Name: preparation and pathogen inactivation of double dose buffy coat platelet products using the intercept blood system
Uploaded: 2012-12-07T11:00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System at JoVE.com

Bevillingerne til publikation, er givet ved Cerus Corp, producenten af ​​INTERCEPT Blood System.

1. Hele blodprøvetagningssystem <ol><li> Indsaml fuldblod fra frivillige donorer i 450 ml top / bund samling sætter henhold til lokale blodindsamlingscentre retningslinjer. </li><li> Helblodet lagres i mindst 2 timer på en køleplade før centrifugering og adskillelse. </li></ol> 2. Buffy Coat Forberedelse <ol><li> Centrifugeres helblod under anvendelse af en hård centrifugering at adskille blodet i tre lag: røde blodlegemer, buffy coat og plasma. Centrifuge anvendte parametre var 4.880 RCF i 11 min ved 22 ± 2 ° C. </li><li> Anvende en automatiseret blod separator til at udtrykke plasmaet til den øverste satellitpose og de røde blodlegemer (RBC) i bunden satellitpose, forlader fibrinlaget i opsamlingsbeholderen. Målret betyde volumen og hæmatokrit intervaller for buffy coats er cirka 48 ml og 37% hhv. </li><li> De buffy-coats gemmes natten over på en blodplade agitator ved 22 ± 2 ° C. </li></ol><ol><li> Sterile connect 7 fibrinlag og 300 ml SSP + blodplade additiv opløsning (PAS) i et tog konfiguration med parallelle linjer for at reducere toglængde, PAS bør være øverst toget. Klemme linien mellem PAS og den første fibrinlag. </li><li> Åbne sterile forbindelser mellem buffy coat enheder og tillade fibrinlag løbe ned sidste beholder. </li><li> Åbne svejsningen og klemmen mellem PAS og den første fibrinlag. Tillad en tredjedel af additivet opløsning til skylning gennem hver af de buffy coat beholderne sekventielt. Gentag to gange hver gang med halvdelen af ​​den resterende PAS. </li><li> Den gennemsnitlige buffy coat pulje volumen skal være ca 600 ml. Hvis målvolumen og hæmatokrit af de enkelte buffy coats er opfyldt, vil plasma-forhold være 32 til 47% som krævet for den INTERCEPT patogen inaktivering behandling senere i processen. </li><li> Kassér den tomme SSP + og buffycoat beholdere. </li><li> For optimal trombocytter, holde pulje på agitator i 1 time før centrifugering. </li><li> Steril tilslutte en blodpladeopbevaring beholder med integreret leukoreduction filter til buffy coat pool. </li><li> Udføre en &quot;blød spin&quot; af buffy coat pool at adskille røde blodlegemer fra blodpladerne i suspension (462 RCF for 9 min, 20 sec). Udtryk blodpladesuspensionen anvendelse af et automatiseret blod separator gennem leukoreduction filter i blodpladeopbevaring container. </li><li> De tidligere beskrevne behandlingskrav sikre, at den blodpladesuspensionen opfylder de INTERCEPT behandling specifikationerne for 300 ml - 420 ml volumen, 2,5-7,0 x 10 11 blodplade dosis, og ≤ 4 x 10 6 / ml røde blodlegemer. </li></ol> 4. SKÆRING Behandling <ol><li> Udfør INTERCEPT behandling inden udgangen af ​​dag 1 efter indsamling (dag 0 er dagen for indsamling). </li><li> Pak INTERCEPT Processing Setmed Dual Opbevaring containere fra klar plast pose. </li><li> Sterile tilslutte blodpladesuspensionen beholderen til slangen til amotosalen beholder på INTERCEPT behandling sæt. </li><li> Mærk skæringen forarbejdning sæt opbevaringsbeholdere med passende blod produktidentifikation efter lokale krav. </li><li> Hæng blodplader og bryder først den nederste kanyle på amotosalen beholderen, således at amotosalen opløsningen at strømme ind i belysningen beholderen. Bryde den øverste kanyle på amotosalen beholderen gør det muligt for blodpladerne at strømme gennem den amotosalen beholderen ind i belysningen beholderen. </li><li> Bland forsigtigt blodplade-og amotosalen blanding og udtrykke luften fra belysningen beholderen ind i amotosalen beholderen. </li><li> Udtrykke en lille mængde af blodplade blandingen i rørledningen, påfyldning omkring 4 cm af røret. Dette sikrer blodplader i både slanger og belysning beholder gennemgå