Name: surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction
Uploaded: 2013-03-07T12:30:00
Duration: 18 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction at JoVE.com

Gli autori ringraziano Pascal Paschenda e Mareike Schulz per la loro assistenza tecnica.

<ol>
	<li>Puhl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+viscosity+histidine-tryptophan-ketoglutarate+graft+flush+improves+subsequent+extended+cold+storage+in+University+of+Wisconsin+solution+in+an+extracorporeal+rat+liver+perfusion+and+rat+liver+transplantation+model.">Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model.</a> Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).</li><li>Yagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Preservation+and+Microcirculation+with+POLYSOL+After+Partial+Liver+Transplantation+in+Rats.">Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats.</a> J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).</li><li>Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+a+physiological+liver+transplant+model+in+rats.+Induction+of+specific+graft+tolerance+in+a+fully+allogeneic+strain+combination.">Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination.</a> Transplantation. 33, 566-568 (1982).</li><li>Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+hepatic+arterial+blood+flow+in+rats+with+liver+transplants.+Examination+of+donor+liver-derived+serum+class+I+MHC+antigen+in+rats+with+liver+transplants+with+or+without+hepatic+arterial+reconstruction.">Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction.</a> Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).</li><li>Chaland, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+artery+anastomoses.+Hemodynamics+and+response+to+hemorrhage+in+conscious+rats.">Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats.</a> Transplantation. 49, 675-678 (1990).</li><li>Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+consequence+of+rat+orthotopic+liver+transplantation+with+and+without+hepatic+arterial+reconstruction:+a+clinical,+pathological,+and+hemodynamic+study.">Long-term consequence of rat orthotopic liver transplantation with and without hepatic arterial reconstruction: a clinical, pathological, and hemodynamic study.</a> Hepatology. 26, 198-205 (1997).</li><li>Zhong, Z., Theruvath, T. P., Currin, R. T., Waldmeier, P. C., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIM811,+a+mitochondrial+permeability+transition+inhibitor,+prevents+mitochondrial+depolarization+in+small-for-size+rat+liver+grafts.">NIM811, a mitochondrial permeability transition inhibitor, prevents mitochondrial depolarization in small-for-size rat liver grafts.</a> Am. J. Transplant. 7, 1103-1111 (2007).</li><li>Spiegel, H. U., Palmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+techniques+of+orthotopic+rat+liver+transplantation.">Surgical techniques of orthotopic rat liver transplantation.</a> J. Invest. Surg. 11, 83-96 (1998).</li><li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li><li>Lee, S., Charters, A. C., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+technic+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">Simplified technic for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Am. J. Surg. 130, 38-40 (1975).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li><li>Howden, B., Jablonski, P., Grossman, H., Marshall, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation.">The importance of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Transplantation. 47, 428-431 (1989).</li><li>Gao, W., Lemasters, J. J., Thurman, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+method+for+hepatic+rearterialization+in+rat+orthotopic+liver+transplantation.+Reduction+of+liver+injury+and+improvement+of+surgical+outcome+by+arterialization.">Development of a new method for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation. Reduction of liver injury and improvement of surgical outcome by arterialization.</a> Transplantation. 56, 19-24 (1993).</li><li>Zhao, D., Zimmermann, A., Wheatley, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometry+of+the+liver+after+liver+transplantation+in+the+rat:+significance+of+an+intact+arterial+supply.">Morphometry of the liver after liver transplantation in the rat: significance of an intact arterial supply.</a> Hepatology. 17, 310-317 (1993).</li><li>Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifty-percent+partial+liver+transplantation+in+the+rat.">Fifty-percent partial liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 292-293 (1996).</li><li>Lehmann, T. G., Bunzendahl, H., Langrehr, J. M., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+reconstruction+in+rat+liver+transplantation--development+of+a+new+tubing+technique+of+the+common+hepatic+artery.">Arterial reconstruction in rat liver transplantation--development of a new tubing technique of the common hepatic artery.</a> Transpl. Int. 18, 56-64 (2005).</li><li>Reck, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+arterialization+on+hepatic+oxygen+supply,+tissue+energy+phosphates,+and+outcome+after+liver+transplantation+in+the+rat.">Impact of arterialization on hepatic oxygen supply, tissue energy phosphates, and outcome after liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 582-587 (1996).</li><li>Hasuike, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+with+arterial+reconstruction+in+rats.">A simple method for orthotopic liver transplantation with arterial reconstruction in rats.</a> Transplantation. 45, 830-832 (1988).</li><li>Steffen, R., Ferguson, D. M., Krom, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+orthotopic+rat+liver+transplantation+with+arterial+cuff+anastomosis+to+the+recipient+common+hepatic+artery.">A new method for orthotopic rat liver transplantation with arterial cuff anastomosis to the recipient common hepatic artery.</a> Transplantation. 48, 166-168 (1989).</li><li>Knoop, M., Bachmann, S., Keck, H., Steffen, R., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+cuff+rearterialization+in+600+orthotopic+liver+grafts+in+the+rat.">Experience with cuff rearterialization in 600 orthotopic liver grafts in the rat.</a> Am. J. Surg. 167, 360-363 (1994).</li><li>Hickman, R., Engelbrecht, G. H., Duminy, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+liver+transplantation+in+the+rat.">A technique for liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 48, 1080 (1989).</li><li>Liu, T., Freise, C. E., Ferrell, L., Ascher, N. L., Roberts, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+vascular+"sleeve"+anastomosis+for+rearterialization+in+orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">A modified vascular "sleeve" anastomosis for rearterialization in orthotopic liver transplantation in rats.</a> Transplantation. 54, 179-180 (1992).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+sleeve+anastomosis+for+reconstruction+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation.">Modified sleeve anastomosis for reconstruction of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Microsurgery. 22, 62-68 (2002).</li><li>Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+partial+hepatectomies.">Rodent models of partial hepatectomies.</a> Liver Int. 28, 3-11 (2008).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1992).</li></ol>

