Name: viral nanoparticles for in vivo tumor imaging
Uploaded: 2012-11-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי NIH / NIBIB מענקי R00 EB009105 (לNFS) וP30 EB011317 (לNFS), NIH / NIBIB אימוני מענק T32 EB007509 (לAMW), מקרה Reserve University הבינתחומי הברית השקעות גרנט המערבי (לNFS), ומקרה מקיף במרכז סרטן מענק P30 CA043703 (לNFS). אנו מודים לחוקרי הסטודנטים לתואר הראשונים שטינמץ מעבדתם לידות על תמיכה: נדיה איאת, קווין חן, אינדונזית (סיד) דיי, אליס יאנג, סם אלכסנדר, קרייג ד &#39;קרוז, סטיבן הרן, לורן רנדולף, בריאן אז, ופול Chariou .

1. VNP (CPMV, BMV, PVX, וTMV) רבייה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את תא הצמח המקורה שולט עד 15 שעות ביום (אור 100%, 25 ° C, לחות 65%) ו 9 שעות של הלילה (אור 0%, 22 ° C, לחות 60%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחסן צמחים בהתאם ללוחות הזמנים בטבלה 1. </li></ol><table border="1" style="...

<ol>
	<li>Carrillo-Tripp, M., Shepherd, C. M., Borelli, I. A., Venkataraman, S., Lander, G., Natarajan, P., Johnson, J. E., Brooks, C. L., Reddy, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VIPERdb2:+an+enhanced+and+web+API+enabled+relational+database+for+structural+virology.">VIPERdb2: an enhanced and web API enabled relational database for structural virology.</a> Nucl. Acids Res. 37, 436-442 (2009).</li><li>Pokorski, J. K., Steinmetz, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+art+of+engineering+viral+nanoparticles.">The art of engineering viral nanoparticles.</a> Mol. Pharm. 8, 29-43 (2011).</li><li>Steinmetz, N. F., Lin, T., Lomonossoff, G. P., Johnson, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure-based+engineering+of+an+icosahedral+virus+for+nanomedicine+and+nanotechnology.">Structure-based engineering of an icosahedral virus for nanomedicine and nanotechnology.</a> Curr. Top Microbiol. Immunol. 327, 23-58 (2009).</li><li>Jung, B., Rao, A. L., Anvari, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+Nano-Constructs+Composed+of+Genome-Depleted+Brome+Mosaic+Virus+Doped+with+a+Near+Infrared+Chromophore+for+Potential+Biomedical+Applications.">Optical Nano-Constructs Composed of Genome-Depleted Brome Mosaic Virus Doped with a Near Infrared Chromophore for Potential Biomedical Applications.</a> ACS Nano. , (2011).</li><li>Leong, H. S., Steinmetz, N. F., Ablack, A., Destito, G., Zijlstra, A., Stuhlmann, H., Manchester, M., Lewis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+embryonic+and+tumor+neovasculature+using+viral+nanoparticles.">Intravital imaging of embryonic and tumor neovasculature using viral nanoparticles.</a> Nat. Protoc. 5, 1406-1417 (2010).</li><li>Leopold, P. L., Ferris, B., Grinberg, I., Worgall, S., Hackett, N. R., Crystal, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+virions:+dynamic+tracking+of+the+pathway+of+adenoviral+gene+transfer+vectors+in+living+cells.">Fluorescent virions: dynamic tracking of the pathway of adenoviral gene transfer vectors in living cells.</a> Hum. Gene Ther. 9, 367-378 (1998).</li><li>Lewis, J. D., Destito, G., Zijlstra, A., Gonzalez, M. J., Quigley, J. P., Manchester, M., Stuhlmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+nanoparticles+as+tools+for+intravital+vascular+imaging.">Viral nanoparticles as tools for intravital vascular imaging.</a> Nat. Med. 12, 354-360 (2006).</li><li>Steinmetz, N. F., Ablack, A. L., Hickey, J. L., Ablack, J., Manocha, B., Mymryk, J. S., Luyt, L. G., Lewis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+human+prostate+cancer+using+viral+nanoparticles+targeted+to+gastrin-releasing+Peptide+receptors.">Intravital imaging of human prostate cancer using viral nanoparticles targeted to gastrin-releasing Peptide receptors.</a> Small. 7, 1664-1672 (2011).</li><li>Wu, C., Barnhill, H., Liang, X., Wang, Q., Jiang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+probe+using+hybrid+virus-dye+nanoparticles+for+near-infrared+fluorescence+tomography.">A new probe using hybrid virus-dye nanoparticles for near-infrared fluorescence tomography.</a> Optics Communications. 255, 366-374 (2005).