patogenet inactivatipå behandling. </li><li> Forsegle slangen mellem belysningen beholder og amotosalen container. Efterlader ikke mere end cirka 4 cm af rør strækker sig fra belysningen beholderen. Fjern og kassér den tomme blodplader og amotosalen containere og luk klemmerne på prøveudtagningsprogrammerne poser. </li><li> Anbring forarbejdning sæt i illuminator med belysning beholderen i det store kammer til venstre og organisatoren i det lille kammer i højre side. </li><li> Brug den håndholdte stregkode enhed, deltage i donation ID, produkt kode, og forarbejdning sæt partinummeret ind i lampen. Luk metaldækslet og når du bliver bedt om illuminatoren grafiske brugerflade, lukke skuffen. Tryk på &quot;Start&quot; for at starte Illumination. </li><li> Efter belysning, skal du fjerne behandling sæt fra illuminator. Illuminatoren udskriver automatisk behandlingen rapport for den behandlede blodplader enhed (er). </li><li> Pak af containerne fra arrangøren og hæng platelets og forarbejdning sæt, bryde kanylen ved udløbet af belysningen beholderen og lade blodpladerne til at strømme i forbindelsen adsorptionsanordningen (CAD) beholder. </li><li> Pas på ikke at bøje CAD wafer, udtrykker luften fra CAD beholderen til belysningen beholderen ved hjælp af en plasma-ekstraktor. </li><li> Forsegle slangen nær ved indløbsåbningen af ​​CAD beholderen. Fjern og kassér den tomme belysning container. </li><li> Placer CAD beholderen med de tilknyttede opbevaringsbeholdere på en blodplade røreværk i mindst 6 timer, men ikke mere end 16 timer. Dette vil resultere i reduktion af tilbageværende amotosalen til en koncentration på ≤ 2 uM. </li><li> Efter CAD behandling, skal du fjerne blodpladeenheder fra omrøreren. Hæng blodpladerne. Bryde kanylen og tillader blodplader at strømme ind i opbevaringsbeholdere. </li><li> Udtryk luften fra opbevaringsbeholdere ind i CAD-container. Lad den resterende blodpladekoncentrat flow tilbage i opbevaringsbeholdere medtyngdekraften. Forsegl slangen over Y-fitting og fjern den tomme CAD container. </li><li> Omfordel volumen mellem opbevaringsbeholdere efter behov. Bind justeringer foretages ved at veje opbevaringsbeholdere. Forsegle slangen til hver lagerbeholder få centimeter over indløbet af lagerbeholderen, hvilket letter opnåelse af en steril prøve fra slutproduktet som beskrevet i 5.2. </li></ol> 5. Product Sampling <ol><li> Til rutinemæssig QC test, kan de endelige opbevaringsbeholdere udtages prøver én gang ved hjælp af stikprøver pose på opbevaringsbeholdere. For at gøre dette, sikre blodplade enhed er godt blandet, og åbn derefter klemmen til posen og klem flere gange. Forsegle slangen, efter at posen er fyldt med blodplader. Overfør den blodpladeprøve i et egnet laboratorium rør og udføre analyser med det samme. </li><li> For at opnå prøver på forskellige tidspunkter i løbet af opbevaring, såsom til en valideringsundersøgelse steril forbindeen ny sampling container til slangen for blodplade-opbevaringsbeholderen. Sørg for, at blodplader er godt opblandet før overførsel til prøveudtagning container. </li></ol> 6. In vitro Function Evaluation <ol><li> Til denne valideringsundersøgelse blev in vitro evaluering udført efter CAD behandling (dag 1 eller dag 2 afhængigt af CAD varighed) og igen på dag 4 (eller dag 5) og Dag 7. In vitro målinger omfattede volumen, blodpladetal, pH, blodgas (PO 2, pCO2), glucose, lactat og omhvirvling. </li><li> Volumen blev bestemt efter vægt med 1,01 g / ml som massefylden af ​​blodplader i additivopløsning. </li><li> Hæmoglobin forurening blev evalueret visuelt ved hjælp af sammenligning med et farvekort. </li><li> Hvirvlende blev bestemt visuelt. </li><li> Se &quot;Tabel over udstyr&quot; til metodologi andre assays. </li></ol> 7. Repræsentative resultater Processen med at producere double dosis buffy coat blodplader begynder med produktion af individuelle buffy coats, der opfylder målspecifikationer for volumen og hæmatokrit. Da det ikke er praktisk