Name: rapid genetic analysis of epithelial-mesenchymal signaling during hair regeneration
Uploaded: 2013-02-28T12:30:00
Duration: 10 min 9 s
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यह काम NIH एनआरएसए (SXA) 1F32CA14208701 और NIH (AEO और डब्ल्यू मेगावाट) AR052785 और AR046786 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.

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	<li>Bershteyn, M., Atwood, S. X., Woo, W. M., Li, M., Oro, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MIM+and+cortactin+antagonism+regulates+ciliogenesis+and+hedgehog+signaling.">MIM and cortactin antagonism regulates ciliogenesis and hedgehog signaling.</a> Dev Cell. 19, 270-283 (2010).</li><li>Driskell, R. R., Juneja, V. R., Connelly, J. T., Kretzschmar, K., Tan, D. W., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+growth+of+dermal+papilla+cells+in+hydrogels+reveals+intrinsic+differences+between+Sox2-positive+and+-negative+cells+in+vitro+and+in+vivo.">Clonal growth of dermal papilla cells in hydrogels reveals intrinsic differences between Sox2-positive and -negative cells in vitro and in vivo.</a> J. Invest. Dermatol. 132, 1084-1093 (2012).</li><li>Lee, L. F., Jiang, T. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+short-term+culture+of+primary+keratinocytes,+hair+follicle+populations+and+dermal+cells+from+newborn+mice+and+keratinocytes+from+adult+mice+for+in+vitro+analysis+and+for+grafting+to+immunodeficient+mice.">Isolation and short-term culture of primary keratinocytes, hair follicle populations and dermal cells from newborn mice and keratinocytes from adult mice for in vitro analysis and for grafting to immunodeficient mice.</a> Nat. Protoc. 3, 799-810 (2008).</li><li>Lichti, U., Weinberg, W. C., Goodman, L., Ledbetter, S., Dooley, T., Morgan, D., Yuspa, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+regulation+of+murine+hair+growth:+insights+from+grafting+defined+cell+populations+onto+nude+mice.">In vivo regulation of murine hair growth: insights from grafting defined cell populations onto nude mice.</a> J. Invest. Dermatol. 101, 124S-129S (1993).</li><li>Lutolf, M. P., Gilbert, P. M., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designing+materials+to+direct+stem-cell+fate.">Designing materials to direct stem-cell fate.</a> Nature. 462, 433-441 (2009).</li><li>Osada, A., Iwabuchi, T., Kishimoto, J., Hamazaki, T. S., Okochi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+culture+of+mouse+vibrissal+dermal+papilla+cells+and+de+novo+hair+follicle+induction.">Long-term culture of mouse vibrissal dermal papilla cells and de novo hair follicle induction.</a> Tissue Eng. 13, 975-982 (2007).</li><li>Rendl, M., Polak, L., Fuchs, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BMP+signaling+in+dermal+papilla+cells+is+required+for+their+hair+follicle-inductive+properties.">BMP signaling in dermal papilla cells is required for their hair follicle-inductive properties.</a> Genes Dev. 22, 543-557 (2008).</li><li>Ventura, A., Meissner, A., Dillon, C. P., McManus, M., Sharp, P. A., Van Parijs, L., Jaenisch, R., Jacks, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cre-lox-regulated+conditional+RNA+interference+from+transgenes.">Cre-lox-regulated conditional RNA interference from transgenes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 10380-10385 (2004).