</li><li>Steinmetz, N. F., Cho, C. F., Ablack, A., Lewis, J. D., Manchester, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cowpea+mosaic+virus+nanoparticles+target+surface+vimentin+on+cancer+cells.">Cowpea mosaic virus nanoparticles target surface vimentin on cancer cells.</a> Nanomedicine (Lond). 6, 351-364 (2011).</li><li>Maeda, H., Wu, J., Sawa, T., Matsumura, Y., Hori, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+vascular+permeability+and+the+EPR+effect+in+macromolecular+therapeutics:+a+review.">Tumor vascular permeability and the EPR effect in macromolecular therapeutics: a review.</a> Journal of Controlled Release. 65, 271-284 (2000).</li><li>Chatterji, A., Ochoa, W., Paine, M., Ratna, B. R., Johnson, J. E., Lin, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+addresses+on+an+addressable+virus+nanoblock:+uniquely+reactive+Lys+residues+on+cowpea+mosaic+virus.">New addresses on an addressable virus nanoblock: uniquely reactive Lys residues on cowpea mosaic virus.</a> Chem. Biol. 11, 855-863 (2004).</li><li>Steinmetz, N. F., Mertens, M. E., Taurog, R. E., Johnson, J. E., Commandeur, U., Fischer, R., Manchester, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potato+virus+X+as+a+novel+platform+for+potential+biomedical+applications.">Potato virus X as a novel platform for potential biomedical applications.</a> Nano Lett. 10, 305-312 (2010).</li><li>Wang, Q., Lin, T., Tang, L., Johnson, J. E., Finn, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Icosahedral+virus+particles+as+addressable+nanoscale+building+blocks.">Icosahedral virus particles as addressable nanoscale building blocks.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 41, 459-462 (2002).</li><li>Bruckman, M. A., Kaur, G., Lee, L. A., Xie, F., Sepulveda, J., Breitenkamp, R., Zhang, X., Joralemon, M., Russell, T. P., Emrick, T., Wang, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+modification+of+tobacco+mosaic+virus+with+"click"+chemistry.">Surface modification of tobacco mosaic virus with "click" chemistry.</a> Chembiochem. 9, 519-523 (2008).</li><li>Schlick, T. L., Ding, Z., Kovacs, E. W., Francis, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-surface+modification+of+the+tobacco+mosaic+virus.">Dual-surface modification of the tobacco mosaic virus.</a> J. Am. Chem. Soc. 127, 3718-3723 (2005).</li><li>Yildiz, I., Tsvetkova, I., Wen, A. M., Shukla, S., Masarapu, M. H., Dragnea, B., Steinmetz, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+of+Brome+mosaic+virus+for+biomedical+applications.">Engineering of Brome mosaic virus for biomedical applications.</a> RSC Advances. , (2012).</li><li>Brunel, F. M., Lewis, J. D., Destito, G., Steinmetz, N. F., Manchester, M., Stuhlmann, H., Dawson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrazone+ligation+strategy+to+assemble+multifunctional+viral+nanoparticles+for+cell+imaging+and+tumor+targeting.">Hydrazone ligation strategy to assemble multifunctional viral nanoparticles for cell imaging and tumor targeting.</a> Nano Lett. 10, 1093-1097 (2010).</li><li>Shukla, S., Ablack, A., Wen, A., Lee, K., Lewis, J., Steinmetz, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+tumor+homing+and+tissue+penetration+of+the+filamentous+plant+viral+nanoparticle+Potato+virus+X.">Increased tumor homing and tissue penetration of the filamentous plant viral nanoparticle Potato virus X.</a> Molecular Pharmaceutics. , (2012).</li><li>Chatterji, A., Ochoa, W., Shamieh, L., Salakian, S. P., Wong, S. M., Clinton, G., Ghosh, P., Lin, T., Johnson, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+conjugation+of+heterologous+proteins+on+the+surface+of+Cowpea+mosaic+virus.">Chemical conjugation of heterologous proteins on the surface of Cowpea mosaic virus.</a> Bioconjug. Chem. 15, 807-813 (2004).</li></ol>

פרוטוקול זה מספק גישה לשינוי הכימי של VNPs והיישומים שלהם להדמית גידול vivo. הדמית חית פלואורסצנטי, פלואורסצנציה כימות, ואימונוהיסטוכימיה הטכניקות שהוצגו כאן הן שימושיות לחקר biodistribution והערכת גידול ביות. טכניקות אלה מספקים מידע רב ערך לגבי גישה של החלקיקים לגי?...

