Name: surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction
Uploaded: 2013-03-07T12:30:00
Duration: 18 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction at JoVE.com

De auteurs danken Pascal Paschenda en Mareike Schulz voor hun technische bijstand.

<ol>
	<li>Puhl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+viscosity+histidine-tryptophan-ketoglutarate+graft+flush+improves+subsequent+extended+cold+storage+in+University+of+Wisconsin+solution+in+an+extracorporeal+rat+liver+perfusion+and+rat+liver+transplantation+model.">Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model.</a> Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).</li><li>Yagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Preservation+and+Microcirculation+with+POLYSOL+After+Partial+Liver+Transplantation+in+Rats.">Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats.</a> J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).</li><li>Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+a+physiological+liver+transplant+model+in+rats.+Induction+of+specific+graft+tolerance+in+a+fully+allogeneic+strain+combination.">Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination.</a> Transplantation. 33, 566-568 (1982).</li><li>Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+hepatic+arterial+blood+flow+in+rats+with+liver+transplants.+Examination+of+donor+liver-derived+serum+class+I+MHC+antigen+in+rats+with+liver+transplants+with+or+without+hepatic+arterial+reconstruction.">Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction.</a> Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).</li><li>Chaland, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+artery+anastomoses.+Hemodynamics+and+response+to+hemorrhage+in+conscious+rats.">Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats.</a> Transplantation. 49, 675-678 (1990).</li><li>Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+consequence+of+rat+orthotopic+liver+transplantation+with+and+without+hepatic+arterial+reconstruction:+a+clinical,+pathological,+and+hemodynamic+study.">Long-term consequence of rat orthotopic liver transplantation with and without hepatic arterial reconstruction: a clinical, pathological, and hemodynamic study.</a> Hepatology. 26, 198-205 (1997).</li><li>Zhong, Z., Theruvath, T. P., Currin, R. T., Waldmeier, P. C., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIM811,+a+mitochondrial+permeability+transition+inhibitor,+prevents+mitochondrial+depolarization+in+small-for-size+rat+liver+grafts.">NIM811, a mitochondrial permeability transition inhibitor, prevents mitochondrial depolarization in small-for-size rat liver grafts.</a> Am. J. Transplant. 7, 1103-1111 (2007).</li><li>Spiegel, H. U., Palmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+techniques+of+orthotopic+rat+liver+transplantation.">Surgical techniques of orthotopic rat liver transplantation.</a> J. Invest. Surg. 11, 83-96 (1998).</li><li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li><li>Lee, S., Charters, A. C., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+technic+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">Simplified technic for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Am. J. Surg. 130, 38-40 (1975).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li><li>Howden, B., Jablonski, P., Grossman, H., Marshall, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation.">The importance of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Transplantation. 47, 428-431 (1989).</li><li>Gao, W., Lemasters, J. J., Thurman, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+method+for+hepatic+rearterialization+in+rat+orthotopic+liver+transplantation.