at måle hæmatokrit af de enkelte fibrinlag under den afsluttende proces validering, begyndte vi ved at foretage en særskilt indsats for at optimere vores fibrinlag at sikre vi kunne konsekvent opfylder target volumen og hæmatokrit. Som vist i tabel 1, vores optimerede buffy coats tilfredsstillende sammenlignet med de målværdier for både volumen og hæmatokrit ved 46 ± 2 ml og 37 ± 3%. Efter gruppering bør volumenet og hæmatokrit af buffy coat pool være ca 600 ml og 20%, henholdsvis før den bløde centrifugering centrifugering. Som vist i tabel 2, vores buffy coat pools gennemsnit 615 ± 5 ml; hæmatokrit i gennemsnit 19 ± 1%. De bløde spin-centrifugering resulterer i en dobbelt dosis blodplade concEntrate, der vil opfylde de indgående krav til patogen inaktivering anvender de INTERCEPT Blood System DS behandling sæt. Vigtige inputparametre til INTERCEPT behandling omfatter volumen, blodpladetal, plasma ratio, og RBC indhold. Derudover vil vi komme ≥ 75% af blodplader i blodpladekoncentrat i forhold til buffy coat pool. Per lokale krav, skal den hvide blodlegemer (WBC) forurening være &lt;1x10 6 / enhed. Den blodpladekoncentrater i vores validering mødte de vigtigste parametre for INTERCEPT behandling samt målene for WBC forurening og trombocytter som vist i tabel 3. Den INTERCEPT fremgangsmåde til patogener inaktivering udføres på dobbelt dosis blodpladekoncentrat hjælp af et enkelt INTERCEPT behandling sæt. Behandling Sættet består af to integrale lagring, og som tillader den behandlede enhed deles i to individuelle terapeutiske blodplade doser ved afslutningen af ​​stienogen inaktiveringsproces. Europæiske retningslinjer kræver, at 75% af de undersøgte enheder indeholder ≥ 200x10 9 blodplader per terapeutisk dose1, lokale krav i Sverige kræver, at 75% af de testede enheder indeholder&gt; 240x10 9 blodplader pr dosis. Efter INTERCEPT behandling var den gennemsnitlige blodplade-indhold 265 ± 22 x 10 9 (n = 24). Desuden 88% af enhederne opfyldt eller overskredet 240x10 9 blodplader pr terapeutisk dosis, hvilket er godt inden for både de europæiske retningslinjer og svenske regler. Se figur 1 og 2 for en illustration af dobbelt dosis buffy coat forberedelse og INTERCEPT behandlingsprocesser hhv. For denne validering, målte vi in vitro egenskaber blodpladekoncentrater efter INTERCEPT behandling (dvs. efter opdelingen i de individuelle opbevaringsbeholdere) parametre blev målt over 7 dages opbevaring. Middelværdi og standardafvigelse blev opsamlet forblodplade-dosis, pH, PO2, pCO2, lactat produktion og glucoseforbrug. Figur 3 viser den gennemsnitlige starter blodplade dosis af dobbelt dosis blodpladekoncentrat før INTERCEPT behandling og den gennemsnitlige blodplade dosis i hver af de opdelte produkter efter INTERCEPT behandling over 7 dages opbevaring. Blodplade tab under opbevaring var cirka 9%. Denne reduktion er ikke anderledes end det forventede tab af blodplader under opbevaring af konventionelle blodplader. 2 Tabel 4 opsummerer de in vitro karakteristika skæringen blodplader efter behandling og opdeling i enkelte enheder. Per europæiske krav, skal pH af blodplader være over 6,4 ved slutningen af ​​holdbarhedsperioden. Under bearbejdningen koncentrater pH af blodplade falder lidt baseret på blodplade-koncentration, volumen, og gaspermeabilitet af den blodplade-storaseri beholder. Figur 4 illustrerer pH-værdien af den opdelte blodplade produkter over 7 dages opbevaring. Under opbevaring er pH stabilt og godt inden for behandlingskrav. Som vist i figur 5A og 5B, blodplade O 2 forbrug og CO 2-produktion indikerer fortsat respiration ved skæringen blodplader i PL2410 beholderen i 7 dages opbevaring. 6A og 6B viser lactat og glucose-niveauer over 7 dages opbevaring . Trombocytter glucose forbrug og produktion af lactat er i overensstemmelse med hinanden under de 7 dages opbevaring. 