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>VNP production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Indoor plant chamber</td>
			<td>Percival Scientific</td>
			<td>E-41L2</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V. unguiculata seeds (California black-eye no. 5)</td>
			<td>Burpee</td>
			<td>51771A</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N. benthamiana seeds</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>N. benthamiana seeds were a gift from Salk Institute. Seeds are produced through plant propagation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carborundum</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>C192-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro-mix BX potting soil</td>
			<td>Premier Horticulture</td>
			<td>713400</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jack's Professional 20-10-20 Peat-Lite Fertilizer</td>
			<td>JR Peters</td>
			<td>77860</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50.2 Ti rotor</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>337901</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SW 32 Ti rotor</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>369694</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima L-90K ultracentrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>365672</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SLA-3000 rotor</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>07149</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SS-34 rotor</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>28020</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall RC-6 Plus centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>46910</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene bottle</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>355607</td>
			<td>For SLA-3000 rotor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate bottle</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>357002</td>
			<td>For SS-34 rotor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-Clear tube</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>344058</td>
			<td>For sucrose gradient and SW 32 Ti rotor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate bottle</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>355618</td>
			<td>For pelleting and 50.2 Ti rotor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>NanoDrop2000c</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerEase 500 pre-cast gel system</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>EI8675EU</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superose 6 10/300 GL (24 ml) size-exclusion column</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>17-5172-01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&Auml;KTA Explorer 100 Chromatograph</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>28-4062-66</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allegra X-12R</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>392302</td>
			<td>Benchtop centrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM1850</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Maestro 2</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>In vivo imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tearor</td>
			<td>Biospec Products</td>
			<td>985370-395</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite-200</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transmission electron microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>Libra 200FE</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoView laser scanning confocal microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV1000</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Chemicals and Reagents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-ethynylaniline</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>498289-5G</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 well black plate</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>353285</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-12% Bis-Tris NuPAGE SDS gel</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>NP0321BOX</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4X LDS sample buffer</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>NP0008</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A385-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>271004-1L</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 azide</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10277</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 carboxylic acid, succinimidyl ester</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A20006</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra-0.5 ml Centrifugal Filters</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>UFC501096</td>
			<td>10 kDa cut-off</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aminoguanidine hydrochloride</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>36891-0250</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Boric acid</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A74-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie Brilliant Blue R-250</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP101-25</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CsCl</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>42285-1000</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>157574</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP231-100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>09-801K</td>
			<td>P5 grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC anti-mouse CD31</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>102406</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16210-064</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP366-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-ascorbic acid sodium salt</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>35268-0050</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A412P-4</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP214-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-544-3</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48366-277</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MOPS buffer</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>NP0001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mPEG-mal</td>
			<td>Nanocs</td>
			<td>PG1-ML-2k</td>
			<td>MW 2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mPEG-N3</td>
			<td>Nanocs</td>
			<td>PG1-AZ-5k</td>
			<td>MW 5000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mPEG-NHS</td>
			<td>Nanocs</td>
			<td>PG1-SC-5k</td>
			<td>MW 5000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP358-212</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oregon Green 488 succinimidyl ester *6-isomer*</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>O-6149</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>p-toluenesulfonic acid monohydrate</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>13902-0050</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>SP15-100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate dibasic</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP363-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP362-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP333-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium nitrite</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>42435-0050</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium sulfite</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>0628-500G</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S6-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEM grid</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>FCF-400Cu</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris base</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP152-500</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>EMD Chemicals</td>
			<td>TX1568-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&beta;-mercaptoethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>O3446I-100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Tissue Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>12483-020</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>0267110</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HT-29 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>HTB-38</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25030-080</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Cellgro</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10378-016</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>31800-089</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture flasks</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431080</td>
			<td>175 cm2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>SV30084.01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin, 0.05% (1X) with EDTA 4Na, liquid</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25300-054</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Animal Studies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18% Protein Rodent Diet</td>
			<td>Harlan Teklad</td>
			<td>Teklad Global 2018S</td>
			<td>Alfalfa free diet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>329410</td>
			<td>28 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>AHN3637</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel Matrix basement membrane</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>356234</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NCR nu/nu mice</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>CWRU School 
			of Medicine Athymic Animal and Xenograft Core Facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile syringe</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305196</td>
			<td>18 1/2 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek CRYO-OCT Compound</td>
			<td>Andwin Scientific</td>
			<td>4583</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

