Name: in vivo imaging systems (ivis) detection of a neuro-invasive encephalitic virus
Uploaded: 2012-12-02T14:00:00
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이 원고에 대한 비디오 편집과 그녀의 도움 병진 과학 UTMB-NIH 보조금 1UL1RR029876-01과 Alisha 프레이 연구소.

1. 동물 준비 <ol><li> 동물 도착 : 동물 바이오 안전성 수준 2 (ABSL2) 시설에 도착시, 동물에게 그들의 새로운 환경에 적응하기 위해 이일을 최소 할 수 있습니다. 이 휴식 기간 후, 자신의 건강 및 전반적인 신체적 인 외모를 평가하기 위해 동물을 검사한다. <ol><li> 형광 기자를 활용하면은 GI의 autofluorescence 및 배경 신호의 양을 제한하는 알팔파 무료로 다이어트의 모든 동물 과목을 배치하는 것이 중...

<ol>
	<li>Steele, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Neurovirulence+and+Tissue+Tropism+of+Wild-type+and+Attenuated+Strains+of+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+Administered+by+Aerosol+in+C3H/HeN+and+BALB/c+Mice.">Comparative Neurovirulence and Tissue Tropism of Wild-type and Attenuated Strains of Venezuelan Equine Encephalitis Virus Administered by Aerosol in C3H/HeN and BALB/c Mice.</a> Veterinary Pathology Online. 35, 386-397 (1998).</li><li>Ludwig, G. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+neurovirulence+of+attenuated+and+non-attenuated+strains+of+Venezuelan+equine+encephalitis+virus+in+mice.">Comparative neurovirulence of attenuated and non-attenuated strains of Venezuelan equine encephalitis virus in mice.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 64, 49-55 (2001).</li><li>Charles, P. C., Walters, E., Margolis, F., Johnston, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Neuroinvasion+of+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+in+the+Mouse.">Mechanism of Neuroinvasion of Venezuelan Equine Encephalitis Virus in the Mouse.</a> Virology. , 208-662 (1995).</li><li>Volkova, E., Gorchakov, R., Frolov, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficient+packaging+of+Venezuelan+equine+encephalitis+virus-specific+RNAs+into+viral+particles+is+determined+by+nsP1-3+synthesis.">The efficient packaging of Venezuelan equine encephalitis virus-specific RNAs into viral particles is determined by nsP1-3 synthesis.</a> Virology. 344, 315-327 (2006).</li><li>Patterson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+non-invasive+imaging+of+alphaviral+brain+infection:+Reducing+animal+numbers+and+morbidity+to+identify+efficacy+of+potential+vaccines+and+antivirals.">Rapid, non-invasive imaging of alphaviral brain infection: Reducing animal numbers and morbidity to identify efficacy of potential vaccines and antivirals.</a> Vaccine. 29, 9345-9351 (2011).</li><li>Cook, S. H., Griffin, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+Imaging+of+a+Neurotropic+Viral+Infection+in+Intact+Animals.">Luciferase Imaging of a Neurotropic Viral Infection in Intact Animals.</a> J. Virol. 77, 5333-5338 (2003).</li><li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+indicators+in+living+mammals.">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nat. Med. 4, 245-247 (1998).</li><li>Osorio, J. E., Iams, K. P., Meteyer, C. U., Rocke, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Monkeypox+Viruses+Pathogenesis+in+Mice+by+In+Vivo+Imaging.">Comparison of Monkeypox Viruses Pathogenesis in Mice by In Vivo Imaging.</a> PLoS ONE. 4, e6592 (2009).</li><li>Luker, G. D., Prior, J. L., Song, J., Pica, C. M., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+Imaging+Reveals+Systemic+Dissemination+of+Herpes+Simplex+Virus+Type+1+in+the+Absence+of+Interferon+Receptors.">Bioluminescence Imaging Reveals Systemic Dissemination of Herpes Simplex Virus Type 1 in the Absence of Interferon Receptors.</a> J. Virol. 77, 11082-11093 (2003).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).</li><li>Kuehne, R. W., Pannier, W. L., Stephen, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indirect+mouse+model+for+the+evaluation+of+potential+antiviral+compounds:+results+with+Venezuelan+equine+encephalomyelitis+virus.">Indirect mouse model for the evaluation of potential antiviral compounds: results with Venezuelan equine encephalomyelitis virus.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 11, (1977).</li><li>Lukaszewski, R. A., Brooks, T. J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pegylated+Alpha+Interferon+Is+an+Effective+Treatment+for+Virulent+Venezuelan+Equine+Encephalitis+Virus+and+Has+Profound+Effects+on+the+Host+Immune+Response+to+Infection.">Pegylated Alpha Interferon Is an Effective Treatment for Virulent Venezuelan Equine Encephalitis Virus and Has Profound Effects on the Host Immune Response to Infection.</a> J. Virol. 74, 5006-5015 (2000).</li></ol>