5 enheder havde glucoseniveau mindre end 1,11 mmol / l (den nedre grænse for glucose assay). Fibrinlaget forberedelse og samle validering produceret blodpladekoncentrater, der opfyldte de input kriterierne for INTERCEPT behandling, specifikt volumen, blodpladetal, plasma ratio, og rød blood cell kontaminering. De endelige enheder mødte godkendelseskriteriet over 7 dages opbevaring, herunder blodplader dosis og pH. <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Målområde </td><td> Resultater gennemsnit ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> ~ 48 </td><td> 46 ± 2 </td></tr><tr><td> Hæmatokrit (%) </td><td> ~ 37 </td><td> 37 ± 3 </td></tr><tr><td> Holdetid før pooling </td><td> Overnatning på omrører </td><td> Overnatning på omrører </td></tr></tbody></table> Tabel 1. Ved den individuelle Buffy Coats (n = 19). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Målområde </td><td> Resultater gennemsnit ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> ~ 600 </td><td> 615 ± 5 </td></tr><tr><td> Hematocrit (%) </td><td> ~ 20 </td><td> 19 ± 1 </td></tr><tr><td> Holdetid før centrifugering </td><td> 1 time om omrører </td><td> 1 time om omrører </td></tr></tbody></table> Tabel 2. Karakteristika for det brungule lag Pools (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Target </td><td> Resultater gennemsnit ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> 370 til 420 </td><td> 404 ± 8 </td></tr><tr><td> Blodpladetal (x10 9 / enhed) </td><td> 250-700 </td><td> 577 ± 62 </td></tr><tr><td> Mean trombocytter (%) </td><td> ≥ 75 </td><td> 75 ± 4 </td></tr><tr><td> Plasma ratio (%) </td><td> 32-47 </td><td> 38 ± 1 </td></tr><tr><td> RBC (x10 6 / ml) </td><td> ≤ 4 </td><td> 1,2 ± 0,4 </td></tr><tr><td> WBC (x10 6 </sop&gt; / enhed) </td><td> ≤ 1 </td><td> 0,11 ± 0,1 </td></tr><tr><td> Holdetid før INTERCEPT (hr) </td><td> ≤ ende dag 1 </td><td> ≤ ende dag 1 </td></tr></tbody></table> Tabel 3. Karakteristik af den Double-Dose blodpladekoncentrater (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Gennemsnit ± SD </td><td> Min </td><td> Max </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> 199 ± 16 </td><td> 182 </td><td> 236 </td></tr><tr><td> Blodpladetal (x10 9 / enhed) </td><td> 265 ± 22 </td><td> 225 </td><td> 292 </td></tr><tr><td> pH (22 ° C) </td><td> 6,9 ± 0,1 </td><td> 6,8 </td><td> 7,0 </td></tr><tr><td> pO 2 (kPa) </td><td> 21,4 ± 4,8 </td><td> 12,8 </td><td> 27,3 </td></tr><tr><td> pCO2 (kPa) </td><td> 4,3 &amp; plusmn; 0,4 </td><td> 3,3 </td><td> 4,9 </td></tr><tr><td> Lactat (mmol / l) </td><td> 9,1 ± 1,7 </td><td> 6,8 </td><td> 12,4 </td></tr><tr><td> Glucose (mmol / l) </td><td> 5,3 ± 0,9 </td><td> 3,7 </td><td> 6,5 </td></tr></tbody></table> Tabel 4. Karakteristik af den INTERCEPT Behandlet Trombocytter Dag 1/2 (enkelte enheder, n = 24). <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig1.jpg" /> Fig. 1. Fremstilling af en dobbelt dosis blodpladekoncentrat fra en pulje på 7 fibrinlag. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig2.jpg" /> Figur 2. Pathogen inaktivering af en dobbelt dosis blodpladekoncentrat med INTERCEPT Blood System. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig3.jpg" /> Fig. 3. Middel blodplade dosis før og efter7 dage efter INTERCEPT behandling (n = 12 før INTERCEPT, n = 24 efter SKÆRING). <img alt="Figur 4" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig4.jpg" /> Fig. 4. Middel blodplade pH ± SD efter INTERCEPT behandling (n = 24). <img alt="Figur 5A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5a.jpg" /> Figur 5A. Mean pO 2 ± SD efter INTERCEPT behandling (n = 24). <img alt="Figur 5B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5b.jpg" /> Figur 5B. Mean pO 2 ± SD efter INTERCEPT behandling (n = 24). <img alt="6A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6a.jpg" /> Figur 6A. Mean laktatniveau ± SD efter INTERCEPT behandling (n = 24). <img alt="Figur 6B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6b.jpg" /> Figur 6B. Mean glucoseniveauer &amp;plusmn, SD efter INTERCEPT behandling (n = 24).