</li><li>Weinberg, W. C., Goodman, L. V., George, C., Morgan, D. L., Ledbetter, S., Yuspa, S. H., Lichti, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+hair+follicle+development+in+vivo:+determination+of+follicle+formation,+hair+growth,+and+hair+quality+by+dermal+cells.">Reconstitution of hair follicle development in vivo: determination of follicle formation, hair growth, and hair quality by dermal cells.</a> J. Invest. Dermatol. 100, 229-236 (1993).</li><li>Woo, W. -. M., Zhen, H. H., Oro, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shh+maintains+dermal+papilla+identity+and+hair+morphogenesis+via+a+Noggin-Shh+regulatory+loop.">Shh maintains dermal papilla identity and hair morphogenesis via a Noggin-Shh regulatory loop.</a> Genes Dev. 26, 1235-1246 (2012).</li><li>Young, T. H., Lee, C. Y., Chiu, H. C., Hsu, C. J., Lin, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembly+of+dermal+papilla+cells+into+inductive+spheroidal+microtissues+on+poly(ethylene-co-vinyl+alcohol)+membranes+for+hair+follicle+regeneration.">Self-assembly of dermal papilla cells into inductive spheroidal microtissues on poly(ethylene-co-vinyl alcohol) membranes for hair follicle regeneration.</a> Biomaterials. 29, 3521-3530 (2008).</li><li>Zheng, Y., Du, X., Wang, W., Boucher, M., Parimoo, S., Stenn, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organogenesis+from+dissociated+cells:+generation+of+mature+cycling+hair+follicles+from+skin-derived+cells.">Organogenesis from dissociated cells: generation of mature cycling hair follicles from skin-derived cells.</a> J. Invest. Dermatol. 124, 867-876 (2005).</li></ol>

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

बाल पुनर्गठन assays डी Novo बाल कूप गठन की व्यवस्था की जांच के लिए एक अनूठा अंग उत्थान मॉडल प्रदान करते हैं. यहाँ, हम एक संशोधित कक्ष बाल बाल कूप गठन में जीन समारोह का निर्धारण करने के लिए उपयोगी परख का वर्णन करता है. हमारी परख रिपोर्ट चैम्बर बाल पुनर्गठन 5 परख, 6,11, जो हम एक lentiviral अभिव्यक्ति या चमड़े या epidermal प्रकार की कोशिकाओं में जीन overexpression या पछाड़ना हासिल तकनीक परिचय संशोधित पर आधारित है. हमारी परख एक तेजी से ऊतक विशेष आनुवंशिक पीटा पैदा करने के लिए विकल्प प्रदान करता है. इस परख हमें जीन समारोह के रूप में छोटे रूप में तीन हफ्तों में भ्रष्टाचार संग्रह करने के लिए lentivirus साथ प्राथमिक कोशिकाओं को संक्रमित करने से बाल कूप गठन में प्रदर्शित करने के लिए अनुमति देता है. हमारी परख के लिए आनुवंशिक lentivirus द्वारा एक सेल 12 प्रकार में संयोजन shRNA / सीडीएनए वितरण का उपयोग कर बातचीत के लिए बढ़ाया जा सकता है, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से चमड़े और epidermal सेल typ के बीच संकेत के परीक्षा की अनुमति देता हैतों. हमारे बाल परख सर्वश्रेष्ठ बाल कूप उत्थान में मजबूत लाभ या हानि का समारोह phenotypes का पता लगाने के लिए अनुकूल है, जबकि सूक्ष्म दोष निरीक्षण करने के लिए कठिन हैं. हम सफलतापूर्वक त्वचीय हमारे बाल उत्थान 1,12 परख का उपयोग कुछ जीनों के विशिष्ट जीन समारोह का प्रदर्शन किया है. Lentivirus वेक्टर 10 shRNA व्यक्त GFP मार्कर के आधार पर सह व्यक्त की, हम प्रदर्शन है कि दाता त्वचीय कोशिकाओं व्यक्त shRNA पुनर्जीवित बाल grafts में बनी. GFP पॉजिटिव कोशिकाओं