Name: treatment of osteochondral defects in the rabbit's knee joint by implantation of allogeneic mesenchymal stem cells in fibrin clots
Uploaded: 2013-05-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Treatment of Osteochondral Defects in the Rabbit's Knee Joint by Implantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells in Fibrin Clots at JoVE.com

Detta projekt har finansierats av det tyska Research Association (bidrag HE 4578/3-1) och delvis genom FP7 EU-projektet &quot;GAMBA&quot; NMP3-SL-2010 till 245.993.

A. Framställning av en donator Kanin för isolering av mesenkymala stamceller (Surgery Room) <ol><li> Celler isoleras från manliga Nya Zealand White (NZW) kaniner vid 4 månaders ålder och ca 3 kg kroppsvikt. </li><li> Inducera anestesi av propofol (10 mg / kg kroppsvikt iv) och offra med natriumpentobarbital (100 mg / kg kroppsvikt iv). </li><li> Raka päls från bakbenen, rygg och mage med en elektrisk klippmaskin och dammsuga pälsen. </li><li> Desinficera rakade området noggrant med 70% etanol. </li><li> Anvä...

<ol>
	<li>Kon, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+nano-composite+multilayered+biomaterial+for+osteochondral+regeneration:+a+pilot+clinical+trial.">Novel nano-composite multilayered biomaterial for osteochondral regeneration: a pilot clinical trial.</a> The American Journal of Sports Medicine. 39, 1180-1190 (2011).</li><li>Kon, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orderly+osteochondral+regeneration+in+a+sheep+model+using+a+novel+nano-composite+multilayered+biomaterial.">Orderly osteochondral regeneration in a sheep model using a novel nano-composite multilayered biomaterial.</a> Journal of Orthopaedic Research: Official Publication of the Orthopaedic Research Society. 28, 116-124 (2010).</li><li>Hangody, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+osteochondral+grafting--technique+and+long-term+results.">Autologous osteochondral grafting--technique and long-term results.</a> Injury. 39, 32-39 (2008).</li><li>Marcacci, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arthroscopic+autologous+osteochondral+grafting+for+cartilage+defects+of+the+knee:+prospective+study+results+at+a+minimum+7-year+follow-up.">Arthroscopic autologous osteochondral grafting for cartilage defects of the knee: prospective study results at a minimum 7-year follow-up.</a> The American Journal of Sports Medicine. 35, 2014-2021 (2007).</li><li>Ochs, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+of+articular+cartilage+and+subchondral+bone+after+bone+grafting+and+matrix-associated+autologous+chondrocyte+implantation+for+osteochondritis+dissecans+of+the+knee.">Remodeling of articular cartilage and subchondral bone after bone grafting and matrix-associated autologous chondrocyte implantation for osteochondritis dissecans of the knee.</a> The American Journal of Sports Medicine. 39, 764-773 (2011).</li><li>Aurich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+chondrocyte+transplantation+by+the+sandwich+technique.+A+salvage+procedure+for+osteochondritis+dissecans+of+the+knee.">Autologous chondrocyte transplantation by the sandwich technique. A salvage procedure for osteochondritis dissecans of the knee.</a> Unfallchirurg. 110, 176-179 (2007).</li><li>Williams, R. J., Ranawat, A. S., Potter, H. G., Carter, T., Warren, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fresh+stored+allografts+for+the+treatment+of+osteochondral+defects+of+the+knee.">Fresh stored allografts for the treatment of osteochondral defects of the knee.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. 89, 718-726 (2007).</li><li>Szerb, I., Hangody, L., Duska, Z., Kaposi, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaicplasty:+long-term+follow-up.">Mosaicplasty: long-term follow-up.</a> Bull. Hosp. Jt. Dis. 63, 54-62 (2005).</li><li>Brittberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+deep+cartilage+defects+in+the+knee+with+autologous+chondrocyte+transplantation.">Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 331, 889-895 (1994).</li><li>Peterson, L., Vasiliadis, H. S., Brittberg, M., Lindahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+chondrocyte+implantation:+a+long-term+follow-up.">Autologous chondrocyte implantation: a long-term follow-up.</a> Am. J. Sports Med. 38, 1117-1124 (2010).</li><li>Gomoll, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+subchondral+bone+in+articular+cartilage+repair:+current+problems+in+the+surgical+management.">The subchondral bone in articular cartilage repair: current problems in the surgical management.</a> Knee Surg. Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 434-447 (2010).</li><li>Steinhagen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+osteochondritis+dissecans+of+the+femoral+condyle+with+autologous+bone+grafts+and+matrix-supported+autologous+chondrocytes.">Treatment of osteochondritis dissecans of the femoral condyle with autologous bone grafts and matrix-supported autologous chondrocytes.