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components. , (2010).</li><li>Van Rhenen, D. J., Vermeij, J., Mayaudon, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+characteristics+of+S-59+photochemically+treated+platelet+concentrates+derived+from+buffy+coats.">Functional characteristics of S-59 photochemically treated platelet concentrates derived from buffy coats.</a> Vox Sang. 79, 206-214 (2000).</li><li>Wollowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+DNA+and+RNA+in+pathogens:+mode+of+action+of+amotosalen+HCl.">Targeting DNA and RNA in pathogens: mode of action of amotosalen HCl.</a> Transfus. Med. Rev. 31, 11-16 (2004).</li><li>Irsch, J., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen+Inactivation+of+Platelet+and+Plasma+Blood+Components+for+Transfusion+Using+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM.">Pathogen Inactivation of Platelet and Plasma Blood Components for Transfusion Using the INTERCEPT Blood SystemTM.</a> Transfus. Med. Hemother. 38, (2011).</li><li>Lin, L., Dikeman, R., Molini, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemical+treatment+of+platelet+concentrates+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light+inactivates+a+broad+spectrum+of+pathogenic+bacteria.">Photochemical treatment of platelet concentrates with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light inactivates a broad spectrum of pathogenic bacteria.</a> Transfusion. 44, 1496-1504 (2004).</li><li>Lin, L., Hanson, C., Alter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+viruses+in+platelet+concentrates+by+photochemical+treatment+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light.">Inactivation of viruses in platelet concentrates by photochemical treatment with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light.</a> Transfusion. 45, 580-590 (2005).</li><li>Allain, J. P., Cianco, C., Blajchman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protecting+the+blood+supply+from+emerging+pathogens:+the+role+of+pathogen+inactivation.">Protecting the blood supply from emerging pathogens: the role of pathogen inactivation.</a> Transfus. Med. Rev. 19, 110-126 (2005).</li><li>Stramer, S., Hollinger, F., Katz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+infectious+disease+agents+and+their+potential+threat+to+transfusion+safety.">Emerging infectious disease agents and their potential threat to transfusion safety.</a> Transfusion. 49, 1S-29S (2009).</li><li>Nussbaumer, W., Allesdorfer, D., Grabmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+transfusion+of+platelet+components+contaminated+with+low+levels+of+bacteria:+a+comparison+of+bacteria+culture+and+pathogen+inactivation+methods.">Prevention of transfusion of platelet components contaminated with low levels of bacteria: a comparison of bacteria culture and pathogen inactivation methods.</a> Transfusion. 47, 1125-1133 (2007).</li><li>Schlenke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+Transfusion-Associated+Graft-versus-Host+Disease+in+Blood+transfusion:+Is+Gamma-Irradiation+the+Only+Answer?+Transfus.">Protection against Transfusion-Associated Graft-versus-Host Disease in Blood transfusion: Is Gamma-Irradiation the Only Answer? Transfus.</a> Med. Hemother. 31, 24-31 (2004).</li><li>Lin, L., Corash, L., Osselear, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer.">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li><li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease.">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li></ol>