Non ci sono conflitti di interesse da dichiarare. I ratti sono alloggiati sotto specifica-esenti da organismi patogeni condizioni secondo le linee guida della Federazione Associazioni di Laboratorio Scienza animali (FELASA). Tutti gli esperimenti sono stati condotti in conformità con la legge federale tedesca in materia di protezione degli animali e della &quot;Guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio&quot; (National Institutes of Health pubblicazione n ° 86-23, riveduta 1985).

Il primo modello di OLT ratto è stato riportato da Lee et al. Nel 1973 9, in cui tutte le navi comprese dell&#39;arteria epatica sono stati ricostruiti da un cucita a mano e il metodo shunt porto extracorporeo è stato utilizzato. Questo modello era tecnicamente complicato e difficile da eseguire. Il modello successivo è stato uno senza ricostruzione arteriosa epatica e lo shunt extracorporea, sviluppato dagli autori stessi 10 nel 1975. Successivamente, nel 1979, Kamada et al. Ha introdotto la tecnica di anastomosi bracciale per il modello senza rearterialization epatica 11. Con queste modifiche, OLT nei ratti è stato semplificato con un tempo anepatica abbreviato in operazioni destinatario ed è stato ampiamente utilizzato come modello sperimentale accettato. Tuttavia, non vi è stata da allora notevoli controversie sul significato di arterialization epatica nel ratto OLT 8 perché il arterialization è stato un compito impegnativo, ma did non influenzano la sopravvivenza dopo il trapianto. Numerosi studi su arterialization epatica utilizzando varie tecniche di ricostruzione sono stati riportati 8, ad esempio un segmento aortico-to-aorta anastomosi 3,9,17, una tecnica di anastomosi bracciale 18,19,20, una tecnica telescopica 5, una tecnica stent 13, 16, e una tecnica di anastomosi manicotto 12,21-23. Mentre la tecnica di OLT ratto non è ancora standardizzata oggi, il modello arterializzato è stata sempre favorita in termini di superiorità fisiologica 8,12,13,14. Tra le tecniche sopra menzionate, una tecnica stent che era semplice e veloce per eseguire stata riportata da Lehmann et al. 16 del 2005. Lo studio ha mostrato ottimi risultati: no rate occlusione è stata osservata in arteria epatica ricostruito a 8 ore, 24 ore, e 6 mesi dopo la riperfusione. Abbiamo quindi adottato questa tecnica per arterialization epatica. Abbiamo Performa cucito a mano anastomosi per la ricostruzione del SHVC e IHVC. Questo metodo fornisce il sito anastomosi con una condizione ottimale fisiologica, che porta alla ridotta incidenza di trombosi 8, ed è la migliore simulazione microchirurgia e formazione per i chirurghi. Inoltre, l&#39;anastomosi può essere possibile anche con ceppi vaso brevi. Concernente l&#39;anastomosi di IHVC, questo metodo non richiede una lunga IHVC sul lato dell&#39;innesto rispetto alla tecnica anastomosi bracciale. Pertanto, quando la vena renale donatore è sezionato per rendere il IHVC innesto lungo, questo metodo è applicabile al trapianto di un piccolo innesto che necessita di un IHVC lungo, come un innesto 30% che consiste di lobi laterali destra e caudato con intraepatico breve vena cava senza SHVC 2. Per quanto riguarda le tecniche di resezione del fegato nei ratti, fino ad oggi diversi metodi sono stati segnalati, le due tecniche principali sono la classica tecnica della legatura di massae la nave orientato tecnica 24. Abbiamo eseguire la tecnica classica legatura per resezione epatica 50% 15, ma sotto un microscopio