को पुनर्जीवित बालों के रोम (3 चित्रा) के त्वचीय papilla (डीपी) में मौजूद थे. डी पी सेल की संभावना के रूप में जीन पछाड़ना के विभिन्न स्तरों के शामिल कोशिकाओं GFP के स्तर अलग व्यक्त की है, इस तरह से मनाया बाल कूप phenotype रेंज आनुवंशिक hypomorph से एक अशक्त करने के लिए गया था. इस परख के लिए एक सुधार के लिए उच्च shRNA व्यक्त की कोशिकाओं के लिए एक त्वरित और कारगर चयन graftin पहले स्थापित हो जाएगाछ FACS का उपयोग करने के लिए मजबूत GFP-व्यक्त कोशिकाओं को शुद्ध के रूप में. एक विकल्प के लिए इस परख में 9 उत्परिवर्ती या सशर्त पीटा कोशिकाओं विकल्प है. दूसरी ओर, एक संस्कृति प्रणाली है कि डी पी सेल समारोह की रक्षा कर सकते हैं बहुत ही उपयोगी है डी पी शक्ति के रूप में धीरे - धीरे एक बार प्राथमिक त्वचीय कोशिकाओं passaged खो दिया है. संभावित संस्कृति प्रणालियों कृत्रिम आला या एकत्रीकरण 2,7,8,13 संस्कृतियों से व्युत्पन्न biomaterials का उपयोग शामिल है. एक और सुधार करने के लिए एक उच्च सेल वसूली दर के साथ एक विश्वसनीय epidermal सेल ठंड विधि के रूप में इस माउस पिल्ले के दूसरे सेट (7 कदम) के उपयोग को कम करने के लिए चमड़े का विशिष्ट नुकसान या ताजा keratinocytes उत्पन्न होगा उत्पन्न होगा लाभ समारोह का अध्ययन करता है. इस कक्ष बाल परख बाल कूप घनत्व और सामान्य माउस त्वचा के लिए इसी तरह की गुणवत्ता का उत्पादन, हालांकि बाल विकास थोड़ा कम सिंक्रनाइज़ और कूप उन्मुखीकरण अधिक यादृच्छिक है. बाल उत्थान आनुवंशिक परख की कुछ सीमाएँ समेतlentivirus और सेल नंबर की एक बड़ी राशि की आवश्यकता है, और यह शल्य चिकित्सा पद्धतियों के मामले में बहुत श्रम गहन जब बाल पैच और प्रालंब assays 3,4,14 के रूप में पुनर्गठन assays के अन्य रूपों की तुलना में है. हालांकि, बालों के रोम और समय की गुणवत्ता का पता लगाने के लिए बाल विकास अन्य 4 assays के लिए बेहतर है. हमारे लक्षित बाल उत्थान परख मौजूदा आनुवंशिक मॉडल के लिए एक तेज और सुविधाजनक साथी प्रदान करता है.

<table border="1"><tbody><tr><td> नाम </td><td> कंपनी </td><td> # सूची </td><td> टिप्पणियां </td></tr><tr><td> पीबीएस </td><td> Invitrogen </td><td> 14190-144 </td><td></td></tr><tr><td> HbSS </td><td> Invitrogen </td><td> 14170-122 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 11995-065 </td><td></td></tr><tr><td> 0.25% ट्रिप्सिन-EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-056 </td><td></td></tr><tr><td> CNT-07 </td><td> सेल एन Tec </td><td> CNT-07 </td><td></td></tr><tr><td> AminoMAX-C100 </td><td> Invitrogen </td><td> 17001-074 </td><td></td></tr><tr><td> AminoMAX-C100 अनुपूरक </td><td> Invitrogen </td><td> 12556-015 </td><td></td></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 26140-079 </td><td></td></tr><tr><td> पेनिसिलिन स्ट्रेप्टोमाइसिन / </td><td> Invitrogen </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td> Fungizone </td><td> Invitrogen </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td> Gentamycin </td><td> Invitrogen </td><td> 15710-064 </td><td></td></tr><tr><td> Dispase </td><td> Roche </td><td> 4942078001 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase, प्रकार 1 </td><td> सिग्मा </td><td> C-0130 </td><td></td></tr><tr><td> Polybrene </td><td> सिग्मा </td><td> 107,689-10G </td><td></td></tr><tr><td> टिशू कल्चर पकवान </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 08-772E </td><td></td></tr><tr><td> विदारक कैंची </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 11-999 </td><td></td></tr><tr><td> संदंश </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 10-275 </td><td> घुमावदार </td></tr><tr><td> Scalpal </td><td> Medex आपूर्ति </td><td> # 10 GRF-2975 </td><td> आकार नहीं. 