</a> Int. Orthop. 34, 819-825 (2010).</li><li>Guo, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+large+articular+cartilage+defects+with+implants+of+autologous+mesenchymal+stem+cells+seeded+into+beta-tricalcium+phosphate+in+a+sheep+model.">Repair of large articular cartilage defects with implants of autologous mesenchymal stem cells seeded into beta-tricalcium phosphate in a sheep model.</a> Tissue Eng. 10, 1818-1829 (2004).</li><li>Centeno, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+knee+cartilage+volume+in+degenerative+joint+disease+using+percutaneously+implanted,+autologous+mesenchymal+stem+cells.">Increased knee cartilage volume in degenerative joint disease using percutaneously implanted, autologous mesenchymal stem cells.</a> Pain Physician. 11, 343-353 (2008).</li><li>Niederauer, G. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+multiphase+implants+for+repair+of+focal+osteochondral+defects+in+goats.">Evaluation of multiphase implants for repair of focal osteochondral defects in goats.</a> Biomaterials. 21, 2561-2574 (2000).</li><li>Nagura, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+of+osteochondral+defects+with+a+new+porous+synthetic+polymer+scaffold.">Repair of osteochondral defects with a new porous synthetic polymer scaffold.</a> J. Bone. Joint Surg. Br. 89, 258-264 (2007).</li><li>Schlichting, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+scaffold+stiffness+on+subchondral+bone+and+subsequent+cartilage+regeneration+in+an+ovine+model+of+osteochondral+defect+healing.">Influence of scaffold stiffness on subchondral bone and subsequent cartilage regeneration in an ovine model of osteochondral defect healing.</a> The American Journal of Sports Medicine. 36, 2379-2391 (2008).</li><li>Schagemann, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-laden+and+cell-free+biopolymer+hydrogel+for+the+treatment+of+osteochondral+defects+in+a+sheep+model.">Cell-laden and cell-free biopolymer hydrogel for the treatment of osteochondral defects in a sheep model.</a> Tissue Engineering. Part A. 15, 75-82 (2009).</li><li>Vogt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+the+stable+expression+of+BMP2+in+fibrin+clots+on+the+remodelling+and+repair+of+osteochondral+defects.">The influence of the stable expression of BMP2 in fibrin clots on the remodelling and repair of osteochondral defects.</a> Biomaterials. 30, 2385-2392 (2009).</li><li>Schillinger, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+fibrin+glue+composition+as+carrier+for+nucleic+acid+vectors.">A fibrin glue composition as carrier for nucleic acid vectors.</a> Pharm. Res. 25, 2946-2962 (2008).</li><li>Ahmed, T. A., Giulivi, A., Griffith, M., Hincke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+glues+in+combination+with+mesenchymal+stem+cells+to+develop+a+tissue-engineered+cartilage+substitute.">Fibrin glues in combination with mesenchymal stem cells to develop a tissue-engineered cartilage substitute.</a> Tissue Engineering. Part A. 17, 323-335 (2011).</li><li>Haleem, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Clinical+Use+of+Human+Culture-Expanded+Autologous+Bone+Marrow+Mesenchymal+Stem+Cells+Transplanted+on+Platelet-Rich+Fibrin+Glue+in+the+Treatment+of+Articular+Cartilage+Defects:+A+Pilot+Study+and+Preliminary+Results.">The Clinical Use of Human Culture-Expanded Autologous Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Transplanted on Platelet-Rich Fibrin Glue in the Treatment of Articular Cartilage Defects: A Pilot Study and Preliminary Results.</a> Cartilage. 1, 253-261 (2010).</li><li>Pape, D., Filardo, G., Kon, E., van Dijk, C. N., Madry, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disease-specific+clinical+problems+associated+with+the+subchondral+bone.">Disease-specific clinical problems associated with the subchondral bone.</a> Knee Surg Sports Traumatol. Arthrosc. 18, 448-462 (2010).</li><li>Shirazi, R., Shirazi-Adl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+biomechanics+of+articular+cartilage+of+human+knee+joint:+effect+of+osteochondral+defects.">Computational biomechanics of articular cartilage of human knee joint: effect of osteochondral defects.</a> Journal of Biomechanics. 42, 2458-2465 (2009).</li><li>Jorgensen, C., Gordeladze, J., Noel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering+through+autologous+mesenchymal+stem+cells.">Tissue Engineering through autologous mesenchymal stem cells.</a> Curr. Opin. Biotechnol. 15, 406-410 (2004).</li><li>Chen, F. H., Tuan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+in+arthritic+diseases.">Mesenchymal stem cells in arthritic diseases.</a> Arthritis Res. Ther. 10, 223 (2008).</li><li>Le Blanc, K., Tammik, C., Rosendahl, K., Zetterberg, E., Ringden, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HLA+expression+and+immunologic+properties+of+differentiated+and+undifferentiated+mesenchymal+stem+cells.">HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells.</a> Exp. Hematol. 31, 890-896 (2003).</li></ol>