chirurgico per rendere la procedura più fine, e per evitare danni ai lobi rimanenti e strutture. Abbiamo descritto i risultati rappresentativi dei ratti destinatario nel nostro modello, i topi sono sopravvissuti durante il periodo di 7 giorni di osservazione senza complicazioni apparenti. Il modello può essere modificato per scopi diversi esperimenti scegliendo le impostazioni diverse, come prolungato stoccaggio a freddo, prolungata ischemia calda che comprende donazione dopo morte cardiaca, e l&#39;utilizzo di fegati piccole o innesti di modelli sperimentali di danno al fegato o malattie. Nella nostra esperienza, ci sono tre fattori chiave delle procedure che possono influenzare la sopravvivenza dopo il trapianto, il parametro più affidabile per i risultati di OLT ratto: la quantità di perdita di sangue, il tempo di funzionamento, gli eappositamente bloccaggio tempo della vena porta e IHVC, e l&#39;adeguatezza della ricostruzione di una nave, che potrebbe causare una stenosi, trombosi, o sanguinamento. In un periodo di formazione di questo modello, la maggior parte dei fallimenti potrebbe probabilmente essere correlato a tali fattori. In questo articolo video, vi presentiamo passo-passo le istruzioni per le procedure chirurgiche per il nostro modello di ratto di OLT parziale con ricostruzione arteriosa epatica. Mentre un modello di ratto di OLT è complicato e richiede competenze avanzate di microchirurgia, in questo articolo fornisce un sacco di informazioni pratiche, che dovrebbe servire come una buona guida per la formazione e l&#39;apprendimento di questo modello. Apprendimento questo modello efficiente è particolarmente importante per abbreviare il periodo di apprendimento, riducendo il numero di animali e costi necessari per la pratica, e poi riprodurre risultati affidabili in esperimenti. Ciò è in linea con il concetto delle 3R (sostituzione, riduzione e perfezionamento) degli esperimenti sugli animali, che è stata postulata da Russel e Burch nel1959 25.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commenti </td></tr><tr><td> Microscopio chirurgico </td><td> Leica </td><td> M651 </td><td></td></tr><tr><td> Sorgente di luce </td><td> Schott </td><td> KL1500LCD </td><td></td></tr><tr><td> Tamponi di cotone </td><td> NOBA Verbandmittel </td><td> 974202 </td><td></td></tr><tr><td> Tamponi di garza (5x5 cm) </td><td> Fuhrmann </td><td> 10002 </td><td></td></tr><tr><td> povidone-iodio soluzione </td><td> Mundipharma </td><td> 6108022.00.01 </td><td></td></tr><tr><td> Olio a base di argilla </td><td> Debika società </td><td> 090148 </td><td></td></tr><tr><td> TachoSil </td><td> Takeda Pharmaceuticals International GmbH </td><td> EU/1/04/277/001-004</td><td> Applicato al fegato superficie resecata </td></tr><tr><td> Bisturi lama n ° 11 </td><td> Pfm medico </td><td> 200130011 </td><td> Preparazione del bracciale e stent </td></tr><tr><td> Calibro 14 catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4268210S </td><td> Bracciale per il fotovoltaico </td></tr><tr><td> 18-gauge catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4268130S </td><td> Perfusione via PV </td></tr><tr><td> 24-gauge catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4269071S </td><td> Stent per BD e HA </td></tr><tr><td> Seta filo di sutura 4-0 </td><td> Resorba </td><td> H3F </td><td> Resezione epatica </td></tr><tr><td> 6-0 seta sutura </td><td> Resorba </td><td> H1F </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 