Name: isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods
Uploaded: 2012-11-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods at JoV

نحن نعترف بامتنان الدكتورة ليلى شاكري والدكتور عارف Dournaei لرمي انتقاداتهم والسيد محمد رضا شريف خادم للدعم الفني له.

1. إعداد الحل والمتوسطة إنزيم انتشار (PM) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل نوع كولاجيناز I الحل: زن من نوع I كولاجيناز (12 ملغ / مل) وتذوب في 1 مل PBS باستخدام فلتر وحقنة ميكرون 0،2 التصفية. ثم ضع على بعد 15 مل أنبوب وابقائه في -20 درجة مئوية حتى الحاجة...

<ol>
	<li>Volponi, A. A., Pang, Y., Sharpe, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+biological+tooth+repair+and+regeneration.">Stem cell-based biological tooth repair and regeneration.</a> Trends Cell Biol. 20, 715-722 (2010).</li><li>Nosrat, I. V., Widenfalk, J., Olson, L., Nosrat, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+cells+produce+neurotrophic+factors,+interact+with+trigeminal+neurons+in+vitro,+and+rescue+motoneurons+after+spinal+cord+injury.">Dental pulp cells produce neurotrophic factors, interact with trigeminal neurons in vitro, and rescue motoneurons after spinal cord injury.</a> Dev. Biol. 238, 120-132 (2001).</li><li>Gandia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells+improve+left+ventricular+function,+induce+angiogenesis,+and+reduce+infarct+size+in+rats+with+acute+myocardial+infarction.">Human dental pulp stem cells improve left ventricular function, induce angiogenesis, and reduce infarct size in rats with acute myocardial infarction.</a> Stem Cells. 26, 638-645 (2008).</li><li>Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+human+dental+pulp+stem+cells+(DPSCs)+in+vitro+and+in+vivo.">Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.. 97, 13625-13630 (2000).</li><li>Graziano, A., d'Aquino, R., Laino, G., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells:+a+promising+tool+for+bone+regeneration.">Dental pulp stem cells: a promising tool for bone regeneration.</a> Stem Cell Rev. 4, 21-26 (2008).</li><li>Kerkis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+transplantation+of+human+immature+dental+pulp+stem+cells+from+baby+teeth+to+golden+retriever+muscular+dystrophy+(GRMD)+dogs:+Local+or+systemic.">Early transplantation of human immature dental pulp stem cells from baby teeth to golden retriever muscular dystrophy (GRMD) dogs: Local or systemic.</a> J. Transl. Med. 6, 35 (2008).</li><li>Onyekwelu, O., Seppala, M., Zoupa, M., Cobourne, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tooth+development:+2.+Regenerating+teeth+in+the+laboratory.">Tooth development: 2. Regenerating teeth in the laboratory.</a> Dent. Update. 34, 20-29 (2007).</li><li>Cordeiro, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+tissue+engineering+with+stem+cells+from+exfoliated+deciduous+teeth.">Dental pulp tissue engineering with stem cells from exfoliated deciduous teeth.</a> J. Endod. 34 (08), 962-969 (2008).</li><li>Pierdomenico, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipotent+mesenchymal+stem+cells+with+immunosuppressive+activity+can+be+easily+isolated+from+dental+pulp.">Multipotent mesenchymal stem cells with immunosuppressive activity can be easily isolated from dental pulp.</a> Transplantation. 80, 836-842 (2005).</li><li>de Mendonca Costa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstruction+of+large+cranial+defects+in+nonimmunosuppressed+experimental+design+with+human+dental+pulp+stem+cells.">Reconstruction of large cranial defects in nonimmunosuppressed experimental design with human dental pulp stem cells.</a> J. Craniofac. Surg. 19, 204-210 (2008).</li><li>Tirino, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+identification,+characterization+and+banking+of+human+DPSCs:+current+strategies+and+perspectives.">Methods for the identification, characterization and banking of human DPSCs: current strategies and perspectives.</a> Stem Cell Rev. 7, 608-615 (2011).</li><li>Tirino, V., Paino, F., De Rosa, A., Papaccio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification,+isolation,+characterization,+and+banking+of+human+dental+pulp+stem+cells.">Identification, isolation, characterization, and banking of human dental pulp stem cells.</a> Methods Mol. Biol. 879, 443-463 (2012).</li><li>Eslaminejad, M. B., Vahabi, S., Shariati, M., Nazarian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+Growth+and+Characterization+of+Stem+Cells+from+Human+Dental+Pulp+of+Deciduous+Versus+Permanent+Teeth.">In vitro Growth and Characterization of Stem Cells from Human Dental Pulp of Deciduous Versus Permanent Teeth.</a> J. Dent. (Tehran). 7, 185-195 (2010).</li><li>Wei, X., Ling, J., Wu, L., Liu, L., Xiao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+mineralization+markers+in+dental+pulp+cells.">Expression of mineralization markers in dental pulp cells.</a> J. Endod. 33, 703-708 (2007).</li><li>Nombela-Arrieta, C., Ritz, J., Silberstein, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+elusive+nature+and+function+of+mesenchymal+stem+cells.">The elusive nature and function of mesenchymal stem cells.