Name: the insect galleria mellonella as a powerful infection model to investigate bacterial pathogenesis
Uploaded: 2012-12-11T13:00:00
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Nous tenons à remercier Elisabeth Guillemet, Christophe Buisson et Ludovic Bridoux pour l&#39;assistance technique excellente. Nous sommes très reconnaissants à Sylvie Salamitou et Sinda Fedhila pour la configuration initiale du système.

1. Élevage des insectes Le cycle entier de l&#39;oeuf à larves du dernier dure environ 5 semaines à 25 ° C. Un ou 2 semaines supplémentaires sont nécessaires pour obtenir les papillons adultes. <ol><li> Placez au moins 100 nymphes ou adultes nouvellement fusionnée G. papillons mellonella dans un 5-litres cage grillagée. Papillons mâles mesurent 10 à 15 mm. Le papillon mâle adulte est de couleur beige avec une lumière faible et des marques sombres. Femme papill...

<ol>
	<li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster.">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annu. Rev. 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Bacteriol. 184, 3296-3304 (2002).</li><li>Guillemet, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+InhA+metalloproteases+of+Bacillus+cereus+contribute+concomitantly+to+virulence.">The InhA metalloproteases of Bacillus cereus contribute concomitantly to virulence.</a> J. Bacteriol. 192, 286-294 (2010).</li><li>Nielsen-LeRoux, C., Gaudriault, S., Ramarao, N., Lereclus, D., Givaudan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+the+insect+pathogen+bacteria+Bacillus+thuringiensis+and+Xenorhabdus/Photorhabdus+occupy+their+hosts.">How the insect pathogen bacteria Bacillus thuringiensis and Xenorhabdus/Photorhabdus occupy their hosts.</a> Curr. Opin. Microbiol. 15, 1-12 (2012).</li><li>Bottone, E. 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O., Ribier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+transduction+in+Bacillus+thuringiensis+var.+berliner+1715,+using+bacteriophage+CP54.">Generalized transduction in Bacillus thuringiensis var. berliner 1715, using bacteriophage CP54.</a> Ber. J. Gen. Microbiol. 121, 203-212 (1980).</li><li>Sanchis, V., Agaisse, H., Chaufaux, J., Lereclus, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Construction+of+new+insecticidal+Bacillus+thuringiensis+recombinant+strains+by+using+the+sporulation+non-dependent+expression+system+of+cryIIIA+and+a+site+specific+recombination+vector.">Construction of new insecticidal Bacillus thuringiensis recombinant strains by using the sporulation non-dependent expression system of cryIIIA and a site specific recombination vector.</a> J. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolysin+II+is+a+Bacillus+cereus+virulence+factor+that+induces+apoptosis+of+macrophages.">Hemolysin II is a Bacillus cereus virulence factor that induces apoptosis of macrophages.</a> Cell Microbiol. 13, 92-108 (2011).</li><li>Fedhila, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+the+virulence+of+invertebrate+and+mammalian+pathogenic+bacteria+in+the+oral+insect+infection+model+Galleria+mellonella.">Comparative analysis of the virulence of invertebrate and mammalian pathogenic bacteria in the oral insect infection model Galleria mellonella.</a> J. Invertebr. Pathol. 103, 24-29 (2010).</li><li>Daou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IlsA,+a+unique+surface+protein+of+Bacillus+cereus+required+for+iron+acquisition+from+heme,+hemoglobin+and+ferritin.">IlsA, a unique surface protein of Bacillus cereus required for iron acquisition from heme, hemoglobin and ferritin.</a> PLoS Pathog. 5, e1000675 (2009).</li><li>Mason, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+commensal+to+pathogen:+translocation+of+Enterococcus+faecalis+from+the+midgut+to+the+hemocoel+of+Manduca+sexta.">From commensal to pathogen: translocation of Enterococcus faecalis from the midgut to the hemocoel of Manduca sexta.</a> MBio. 2, e00065-00011 (2011).</li><li>Goldsmith, M. 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L&#39;utilisation d&#39;insectes et en particulier au stade larvaire, comme des modèles d&#39;infection de plusieurs agents pathogènes, devient fréquente. Un modèle de choix pour certains aspects est la drosophile (mouche du modèle) utilisés comme les adultes et 1,2 stade larvaire. Le lépidoptère insectes G. mellonella a également été utilisé principalement pour tester la virulence bactérienne par injection. L&#39;avantage de tolérer des températures plus élevées (supérieur...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires (optionnel) </td></tr><tr><td> Cire et de pollen </td><td> La Ruche Roanaise </td><td> 303000 </td><td> Tout producteur de miel </td></tr><tr><td> Pompe à seringue automatique </td><td> KD Scientific </td><td> KDS 100 </td><td></td></tr><tr><td> Seringue de 1 ml </td><td> Terumo </td><td> BS 01T </td><td></td></tr><tr><td> Aiguille 0,45 x 12 mm </td><td> Terumo </td><td> NN 2613R </td><td></td></tr><tr><td> Boîte de Petri de 5 cm </td><td> VWR </td><td> 89000-300 </td><td></td></tr><tr><td> 30G aiguille, 25 mm hypodermique </td><td> Burkard Mfg Co. Ltd </td><td> PDE0005 </td><td></td></tr></tbody></table>

the insect galleria mellonella as a powerful infection model to investigate bacterial pathogenesis