Prolene (polipropilene) sutura </td><td> Ethicon </td><td> 8701H </td><td> SHVC e IHVC </td></tr><tr><td> 4-0 sutura Vicryl </td><td> Ethicon </td><td> V304H </td><td> Chiusura addominale </td></tr><tr><td> Siringa da 5 ml </td><td> Terumo </td><td> SS + T05ES1 </td><td> Eseguire il cuscino </td></tr><tr><td> Riscaldamento pad </td><td> Thermo </td><td> 190 x 260 mm </td><td></td></tr><tr><td> Magnetico fissatore retrazione </td><td> Belle Science Tools Inc. </td><td> 18200-01 18200-02 18200-03 18200-12 </td><td></td></tr><tr><td> Bagno di acqua fredda </td><td> Huber </td><td> 740.000X </td><td> Conservazione Graft </td></tr><tr><td> Pinza bipolare </td><td> Promotrice </td><td> MBC-200 </td><td></td></tr><tr><td> Pinza Mosquito </td><td> BONIMED </td><td> 451-476-03 </td><td> Due coppie usate </td></tr><tr><td> Adson micro pinza </td><td> Dimeda </td><td> 10.176.12 </td><td></td></tr><tr><td> Mi curvocro pinza </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Dritti pinza micro </td><td> Bonimed </td><td> 451-476-03 </td><td></td></tr><tr><td> Curve forbici micro </td><td> Medicon </td><td> 05.15.83 </td><td></td></tr><tr><td> Dritti forbici micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD12 </td><td> Incisione fine </td></tr><tr><td> Forbici </td><td> AESCULAP </td><td> BC211W </td><td></td></tr><tr><td> Micro supporto dell&#39;ago </td><td> AESCULAP </td><td> FD241R </td><td> Ricostruzione </td></tr><tr><td> Il sindaco-Hegar Porta aghi </td><td> Mizuho Ikakogyo </td><td> 06-798-00 </td><td> Chiusura addominale </td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog morsetto (diritto) </td><td> ULRICH </td><td> CV3054 </td><td></td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog morsetto (curva) </td><td> Codman </td> &lt;td&gt; 37-1062 </td><td></td></tr><tr><td> Satinsky morsetto </td><td> Mizuhoika </td><td> 09-230-24 </td><td></td></tr><tr><td> Pinza vascolare periferica </td><td> Teleflex Medical </td><td> 353494 </td><td> Destinatario SHVC </td></tr><tr><td> Nave morsetto Micro (usa e getta) </td><td> AROSurgical Instruments Corporation </td><td> TKM-1-60 g </td><td> PV, IHVC innesto, e il destinatario HA </td></tr><tr><td> Nave fascetta Micro (metallo) </td><td> Belle Science Tools Inc. </td><td> 18052-01 </td><td> Destinatario IHVC </td></tr><tr><td> Soluzione di Ringer lattato </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 6150917.00.00 </td><td></td></tr><tr><td> Normale soluzione salina </td><td> DeltaSelect </td><td> 1299.99.99 </td><td></td></tr><tr><td> HTK soluzione </td><td> Dr. Franz Köhler Chemie GmbH </td><td> 31268.00.00 </td><td> Conservazione soluzione </td></tr><tr><td> Eparina-Natrium </td><td> Ratiopharm </td><td> 5394.02.00 </td><td> 500 UI prima di perfusione innesto </td></tr><tr><td> Bicarbonato di sodio 8,4% </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 4399.97.99 </td><td> 0,5 ml dopo la riperfusione </td></tr><tr><td> Soluzione di glucosio 5% </td><td> B. Braun </td><td> 6714567.06.00 </td><td> 1,0 ml dopo la riperfusione </td></tr><tr><td> Cefuroxim sodio </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 38985.01.00 </td><td> Antibiotico, 16 mg / kg </td></tr><tr><td> Buprenorfina </td><td> Essex Pharma </td><td> 997.00.00 </td><td> Painkiller, 0,1 mg / kg </td></tr><tr><td> Intensive Care Cage Unità </td><td> Brinsea Products Ltd. </td><td> Vetario S10 </td><td> Cura postoperatoria </td></tr></tbody></table>

surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction

Trapianto di fegato (OLT) nei ratti utilizzando un innesto totale o parziale, è indispensabile un modello sperimentale per la ricerca trapianto, come ad esempio gli studi sulla conservazione del trapianto e ischemia-riperfusione 1,2 lesioni, risposte immunologiche 3,4, 5,6 emodinamica, e di piccole dimensioni per la sindrome di 7. La OLT ratto è tra i modelli animali più difficili in chirurgia sperimentale e microchirurgia richiede competenze avanzate che richiedono molto tempo per imparare. Di conseguenza, l&#39;uso di questo modello è stato limitato. Dal momento che l&#39;affidabilità e la riproducibilità dei risultati sono componenti chiave degli esperimenti in cui si utilizzano tali modelli animali complessi, è fondamentale per i chirurghi che sono coinvolti nel OLT ratto per essere addestrato nelle procedure ben standardizzate e sofisticata per questo modello. Mentre varie tecniche e modifiche di OLT nei ratti sono stati riportati 8 Poiché il primo modello è stato descried da Lee et al. 9 nel 1973, l&#39;eliminazione della arteria epatica ricostruzione 10 e l&#39;introduzione della tecnica anastomosi bracciale da Kamada et al. 11 erano un avanzamento importante in questo modello, perché semplificato le procedure di ricostruzione in grande misura . Nel modello da Kamada et al., Il rearterialization epatica è stato eliminato. Dal momento che i ratti possono sopravvivere in assenza di flusso in arteria epatica dopo trapianto di fegato, vi è stata polemica considerevole rispetto al valore di arterialization epatica. Tuttavia, la superiorità del modello fisiologico arterializzato è stato sempre più riconosciuto, soprattutto in termini di preservazione del sistema biliare 8,12 e dell&#39;integrità fegato 8,13,14. In questo articolo, vi presentiamo dettagliate procedure chirurgiche per un modello murino di OLT con ricostruzione arteriosa epatica con un innesto parziale del 50% dopo resezione epatica ex vivozione. Le procedure di ricostruzione per ciascuna nave e il dotto biliare vengono eseguite con i seguenti metodi: un 7-0 sutura in polipropilene continuo per la sovra-e sottoepatica vena cava; una tecnica bracciale per la vena porta, e una tecnica di stent per l&#39;arteria epatica e il dotto biliare.