</a> Nat. Rev. Mol Cell Biol. 12, 126-131 (2011).</li><li>Huang, G. T., Gronthos, S., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+tissues+vs.+those+from+other+sources:+their+biology+and+role+in+regenerative+medicine.">Mesenchymal stem cells derived from dental tissues vs. those from other sources: their biology and role in regenerative medicine.</a> J. Dent. Res. 88, 792-806 (2009).</li><li>Graziano, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffold's+surface+geometry+significantly+affects+human+stem+cell+bone+tissue+engineering.">Scaffold's surface geometry significantly affects human stem cell bone tissue engineering.</a> J. Cell Physiol. 214, 166-172 (2008).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dental+pulp+stem+cells:+from+biology+to+clinical+applications.">Human dental pulp stem cells: from biology to clinical applications.</a> J. Exp. Zool. B. Mol. Dev. Evol. 312, 408-415 (2009).</li><li>Mitsiadis, T. A., Feki, A., Papaccio, G., Caton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells,+niches,+and+notch+signaling+in+tooth+injury.">Dental pulp stem cells, niches, and notch signaling in tooth injury.</a> Adv. Dent. Res. 23, 275-279 (2011).</li><li>Shi, S., Gronthos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+niche+of+postnatal+mesenchymal+stem+cells+in+human+bone+marrow+and+dental+pulp.">Perivascular niche of postnatal mesenchymal stem cells in human bone marrow and dental pulp.</a> J. Bone Miner. Res. 18, 696-704 (2003).</li><li>Tomic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+properties+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+dental+pulp+and+dental+follicle+are+susceptible+to+activation+by+toll-like+receptor+agonists.">Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells derived from dental pulp and dental follicle are susceptible to activation by toll-like receptor agonists.</a> Stem Cells Dev. 20, 695-708 (2011).</li><li>Tsukamoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mineralized+nodule+formation+by+cultures+of+human+dental+pulp-derived+fibroblasts.">Mineralized nodule formation by cultures of human dental pulp-derived fibroblasts.</a> Arch. Oral Biol. 37, 1045-1055 (1992).</li><li>About, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dentin+production+in+vitro.">Human dentin production in vitro.</a> Exp. Cell Res. 258, 33-41 (2000).</li><li>Couble, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odontoblast+differentiation+of+human+dental+pulp+cells+in+explant+cultures.">Odontoblast differentiation of human dental pulp cells in explant cultures.</a> Calcif. Tissue Int. 66, 129-138 (2000).</li><li>Onishi, T., Kinoshita, S., Shintani, S., Sobue, S., Ooshima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+proliferation+and+differentiation+of+dog+dental+pulp+cells+in+serum-free+culture+medium+by+insulin-like+growth+factor.">Stimulation of proliferation and differentiation of dog dental pulp cells in serum-free culture medium by insulin-like growth factor.</a> Arch. Oral Biol. 44 (99), 361-371 (1999).</li><li>Huang, G. T., Sonoyama, W., Chen, J., Park, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+characterization+of+human+dental+pulp+cells:+various+isolation+methods+and+culturing+environments.">In vitro characterization of human dental pulp cells: various isolation methods and culturing environments.</a> Cell Tissue Res. 324, 225-236 (2006).</li><li>Bakopoulou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+impact+of+two+different+isolation+methods+on+the+osteo/odontogenic+differentiation+potential+of+human+dental+stem+cells+derived+from+deciduous+teeth.">Assessment of the impact of two different isolation methods on the osteo/odontogenic differentiation potential of human dental stem cells derived from deciduous teeth.</a> Calcif. Tissue Int. 88, 130-141 (2011).</li><li>Curtis, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EF1alpha+and+RPL13a+represent+normalization+genes+suitable+for+RT-qPCR+analysis+of+bone+marrow+derived+mesenchymal+stem+cells.">EF1alpha and RPL13a represent normalization genes suitable for RT-qPCR analysis of bone marrow derived mesenchymal stem cells.</a> BMC Mol. Biol. 11, 61 (2010).</li><li>Suchanek, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+pulp+stem+cells+and+their+characterization.">Dental pulp stem cells and their characterization.</a> Biomed. Pap. Med. Fac. Univ. Palacky Olomouc Czech Repub. 153, 31-35 (2009).</li><li>d'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+postnatal+dental+pulp+cells+co-differentiate+into+osteoblasts+and+endotheliocytes:+a+pivotal+synergy+leading+to+adult+bone+tissue+formation.">Human postnatal dental pulp cells co-differentiate into osteoblasts and endotheliocytes: a pivotal synergy leading to adult bone tissue formation.</a> Cell Death Differ. 14, 1162-1171 (2007).</li><li>Atari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+pluripotent+stem+cells+from+human+third+molar+dental+pulp.">Isolation of pluripotent stem cells from human third molar dental pulp.</a> Histol. Histopathol. 26, 1057-1070 (2011).</li></ol>