viral nanoparticles for in vivo tumor imaging

השימוש של ננו יש פוטנציאל לחולל מהפכה במדע וברפואת חומרים. נכון לעכשיו, מספר החלקיקים שונים הנחקרים בחשד ליישומים בתחום הדמיה וטיפול. חלקיקים נגיפיים (VNPs) המופקים מצמחים יכולים להיחשב bionanomaterials עצמי התאסף עם גדלים וצורות מוגדרות. וירוסי צמחים נחקרים במעבדת שטיינמץ כוללים חלקיקי icosahedral נוצרו על ידי וירוס Cowpea פסיפס (CPMV) ונגיף פסיפס Brome (BMV), אשר שניהם הם 30 ננומטר בקוטר. אנחנו גם בפיתוח מבני מוט בצורה ופילמנטיות נגזרים מוירוסי הצמחים הבאים: וירוס טבק פסיפס (TMV), המהווה מוטות נוקשות עם ממדים של 300 ננומטר על 18 ננומטר, ותפו&quot;א וירוס X (PVX), שיצירת חלקיקים פילמנטיות 515 ננומטר באורך 13 ננומטר ברוחב (הקורא התייחס לשופטים. 1 ו 2 למידע נוסף על VNPs). &gt; מנקודת מבטו של מדען חומרים של נוף, VNPs הם אבני בניין אטרקטיביים מכמה סיבות: החלקיקים הם monodisperse, ניתן לייצר בקלות בקנה מידה גדול בPlanta, הם במיוחד יציבים, ולא ביולוגיים. כמו כן, VNPs הם יחידות &quot;לתכנות&quot;, אשר יכולה להיות מהונדסת במיוחד באמצעות הנדסה גנטית או בשיטות כימיות bioconjugation 3. מבנה VNPs ידוע רזולוציה אטומית, ושינויים יכולים להתבצע עם דיוק המרחבי ברמה האטומית 4, רמת שליטה שלא ניתן להשיג באמצעות ננו הסינטטי עם נוכחיות טכנולוגיות מדינה-of-the-art. במאמר זה, אנו מתארים את ההתפשטות של CPMV, PVX, TMV, וBMV בצמחי Nicotiana benthamiana Vigna ungiuculata ו. פרוטוקולי שאיבה וטיהור לכל VNP מקבלים. שיטות לאפיון של מטוהרים וVNPs כותרת-כימית מתוארות. במחקר זה, אנו מתמקדים בפרקתיוג emical של VNPs עם fluorophores (למשל Alexa פלואוריד 647) ופוליאתילן גליקול (PEG). את הצבעים להקל על מעקב וזיהוי של VNPs 5-10, וPEG מפחית חיסוני של החלקיקים חלבוניים תוך שיפור הפרמקוקינטיקה 8,11. אנו מראים גידול ביות של VNPs PEGylated באמצעות מודל גידול xenograft עכבר. שילוב של דימות פלואורסצנטי של הרקמות vivo לשעבר באמצעות מערכת הדמית מאסטרו, כימות קרינה ברקמות הומוגניזציה, ומיקרוסקופיה confocal משמש ללמוד biodistribution. VNPs נמחקים באמצעות מערכת reticuloendothelial (מיל &#39;); גידול ביות מושגת באופן פסיבי באמצעות חדירות המשופרות ושמירת האפקט (EPR) 12. ננוטכנולוגיה VNP היא חזק plug-and-לשחק טכנולוגיה לתמונה ולטפל באתרים של מחלה בגוף חי. בנוסף, אנו מפתחים VNPs לשאת מטעני סמים וmoieties הדמיה הרלוונטי קליני-, כמו גם ligands רקמות ספציפיות ללמקד קולטנים מולקולריים overexpressed בסרטן ומחלות לב וכלי דם.