Produktion og fri adgang til denne artikel er sponsoreret af Cerus.

Buffy coat blodplader kræver flere bearbejdningstrin, der resulterer i post-opkrævningsomkostninger, herunder personale tid, forbrugsvarer, udstyr og affald, som skal indregnes i de samlede omkostninger til fremstilling af de blodplade enheder. Forbedring af blodpladeudbyttet fra hver buffy coat (via optimering af buffy coat volumen og hæmatokrit) tillader fremstilling af dobbelt dosis buffy coat blodplade-enhed fra en pool af syv buffy coats. Når denne optimering udføres, antallet af fibrinlag kræves for at fremstille et fast antal blodplader doser kan reduceres, og derved forbedre den samlede udnyttelse af fibrinlag og muliggør fremstilling af yderligere blodpladekoncentrater (PC). Personale tid samt forbrugsvarer og udstyr omkostninger såsom pooling sæt, blodplade additiv opløsning, steril forbindelse vafler, filter sæt, og centrifugering procedurer reduceres med op til 50%. Ud over at optimere blodpladeproduktion og reducere omkostninger i forbindelse hermed, this pooling metode kan generere et blodpladekoncentrat (PC), der opfylder de krav til brug med INTERCEPT dobbelt opbevaringsbeholder behandling sæt, giver os mulighed for at yde bedre beskyttelse til vores transfusion modtagere så godt. Den INTERCEPT Blood System for patogener inaktivering anvender amotosalen og ultraviolet A (UVA) lys til kovalent tværbinde DNA og RNA, forhindrer nukleinsyre-replikation og rendering patogener er ude af stand til at forårsage sygdom. 3. Det effektivt inaktiverer et bredt spektrum af patogener inklusive vira, bakterier , parasitter og forurenende donor hvide blodlegemer. 4-6 INTERCEPT giver et alternativ til den aktuelle test paradigme for nye patogener, der historisk set medfører en væsentlig forsinkelse, mens en ny test er udviklet og i sidste ende kræver en betydelig finansiel investering at gennemføre, når en test bliver tilgængelig. 7,8 Det kan også være et alternativ til overflødige sikkerhed measures, såsom bakteriel detektion 9 og gammastråling. 10-12 Derudover SKÆRING giver os mulighed for at behandle dobbelt dosis blodpladeenheder hvilket gavner vores produktionseffektivitet og hjælper os overholder vores budgetter. SKÆRING og dobbelt dosis buffy coat fremgangsmåde kan tilpasses til en række forskellige Blodbanks arbejdsgange. Som eksempler kan helblod samlinger øges til 500 ml, samlinger kan også opbevares natten over ved 22 ° C forud for adskillelse. Desuden er en alternativ fibrinlag pooling fremgangsmåde mulig (fx en blæksprutte fremgangsmåde i stedet for et tog metode) og / eller en automatisk anordning (f.eks TACSI) kan anvendes til den anden centrifugering og adskillelse af blodpladesuspension fra de resterende røde celler . Hvis øget blodplade indhold er nødvendig, flere teknikker er tilgængelige, herunder udvælgelse af donorer er baseret på trombocyttal, inkubation natten af ​​fuldblod, adjustment af centrifugering indstillinger eller anvende en pulje på 8 buffy coats i stedet for 7. På grund af begrænsningen af ​​pooling sætter i øjeblikket tilgængelig, og kapacitet centrifuge spande, bør det totale volumen af ​​det brungule lag pool være ca 600 ml. Den centrifugering proces og indstillinger er beskrevet i denne protokol er blevet optimeret til at give produkt, der opfylder skæringen parametre for en pulje på 7 buffy coats. Centrifugeringen indstillinger skal ændres, hvis antallet af fibrinlag i puljen ændres. I nogle lande er den mindste blodplade dosis højere og QC krav er strengere end i Sverige. Som sådan kan vores resultater ikke finder generel anvendelse. I disse lande vil den dobbelt dosis PC forud for INTERCEPT behandling behøver at indeholde et større antal blodplader for at opfylde lokale krav efter INTERCEPT behandling og split. Fordi den maksimale blodplade-indhold og behandlingsvolumenet for SKÆRING er 7x10 11 blodplader og 420 ml, vil den procentdel af enheder, der overstiger de INTERCEPT behandlingskrav eller har utilstrækkelig blodplade indhold, der skal deles i to terapeutiske doser, variere afhængigt af faktorer såsom lokale krav til blodplade dosis, QC kriterier, buffy coat optimering resultater, og produktionen stabilitet. Hvis en dobbelt dosis PC overstiger skæringen behandlingskrav, kan den indstilles manuelt at opfylde kravene og efterfølgende behandles. I de få tilfælde, hvor den 7-buffy coat pulje Udbytter utilstrækkelige blodplader for en dobbelt dosis produkt efter INTERCEPT, vælger vi ikke at udføre INTERCEPT behandling. Alternativt kan andre blodcentre vælger at behandle pc&#39;en med en enkelt dosis INTERCEPT forarbejdning sæt (dvs. den store mængde sæt) og gemme pc&#39;en som en enkelt større terapeutisk dosis, hvorved der udføres patogen inaktivering på alle enheder. For at sikre, at vi lever op til voresQC krav og patogen inaktivere så mange af vores blodplade enheder som muligt, vælger vi buffy coats på basis af donorens blodpladetal, som, når samlet, vil resultere i en minimal blodplade indhold af 5.6x10 11 blodplader i puljen. Dette sikrer tilstrækkelig blodplade indhold til at producere to terapeutiske doser efter INTERCEPT behandling. Vores validering viser, at 7 fuldblodsprøver afledte buffy coat-enheder med held kan samles og behandles med INTERCEPT proces for blodplader, hvilket resulterer i 2 patogen inaktiverede blodplade produkter, der opfylder kriterierne for godkendelse af fremstillingsvirksomhed (svenske krav og europæiske retningslinjer) og til støtte af patienter kræver blodpladetransfusioner i henhold til kliniske retningslinjer og standard blodplade infusion metoder i Sverige.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material / Equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Whole blood donation, primary separation, and platelet production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection pack</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>R6485</td>
			<td>Top/Bottom set</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated component extractor</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>Optipress-II</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood mixer and balance system</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>Easymix V3</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet leukocyte filtration set</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>K4R7042</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich</td>
			<td>Roto Silenta 63 RS</td>
			<td>Version 5.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet additive solution - SSP+</td>
			<td>MacoPharma</td>
			<td>SSP2030U</td>
			<td>300 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile tubing welder</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>T-SCD</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>INTERCEPT treatment &amp; storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INTERCEPT processing set</td>
			<td>Cerus</td>
			<td>INT2503</td>
			<td>Dual Storage (DS) set</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INTERCEPT Illuminator</td>
			<td>Cerus</td>
			<td>INT100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PC sample pack</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>FTX 1122</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Helmer</td>
			<td>PC2200/PC3200</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agitator</td>
			<td>Helmer</td>
			<td>PF48H/PF96H</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Evaluation of in vitro Platelet Function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood gas analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>ABL 735</td>
			<td>Used for pH, blood gases, and lactate measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemistry system</td>
			<td>Ortho Clinical Diagnostic</td>
			<td>Vitros 5.1</td>
			<td>Used for glucose measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematology analyzer</td>
			<td>Boule Medical AB</td>
			<td>Medonic CA620-Cellguard</td>
			<td>Used for platelet count measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td>FACSCanto</td>
			<td>Used for white blood cell measurement</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation and pathogen inactivation of double dose buffy coat platelet products using the intercept blood system