+Reduction+of+liver+injury+and+improvement+of+surgical+outcome+by+arterialization.">Development of a new method for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation. Reduction of liver injury and improvement of surgical outcome by arterialization.</a> Transplantation. 56, 19-24 (1993).</li><li>Zhao, D., Zimmermann, A., Wheatley, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometry+of+the+liver+after+liver+transplantation+in+the+rat:+significance+of+an+intact+arterial+supply.">Morphometry of the liver after liver transplantation in the rat: significance of an intact arterial supply.</a> Hepatology. 17, 310-317 (1993).</li><li>Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifty-percent+partial+liver+transplantation+in+the+rat.">Fifty-percent partial liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 292-293 (1996).</li><li>Lehmann, T. G., Bunzendahl, H., Langrehr, J. M., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+reconstruction+in+rat+liver+transplantation--development+of+a+new+tubing+technique+of+the+common+hepatic+artery.">Arterial reconstruction in rat liver transplantation--development of a new tubing technique of the common hepatic artery.</a> Transpl. Int. 18, 56-64 (2005).</li><li>Reck, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+arterialization+on+hepatic+oxygen+supply,+tissue+energy+phosphates,+and+outcome+after+liver+transplantation+in+the+rat.">Impact of arterialization on hepatic oxygen supply, tissue energy phosphates, and outcome after liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 582-587 (1996).</li><li>Hasuike, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+with+arterial+reconstruction+in+rats.">A simple method for orthotopic liver transplantation with arterial reconstruction in rats.</a> Transplantation. 45, 830-832 (1988).</li><li>Steffen, R., Ferguson, D. M., Krom, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+orthotopic+rat+liver+transplantation+with+arterial+cuff+anastomosis+to+the+recipient+common+hepatic+artery.">A new method for orthotopic rat liver transplantation with arterial cuff anastomosis to the recipient common hepatic artery.</a> Transplantation. 48, 166-168 (1989).</li><li>Knoop, M., Bachmann, S., Keck, H., Steffen, R., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+cuff+rearterialization+in+600+orthotopic+liver+grafts+in+the+rat.">Experience with cuff rearterialization in 600 orthotopic liver grafts in the rat.</a> Am. J. Surg. 167, 360-363 (1994).</li><li>Hickman, R., Engelbrecht, G. H., Duminy, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+liver+transplantation+in+the+rat.">A technique for liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 48, 1080 (1989).</li><li>Liu, T., Freise, C. E., Ferrell, L., Ascher, N. L., Roberts, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+vascular+"sleeve"+anastomosis+for+rearterialization+in+orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">A modified vascular "sleeve" anastomosis for rearterialization in orthotopic liver transplantation in rats.</a> Transplantation. 54, 179-180 (1992).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+sleeve+anastomosis+for+reconstruction+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation.">Modified sleeve anastomosis for reconstruction of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Microsurgery. 22, 62-68 (2002).</li><li>Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+partial+hepatectomies.">Rodent models of partial hepatectomies.</a> Liver Int. 28, 3-11 (2008).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1992).</li></ol>