Tutti i ratti destinatario (n = 20) sono sopravvissuti senza complicazioni apparenti fino a quando l&#39;eutanasia previsto per il prelievo del sangue a 1, 3, 24, e 168 ore (7 giorni) dopo la riperfusione portale (n = 5 ad ogni tempo). I campioni di sangue sono stati prelevati dalla IHVC da una puntura diretta con un ago di calibro 27. Dopo la centrifugazione a 5340 xg per 10 minuti, i campioni di siero sono stati ottenuti e analizzati per alanina aminotransferasi (ALT), che riflettono il grado di danno epatocellulare dopo il trapianto. Il tempo impiegato per cambiamenti nei livelli sierici di ALT è mostrato in Figura 16. I livelli di ALT ha raggiunto un picco a 24 ore (media ± deviazione standard: 212,6 ± 67,9 IU / L), per poi scendere entro i limiti normali a 168 ore (33,6 ± 6,8 UI / L). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig1.jpg" /> Figura 1. A bracciale per la vena porta (PV) da 14-calibro del catetere, e stent per l&#39;arteria epatica (HA) e del dotto biliare (BD) da 24-gauge cateteri. <img alt="Figura 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2.jpg" /> Figura 2. Schema della rimozione del fegato da donatore ratto BD, del dotto biliare,. HA, arteria epatica; IHVC, sottoepatica vena cava, PV, della vena porta, SHVC, sovraepatica vena cava. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig3.jpg" /> Figura 3. Donatore funzionamento. a. Il ratto viene posto su una piastra elettrica con un sistema magnetico retrazione fissatore. L&#39;addome viene aperto da una incisione mediana con estensioni bilaterali. B. Inserimento dello stent nel dotto biliare. C. Perfusione del fegato attraverso la vena porta. Abbreviazioni sono spiegareed in Figura 2. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig4.jpg" /> Figura 4. Fissaggio di un bracciale alla vena porta. a, b. La pinza DeBakey Bulldog che afferra il tronco venoso portale viene posta sopra la tazza di metallo. La coppa è montato nella scatola di plastica riempito di ghiaccio tritato. C. La vena porta è messa attraverso il bracciale. D. La parete della vena porta è rovesciato sopra il bracciale con il moncone della vena splenica fuori il bracciale al 7 posizione ore e l&#39;estensione del bracciale nella posizione delle ore 12. e. La vena porta è fissata con un filo di seta circonferenziale 6-0 sul bracciale. Le frecce nere indicano il moncone della vena splenica. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig5.jpg" /> Figura 5. Ex vivoinserimento di uno stent nell&#39;arteria epatica. a. Il fegato è fissata serrando entrambi i bordi del diaframma, e l&#39;arteria epatica viene tirato dritto tenendo il filo ligato per l&#39;arteria. b. La parete anteriore della piccola incisione sulla arteria epatica è tenuto con una pinza diritte micro . c, d. Lo stent viene inserito nell&#39;arteria epatica e fissato con un filo di seta 6-0. <img alt="Figura 6" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6.jpg" /> Figura 6. Lo schema di resezione epatica ex vivo al 50%. Lobi in colore grigio vengono rimossi. ACL, anteriore lobo caudato, PCL, lobo caudato posteriore; LLL, lobo sinistro laterale; LML, parte sinistra del lobo mediano, RML, parte destra del lobo mediano, SRL, superiore del lobo laterale destro, IRL, inferiore del lobo laterale destro. Figura 7. Ex resezione epatica vivo 50%. un. legatura del peduncolo del lobo caudato posteriore. b. legatura del peduncolo della porzione sinistra del lobo mediano. c. Il fegato prima 50% resezione. d. fegato dopo resezione 50%. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig8.jpg" /> Figura 8. Ex vivo plasty del sovraepatica vena cava. a. Il fegato è fissata serrando i due lati della membrana con le pinzette zanzara. b. Soggiorno con suture 7-0 polipropilene sono collegati ad entrambi gli angoli. <img alt="Figura 9" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig9highres.jpg" src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig9.jpg&quot; /&gt; Figura 9. Schema di impianto dell&#39;innesto nel ratto ricevente. Le procedure di ricostruzione vengono eseguite per il sovra-e sottoepatica vena cava (SHVC e IHVC) con una sutura 7-0 continuo, la vena porta (PV) mediante una tecnica di bracciale, e l&#39;epatica arteria (HA) e del dotto biliare (BD) mediante una tecnica stent. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig10.jpg" /> Figura 10. Funzionamento beneficiario fino alla rimozione del fegato nativo. a. L&#39;addome viene aperto da una incisione mediana. b. La vena surrenalica destra è legato. c. il fegato nativo viene asportato. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig11.jpg" /> Figura 11. Anastomosi del suprahepatico vena cava. a, b. La pinza vascolare periferica per la vena cava sovraepatica è fissato in un grumo di olio a base di argilla. Le suture in entrambi gli angoli sono mantenuti con una leggera trazione superiolaterally per allargare l&#39;anastomosi. C. Continua sutura intraluminale della fila posteriore in corso. D. Sutura continua della fila anteriore in corso. <img alt="Figura 12" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig12.jpg" /> Figura 12. Ricostruzione della vena porta. a, b. La pinza di serraggio zanzara vena porta è fissato in argilla a base di olio e tirato verso l&#39;ilo epatico. cf. Inserimento del bracciale nella vena porta. <img alt="Figura 13" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig13.jpg" /> Figura 13. Ricostruzione dell&#39;arteria epatica. a, b. </stron<html> g inserimento&gt; di uno stent nell&#39;arteria epatica comune destinatario (CHA) alla biforcazione dell&#39;arteria epatica propria (PHA) e dell&#39;arteria gastroduodenale (GDA). <img alt="Figura 14" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig14.jpg" /> Figura 14. Anastomosi del sottoepatica vena cava. a. Le suture in entrambi gli angoli. b. sutura continua della fila posteriore. c. sutura continua della fila anteriore. d. riperfusione del sottoepatica vena cava. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="Figura 15" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig15.jpg" /> Figura 15. Tutte le procedure di ricostruzione sono finiti. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="&lt;/ Html">&quot;Figura 16&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg&quot; /&gt; Figura 16 postoperatoria time-course delle variazioni di sierici di alanina aminotransferasi (ALT) (n = 20; n = 5 in ogni punto).. I dati sono espressi come medie con barre di errore che indicano deviazioni standard. I livelli di ALT ha raggiunto un picco a 24 ore (212,6 ± 67,9 IU / L), per poi scendere entro i limiti normali a 168 ore (33,6 ± 6,8 UI / L).