Blod centre står over for mange udfordringer, herunder at maksimere produktionen udbytte fra blodproduktet donationer de modtager, samt sikre den højest mulige grad af sikkerhed for transfusion patienter, herunder beskyttelse mod transfusion overførte sygdomme. Dette skal ske i et skattemæssigt ansvarlig måde, der minimerer driftsomkostninger, herunder hjælpematerialer, udstyr, affald og personaleomkostninger, blandt andre. Der findes flere metoder til fremstilling af blodpladekoncentrater for transfusion. En af de mest almindelige er buffy coat metode, hvor en enkelt terapeutisk blodplade enhed (≥ 2,0 x10 11 blodplader pr enhed eller pr lokale bestemmelser) fremstilles ved at samle fibrinlaget lag fra op til seks fuldblodsdonationer. En procedure til fremstilling af &quot;dobbelt dosis&quot; hele blodafledte blodplader er først for nylig blevet udviklet. Præsenteres her er en hidtil ukendt fremgangsmåde til fremstilling afdobbelt dosis fuldblod afledt blodpladekoncentrater fra puljer af 7 buffy coats og efterfølgende behandling af dobbelt dosis enheder med den INTERCEPT Blood System for patogener inaktivering. SKÆRING blev udviklet for at inaktivere vira, bakterier, parasitter og kontaminerende donor hvide celler, der kan være til stede i donorblod. Parring SKÆRING med dobbelt dosis buffy coat metode ved at udnytte den INTERCEPT Processing sæt med Dual Opbevaringskasser (&quot;DS set&quot;), giver blod centre til at behandle hver enkelt af deres dobbelt dosis enheder i en enkelt patogen inaktivering forarbejdning sæt, hvilket maksimerer patientsikkerhed og samtidig minimere omkostningerne. Den dobbelte dosis buffy coat metode kræver færre buffy coats og reducerer brugen af forbrugsvarer med op til 50% (f.eks pooling sæt, filter sæt, blodplade additiv opløsning og steril forbindelse vafler) i forhold til forberedelse og behandling af enkeltdosis buffy coat blodpladeenheder . Andre omkostningsbesparelser omfatter mindre affald, mindre udstyr vedligece, lavere krav til strøm, reduceret personale tid, og lavere opkrævningsomkostninger forhold til aferese teknik.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System at JoVE.com