هذا البروتوكول يصف عملية عزل وتوصيف hDPSCs من لب الأسنان باستخدام طريقتين، والتفكك الأنزيمية ثمرة مباشرة للخلايا الجذعية من الأنسجة إإكسبلنتس اللب. وبالإضافة إلى ذلك، في تمايز المختبر من هذه الخلايا في odontoblasts، تم تقييم من قبل فحص كمية الصبغ الأحمر الأحمر S &amp...

الخلايا الجذعية هي خلايا مولد الرمع التي تمتلك اثنين من الميزات الرائعة، والمعروفة باسم قوة متعددة والتجديد الذاتي 15. بين جميع الخلايا الجذعية مع الفعاليات المختلفة تنسخي، وضعت الخلايا الجذعية الأسنان والخلايا الجذعية بعد الولادة الاهتمام في السنوات الأخيرة بسبب إمكانية الوصول إليها، اللدونة، وقدرة عالية التكاثري بالمقارنة مع غيرها من الخلايا الجذعية البالغة 16. مميز، على غرار الخلايا الجذعية الوسيطة، طب الأسنان الخلايا الجذعية هي لب الخلايا الملتصقة مولد الرمع التي لها قدرة التمايز متعددة في اللحمة المتوسطة و / أو غير اللحمة المتوسطة الأنساب، سواء في التجارب المختبرية والحية. يتم تحديد 1-8،17،18 DPSCs من قبل من التعبير السلبي للمستضدات المكونة للدم (مثل CD45، CD34، CD14)، والتعبير الإيجابي للCD90، CD29، CD73، CD105، CD44 وSTRO 1-. 19،20 من السهل الحصول عليها مع احتمال الألم والمرض جعل الحد الأدنى DPSCs الإنسان باعتبارها valuمصدر من اللجان الدائمة قادرة بالمقارنة مع مصادر العادية، مثل خلايا نخاع العظام الجذعية الوسيطة 21. بشكل عام، تم عزلها من قبل أي من DPSCs طريقة ثمرة، أي هجرة الخلايا الجذعية من الأنسجة إإكسبلنتس اللب (DPSC-OG) 22-24، و / أو عن طريق الهضم الأنزيمي (DPSC-ED) 4،6،25. وقد أظهرت الدراسات السابقة أن طريقة العزل وظروف التربية يمكن أن تحدث السكان تحت الأنساب مختلفة أو في الممرات المختبر 26،27. في حالة الأسنان الدائمة (pDPSCs)، كشفت هوانغ آخرون أن الأنزيمية pDPSCs هضمها وارتفاع احتمال انتشار بالمقارنة مع DPSCs تجاوزت 26 وعلاوة على ذلك، في حالة الأسنان اللبنية (dDPSCs)، وقد تبين أن STRO-1 و CD34 وأعرب علامات اكثر في dDPSC-ED بالمقارنة مع dDPSC-OG. وبالإضافة إلى ذلك، عرض dDPSC-ED أعلى معدل تمعدن العظم في المتوسط ​​/ odonto تعريف 27 لذلك، ونظرا لإمكانية ممتازة من DPSCs في مجال البحثالطب egenerative، وسوف تكون هناك حاجة لمزيد من الدراسات لفهم أفضل لمختلف السكان المحتملة التي هي مستمدة من أساليب العزل المختلفة. هنا، كان محاولة لإدخال طريقة سهلة لاستخراج اللب، وذلك باستخدام خطوة واحدة القرص الماس الأسنان لتسهيل عملية استخراج اللب. وعلاوة على ذلك، بعد عزل الخلايا الجذعية البشرية المستمدة من اللب من خلال تطبيق أساليب ED أو OG، كما تم بحث خصائص وقدرات عامة التفريق بين مجموعتين.