L&#39;étude de la virulence bactérienne nécessite souvent un modèle animal approprié. Modèles de mammifères d&#39;infection sont coûteux et peuvent soulever des questions éthiques. L&#39;utilisation d&#39;insectes comme des modèles d&#39;infection constitue une alternative intéressante. Comparé à d&#39;autres hôtes non vertébrés modèle comme les nématodes, les insectes ont un système relativement avancé des défenses antimicrobiennes et sont donc plus susceptibles de produire des informations pertinentes pour le processus d&#39;infection chez les mammifères. Comme les mammifères, les insectes possèdent un complexe système immunitaire inné 1. Les cellules de l&#39;hémolymphe sont capables de phagocyter ou d&#39;encapsuler des envahisseurs microbiens et réponses humorales comprennent la production inductible de lysozyme et petits peptides antibactériens 2,3. En outre, les analogies se retrouvent entre les cellules épithéliales des insectes larvaires estomacs et les cellules intestinales de l&#39;appareil digestif de mammifères. Enfin, plusieurs composantes de base essentielles pour le processus d&#39;infection bactérienne telle que l&#39;adhérence cellulaire, la résistance à lapeptides antimicrobiens, la dégradation des tissus et de l&#39;adaptation au stress oxydatif sont susceptibles de jouer un rôle important dans les deux insectes et les mammifères 1. Ainsi, les insectes sont des outils polyvalents pour l&#39;identification et la caractérisation des facteurs de virulence impliqués dans les infections microbiennes mammifères. Les larves de la teigne plus grande Galleria mellonella ont été montré pour fournir un aperçu utile de la pathogenèse d&#39;un large éventail d&#39;infections microbiennes, y compris les mammifères fongiques (Fusarium oxysporum, Aspergillus fumigatus, Candida albicans) et des bactéries pathogènes, telles que Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris , Serratia marcescens Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes ou Enterococcus faecalis 4-7. Quelles que soient les espèces bactériennes, les résultats obtenus avec des larves infectées Galleria par injection directe à travers la cuticule toujours en corrélation avec ceux de similar des études de mammifères: les souches bactériennes qui sont atténuées dans les modèles de mammifères montrent moins virulents dans la Galleria, et des souches responsables de graves infections humaines sont également très virulent dans le modèle Galleria 8-11. L&#39;infection orale de la Galleria est beaucoup moins utilisées et d&#39;autre composés, comme des toxines spécifiques, sont nécessaires pour atteindre la mortalité. G. mellonella larves présentent plusieurs avantages techniques: elles sont relativement importantes (dernier stade larvaire avant la nymphose ya environ 2 cm de long et un poids de 250 mg), ce qui permet l&#39;injection de doses définies de bactéries, ils peuvent être élevés à différentes températures (20 ° études C à 30 ° C) et l&#39;infection peut être effectuée entre 15 ° C et au-dessus de 37 ° C 12,13, ce qui permet d&#39;expériences qui imitent un environnement de mammifère. En outre, l&#39;élevage d&#39;insectes est facile et relativement pas cher. Infection des larves permet de surveiller la virulence bactérienne par plusieurs moyens, includincalcul g de LD 50 14, mesure de la survie de la bactérie 15,16 et l&#39;examen du processus d&#39;infection 17. Ici, nous décrivons l&#39;élevage des insectes, couvrant toutes les étapes de la vie de G. mellonella. Nous fournissons un protocole détaillé de l&#39;infection par deux voies d&#39;inoculation: haemocoelic orale et intra. Le modèle bactérienne utilisée dans ce protocole est Bacillus cereus, un agent pathogène à Gram positif impliquées dans gastro-intestinal ainsi que dans d&#39;autres locaux ou systémiques sévères infections opportunistes 18,19.

Injection intra haemocoelic de bactéries dans G. mellonella s&#39;est avéré très utile pour l&#39;identification des facteurs de virulence de nombreuses traitant de dommages aux tissus et la résistance aux facteurs immunitaires innés de plusieurs agents pathogènes humains. A titre d&#39;exemple, la figure 2A représente la mortalité des insectes après l&#39;injection de doses différentes de B. bactéries cereus (type sauvage et des souches mutantes) 22. <s...

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The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

Orale et intra infection haemocolic des larves de la teigne de la cire plus<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Est décrite. Cet insecte peut être utilisée pour étudier les facteurs de virulence de entomopathogène ainsi que de mammifères bactéries opportunistes. L&#39;élevage des insectes, des méthodes d&#39;infection et des exemples de<em&gt; In vivo</em&gt; L&#39;analyse sont décrits.

L&#39;insecte<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Comme un modèle d&#39;infection puissant pour étudier la pathogenèse bactérienne

The study of bacterial virulence often requires a suitable animal model. Mammalian models of infection are costly and may raise ethical issues. The use of ...

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Immunology and Infection

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In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

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The chronic nature of many diseases is attributed to the formation of bacterial biofilms which are recalcitrant to traditional antibiotic therapy. ...

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Imaging is a valuable technique that can be used to monitor biological processes.  In particular, the presence of cancer cells, stem cells, specific ...

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Utilisation d&#39;<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Comme un organisme modèle pour l&#39;étude<em&gt; Legionella pneumophila</em&gt; Maladies infectieuses

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