Name: endothelin-1 induced middle cerebral artery occlusion model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in rat
Uploaded: 2013-02-16T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat at JoVE.com

Este trabalho foi financiado por doações do American Heart Association Maior filial Sudeste (09GRNT2060421), a Associação Médica Americana, e da Universidade da Flórida Clínica e Translacional Science Institute. Adam Meca é um NIH / NINDS, companheiro NRSA predoctoral (F30 NS-060335). Robert Regenhardt recebeu apoio comunhão predoctoral da Universidade da Flórida Programa de Formação Multidisciplinar em Hipertensão (T32 HL-083810).

Este protocolo foi aprovado pelo Animal Care Institucional e Comitê de Uso (IACUC) da Universidade da Flórida e está em conformidade com o &quot;Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório&quot; (oitava edição, a National Academy of Sciences, 2011). Materiais <ol><li> Animais: Oito semanas de idade, macho, Sprague Dawley (Farms Charles River, Wilmington, MA, EUA) pesando 250-300 g no momento da cirurgia. </li><li> Anestesia <ol class="lalpha"><li> Sistema de anestesia por inal...

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	<li>Stroke--1989. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+on+stroke+prevention,+diagnosis,+and+therapy.+Report+of+the+WHO+Task+Force+on+Stroke+and+other+Cerebrovascular+Disorders.">Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders.</a> Stroke. 20, 1407-1431 (1989).</li><li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2009+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee.">Heart disease and stroke statistics--2009 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 119, 480-486 (2009).</li><li>Mohr, J. P., Gautier, J. C., Hier, D., Stein, R. W., Barnett, H. J. M., Stein, B. M., Mohr, J. P., Yatsu, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stroke: pathophysiology, diagnosis, and management. , 377-450 (1986).</li><li>Robinson, M. J., Macrae, I. M., Todd, M., Reid, J. L., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+local+cerebral+blood+flow+to+pathological+levels+by+endothelin-1+applied+to+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Reduction of local cerebral blood flow to pathological levels by endothelin-1 applied to the middle cerebral artery in the rat.</a> Neurosci. Lett. 118, 269-272 (1990).</li><li>Sharkey, J., Ritchie, I. M., Kelly, P. 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J., Sumners, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candesartan+pretreatment+is+cerebroprotective+in+a+rat+model+of+endothelin-1-induced+middle+cerebral+artery+occlusion.">Candesartan pretreatment is cerebroprotective in a rat model of endothelin-1-induced middle cerebral artery occlusion.</a> Exp. Physiol. 94, 937-946 (2009).</li><li>Braeuninger, S., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia:+procedural+pitfalls+and+translational+problems.">Rodent models of focal cerebral ischemia: procedural pitfalls and translational problems.</a> Exp. Transl. Stroke Med. 1, 8 (2009).</li><li>Tomsick, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+thrombolysis+for+acute+ischemic+stroke.">Intravenous thrombolysis for acute ischemic stroke.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 15, 67-76 (2004).</li><li>Olsen, T. S., Lassen, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dynamic+concept+of+middle+cerebral+artery+occlusion+and+cerebral+infarction+in+the+acute+state+based+on+interpreting+severe+hyperemia+as+a+sign+of+embolic+migration.">A dynamic concept of middle cerebral artery occlusion and cerebral infarction in the acute state based on interpreting severe hyperemia as a sign of embolic migration.</a> Stroke. 15, 458-468 (1984).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586 (2011).</li><li>Gonzalez, C. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+different+models+of+stroke+on+behaviour+and+brain+morphology.">A comparison of different models of stroke on behaviour and brain morphology.</a> Eur. J. Neurosci. 18, 1950-1962 (2003).</li><li>Ansari, S., Azari, H., McConnell, D. J., Afzal, A., Mocco, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+(MCAO)+model+for+ischemic+stroke+with+laser+doppler+flowmetry+guidance+in+mice.">Intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in mice.</a> J. Vis. Exp. (51), e2879 (2011).</li><li>Sharkey, J., Butcher, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+an+experimental+model+of+stroke+produced+by+intracerebral+microinjection+of+endothelin-1+adjacent+to+the+rat+middle+cerebral+artery.">Characterisation of an experimental model of stroke produced by intracerebral microinjection of endothelin-1 adjacent to the rat middle cerebral artery.</a> J. Neurosci. Methods. 60, 125-131 (1995).</li><li>Macrae, I. M., Robinson, M. J., Graham, D. I., Reid, J. L., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelin-1-induced+reductions+in+cerebral+blood+flow:+dose+dependency,+time+course,+and+neuropathological+consequences.">Endothelin-1-induced reductions in cerebral blood flow: dose dependency, time course, and neuropathological consequences.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 13, 276-284 (1993).</li><li>Mecca, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebroprotection+by+angiotensin-(1-7)+in+endothelin-1-induced+ischaemic+stroke.">Cerebroprotection by angiotensin-(1-7) in endothelin-1-induced ischaemic stroke.</a> Exp. Physiol. 96 (1-7), 1084-1096 (2011).</li><li>Fisher, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+of+the+stroke+therapy+academic+industry+roundtable+preclinical+recommendations.">Update of the stroke therapy academic industry roundtable preclinical recommendations.</a> Stroke. 40, 2244-2250 (2009).</li></ol>