Under senare år har möjligheten att behandla komplexa artikulära osteokondrala defekter - blev med metoder Vävnadsteknik mer och mer attraktiv - såsom sådana som härrör från osteochondritis dissecans, osteonekros och trauma. I de tidigare nämnda patologiska enheter, sträcker vävnadsskador till det subkondrala benet och som omfattar två vävnader kännetecknas av olika inneboende helande kapacitet 1. Det finns ett ökande intresse för rollen som subkondralt ben för patogena processer osteokondra...

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of reagent/equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>F 0415</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FCS</td>
			<td>PAN Biotech GmbH</td>
			<td>0401</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>A 2210</td>
			<td>1,000 units/10 &mu;g/&mu;l in 0.9% NaCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS Dulbecco (1X)</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>L1815</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (70%)</td>
			<td>Merck KGaA</td>
			<td>410230</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Solution (0.4%)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8154</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biocoll Separation Sol.</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>L6115</td>
			<td>Isotonic solution Density: 1,077 g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA 0.05%</td>
			<td>Invitrogen GmbH</td>
			<td>25300-054</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl</td>
			<td>DeltaSelectGmBH</td>
			<td>1819340</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl solution (0.9%)</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>8333A193</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes (Injekt)</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>4606108V</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles (Sterican)</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>4657519</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (blunt/sharp)</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpels</td>
			<td>Feather Safety Razor Co</td>
			<td>02.001.30.022</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes research</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone Cutter</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes 100 mm/150 mm</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>93100/93150</td>
			<td>Growth area 60.1 mm2/147.8 mm2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture flasks 25/75 mm2</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>90025/90075</td>
			<td>25 mm2, 75 mm2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tubes (50 ml)</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>91050</td>
			<td>Gamma-sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td>Forma Scientific Inc.</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture laminar flow hood Hera Safe</td>
			<td>Heraeus Instruments</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saw</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Megafuge 2.0 R</td>
			<td>Heraeus Instruments</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>Brand GmbH+Co KG</td>
			<td>717810</td>
			<td>Neubauer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air operated power drill</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TISSUCOL-Kit 1.0 ml Immuno</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2546648</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibers (4-0 Monocryl, 4-0 Vicryl)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray dressing (OpSite)</td>
			<td>Smith&amp;Nephew</td>
			<td>66004978</td>
			<td>Permeable for water vapor</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

treatment of osteochondral defects in the rabbit's knee joint by implantation of allogeneic mesenchymal stem cells in fibrin clots