We hebben geen conflicterende belangen te onthullen. De ratten worden ondergebracht onder specifieke-pathogeen-vrije omstandigheden volgens de richtlijnen van de Federatie voor Proefdierkunde Associations (FELASA). Alle experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de Duitse federale wet betreffende de bescherming van dieren en &quot;Gids voor de zorg en het gebruik van proefdieren&quot; (National Institutes of Health publicatie nr. 86 tot 23, herzien 1985).

Het eerste model van rat OLT werd door Lee et al.. 9 in 1973, waarbij alle vaten zoals de leverslagader werden gereconstrueerd door een handgenaaide methode en de extracorporale portosystemische shunt werd gebruikt. Dit model was technisch ingewikkeld en moeilijk uit te voeren. Het volgende model was een zonder lever arteriële reconstructie en de extracorporale shunt, ontwikkeld door dezelfde auteurs 10 in 1975. Vervolgens in 1979, Kamada et al.. Introduceerde de manchet anastomose techniek voor het model zonder lever rearterialization 11. Met deze wijzigingen, OLT in ratten een vereenvoudiging verkorte anhepatische tijd ontvanger operaties en is op grote schaal gebruikt als een aanvaard experimenteel model. Toch is er sprake van aanzienlijke controverse sinds die tijd over de betekenis van de lever arterialization in de rat OLT 8, omdat de arterialization was een veeleisende taak, maar did geen invloed op de overleving na transplantatie. Talrijke studies op de hepatische arterialization met diverse reconstructietechnieken gemeld 8, zoals een aorta segment naar aorta anastomose 3,9,17, een manchet anastomose techniek 18,19,20, een telescopische techniek 5, een stent techniek 13, 16 en een huls anastomose techniek 12,21-23. Hoewel de techniek voor rat OLT nog niet gestandaardiseerd heden is de arterialized model steeds meer voorkeur in termen van fysiologische superioriteit 8,12,13,14. Onder de hierboven genoemde technieken, werd een stent techniek die was eenvoudig en snel uit te voeren die door Lehmann et al.. 16 in 2005. De studie toonde goede resultaten: geen occlusie werd waargenomen in de gereconstrueerde leverslagader in 8 uur, 24 uur en 6 maanden na reperfusie. Daarom heeft deze techniek op hepatische arterialization. We Performa de hand genaaid anastomose voor de wederopbouw van de SHVC en IHVC. Deze methode de anastomose plaats met optimale fysiologische omstandigheden, waardoor de verminderde incidentie van trombose 8 en het beste microchirurgie simulatie en training voor chirurgen. Bovendien kan de anastomose mogelijk zelfs korte stompen vaartuig. Wat de anastomose van IHVC is deze methode geen lange IHVC de graft kant in vergelijking met de manchet anastomose techniek. Wanneer derhalve de donor nierader wordt ontleed om het transplantaat IHVC lang te maken is deze werkwijze voor transplantatie van een kleine graft met een lange IHVC, zoals een 30% graft die bestaat uit rechter laterale en caudate lobben met een korte intrahepatic noodzakelijk vena cava zonder SHVC 2. Met betrekking tot de technieken van leverresectie bij ratten, met verschillende methoden op heden zijn gemeld, de twee belangrijkste technieken zijn de klassieke massa ligatuur technieken het vat gerichte techniek 24. We voeren de klassieke techniek ligatuur 50% leverresectie 15, maar onder een chirurgische microscoop om de procedure fijner te maken en om beschadiging van de resterende lobben en structuren te vermijden. We beschreven de representatieve resultaten van de ontvanger ratten in ons model, de ratten overleefde tijdens de 7-dagen durende observatieperiode zonder duidelijke complicaties. Het model kan worden aangepast voor verschillende doeleinden van experimenten door te kiezen voor de verschillende instellingen, zoals langdurig koude opslag, langdurige warme ischemie die donatie na hartdood omvat, en het gebruik van kleinere lever transplantaties of enten van experimentele modellen van leverschade of ziekten. In onze ervaring, zijn er drie belangrijke factoren in de procedures die de overleving na transplantatie, de meest betrouwbare parameter voor de resultaten van de rat OLT kan van invloed zijn: de hoeveelheid bloedverlies, de bedrijfstijd, especiaal klemmen tijd van de poortader en IHVC, en de toereikendheid van de wederopbouw van elk vaartuig, wat kan leiden tot stenose, trombose, of bloeden. In een stage van dit model, kan het grootste deel van de mislukkingen waarschijnlijk gerelateerd aan deze factoren. In deze video artikel zullen we stap-voor-stap instructies voor de chirurgische procedures voor onze rat model van partiële OLT met een verminderde arteriële reconstructie. Terwijl een rat model van OLT is ingewikkeld en vereist geavanceerde microchirurgische vaardigheden, dit artikel biedt veel praktische informatie, die moet dienen als een goede gids voor de opleiding en het leren van dit model. Leren dit model efficiënt is vooral van belang voor het inkorten van de leerperiode, vermindering van het aantal dieren en de kosten die nodig zijn voor de praktijk, en later reproduceren betrouwbare resultaten bij experimenten. Dit is in lijn met de 3 V&#39;s concept (vervanging, vermindering en verfijning) van dierproeven, die door Russell en Burch gepostuleerd in1959 25.