A ET-1 induzida OACM é um modelo estabelecido de acidente vascular cerebral isquêmico experimental que é regularmente utilizado em várias linhagens de ratos. Muitas variáveis, tais como a estirpe de ratos, a idade do animal, temperatura corporal, método de anestesia, e experiência do operador pode levar a aumento da variabilidade nos volumes de infarto ao usar este modelo de 5, 14. No entanto, vários investigadores têm mostrado que as vantagens deste modelo incluem a abordagem relativamente não inv...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td><ol><li> Animais: Oito semanas de idade, macho, Sprague Dawley (Farms Charles River, Wilmington, MA, EUA) pesando 250-300 g no momento da cirurgia. </li><li> Anestesia <ol class="lalpha"><li> Sistema de anestesia por inalação (VetEquip Inc., Pleasanton, CA, EUA) </li><li> Anestésico isoflurano (Baxter Farmacêutica, em Deerfield, Illinois, EUA) </li></ol></li><li> Estereotáxico sistema (David Kopf Instruments, Tujunga, CA, EUA) <ol class="lalpha"><li> Sistema estereotáxico de pequenos animais </li><li> Não-ruptura de ouvido barras para ratos </li><li> Gás titular cabeça anestesia para ratos </li></ol></li><li> Regulação da temperatura <ol class="lalpha"><li> BAT-12 termômetro microssonda (Precision Mundial Instruments, Inc., Sarasota, Flórida, EUA) </li><li> T / BOMBA, TP600 manta térmica (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, EUA) </li></ol></li><li> Instrumentos cirúrgicos <ol class="lalpha"><li> Cabo de bisturi e lâmina n º 11, íris fórceps, fórceps Graefe, afastadores braçadeira bulldog, chave de fenda, 10 seringas ul com agulha de calibre 26 chanfrado (Instrumentos de Precisão World, Inc., Sarasota, Flórida, EUA) </li><li> Micromotor e broca titular estereotáxica, Quintessential Estereotáxica Injector (Stoelting, Wood Dale, IL, EUA) </li><li> 1,0 milímetros broca de perfuração redonda, 1,0 mm cone invertido de perfuração da broca (Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, EUA) </li></ol></li><li> Material cirúrgico <ol class="lalpha"><li> Parafusos de montagem 0-80 X 3/32 com 2,4 comprimento do eixo mm, 21 de calibre da cânula guia [4 milímetros longa abaixo do pedestal] e manequim cânula (um Plásticos, Roanoke, VA, EUA) </li><li> Jet acrílico dentadura e líquido (Lang Dental Manufacturing Co., Inc., Wheeling, IL, EUA) </li><li> 3,0 nylon sutura (Oasis, Mettawa, IL, EUA) </li><li> Cotonetes, pomada Puralube (Fisher cientificamentec, Pittsburg, PA, EUA) </li><li> Elétrica de cortar cabelo (Oster, Providence, RI, EUA) </li></ol></li><li> Produtos químicos <ol class="lalpha"><li> A endotelina-1 (American Peptide, Sunnyvale, CA, EUA) </li><li> Clorexidina 2% (Agrilabs, St. Joseph, MO, EUA) </li><li> Buprenorfina HCl (Hospira Inc., Lake Forest, Illinois, EUA) </li></ol></li><li> Equipamento de visualização <ol class="lalpha"><li> Microscópio cirúrgico (Seiler Instrumento e Manufatura; St. Louis, MO, EUA) </li><li> Iluminador de fibra óptica (TechniQuip Corp, Livermore, CA, EUA) </li></ol></li><li> Laser Doppler fluxometria sistema (ADInstruments, Inc., Colorado Springs, CO, EUA) <ol class="lalpha"><li> Sonda lápis padrão </li><li> Suporte da sonda </li><li> Fluxômetro sangue </li><li> Powerlab 4/30 com 7 LabChart </li></ol></li><li> Medição do volume de enfarte <ol class="lalpha"><li> De cérebro de ratomatriz (Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, EUA) </li><li> 2,3,5-cloreto de trifeniltetrazólio (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, EUA), diluída a 0,05% em PBS </li><li> Scanner de mesa (Epson Perfection V30, Epson America, Inc., Long Beach, CA, EUA) </li><li> Image J software (ImageJ 1.42q software, EUA National Institutes of Health, Bethesda, MA, EUA) </li></ol></li></ol></td></tr></tbody></table>