10 </td></tr><tr><td> 70 सुक्ष्ममापी सेल stainer </td><td> VWR </td><td> 21008-952 </td><td></td></tr><tr><td> 15 मिलीलीटर शंक्वाकार अपकेंद्रित्र ट्यूब </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 14 ९५९-49D </td><td></td></tr><tr><td> शराब swabs </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 1368063 </td><td></td></tr><tr><td> 23 गेज सुई </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 14-821-13F </td><td></td></tr><tr><td> नेत्र स्नेहक </td><td> CVS </td><td> 8883660 </td><td></td></tr><tr><td> Providone - lodine swabs </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> NC0116841 </td><td></td></tr><tr><td> सिलिकॉन चेम्बर्स </td><td> Renner GmbH </td><td> F2U, 30268 </td><td></td></tr><tr><td> Sutures </td><td> Acuderm </td><td> SUP3524 </td><td></td></tr><tr><td> लचीला पट्टी </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><html><td> 22-363-100 </td><td></td></tr><tr><td> गैर पक्षपाती ड्रेसिंग </td><td> TELFA </td><td> 1050 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> सामग्री </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> समाधान धो पीबीएस 500 छ / मिलीलीटर पेनिसिलिन / स्ट्रेप्टोमाइसिन 12.5 ग्राम / मिलीलीटर Fungizone 100 छ / मिलीलीटर Gentamycin Dispase समाधान HbSS 2.5 मिलीग्राम / एमएल अंतिम Dispase 100 छ / मिलीलीटर Gentamycin उदासीन मीडिया HbSS 15% FBS (v / v) Collagenase समाधान 0.25 (w / v)% Collagenase, प्रकार 1 ontent &quot;&gt; 100 छ / एमएल पेनिसिलिन / स्ट्रेप्टोमाइसिन 2.5 छ / मिलीलीटर Fungizone 50 ग्राम / मिलीलीटर Gentamycin Polybrene समाधान HbSS 8 ग्राम / एमएल (w / v) Polybrene </td></tr></tbody></table>

rapid genetic analysis of epithelial-mesenchymal signaling during hair regeneration

बाल कूप morphogenesis, एक जटिल प्रक्रिया epithelia व्युत्पन्न keratinocytes और अंतर्निहित mesenchyme के बीच बातचीत की आवश्यकता होती है, एक आकर्षक मॉडल अंग विकास और ऊतक विशेष के संकेत का अध्ययन करने के लिए प्रणाली है. हालांकि बाल कूप विकास आनुवंशिक विनयशील, इस प्रक्रिया के लिए आवश्यक कारकों में से तेजी से और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विश्लेषण एक चुनौती बनी हुई है. यहाँ हम एक लक्षित overexpression या एक ऊतक विशेष तरीके में lentivirus का उपयोग करने वाले कारकों के shRNA की मध्यस्थता पछाड़ना उत्पन्न करने की प्रक्रिया का वर्णन करता है. एक बाल उत्थान 5 मॉडल, 6, 11 का एक संशोधित संस्करण का उपयोग करना है, हम मजबूत लाभ या नुकसान का समारोह प्राथमिक माउस keratinocytes या त्वचीय कोशिकाओं में विश्लेषण उपकला-mesenchymal संकेत दे रास्ते कि बाल कूप morphogenesis नेतृत्व के अध्ययन की सुविधा प्राप्त करने के लिए कर सकते हैं . हम वर्णन कैसे अलग करने के लिए ताजा प्राथमिक माउस keratinocytes और त्वचीय कोशिकाओं है, जो त्वचीय papilla कोशिकाओं और उनके पूर्ववर्ती होते, lentivirus contai वितरित करने के लिएएक सेल आबादी के लिए या तो shRNA या सीडीएनए ning, और कोशिकाओं को गठबंधन करने के लिए पूरी तरह का गठन नग्न चूहों की पीठ पर बालों के रोम उत्पन्न. इस दृष्टिकोण ऊतक विशेष के तीन सप्ताह के भीतर बालों के रोम को उत्पन्न करने के लिए आवश्यक कारकों का विश्लेषण की अनुमति देता है और मौजूदा आनुवंशिक मॉडल के लिए एक तेज और सुविधाजनक साथी प्रदान करता है.

