהפניה כ30% משתלים יכולים להיכשל כתוצאה מצלקות או קובץ מצורף שלם של שתלים. במקרה של בדיקת אינטראקציה בין שני גורמים כגון overexpressing cDNA של גורם אחד מחדשמציאת shRNA בתיווך scue של גורם נוסף, יש תמיד כוללת שתלים בלבד למציאת מניפסט תוצאת אובדן של תפקוד בכל ניסוי. זה יספק טווח נחוץ כדי לקבוע כיצד גן מסוים perturbs מסלול זקיק שיער התחדשות ואיך שני גני האינטראקציה. הסרה של החדר (איור 2 א) חייב להיעשות בזהירות. השתל חדש שנוצר צריך להיות מעט אטום עם משטח עמום (איור 2 ב &#39;). השתל עלול להידבק לקנה, אז הרים בעדינות צד אחד הוא חשוב לוודא השתל נשאר מחובר למיטת הפצע. השתל הוא די יציב לאחר שלושה ימים וצריך להציג את הקושי בעת הסרת האיפור. צמיחת שיער חזקה צריכה להיות שנצפתה לאחר שלושה שבועות (האיור 2C). השמטה או mDCs או KCs תגרום אתר פצע החלים ללא כל שיער (האיור 2D) 11. מוות של תאים או אובדן תא באחדסוגי תאים גם תוצאות לא שיער, בניגוד להתחדשות שיער מופחתת במציאת עור-SMO כפי שמוצג בתרשים 1B. כדי להבטיח assay מוצלח, זה קריטי כדי להשיג יותר מ 90% זיהום נגיפי של תאים עם ביטוי יתר מתאים או יעיל מציאה לפני ההשתלה. בשל אילוצי הזמן של הליך ההשתלה, אנו ממליצים יעילות זיהום ויראלי צרות ירי לפני התחלת ניסוי השתלה, ותמיד לשמור חלק קטן מתאים ביום של השתלת הליך כדי לוודא פסד או רווח, לביטוי. כייל lentiviral ישתנה בהתאם לשימוש, ולבנות צריך להיקבע לפני זיהום כדי להשיג יעילות 90-100%. אנו מנטרים את יעילות זיהום ויראלי עם GFP coexpressed מוקטור lentiviral. אנחנו לבצע באופן שגרתי כתם מערבי PCR ו / או כמותית כדי לקבוע את היקף מציאה או ביטוי יתר. ניצול וקטורים כפולי ביטוי עם תגי ניאון לתייגתאים נגועים באופן ויראלי מספקים דרך לדווח perdurance של אות ומספר התאים להביע מבנינו בשתלים בוגרים. אנו משתמשים GFP מונע על ידי אמרגן CMV מוקטור lentiviral pSicoR-CMV-GFP 10 בשילוב עם SMO shRNA. באיור 3, אנו מראים שתל ישן 3-שבוע עור ספציפי שבו GFP-הביע lentivirally בפטמית עור של זקיק שערה יציגה. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/4344/4344fig1.jpg" /> איור 1. ניתוח היסטולוגית של צמיחת זקיקי שיער. () צפה בשתל התחדשות שיער שליטה עם תאי עור נגוע בוקטור lentiviral ריק והקרטינוציטים שלא טופלו. (ב) מציאה תתפוגג באמצעות shRNA lentiviral בתאי עור בשילוב עם תוצאות הקרטינוציטים לא טופלו בהפסד של זקיקי שיער. (ג) Hematoxylin ומכתים eosin מראים f שיער anagen<html> ollicles בשתלי בקרה להאריך לתוך הדרמיס ו( ד &#39;) זקיקי שיער מציאה יתפוגגו יישארו ננסיים וברובו נעדר. כל התמונות הן שלושה שבועות לאחר ההשתלה. סרגל קנה מידה מציין 100 מיקרומטר. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/4344/4344fig2.jpg" /> איור 2. השתלת תאים ראשוניים. () עכבר נו / נו עם תאים תפר קאמריים דיור עיקריים עור והקרטינוציטים. (ב &#39;) להסרה של תאי עור שנוצרה חושפת הוא עמום ומעורפל בדמות חדשה. (C) שערות גדלו באופן מלא על שתל באמצעות פרועות הקלד תאים ראשוניים עור והקרטינוציטים בשלושה שבועות לאחר ההשתלה. (ד &#39;) תוספת של תאי עור ראשוניים ללא הקרטינוציטים מובילה לשום שיער לאחר שלושה שבועות. תוצאות דומות נצפו עם תוספת של הקרטינוציטים ראשוניים ללא תאי עור. עמודים = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/4344/4344fig3.jpg" /> איור 3. תחזוקה של ביטוי של GFP בגבשושיות עור. תמונות confocal של גבשושיות עור משתל 3-בן שבוע מחדש. GFP לידי ביטוי באוכלוסיית תאי העור מוקטור lentiviral וזוהה בפטמית עורי (ירוק). Versican (אדום) תוחם את הגבשושיות וגרעיני עורי היו תווית עם Hoechst (כחול). GFP ההערה מתבטא במיוחד בתאי עור, אך לא בקרטינוציטים שמסביב. סרגל קנה מידה מציין 20 מיקרומטר.