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> Operatiemicroscoop </td><td> Leica </td><td> M651 </td><td></td></tr><tr><td> Lichtbron </td><td> Schott </td><td> KL1500LCD </td><td></td></tr><tr><td> Wattenstaafjes </td><td> NOBA Verbandmittel </td><td> 974202 </td><td></td></tr><tr><td> Gaaskompressen (5x5 cm) </td><td> Fuhrmann </td><td> 10002 </td><td></td></tr><tr><td> povidon-joodoplossing </td><td> Mundipharma </td><td> 6108022.00.01 </td><td></td></tr><tr><td> Op olie gebaseerde klei </td><td> Debika bedrijf </td><td> 090148 </td><td></td></tr><tr><td> TachoSil </td><td> Takeda Pharmaceuticals International GmbH </td><td> EU/1/04/277/001-004</td><td> Toegepast op gereseceerde leveroppervlak </td></tr><tr><td> Scalpel nr. 11 </td><td> Pfm medische </td><td> 200130011 </td><td> Bereiding van manchet en stents </td></tr><tr><td> 14-gauge katheter </td><td> B. Braun </td><td> 4268210S </td><td> Manchet voor PV </td></tr><tr><td> 18-gauge katheter </td><td> B. Braun </td><td> 4268130S </td><td> Perfusie via PV </td></tr><tr><td> 24-gauge katheter </td><td> B. Braun </td><td> 4269071S </td><td> Stent voor BD en HA </td></tr><tr><td> 4-0 zijden hechtdraad </td><td> Resorba </td><td> H3F </td><td> Leverresectie </td></tr><tr><td> 6-0 zijden hechtdraad </td><td> Resorba </td><td> H1F </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 Prolene (polypropyleen) hechtdraad </td><td> Ethicon </td><td> 8701H </td><td> SHVC en IHVC </td></tr><tr><td> 4-0 Vicryl hechtmateriaal </td><td> Ethicon </td><td> V304H </td><td> Abdominale sluiting </td></tr><tr><td> 5-ml spuit </td><td> Terumo </td><td> SS + T05ES1 </td><td> Back kussen </td></tr><tr><td> Verwarmingskussen </td><td> Thermo </td><td> 190 x 260 mm </td><td></td></tr><tr><td> Magnetische fixator retractie systeem </td><td> Fine Science Tools Inc </td><td> 18.200-01 18.200-02 18.200-03 18.200-12 </td><td></td></tr><tr><td> Koud waterbad </td><td> Huber </td><td> 740.000X </td><td> Graft behoud </td></tr><tr><td> Bipolaire forceps </td><td> Bijdragende </td><td> MBC-200 </td><td></td></tr><tr><td> Mosquito tang </td><td> BONIMED </td><td> 451-476-03 </td><td> Gebruikt twee paar </td></tr><tr><td> Adson micro pincet </td><td> Dimeda </td><td> 10.176.12 </td><td></td></tr><tr><td> Gebogen micro tang </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Rechte micro pincet </td><td> Bonimed </td><td> 451-476-03 </td><td></td></tr><tr><td> Gebogen micro schaar </td><td> Medicon </td><td> 05.15.83 </td><td></td></tr><tr><td> Rechte micro schaar </td><td> AESCULAP </td><td> FD12 </td><td> Fijn incisie </td></tr><tr><td> Schaar </td><td> AESCULAP </td><td> BC211W </td><td></td></tr><tr><td> Micro naaldhouder </td><td> AESCULAP </td><td> FD241R </td><td> Reconstructie </td></tr><tr><td> Burgemeester-Hegar Naaldhouder </td><td> Mizuho Ikakogyo </td><td> 06-798-00 </td><td> Abdominale sluiting </td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog klem (recht) </td><td> ULRICH </td><td> CV3054 </td><td></td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog klem (gebogen) </td><td> Codman </td> &lt;td&gt; 37-1.062 </td><td></td></tr><tr><td> Satinsky klem </td><td> Mizuhoika </td><td> 09-230-24 </td><td></td></tr><tr><td> Perifere vasculaire klem </td><td> Teleflex Medical </td><td> 353494 </td><td> Ontvanger SHVC </td></tr><tr><td> Micro schip klem (wegwerp) </td><td> AROSurgical Instruments Corporation </td><td> TKM-1-60 g </td><td> PV, graft IHVC, en de ontvanger HA </td></tr><tr><td> Micro schip klem (metaal) </td><td> Fine Science Tools Inc </td><td> 18.052-01 </td><td> Ontvanger IHVC </td></tr><tr><td> Ringerlactaat </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 6150917.00.00 </td><td></td></tr><tr><td> Fysiologische zoutoplossing </td><td> DeltaSelect </td><td> 1299.99.99 </td><td></td></tr><tr><td> HTK-oplossing </td><td> Dr Franz Köhler Chemie GmbH </td><td> 31268.00.00 </td><td> Preservatievloeistof </td></tr><tr><td> Heparine-Natrium </td><td> Ratiopharm </td><td> 5394.02.00 </td><td> 500 IE voor graft perfusie </td></tr><tr><td> 8,4% natriumbicarbonaat </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 4399.97.99 </td><td> 0,5 ml na reperfusie </td></tr><tr><td> 5% glucose-oplossing </td><td> B. Braun </td><td> 6714567.06.00 </td><td> 1,0 ml na reperfusie </td></tr><tr><td> Cefuroxim natrium </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 38985.01.00 </td><td> Antibiotica, 16 mg / kg </td></tr><tr><td> Buprenorfine </td><td> Essex Pharma </td><td> 997.00.00 </td><td> Pijnstiller, 0,1 mg / kg </td></tr><tr><td> Intensive Care Unit Cage </td><td> Brinsea Products Ltd </td><td> Vetario S10 </td><td> Postoperatieve zorg </td></tr></tbody></table>

surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction

Orthotope levertransplantatie (OLT) bij ratten met behulp van een gehele of gedeeltelijke graft is een onmisbare experimenteel model voor transplantatie onderzoek, zoals onderzoek bij graft behoud en ischemie-reperfusie schade 1,2, immunologische reacties 3,4, hemodynamiek 5,6, en kleine-for-size-syndroom 7. De rat OLT is een van de moeilijkste diermodellen in experimentele chirurgie en vraagt ​​om geavanceerde microchirurgische vaardigheden die een lange tijd om te leren nemen. Derhalve is het gebruik van dit model beperkt. Aangezien de betrouwbaarheid en reproduceerbaarheid zijn belangrijke componenten van de experimenten waarin dergelijke complexe diermodellen worden gebruikt, is het essentieel voor chirurgen die betrokken zijn bij rat OLT worden getraind in goed gestandaardiseerde en verfijnde procedures voor dit model. Terwijl verschillende technieken en modificaties van OLT bij ratten zijn gemeld 8 sinds de eerste model was described. by Lee et al.. 9 in 1973, de eliminatie van de hepatische arteriële reconstructie 10 en de invoering van de manchet anastomose techniek Kamada c.s.. waren 11 een belangrijke vooruitgang in dit model omdat de reconstructie procedures vereenvoudigd in hoge mate . In het model van Kamada c.s.. Werd de lever rearterialization ook geëlimineerd. Omdat ratten kon overleven zonder hepatische arteriële flow na levertransplantatie, was er veel controverse over de waarde van de lever arterialization. Echter, de fysiologische superioriteit van de arterialized model in toenemende mate onderkend, met name in termen van het behoud van de galwegen systeem 8,12 en de lever integriteit 8,13,14. In dit artikel presenteren we gedetailleerde chirurgische procedures voor een rat model van OLT met een lever-arteriële reconstructie met behulp van een 50% gedeeltelijke transplantaat na ex vivo lever resectie. De reconstructie procedures voor elk vaartuig en de galwegen worden uitgevoerd door de volgende methoden: een 7-0 polypropyleen continue hechtdraad voor de supra-en infrahepatic vena cava, een manchet techniek voor de poortader, en een stent techniek voor de leverslagader en de galwegen.

