Name: in vivo imaging systems (ivis) detection of a neuro-invasive encephalitic virus
Uploaded: 2012-12-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging Systems IVIS Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus at JoVE.com

מכון לTranslational UTMB-NIH מענק מדעי 1UL1RR029876-01 ואלישה פריית&#39;ר על סיועה בעריכת וידאו לכתב היד הזה.

1. הכנת בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגעת בעלי חיים: עם ההגעה לרמת הבטיחות הביולוגית חית 2 (ABSL2) מתקנים, לאפשר חי מינימום של 2 ימים להסתגל לסביבתם החדשה. לאחר תקופת המנוחה הזו, לבדוק את בעלי החיים כדי להעריך את בריאותם ומראה החיצוני באופן כל?...

<ol>
	<li>Steele, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Neurovirulence+and+Tissue+Tropism+of+Wild-type+and+Attenuated+Strains+of+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+Administered+by+Aerosol+in+C3H/HeN+and+BALB/c+Mice.">Comparative Neurovirulence and Tissue Tropism of Wild-type and Attenuated Strains of Venezuelan Equine Encephalitis Virus Administered by Aerosol in C3H/HeN and BALB/c Mice.</a> Veterinary Pathology Online. 35, 386-397 (1998).</li><li>Ludwig, G. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+neurovirulence+of+attenuated+and+non-attenuated+strains+of+Venezuelan+equine+encephalitis+virus+in+mice.">Comparative neurovirulence of attenuated and non-attenuated strains of Venezuelan equine encephalitis virus in mice.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 64, 49-55 (2001).</li><li>Charles, P. C., Walters, E., Margolis, F., Johnston, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Neuroinvasion+of+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+in+the+Mouse.">Mechanism of Neuroinvasion of Venezuelan Equine Encephalitis Virus in the Mouse.</a> Virology. , 208-662 (1995).</li><li>Volkova, E., Gorchakov, R., Frolov, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficient+packaging+of+Venezuelan+equine+encephalitis+virus-specific+RNAs+into+viral+particles+is+determined+by+nsP1-3+synthesis.">The efficient packaging of Venezuelan equine encephalitis virus-specific RNAs into viral particles is determined by nsP1-3 synthesis.</a> Virology. 344, 315-327 (2006).</li><li>Patterson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+non-invasive+imaging+of+alphaviral+brain+infection:+Reducing+animal+numbers+and+morbidity+to+identify+efficacy+of+potential+vaccines+and+antivirals.">Rapid, non-invasive imaging of alphaviral brain infection: Reducing animal numbers and morbidity to identify efficacy of potential vaccines and antivirals.</a> Vaccine. 29, 9345-9351 (2011).</li><li>Cook, S. H., Griffin, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+Imaging+of+a+Neurotropic+Viral+Infection+in+Intact+Animals.">Luciferase Imaging of a Neurotropic Viral Infection in Intact Animals.</a> J. Virol. 77, 5333-5338 (2003).</li><li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+indicators+in+living+mammals.">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nat. Med. 4, 245-247 (1998).</li><li>Osorio, J. E., Iams, K. P., Meteyer, C. U., Rocke, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Monkeypox+Viruses+Pathogenesis+in+Mice+by+In+Vivo+Imaging.">Comparison of Monkeypox Viruses Pathogenesis in Mice by In Vivo Imaging.</a> PLoS ONE. 4, e6592 (2009).</li><li>Luker, G. D., Prior, J. L., Song, J., Pica, C. M., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+Imaging+Reveals+Systemic+Dissemination+of+Herpes+Simplex+Virus+Type+1+in+the+Absence+of+Interferon+Receptors.">Bioluminescence Imaging Reveals Systemic Dissemination of Herpes Simplex Virus Type 1 in the Absence of Interferon Receptors.</a> J. Virol. 77, 11082-11093 (2003).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).</li><li>Kuehne, R. W., Pannier, W. L., Stephen, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+mouse+model+for+the+evaluation+of+potential+antiviral+compounds:+results+with+Venezuelan+equine+encephalomyelitis+virus.">Indirect mouse model for the evaluation of potential antiviral compounds: results with Venezuelan equine encephalomyelitis virus.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 11, (1977).</li><li>Lukaszewski, R. A., Brooks, T. J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pegylated+Alpha+Interferon+Is+an+Effective+Treatment+for+Virulent+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+and+Has+Profound+Effects+on+the+Host+Immune+Response+to+Infection.">Pegylated Alpha Interferon Is an Effective Treatment for Virulent Venezuelan Equine Encephalitis Virus and Has Profound Effects on the Host Immune Response to Infection.</a> J. Virol. 74, 5006-5015 (2000).</li></ol>