Watch this Scientific Journal Video about Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration at JoVE.com

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

ניתוח רקמות ספציפית של מודל התחדשות זקיקי שיער באמצעות lentivirus לתווך רווח או פסד--of-פונקציה.

ניתוח גנטי מהיר של איתות אפיתל-mesenchymal במהלך התחדשות שיער

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissection של gyrus משוננת בהיפוקמפוס מתוך עכבר למבוגרים

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

A Reverse Genetic Approach to Test Functional Redundancy During Embryogenesis

גישה גנטית הפוך כדי בדיקת יתירות פונקציונלית במהלך embryogenesis

Gene function during embryogenesis is typically defined by loss-of-function experiments, for example by targeted mutagenesis (knockout) in the mouse. In ...

Adenovirus-mediated Genetic Removal of Signaling Molecules in Cultured Primary Mouse Embryonic Fibroblasts

Adenovirus בתיווך הסרת גנטית של מולקולות איתות ב Cultured Fibroblasts עכבר ראשיים עובריים

The ability to genetically remove specific components of various cell signalling cascades has been an integral tool in modern signal transduction ...

Assessing Signaling Properties of Ectodermal Epithelia During Craniofacial Development

הערכת נכסים איתות של Ectodermal epithelia במהלך פיתוח Craniofacial

The accessibility of avian embryos has helped experimental embryologists understand the fates of cells during development and the role of tissue ...

Pharmacological and Functional Genetic Assays to Manipulate Regeneration of the Planarian Dugesia japonica

Pharmacological and Functional Genetic Assays to Manipulate Regeneration of the Planarian Dugesia japonica

מבחני גנטית תרופתי ו פונקציונלית לתפעל התחדשות של Planarian Japonica Dugesia</em

Free-living planarian flatworms have a long history of experimental usage owing to their remarkable regenerative abilities1. Small fragments excised from ...

Metabolic Labeling and Membrane Fractionation for Comparative Proteomic Analysis of Arabidopsis thaliana Suspension Cell Cultures

Metabolic Labeling and Membrane Fractionation for Comparative Proteomic Analysis of Arabidopsis thaliana Suspension Cell Cultures

מטבולית תיוג וממברנה היפוך חלוקה לניתוח השוואתי של proteomic<em&gt; Thaliana ארבידופסיס</em&gt; תא תרבויות השעיה

Plasma membrane microdomains are features based on the physical properties of the lipid and sterol environment and have particular roles in signaling ...

Extraction and Analysis of Cortisol from Human and Monkey Hair

הפקה וניתוח של קורטיזול מאדם וקוף השיער

The stress hormone cortisol (CORT) is slowly incorporated into the growing hair shaft of humans, nonhuman primates, and other mammals. We developed and ...

Rapid Analysis and Exploration of Fluorescence Microscopy Images

ראפיד ניתוח וחקירה של תמונות מיקרוסקופ פלואורסצנטי

Despite rapid advances in high-throughput microscopy, quantitative image-based assays still pose significant challenges. While a variety of specialized ...

Detection of Alternative Splicing During Epithelial-Mesenchymal Transition

איתור של אלטרנטיבי שחבור במהלך המעבר אפיתל- mesenchymal

Alternative splicing plays a critical role in the epithelial-mesenchymal transition (EMT), an essential cellular program that occurs in various ...

A New Technique for Quantitative Analysis of Hair Loss in Mice Using Grayscale Analysis

טכניקה חדשה לניתוח כמותי של נשירת שיער בעכברים באמצעות ניתוח גווני אפור

Alopecia is a common form of hair loss which can occur in many different conditions, including male-pattern hair loss, polycystic ovarian syndrome, and ...