이 프로토콜은 생체 분석을위한 이미징 측면을 다루고 있지만, 향후 연구를위한 중요한 요소로 발광 생물 벡터를 인식하는 것이 중요합니다. 루시 페라 제 표현을위한 벡터로 TC83 우리의 활용, VEEV의 감쇠 백신 변형은 효소의 대량는 이전 1-4에 설명 된대로 CNS에서 바이러스의 높은 복제 속도로 인해 생산되고 있다는 보장합니다. 재조합 바이러스의 추가 감쇠에 두 번째 subgenomic 발?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> D-Luciferin </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Xenogen IVIS 시스템 (스펙트럼) </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> XGI-8-가스 마취 시스템 </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> XIC-3 억압 박스 </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> LivingImage 4.0 소프트웨어 </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 원격 / 식별 칩 </td><td> 바이오 의사 데이터 시스템 </td><td> IPTT-300 </td><td> 동물 ID 및 성격ature </td></tr><tr><td> 26 GX 3 / 8 &quot;바늘로 BD Integra 1ml TB의 주사기 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 305279 </td><td></td></tr><tr><td> 수의사 본드 조직 접착제 </td><td> 피셔 과학 </td><td> NC9259532 </td><td></td></tr><tr><td> Vetropolycin의 안과 연고 </td><td> 웹스터 동물 제품 </td><td> 78444656 </td><td></td></tr><tr><td> Dulbecco의 인산이 식염 1X 버퍼 </td><td> Invitrogen </td><td> 14190-144 </td><td></td></tr><tr><td> BMDS 칩 리더 </td><td> 바이오 의사 데이터 시스템 </td><td> DAS-7007S </td><td></td></tr><tr><td> DAS-HOST 소프트웨어 </td><td> 바이오 의사 데이터 시스템 </td><td></td><td> 프로브 정보를 다운로드하는 데 사용 </td></tr></tbody></table>

in vivo imaging systems (ivis) detection of a neuro-invasive encephalitic virus

영상 기술의 현대적인 발전은 바이러스 성 연구가 수행되는 방식으로 발전하고 상세 검색을 권장합니다. 처음 흄의 3Rs에 Russel과 버치 제안한 (교체, 감소, 정제), 과학 연구에서 동물 모델의 활용은 과학 정확성과 속도를 향상하면서 동물 사용을 줄이기 위해 새로운 방법론을 식별 할 수 지속적인 압력을 받고 있습니다. 흄의 원칙에 대한 주요 도전하지만, 동물 질병 병적 상태와 전체 숫자를 줄이는 한편 연구 통계적으로 정확하도록하는 방법입니다. 백신 효능 연구는 현재 통계적으로 유의미한 것으로 간주하기 위해 동물의 다수를 필요로 종종 면역 보호의 식별을위한 높은 병적 상태와 사망률의 끝점하는 결과를 가져올 수도 있습니다. 우리는 점점 줬어에 의해 중추 신경계 (CNS)의 침략을 추적 할 반딧불 발광 생물 효소와 함께 생체 이미징 시스템 (IVIS)에 활용손쥐 모델의 phalitic 바이러스. 일반적으로,이 병은 비교적 천천히 진행하지만 바이러스 복제는 특히 CNS 내에서 빠른 속도이며, 종종 치명적인 결과로 이어질 수 있습니다. TC83 룩과 마우스의 비강 감염 후, 감쇠 베네수엘라 말 뇌염 바이러스 변종이 루시 페라 제 유전자를 표현하도록 수정, 우리는 최소 3 일전에 임상 질병의 증상을 개발하기 전에 뇌에서 바이러스 복제를 시각화 할 수 있습니다. 우리는 임상 증상이 개발되기 전에 신속하게 TC83 룩 감염에 대한 치료 및 백신 보호 기능을 식별 할 수있는 키 encephalitic 질병 개발 엔드 포인트로 CNS의 침략을 활용. IVIS 기술을 통해 우리는 동물 번호와 질병을 줄이면서 약물 치료학 및 백신의 신속하고 정확한 테스트를 시연 할 수 있습니다.