בעוד פרוטוקול זה מכסה את היבטי ההדמיה לניתוח בvivo, חשוב להכיר את וקטור bioluminescent כגורם מרכזי למחקרים עתידיים. הניצול שלנו של TC83, של חיסון מוחלש של VEEV, כוקטור לביטוי של לוציפראז מבטיח שכמויות גדולות של האנזים שתופקנה, בשל השיעור הגבוה של שכפול הנגיף במערכת עצבים מרכז...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> D-luciferin </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Xenogen IVIS מערכת (ספקטרום) </td><td> Caliper מדעי חיים </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מערכת ההרדמה XGI-8-גז </td><td> Caliper מדעי חיים </td><td></td><td></td></tr><tr><td> תיבת הבלימה XIC-3 </td><td> Caliper מדעי חיים </td><td></td><td></td></tr><tr><td> LivingImage 4.0 תוכנה </td><td> Caliper מדעי חיים </td><td></td><td></td></tr><tr><td> שבבי טלמטריה / זיהוי </td><td> ביו מדיק מערכות מידע </td><td> IPTT-300 </td><td> זיהוי בעלי חיים ומזגשבמקום </td></tr><tr><td> מזרק BD Integra 1ml TB עם GX מחט 26 3/8 &quot; </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 305279 </td><td></td></tr><tr><td> דבק רקמות ונד וטרינר </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> NC9259532 </td><td></td></tr><tr><td> משחה לרפואת עיני Vetropolycin </td><td> מוצרי וובסטר הווטרינריים </td><td> 78444656 </td><td></td></tr><tr><td> פוספט של Dulbecco נאגר מלוח 1X </td><td> Invitrogen </td><td> 14190-144 </td><td></td></tr><tr><td> BMDS צ&#39;יפ קורא </td><td> ביו מדיק מערכות מידע </td><td> DAS-7007S </td><td></td></tr><tr><td> תוכנת DAS-HOST </td><td> ביו מדיק מערכות מידע </td><td></td><td> משמש להורדת מידע חללית </td></tr></tbody></table>

in vivo imaging systems (ivis) detection of a neuro-invasive encephalitic virus

פיתוחים מודרניים בטכנולוגיית הדמיה לעודד פיתוח וחידוד נוסף בדרך המחקר נגיפי נעשה. הוצע בתחילה על ידי ראסל ורץ&#39; ב3Rs של יום (החלפה, הפחתה, עידון), ניצול מודלים של בעלי החיים במחקר מדעי הוא תחת לחץ מתמיד לזהות מתודולוגיות חדשות כדי לצמצם את שימוש בעלי חיים תוך שיפור דיוק ומהירות מדעי. אתגר גדול למנהלים של יום לעומת זאת, הוא כיצד להבטיח את המחקרים סטטיסטיים מדויקים תוך הפחתת תחלואת מחלות בעלי חיים ומספרים באופן כללי. מחקרי יעילות חיסון כעת דורשים מספר רב של בעלי חיים כדי להיחשב משמעותי מבחינה סטטיסטית, ולעתים קרובות לגרום לתחלואה גבוהה ותמותת נקודתי קצה עבור זיהוי של הגנה חיסונית. אנו מנוצלים in vivo מערכות הדמיה (IVIS) בשיתוף עם אנזים bioluminescent גחלילית בהדרגה כדי לעקוב אחר הפלישה של מערכת העצבים המרכזית (CNS) על ידי enceוירוס phalitic במודל עכברי. בדרך כלל, המחלה מתקדמת לאט יחסית, עם זאת שכפול נגיף הוא מהיר, במיוחד בתוך מערכת העצבים מרכזיים, והוא יכול להוביל לעתים קרובות תוצאה, קטלנית. בעקבות זיהום אפי של העכברים עם TC83 לוק, זן נחלש ונצואלה סוסי דלקת מוח וירוס שונה למבטא גן לוציפראז; אנו מסוגלים לדמיין שכפול נגיף בתוך המוח לפחות שלושה ימים לפני התפתחות תסמיני מחלה קליניות. ניצול פלישת CNS כנקודת סיום מפתח אנצפליטי מחלת פיתוח אנו מסוגלים לזהות הגנת חיסון הטיפולי ובמהירות נגד זיהום TC83 לוק לפני שתסמינים קליניים להתפתח. בעזרת טכנולוגית IVIS אנו מסוגלים להדגים את הבדיקה המהירה ומדויקת של סמים ותרופות וחיסונים, תוך צמצום מספר בעלי חיים ותחלואה.