Behandlingen av osteokondrala artikulära defekter har varit utmanande läkare i många år. Den bättre förståelse av samspelet mellan ledbrosk och subkondralt ben under de senaste åren lett till ökad uppmärksamhet på restaurering av hela osteokondral enheten. I jämförelse med chondral lesioner regenerering av osteokondrala defekter är mycket mer komplex och en mycket större kirurgiska och terapeutiska utmaning. Den skadade vävnaden innehåller inte bara den ytliga broskskiktet men också det subkondrala benet. För djup, osteochondral skador, eftersom det förekommer till exempel med osteochondrosis dissecans måste hela tjockleken av defekten som skall ersättas för att återställa ledytan 1. Berättigade terapeutiska procedurer måste överväga dessa två olika vävnader med sina olika inneboende läkande potential 2. Under de senaste decennierna har flera kirurgiska behandlingsalternativ vuxit fram och har redan blivit kliniskt etablerad 3 -6. Autologa eller allogena osteokondrala transplantat består av artikulär brosk och subkondralt ben och tillåta utbyte av hela osteokondral enheten. De brister är fyllda med cylindriska osteokondrala transplantat som syftar till att ge en kongruent hyalinbrosk täckt yta 3,7,8. Nackdelar är den begränsade mängden tillgängliga transplantat, tagstället sjuklighet (för autologa transplantationer) och incongruence av ytan, varigenom tillämpningen av denna metod är särskilt begränsad för stora defekter. Nya metoder inom området tissue engineering öppnat lovande möjligheter för regenerativ osteokondral terapi. Implantation av autologa kondrocyter markerade den första cellen baserad biologisk metod för behandling av full tjocklek broskskador och är nu världsomfattande etablerad med goda kliniska resultat och med 10 till 20 år efter implantation 9,10. Men för att date, är denna teknik inte lämplig för behandling av alla typer av lesioner som djupa defekter involverar det subkondrala benet 11. Den sandwich-tekniken kombinerar ben ympning med nuvarande metoder i Tissue Engineering 5,6. Denna kombination verkar kunna övervinna de begränsningar som ses i osteokondrala transplantat ensam. Efter autolog bentransplantation till det subkondrala defekta området, är ett membran ympas med autologa kondrocyter sutureras ovan och underlättar att motsvarar topologin av transplantatet med det skadade stället. Naturligtvis måste den föregående benrekonstruktion ytterligare kirurgisk tid och ofta till och med en ytterligare operation. Dessutom, hittills, är långsiktiga data saknas 12. Tissue Engineering utan ytterligare bentransplantation syftar till att återställa den komplexa strukturen och egenskaperna hos nativt ledbrosk genom kondrogen och osteogena potentialen hos de transplanterade cellerna. HoweveR, återigen, är det oftast bara broskvävnaden som är mer eller mindre regenereras. Ytterligare osteokondral skada behöver en viss ytterligare behandling. För att uppnå en regenerering av den flerskiktade strukturen av osteokondrala defekter, tredimensionella vävnadstekniska produkterna ympade med autologa / allogena celler kan ge en god regenereringskapacitet 11. Bredvid autologa kondrocyter, mesenkymala stamceller (MSC) verkar vara ett attraktivt alternativ för utvecklingen av en full tjocklek broskvävnad. I många prekliniska in vitro och in vivo studier har mesenkymala stamceller visade god potential vävnadsregenerering 13,14. Den viktiga fördelen av mesenkymala stamceller särskilt för behandling av osteokondrala defekter är att de har förmåga att differentieras i osteocyter samt kondrocyter. Därför, de tillåter potentiellt en flerskiktad regenerering av defect. Under senare år har flera ställningar med osteochondral regenerativ potential därför utvecklats och utvärderats med lovande preliminära resultat 1,15-18. Dessutom blev fibrinlim som en cell bärare en av de föredragna tekniker i experimentell broskreparation och har redan med framgång använts i flera djurstudier 19-21 och även första försök på människor 22. Följande protokoll kommer att visa en experimentell teknik för isolering av mesenkymala stamceller från en kanin benmärg, för efterföljande proliferation i cellkultur och för framställning av ett standardiserat in vitro-modell för fibrin-cell-blodproppar. Slutligen kommer en teknik för implantering av på förhand fastställda fibrin-cell-koaguleringar i artificiella osteokondrala defekter i kaninens knäleden att beskrivas.