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج أو كثيرا. عدد </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> α-MEM </td><td> GIBCO </td><td> 11900-073 </td><td></td></tr><tr><td> النوع الأول كولاجيناز </td><td> سيغما الدريخ </td><td> C0130-100MG </td><td></td></tr><tr><td> Dispase </td><td> GIBCO </td><td> 17105-041 </td><td></td></tr><tr><td> البنسلين / الستربتوميسين </td><td> GIBCO </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td> الأمفوتريسين B </td><td> GIBCO </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td> الجنين المصل البقري محددة (FBS) </td><td> HyClone </td><td> SH30070.03 </td><td></td></tr><tr><td> L-حمض الاسكوربيك 2-الفوسفات </td><td> سيجما </td><td> A8960-5G </td><td></td></tr><tr><td> الجلوتامين L- </td><td> GIBCO </td><td> 25030-024 </td><td></td></tr><tr><td> ديكساميثازون </td><td> سيجما </td><td> D4902 </td><td></td></tr><tr><td> β-الجلسرين الملح الصوديوم هيدرات الفوسفات، BioUltra </td><td> سيجما </td><td> G9422-100G </td><td></td></tr><tr><td> أحادى فوسفات البوتاسيوم </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P5655 </td><td></td></tr><tr><td> تكون العظم الفحص كيت </td><td> ميليبور </td><td> PS01802031 </td><td></td></tr><tr><td> الماوس IgG2b-PE نمط إسوي السيطرة </td><td> BD pharmingen </td><td> 50808088029 </td><td></td></tr><tr><td> FITC الماوس IgG2b نمط إسوي السيطرة </td><td> BD pharmingen </td><td> 559532 </td><td></td></tr><tr><td> FITC الماوس IgG1 κ نمط إسوي </td><td> BD pharmingen </td><td> 11471471 </td><td></td></tr><tr><td> FITC / PE الماوس المضادة للCD34/CD45 الإنسان </td><td> BD pharmingen </td><td>341071 </td><td></td></tr><tr><td> PE مكافحة CD146 الإنسان </td><td> BD pharmingen </td><td> 550315 </td><td></td></tr><tr><td> وحيدة النسيلة المضادة للماوس الإنسان CD90/FITC </td><td> داكا </td><td> 00034418 </td><td></td></tr><tr><td> PE الماوس المضادة للCD73 الإنسان </td><td> BD pharmingen </td><td> 550257 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة ح CD105/Endoglin PE </td><td> BD pharmingen </td><td> FAB10971P </td><td></td></tr><tr><td> PE الماوس المضادة للCD11b/Mac1 الإنسان </td><td> BD pharmingen </td><td> 5553888 </td><td></td></tr><tr><td> CD44 PE الماوس المضادة الإنسان </td><td> BD pharmingen </td><td> 555479 </td><td></td></tr><tr><td> الفوسفات العازلة الحل (PBS) </td><td> GIBCO </td><td> 003000 </td><td></td></tr><tr><td> 70-ميكرومتر مصفاة الخلية </td><td> صقر </td><td> 352360 </td><td></td></tr><tr><td&gt; حقنة ميكرون تصفية 0،2 </td><td> Millex-GV </td><td> SLGV033RB </td><td></td></tr><tr><td> 25 قارورة سم الثقافة 2 </td><td> سيغما الدريخ </td><td> Z707481 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> EQUIPMENT </td></tr><tr><td> BD FACSCalibur </td><td> BD </td><td> 342975 </td><td></td></tr><tr><td> multiskan صفيحة ميكروسكوبية الطيف </td><td> الحرارية العلمية </td><td> 51119200 </td><td></td></tr><tr><td> Fleurcense مجهر </td><td> OLYMPUS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> تتدفق الإصدار 2.3.1 البرمجيات </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