<img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/4352/4352fig1.jpg" /> 
 Figure 1. Plant virus-infected plants. Vigna unguiculata plants infected with CPMV (A). Nicotiana benthamiana plants infected with PVX (B), TMV (C), and BMV (D). The pictures were taken about 10 days post infection by mechanical inoculation.
<img alt="Figure 2" fo:content-width="3in" fo:src="/files/ftp_upload/4352...

Watch this Scientific Journal Video about Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging at JoVE.com

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

חלקיקים נגיפיים צמח (VNPs) מבטיחים פלטפורמות ליישומים ביו. כאן, אנו מתארים את ההליכים להתפשטות צמח VNP, טיהור, אפיון, וbioconjugation. לבסוף, אנו מראים את היישום של VNPs לביות והדמית גידול תוך שימוש במודל עכבר xenograft ודימות פלואורסצנטי.

חלקיקים נגיפיים עבור<em&gt; בחי</em&gt; הדמית גידול

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

תלת ממדית ברזולוציה אופטית photoacoustic מיקרוסקופית

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

התקני microfluidic פשוטים עבור<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה של<em&gt; ג elegans</em&gt;,<em&gt; דרוזופילה</em&gt; ודג זברה

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Analysis of Targeted Viral Protein Nanoparticles Delivered to HER2+ Tumors

ניתוח של חלבון נגיפי ממוקד חלקיקים מובא לHER2 + גידולים

The HER2+ tumor-targeted nanoparticle, HerDox, exhibits tumor-preferential accumulation and tumor-growth ablation in an animal model of HER2+ cancer. ...

PLGA Nanoparticles Formed by Single- or Double-emulsion with Vitamin E-TPGS

Poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a biocompatible member of the aliphatic polyester family of biodegradable polymers. PLGA has long been a popular ...

Imaging Denatured Collagen Strands In vivo and Ex vivo via Photo-triggered Hybridization of Caged Collagen Mimetic Peptides

Imaging Denatured Collagen Strands In vivo and Ex vivo via Photo-triggered Hybridization of Caged Collagen Mimetic Peptides

הדמיה גידים קולגן המפוגל<em&gt; בvivo</em&gt; ו<em&gt; Ex vivo</em&gt; באמצעות הכלאה-מופעל על תמונה של Caged קולגן כוזב פפטידים

Collagen is a major structural component of the extracellular matrix that supports tissue formation and maintenance. Although collagen remodeling is an ...

Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research

הרמוני חלקיקים למחקר הרגנרציה

In this visualized experiment, protocol details are provided for in vitro labeling of human embryonic stem cells (hESC) with second harmonic generation ...

Biofunctionalized Prussian Blue Nanoparticles for Multimodal Molecular Imaging Applications

Biofunctionalized הכחול פרוסים חלקיקים ליישומי הדמיה מולקולריים Multimodal

Multimodal, molecular imaging allows the visualization of biological processes at cellular, subcellular, and molecular-level resolutions using multiple, ...

Microwave-driven Synthesis of Iron Oxide Nanoparticles for Fast Detection of Atherosclerosis

סינתזה מיקרוגל מונחה של תחמוצת ברזל חלקיקים עבור איתור מהיר של טרשת עורקים

A fast and reproducible microwave-driven protocol has been developed for the synthesis of neridronate-functionalized nanoparticles. Starting from the ...

Visualizing Angiogenesis by Multiphoton Microscopy In Vivo in Genetically Modified 3D-PLGA/nHAp Scaffold for Calvarial Critical Bone Defect Repair

Visualizing Angiogenesis by Multiphoton Microscopy In Vivo in Genetically Modified 3D-PLGA/nHAp Scaffold for Calvarial Critical Bone Defect Repair

אנגיוגנזה להמחיש באמצעות מיקרוסקופ Multiphoton Vivo ב מהונדסים גנטית לגרדום 3D-PLGA/nHAp Calvarial תיקון פגם קריטי של העצם

The reconstruction of critically sized bone defects remains a serious clinical problem because of poor angiogenesis within tissue-engineered scaffolds ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

ההערכה הראשונית של נוגדן-conjugates שונה עם פפטידים ויראלי-derived הגדלת לצבירה התאית ושיפור הגידול מיקוד

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...