Den beskrivna kirurgiska tekniken tillåter en lyckad isolering och implantation av allogena mesenkymala stamceller till en konstgjord osteokondral defekt. Den experimentuppställning resulterade i en framgångsrik integration av implantatet i den omgivande brosk. Defekten fylldes genom reparation vävnad med liknande biomekaniska egenskaper och liknande hållbarhet jämfört med omgivande brosk. Den fibrin-cell-propp framställdes in vitro på en steril platta med förborrade hål,...

Watch this Scientific Journal Video about Treatment of Osteochondral Defects in the Rabbit's Knee Joint by Implantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells in Fibrin Clots at JoVE.com

Treatment of Osteochondral Defects in the Rabbit's Knee Joint by Implantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells in Fibrin Clots

En experimentell teknik för behandling av osteokondrala defekter i kaninens knäleden beskrivs. Den implantering av allogena mesenkyma stamceller till osteokondrala defekter ger en lovande utveckling inom området för vävnadsteknik. Framställningen av fibrin-cell-blodproppar<em&gt; In vitro</em&gt; Erbjuder en standardiserad metod för implantation.

Behandling av osteokondrala Defekter i Rabbit knäled med implantation av allogena mesenkymala stamceller i fibrinproppar

The treatment of osteochondral articular defects has been challenging physicians for many years. The better understanding of interactions of articular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolering, karakterisering och jämförande differentiering av mänskliga Dental celler Pulp Stem Härstammar från permanenta tänder med hjälp av två olika metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

Långsam frisättning Drug Delivery genom Elvax 40W till Rat Retina: Konsekvenser för behandling av kroniska sjukdomar

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Implantation of Fibrin Gel on Mouse Lung to Study Lung-specific Angiogenesis

Implantation av fibringel på Mus Lung att studera Lung specifika angiogenes

Recent significant advances in stem cell research and bioengineering techniques have made great progress in utilizing biomaterials to regenerate and ...

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In vivo Imaging och spårning av teknetium-99m märkt benmärg mesenkymala stamceller i Equine tendinopati

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studera bukspottkörtelcancer Stem Cell egenskaper för att utveckla nya behandlingsstrategier

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Snabb och effektiv generering av rekombinant human pluripotenta stamceller genom Recombinase-medierad kassett Exchange i<em&gt; AAVS1</em&gt; Locus

Even with the revolution of gene-targeting technologies led by CRISPR-Cas9, genetic modification of human pluripotent stem cells&#160;(hPSCs)&#160;is ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Network Analys av foramen ovale Elektrodrecordings i Läkemedelsresistenta Temporallobsepilepsi Patienter

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Förberedelse, förfaranden och utvärdering av Platelet-Rich Plasma injektion vid behandling av knä artros

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

Using a Knee Arthrometer to Evaluate Tissue-specific Contributions to Knee Flexion Contracture in the Rat

Använda en knä Arthrometer att utvärdera vävnadsspecifika bidrag till knä flexionskontraktur hos råtta

Normal knee range of motion (ROM) is critical to well-being and allows one to perform basic activities such as walking, climbing stairs and sitting. Lost ...

Isolation and Cultivation of Mandibular Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Rats

Isolering och odling av mandibulära benmärgsmjukelsemjukelsestamceller hos råttor

Here we present an efficient method for isolating and culturing mandibular bone marrow mesenchymal stem cells (mBMSCs) in vitro to rapidly obtain numerous ...