בוירוס מהונדס גנטי, TC83-לוציפראז, ראה עלייה בעוצמת אות bioluminescent כשכפול הנגיף עובר מאזור האף אל מערכת העצבים מרכזיים המרכזי (איור 1). עקב קצב השכפול הנגיפי הגבוה, אנו מצפים לראות רמות גבוהות של אות bioluminescent (איור 2 א) תלויות על הווקטור ואת התגובה החיסונית ?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging Systems IVIS Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus at JoVE.com

In Vivo Imaging Systems IVIS Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

שימוש בלוציפראז ובמערכות הדמית vivo (IVIS) כרומן האמצעי לזיהוי נקודתי קצה מחלה לפני התפתחויות קליניות להתרחש. IVIS אפשר לנו לחזות בזמן אמתו את הפלישה של וירוסי אנצפליטיים מעל ימים מרובים, מתן מודל מחלה מדויקת יותר למחקר עתידי. זה גם אפשר לנו לזהות את התכונות המגנות הפוטנציאליות של תרופות אנטי וחיסונים מהר יותר ממודלים של בעלי חיים מנוצלים כיום. היכולת לנצל חיות בודדות מעל נקודתי זמן מרובות מבטיחה דרישות מופחתות בבעלי חיים, עלויות ותחלואה הכוללת לבעלי החיים מנוצלים להבטיח אמצעי הומני יותר ויותר מדעי של מחקר מחלה.

איתור vivo מערכות הדמיה (IVIS) של וירוס אנצפליטים נוירו פולשנית

Modern advancements in imaging technology encourage further development and refinement in the way viral research is accomplished. Initially proposed by ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vivo Imaging Systems (IVIS) Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

בתחום ההדמיה vivo של טפילים טראנסגנטי שושנת יריחו שורה חיים

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

לא פולשני הדמיה של ביות ליקוציט והגירה In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Estimating Virus Production Rates in Aquatic Systems

הערכת הפקה חליפין וירוס במערכות Aquatic

Viruses are pervasive components of marine and freshwater systems, and are known to be significant agents of microbial mortality. Developing quantitative ...

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

באמצעות הדמיה Bioluminescent לחקור סינרגיזם בין Streptococcus pneumoniae ו שפעת וירוס עכברים תינוקות

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

לדמיין וירוס דנגה דרך אלקסה פלואוריד תיוג

The early events in the interaction between virus and cell can have profound influence on the outcome of infection. Determining the factors 
that ...

High-throughput Detection Method for Influenza Virus

תפוקה גבוהה איתור שיטת וירוס השפעת

Influenza virus is a respiratory pathogen that causes a high degree of morbidity and mortality every year in multiple parts of the world. Therefore, ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

הדמיה בקטריאלי bioluminescent<em&gt; In Vivo</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Nasal Wipes for Influenza A Virus Detection and Isolation from Swine

האף מגבונים לשפעת זיהוי וירוסים ובידוד מחזירים

Surveillance for influenza A viruses in swine is critical to human and animal health because influenza A virus rapidly evolves in swine populations and ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

בידוד נויטרופילים וניתוח כדי לקבוע את תפקידם רגישות תאים לימפומה לסוכנים טיפוליים

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Detection and Removal of Nuclease Contamination During Purification of Recombinant Prototype Foamy Virus Integrase

האיתור וההסרה של נוקלאז זיהום במהלך טיהור של אב טיפוס רקומביננטי קצפית וירוס Integrase

The integrase (IN) protein of the retrovirus prototype foamy virus (PFV) is a model enzyme for studying the mechanism of retroviral integration. Compared ...