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction at JoVE.com

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Trapianto di fegato nei ratti è un modello sperimentale indispensabile per la ricerca biomedica. Qui vi presentiamo le nostre procedure chirurgiche per il trapianto ortotopico di fegato di ratto con la ricostruzione arteriosa epatica con un trapianto parziale del 50%.

Procedure chirurgiche per un modello di Rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Ricerca

Medicina

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Trapianto di fegato in ratti

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Eterotopica ausiliario Ratto trapianto di fegato con flusso regolato Portal Vein arterialization in acuta insufficienza epatica

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

Generazione di un umanizzato mouse Fegato Utilizzando epatici umani cellule staminali

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Metodo di consegna diretta segmentale intra-epatico utilizzando un modello di fegato di ratto Hilar morsetto

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Ri-Arterialized trapianto parziale di fegato del ratto con un in vivo vaso-Oriented 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Un modello del ratto di orthotopic del trapianto del fegato usando una tecnica novella dell'anastomosi magnetico per la ricostruzione della Vena Cava Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Trapianto di rene ortotopico ratto: un nuovo approccio chirurgico semplificato

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

Generation of a Rat Model of Acute Liver Failure by Combining 70% Partial Hepatectomy and Acetaminophen

Generazione di un modello di ratto di insufficienza epatica acuta combinando il 70% di epatitectomia parziale e acetaminofene

Acute liver failure (ALF) is a clinical condition caused by various etiologies resulting in the loss of metabolic, biochemical, synthesizing, and ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

Complicazioni ridotte dopo la riconnessione arteriosa in un modello di ratto di trapianto di fegato ortotopico

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...