바이러스 복제가 중앙 CNS (그림 1)에 코 지역에서 이동하는 유전자 변형 바이러스, TC83 - 루시 페라 제, 우리는 발광 생물 신호 강도의 증가를 보았다. 높은 바이러스 복제 속도로 인해, 우리는 벡터 및 벡터에 대한 동물 면역 반응에 의존 발광 생물 신호의 높은 수준 (그림 2A)를 참조 할 예정입니다. 우리는 CNS에서 바이러스 복제 피크 (그림 2B)와 함께, 일 5-7 후 ...

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In Vivo Imaging Systems IVIS Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

소설로 루시 페라 제 및 생체 이미징 시스템 (IVIS)에서를 활용하면 임상 개발가 발생하기 전에 질병 끝점을 식별 할 수 의미합니다. IVIS은 우리가 미래 연구를위한보다 정확한 질병 모델을 제공 실시간으로 여러 일 동안 encephalitic 바이러스의 침입을 시각화 할 수 있습니다. 또한 우리는 신속하게 현재 활용 동물 모델보다 antivirals과 백신의 잠재적 인 보호 기능을 식별 할 수 있습니다. 여러 시간 지점을 통해 개인 동물을 활용하는 기능은 감소 동물의 요구 사항, 비용, 질병 연구의 더 인간적 더 과학적인 수단을 확보 활용 동물 전반적인 질병을 보장합니다.

신경 침윤성 Encephalitic 바이러스의 생체 이미징 시스템 (IVIS) 검색에서

Modern advancements in imaging technology encourage further development and refinement in the way viral research is accomplished. Initially proposed by ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vivo Imaging Systems (IVIS) Detection of a Neuro-Invasive Encephalitic Virus

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

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라이브 호스트에 트렌스 제닉 Leishmania의 기생충의 생체내 이미징에서

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

연구

면역학 및 감염병학

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

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백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Estimating Virus Production Rates in Aquatic Systems

아쿼틱 시스템에서 바이러스 생산 요금 예측

Viruses are pervasive components of marine and freshwater systems, and are known to be significant agents of microbial mortality. Developing quantitative ...

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

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사이 Synergism을 맡은 이후로 발광 생물 이미징을 사용하여 연쇄상 구균 pneumoniae</em유아 마우스에서>와 인플루엔자 바이러스

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

알렉사 플루어 라벨링을 통해 뎅그열 바이러스를 떠올리

The early events in the interaction between virus and cell can have profound influence on the outcome of infection. Determining the factors 
that ...

High-throughput Detection Method for Influenza Virus

인플루엔자 바이러스에 대한 높은 처리량 검출 방법

Influenza virus is a respiratory pathogen that causes a high degree of morbidity and mortality every year in multiple parts of the world. Therefore, ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

발광 생물 세균 이미징<em&gt; 생체 내</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Nasal Wipes for Influenza A Virus Detection and Isolation from Swine

돼지에서 인플루엔자 바이러스 탐지 및 격리를위한 코 닦음

Surveillance for influenza A viruses in swine is critical to human and animal health because influenza A virus rapidly evolves in swine populations and ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

호중구의 분리 및 분석 치료제에 림프종 세포 감도에서 자신의 역할을 확인하는 방법

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Detection and Removal of Nuclease Contamination During Purification of Recombinant Prototype Foamy Virus Integrase

검색 및 재조합 프로토 타입 거품 바이러스 Integrase의 정화 동안 Nuclease 오염의 제거

The integrase (IN) protein of the retrovirus prototype foamy virus (PFV) is a model enzyme for studying the mechanism of retroviral integration. Compared ...