isolation, characterization and comparative differentiation of human dental pulp stem cells derived from permanent teeth by using two different methods

<p class="jove_content"&gt; ضرس العقل النامية من السهل الوصول إليها مصدر للخلايا الجذعية خلال مرحلة البلوغ والتي يمكن الحصول عليها من خلال العلاجات الروتينية تقويم الأسنان. الإنسان الخلايا الجذعية المستمدة من اللب (hDPSCs) تمتلك القدرة العالية على الانتشار مع القدرة التمايز المتعدد النسب مقارنة المصدر العادي للخلايا جذعية للبالغين<sup&gt; 1-8</sup&gt;، وبالتالي، يمكن أن يكون hDPSCs مرشحين جيدين للزرع ذاتي في هندسة الأنسجة والطب التجديدي. وإلى جانب هذه الفوائد، وحيازة الخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) الميزات، مثل تأثير immunolodulatory، وجعل hDPSCs أكثر قيمة، حتى في حالة زرع طعم خيفي<sup&gt; 6،9،10</sup&gt;. ولذلك، فإن الخطوة الأولى لاستخدام هذا المصدر من الخلايا الجذعية هي لاختيار أفضل بروتوكول للعزل hDPSCs من الأنسجة اللب. من أجل تحقيق هذا الهدف، لا بد من دراسة تأثير ظروف مختلفة العزلة على السلوكيات الخلوية مختلفة، مثل علامات على سطح المشتركة وأيضا قدرتها التمايز.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; وهكذا، وهنا يمكننا أن نفصل الإنسان الأنسجة اللب من الأسنان أثرت الرحى الثالثة، وتستخدم بعد ذلك كل من البروتوكولات القائمة على أساس الأدب، لhDPSCs عزل،<sup&gt; 11-13</sup&gt;<em&gt; أي</em&gt; التفكك الأنزيمية من الأنسجة اللب (DPSC-ED)، أو ثمرة من إإكسبلنتس الأنسجة (DPSC-OG). في هذا الإطار، حاولنا تسهيل طرق العزل باستخدام القرص الأسنان الماس. ثم، تتميز هذه الخلايا اللحمية من حيث المرتبطة علامات (CD73، CD90، CD44 و CD105)، وعلامات المكونة للدم / البطانية (CD34، CD45 و CD11b)، علامة حول الأوعية، مثل CD146 وأيضا STRO 1-. بعد ذلك، تمت مقارنة هذين البروتوكولين على أساس التمايز في قوة odontoblasts من قبل كل من الكمية تفاعل البلمرة سلسلة (QPCR) والصبغ الأحمر تلوين الأحمر. واستخدمت QPCR لتقييم التعبير عن الجينات ذات الصلة تمعدن (الفوسفاتيز القلوية، ALP، مصفوفة خارج الخلية phosphoglycoprotein؛ MEPE وعاج sialophosphoprotein؛ DSPP).<sup&gt; 14</sup</p