Alle ontvangende ratten (n = 20) overleefden zonder duidelijke complicaties tot geplande euthanasie voor bloedbemonstering op 1, 3, 24 en 168 uur (7 dagen) na portal reperfusie (n = 5 op elk tijdstip). De bloedmonsters werden uit de IHVC door een directe lek met een 27-gauge naald. Na het centrifugeren bij 5340 g gedurende 10 min werden de serummonsters verkregen en geanalyseerd op alanine aminotransferase (ALT), die de mate van hepatocellulaire schade na transplantatie weerspiegelen. Het tijdsverloop van veranderingen in serum ALT niveaus is weergegeven in figuur 16. De ALT-niveaus een piek bij 24 uur (gemiddeld ± standaarddeviatie: 212,6 ± 67,9 IE / L) en vervolgens binnen de normale grenzen af ​​op 168 uur (33,6 ± 6,8 IE / L). <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig1.jpg" /> Figuur 1. Een manchet voor de poortader (PV) van een 14-gauge katheter en stents voor de leverslagader (HA) en galwegen (BD) van 24-gauge catheters. <img alt="Figuur 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2.jpg" /> Figuur 2. Schema van de verwijdering van de lever van de donor ratten BD, galgang,. HA, leverslagader, IHVC, infrahepatic vena cava, PV, poortader, SHVC, suprahepatic vena cava. <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig3.jpg" /> Figuur 3. Donor werking. een. de rat wordt op een verwarmingskussen met een magnetische fixator veersysteem. Het abdomen wordt geopend door incisie met bilaterale extensions. B. Inbrengen van de stent in de galwegen. C. Perfusie van de lever via de poortader. Afkortingen verklarened in figuur 2. <img alt="Figuur 4" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig4.jpg" /> Figuur 4. Bevestiging van een manchet om de poortader. a, b. DeBakey Bulldog De klem die de portale veneuze stam grijpt wordt over de metalen kom. De beker is gemonteerd in de plastic doos gevuld met gemalen ijs. C. De poortader wordt gebracht door middel van de manchet. D. De wand van de vena porta is eversie over de manchet met de stomp van de milt ader buiten de manchet op de 7 uur positie en een uitbreiding van de manchet op de 12 uur positie. e. De poortader is beveiligd met een omtrek 6-0 zijden draad op de manchet. De zwarte pijlen geven de stomp van de milt ader. <img alt="Figuur 5" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig5.jpg" /> Figuur 5. Ex vivoinbrengen van een stent in de leverslagader. een. de lever wordt door klemmen beide randen van het membraan en de leverslagader wordt getrokken rechtstreeks houdt de draad geligeerd de slagader. b. de voorwand van de kleine incisie in de leverslagader wordt gehouden met een rechte micro forceps . c, d. de stent wordt ingebracht in de leverslagader en vastgezet met een 6-0 zijden draad. <img alt="Figuur 6" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6.jpg" /> Figuur 6. Het schema van ex vivo 50% leverresectie. Lobben in grijze kleur worden verwijderd. ACL, anterior Spiegelse kwab, PCL-, achterste Spiegelse kwab, LLL, linker laterale kwab, LML, linker gedeelte van de mediaan kwab, RML, rechter gedeelte van het mediane lob, SRL, superieure rechter laterale kwab, IRL, inferieure rechter laterale kwab. Figuur 7. Ex vivo 50% leverresectie. een. Ligatie van de pedikel van de achterste caudate kwab. b. Ligatie van de pedikel van het linker deel van de mediaan kwab. c. de lever voor 50% resectie. d. de lever na 50% resectie. <img alt="Figuur 8" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig8.jpg" /> Figuur 8. Ex vivo plastie van de suprahepatic vena cava. een. de lever wordt door klemmen beide randen van het membraan met de mug forceps. b. Blijf hechtingen met 7-0 polypropyleen zijn bevestigd aan beide hoeken. <img alt="Figuur 9" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig9highres.jpg" src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig9.jpg&quot; /&gt; Figuur 9. Schema van het transplantaat implantatie in de ontvanger rat. De reconstructie procedures worden uitgevoerd voor de supra-en infrahepatic