चित्रा 1 में हम एक तीन सप्ताह पुरानी पुनर्योजी बाल भ्रष्टाचार में त्वचीय विशिष्ट smoothened (एसएसओ) के एक महत्वपूर्ण घटक संकेत श्श्श lentiviral shRNA पछाड़ना का परिणाम दिखाते हैं. Lentiviral वेक्टर नियंत्रण का उपयोग कर अकेले grafts मजबूत बाल विकास (चित्रा 1 ए) दिखा. इसके विपरीत करके, बाल विकास (चित्रा 1 बी) के नुकसान में एसएमओ परिणामों के त्वचीय विशिष्ट पछाड़ना. Hematoxylin और लाल भामसान रंग दाग नियंत्रण में बालों के रोम और प्रयोगात्मक शर्तों (चित्रा 1C, डी) के स्तर को दर्शाया गया है. इसी तरह के उपचार से बाल विकास phenotype प्रयोगों के बीच में चर lentiviral वेक्टर अकेले संक्रमण के साथ सकारात्मक नियंत्रण सहित, हो सकता है. इसलिए सकारात्मक नियंत्रण grafts हमेशा एक संदर्भ के रूप में grafts के 30% scarring या grafts के अधूरा लगाव का एक परिणाम के रूप में असफल हो सकता है के रूप में हर प्रयोग में शामिल किया जाना चाहिए. एक कारक की सीडीएनए overexpressing जैसे दो कारकों के बीच एक संवाद का परीक्षण करने के लिए फिर से करने के मामले मेंएक और पहलू की scue shRNA की मध्यस्थता पछाड़ना, एक हमेशा अकेले पछाड़ना प्रत्येक प्रयोग में परिणाम प्रकट नुकसान का समारोह grafts करने के लिए शामिल करना चाहिए. यह एक आवश्यक सीमा निर्धारित करने के लिए कैसे एक विशेष जीन बाल कूप के उत्थान के मार्ग और कैसे दो जीन बातचीत perturbs प्रदान करेगा. चैम्बर (2A चित्रा) के हटाने सावधानी से किया जाना चाहिए. नवगठित अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना थोड़ा सुस्त सतह (चित्रा 2B) के साथ अपारदर्शी होना चाहिए. अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना चैम्बर के लिए छड़ी, तो धीरे एक तरफ उठाने लगता है भ्रष्टाचार घाव बिस्तर के साथ संलग्न रहता है के लिए महत्वपूर्ण है. भ्रष्टाचार के तीन दिन बाद काफी स्थिर है और थोड़ा मुश्किल पेश जब ड्रेसिंग को हटाने चाहिए. मजबूत बाल विकास तीन सप्ताह (चित्रा 2C) के बाद मनाया जाना चाहिए. छोड़ना या तो mDCs या KCS एक बरामद बिना किसी भी बाल (चित्रा 2 डी) 11 घाव साइट में परिणाम देगा. सेल या एक में सेल नुकसान की मौतकोई बालों में सेल प्रकार भी त्वचीय एसएमओ पछाड़ना में कम बाल उत्थान के रूप में चित्रा 1 बी में दिखाया के विपरीत में, परिणाम है. एक सफल परख सुनिश्चित करने के लिए है, यह महत्वपूर्ण है 90% से अधिक ग्राफ्टिंग कोशिकाओं के वायरल संक्रमण से पहले हासिल उपयुक्त overexpression या पछाड़ना दक्षता के साथ. कलम बांधने का काम प्रक्रिया के समय की कमी के कारण, हम एक ग्राफ्टिंग प्रयोग शुरू करने से पहले मुसीबत शूटिंग वायरल संक्रमण क्षमता की सलाह देते हैं, और हमेशा प्रक्रिया कलम बांधने का काम के दिन पर कोशिकाओं के एक छोटे से हिस्से को बचाने के लिए हानि या लाभ की अभिव्यक्ति की पुष्टि. Lentiviral अनुमापांक का निर्माण किया है और पहले संक्रमण 90-100% दक्षता प्राप्त करने के लिए निर्धारित किया जाना चाहिए के आधार पर अलग अलग होंगे. हम GFP साथ वायरल संक्रमण दक्षता lentiviral वेक्टर से coexpressed की