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتظهر DPSCs التي تم الحصول عليها من التفكك الأنزيمية (DPSC-ED) هنا في يوم 10، 15،18 (الشكل 1). المستعمرات بدأت لتشكيل تقريبا على 3 إلى 5 أيام بعد العزلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتظهر DPSCs تجاوزت (DPSC-OG) في الشكل 2 في يوم 5، 10، 13 و 18. الخلايا الليفية مث?...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods at JoV

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

وصف طريقة العزلة وتوصيف الخلايا الجذعية البشرية الأسنان اللب (hDPSCs) باستخدام إما<strong&gt; التفكك الأنزيمية من عجائن (DPSC-ED)</strong&gt; أو<strong&gt; ثمرة مباشرة للخلايا الجذعية من الأنسجة إإكسبلنتس اللب (DPSC-OG). ثم تليها</strong&gt;<em&gt; في المختبر</em&gt; التمايز النسبية لكلا النوعين من hDPSCs في odontoblasts.

العزلة، وتوصيف المقارن التمييز بين الخلايا الجذعية البشرية الأسنان اللب المستمدة من الأسنان الدائمة باستخدام طريقتين مختلفتين

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

زراعة الخلايا المشتقة المريض وعزل CD133<sup&gt; +</sup&gt; خلايا الجذعية السرطانية المزعومين من الميلانوما

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

عزل وتوصيف وظيفي من الإنسان البطيني العضلية من العينات الجراحية الطازجة

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Isolation of Cancer Stem Cells From Human Prostate Cancer Samples

عزل الخلايا الجذعية للسرطان من العينات البشرية سرطان البروستاتا

The cancer stem cell (CSC) model has been considerably revisited over the last two decades. During this time CSCs have been identified and directly ...

Two Methods for Establishing Primary Human Endometrial Stromal Cells from Hysterectomy Specimens

طريقتين لإنشاء أولي خلايا وانسجة بطانة الرحم الإنسان من استئصال الرحم العينات

Many efforts have been devoted to establish in vitro cell culture systems. These systems are designed to model a vast number of in vivo processes. Cell ...

Enrichment for Chemoresistant Ovarian Cancer Stem Cells from Human Cell Lines

لتخصيب Chemoresistant سرطان المبيض الخلايا الجذعية من خطوط الخلايا البشرية

Cancer stem cells (CSCs) are defined as a subset of slow cycling and undifferentiated cells that divide asymmetrically to generate highly proliferative, ...

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

العزلة والخلوية Phenotyping من الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من نخاع الزلالية السائل والعظام من Minipigs

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

تحديد خصائص الخلايا المناعية في الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام التدفق الخلوي

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Oral Biofilm Formation on Different Materials for Dental Implants

تشكيل بيوفيلم الشفوي في المواد المختلفة لزراعة الأسنان

Dental implants and their prosthetic components are prone to bacterial colonization and biofilm formation. The use of materials that provides low ...

An Enzyme-free Method for Isolation and Expansion of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

طريقه خاليه من الانزيمات للعزل والتمدد للخلايا الجذعية الدهنية المستمدة من الدهون البشرية

Mesenchymal stem cells (MSCs) are a population of multipotent cells that can be isolated from various adult and fetal tissues, including adipose tissue. ...

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

Ex Vivo Expansion of Hematopoietic Stem Cells from Human Umbilical Cord Blood-derived CD34+ Cells Using Valproic Acid

السابقين فيفو توسيع نطاق من الخلايا الجذعية المكونة للدم من CD34 المشتقة من دم الحبل السري البشري+ الخلايا باستخدام حمض فالبرويك

Umbilical cord blood (UCB) units provide an alternative source of human hematopoietic stem cells (HSCs) for patients who require allogeneic bone marrow ...