vena cava (SHVC en IHVC) met een 7-0 doorlopende hechting, de poortader (PV) door een manchet techniek en de lever slagader (HA) en galwegen (BD) met een stent techniek. <img alt="Figuur 10" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig10.jpg" /> Figuur 10. Ontvanger operatie tot het verwijderen van de natieve lever. een. Het abdomen wordt geopend door een incisie. b. het recht bijnier ader geligeerd. c. de natieve lever uitgesneden. Afkortingen worden toegelicht in figuur 2. <img alt="Figuur 11" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig11.jpg" /> Figuur 11. Anastomose van de suprahepatic vena cava. a, b. de perifere vasculaire klem voor de suprahepatic vena cava is bevestigd in een klomp klei oliebasis. Het verblijf hechtingen op beide hoeken worden onderhouden met zachte tractie superiolaterally om de anastomose te verbreden. C. Continue intraluminale hechtdraad van de achterste rij aan de gang. D. Continue hechtdraad van de voorste rij in de vooruitgang. <img alt="Figuur 12" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig12.jpg" /> Figuur 12. Reconstructie van de poortader. a, b. De mug tang vastzetten van de poortader wordt vastgesteld in de op olie gebaseerde klei en trok in de richting van de lever navel. cfr. Plaatsen van de manchet in de poortader. <img alt="Figuur 13" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig13.jpg" /> Figuur 13. Reconstructie van de leverslagader. a, b. </stron<html> g&gt; inbrengen van een stent in de ontvanger gemeenschappelijke leverslagader (CHA) bij de vertakking van de juiste leverslagader (PHA) en gastroduodenale slagader (GDA). <img alt="Figuur 14" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig14.jpg" /> Figuur 14. Anastomose van de infrahepatic vena cava. een. Het verblijf hechtingen op beide hoeken. b. Continue hechtdraad van de achterste rij. c. Continue hechtdraad van de voorste rij. d. Reperfusie van de infrahepatic vena cava. Afkortingen worden toegelicht in figuur 2. <img alt="Figuur 15" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig15.jpg" /> Figuur 15. Alle reconstructie procedures zijn voltooid. Afkortingen worden toegelicht in figuur 2. <img alt="&lt;/ Html">&quot;Figuur 16&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg&quot; /&gt; Figuur 16 Postoperatieve tijdsverloop van veranderingen in de alanine aminotransferase (ALT)-spiegels (n = 20, n = 5 op elk tijdstip).. De gegevens worden uitgedrukt als gemiddelden met foutstaven die standaard afwijkingen geven. De ALT-niveaus een piek bij 24 uur (212,6 ± 67,9 IE / L) en vervolgens binnen de normale grenzen af ​​op 168 uur (33,6 ± 6,8 IE / L).

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction at JoVE.com

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotope levertransplantatie bij ratten is een onmisbare experimenteel model voor biomedisch onderzoek. Hier presenteren we onze chirurgische procedures voor orthotope rat levertransplantatie met een lever-arteriële reconstructie met behulp van een 50% gedeeltelijke graft.

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotope Aorta Transplantatie: Een Rat Model voor de ontwikkeling van chronische vasculopathie Study

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

Genereren van een gehumaniseerd muis lever met behulp van menselijke lever stamcellen

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Wijze van Direct Segmentale Intra-lever Delivery Met behulp van een Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Orthotopic rat nier transplantatie: een nieuwe en vereenvoudigde chirurgische aanpak

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Generatie van een rat model van acuut leverfalen door het combineren van 70% partiële Hepatectomie en Acetaminophen

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Verminderde complicaties na arteriële heraansluiting in een ratmodel van orthotopische levertransplantatie

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...