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Denne artikel beskriver den proces, der anvendes af Örebro Universitetssygehus at producere dobbelt dosis buffy coat blodpladekoncentrater fremstillet ud fra fuldblodsdonationer og behandlet med den INTERCEPT Blood System for patogener inaktivering. Den<em&gt; In vitro</em&gt; Kvaliteten af ​​de endelige blodpladeenheder evalueres over 7 dages opbevaring.

Forberedelse og Pathogen Inaktivering af dobbelt dosis buffy coat Trombocyttal Produkter med INTERCEPT Blood System

Blood centers are faced with many challenges including maximizing production yield from the blood product donations they receive as well as ensuring the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Minimal Erythema Dose (MED) Testing

Minimal Erythema Dose MED Testing

Minimal Erythema Dose (MED) Test

Ultraviolet radiation (UV) therapy is  sometimes used as a treatment for various common skin conditions, including  psoriasis, acne, and eczema. The ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral karokklusion<em&gt; Via</em&gt; Dobbelt Ligature og transection

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the "RE:fine Drugs" System

Drug nyorientering Hypotese Generation Brug af &quot;RE: fine Drugs&quot; System

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The ...

Turbidimetry on Human Washed Platelets: The Effect of the Pannexin1-inhibitor Brilliant Blue FCF on Collagen-induced Aggregation

Turbidimetri on Human vaskede blodplader: Virkningen af ​​Pannexin1-inhibitoren Brilliant Blue FCF på Collagen-induceret aggregering

Turbidimetry is a laboratory technique that is applied to measure the aggregation of platelets suspended in either plasma (platelet-rich plasma, PRP) or ...

The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice

Pilocarpin Model af frontal-lap epilepsi og EEG overvågning ved hjælp af Radiotelemetry System i mus

Temporal lobe epilepsy (TLE) is a common neurological disorder in adulthood. For translational studies of chronic epilepsy, pilocarpine-induced status ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Rutine Screening metode for mikropartikler i trombocyttal transfusioner

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Forberedelse, procedurer og vurdering af trombocyt-Rich Plasma injektion til behandling af knæet Osteoarthritis

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

An In Vivo Method for Evaluating the Gut-Blood Barrier and Liver Metabolism of Microbiota Products

An In Vivo Method for Evaluating the Gut-Blood Barrier and Liver Metabolism of Microbiota Products

En In Vivo metode til evaluering af Gut-blod barriere og lever metabolisme af mikrobiota produkter

The gut-blood barrier (GBB) controls the passage of nutrients, bacterial metabolites and drugs from intestinal lumen to the bloodstream. The GBB integrity ...

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Trombocyt-baseret detektion af nitrogenoxid i blodet ved at måle VASP fosforylering

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

Facile Preparation and Photoactivation of Prodrug-Dye Nanoassemblies

Let forberedelse og fotoaktivering af prodrug-dye nanosamlinger

Self-assembly is a simple yet reliable method for constructing nanoscale drug delivery systems. Photoactivatable prodrugs enable controllable drug release ...