निगरानी. हम नियमित रूप से मात्रात्मक पीसीआर और या वेस्टर्न ब्लॉट / प्रदर्शन पछाड़ना या overexpression की सीमा निर्धारित है. फ्लोरोसेंट टैग के साथ दोहरे अभिव्यक्ति वैक्टर उपयोग करने के लिए लेबलvirally संक्रमित कोशिकाओं को संकेत और हमारे परिपक्व grafts में constructs व्यक्त कोशिकाओं की संख्या की perdurance की रिपोर्ट के लिए एक रास्ता प्रदान करता है. हम lentiviral वेक्टर एसएमओ shRNA साथ संयोजन में 10 pSicoR सीएमवी GFP से एक सीएमवी प्रमोटर द्वारा संचालित GFP का उपयोग करें. चित्रा 3 में, हम एक 3 सप्ताह पुरानी भ्रष्टाचार जहां त्वचीय विशिष्ट GFP एक प्रतिनिधि बाल कूप के त्वचीय papilla में lentivirally व्यक्त दिखाते हैं. <img alt="चित्रा 1" src="/files/ftp_upload/4344/4344fig1.jpg" /> चित्रा 1. बाल कूप विकास के histological विश्लेषण () त्वचीय खाली lentiviral वेक्टर और अनुपचारित keratinocytes साथ संक्रमित कोशिकाओं के साथ नियंत्रण बाल उत्थान भ्रष्टाचार के (बी) smoothened त्वचीय कोशिकाओं में lentiviral shRNA का उपयोग पछाड़ना बालों के रोम के नुकसान में इलाज keratinocytes परिणामों के साथ संयुक्त है. (सी) Hematoxylin और लाल भामसान रंग धुंधला हो जाना ऐनाजेन बाल च से पता चलता हैनियंत्रण grafts में ollicles dermis में नीचे विस्तार और (डी) smoothened पछाड़ना बालों के रोम अवरुद्ध और काफी हद तक अनुपस्थित रहते हैं. सभी छवियों कलम बांधने का काम तीन सप्ताह के बाद कर रहे हैं. पैमाने बार 100 सुक्ष्ममापी अर्थ. <img alt="चित्रा 2" src="/files/ftp_upload/4344/4344fig2.jpg" /> चित्रा 2. प्राथमिक कोशिकाओं (ए) sutured कक्ष आवास प्राथमिक त्वचीय कोशिकाओं और keratinocytes के साथ परमाणु परमाणु माउस / ग्राफ्टिंग. (बी) के चैम्बर के हटाने के नव त्वचा कि सुस्त और चरित्र में अपारदर्शी है का गठन उजागर (सी) भ्रष्टाचार पूर्ण विकसित बाल जंगली का उपयोग करते हुए ग्राफ्टिंग के बाद प्राथमिक त्वचीय कोशिकाओं और तीन सप्ताह में keratinocytes लिखें. (डी) keratinocytes बिना प्राथमिक त्वचीय कोशिकाओं के अलावा तीन सप्ताह के बाद कोई बाल की ओर जाता है. इसी तरह के परिणाम त्वचीय कोशिकाओं के बिना प्राथमिक keratinocytes के अलावा के साथ देखा जाता है. चित्रा 3. एक 3 सप्ताह पुराने पुनर्जीवित भ्रष्टाचार से त्वचीय papilla की त्वचीय papilla में GFP अभिव्यक्ति का रखरखाव. Confocal छवियों. GFP त्वचीय सेल की आबादी में एक lentiviral वेक्टर से व्यक्त की गई थी और त्वचीय papilla (हरा) में पाया. Versican (लाल) demarcates त्वचीय papilla और नाभिक Hoechst (नीला) के साथ लेबल थे. नोट GFP त्वचीय कोशिकाओं में विशेष रूप से है, लेकिन आसपास के keratinocytes में व्यक्त की है. स्केल बार 20 सुक्ष्ममापी अर्थ.

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Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

ऊतक विशेष एक बाल कूप उत्थान lentivirus का उपयोग करने के लिए लाभ या हानि का समारोह मध्यस्थता के मॉडल का विश्लेषण.

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