endothelin-1 induced middle cerebral artery occlusion model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in rat

AVC é a causa número um de deficiência e terceira principal causa de morte no mundo, com um custo estimado de US $ 70 bilhões em Estados Unidos, em 2009 1, 2. Vários modelos de isquemia cerebral têm sido desenvolvidos para mimetizar a condição humana de acidente vascular cerebral. Tem sido sugerido que até 80% de todo o resultado de danos isquémicos pancadas na artéria cerebral média (MCA) de área de 3. No início dos anos 1990, a endotelina-1 (ET-1) 4 foi utilizado para induzir isquemia, aplicando-a directamente adjacente à superfície da MCA após craniotomia. Mais tarde, este modelo foi modificado 5 utilizando uma injecção estereotáxica de ET-1 ao lado da MCA para produzir isquemia cerebral focal. As principais vantagens deste modelo incluem a capacidade de realizar o procedimento de forma rápida, a capacidade para controlar a constrição da artéria através da alteração da dose de ET-1 emitido, não há necessidade de manipular os vasos extracranianos que fornecem sangue ao cérebro, bem como reperfusi gradualem taxas que mais de perto imita a reperfusão em humanos 5-7. Por outro lado, o modelo ET-1 tem desvantagens que incluem a necessidade de uma craniotomia, bem como maior variabilidade no volume de curso 8. Esta variabilidade pode ser reduzida com a utilização de dopplerfluxometria a laser (LDF) para verificar se a isquemia cerebral durante a infusão de ET-1. Fatores que afetam a variabilidade AVC incluem precisão de infusão e lote do ET-1 utilizado 6. Outra consideração importante é que, apesar de reperfusão é uma ocorrência comum em acidente vascular cerebral humano, a duração da oclusão por ET-1 induzida por MCAO pode não imitam de perto a do acidente vascular cerebral humano onde muitos pacientes têm reperfusão parcial ao longo de um período de horas a dias após a oclusão 9, 10. Este protocolo irá descrever em detalhes a ET-1 induzida modelo OACM para AVC isquêmico em ratos. Será também chamar a atenção para as considerações especiais e inconvenientes potenciais durante todo o procedimento.

1. Pós-Op avaliação neurológica Depois de o animal recupera a consciência, uma grande variedade de ensaios pode ser utilizada para avaliar défices neurológicos incluindo o equilíbrio, a força de preensão, colocação da pata, assimetria postural e escada de escalada. A tarefa de semente de girassol é uma avaliação grosseira da função motora e sensorial que tem correlação significativa com infarto volume 7, 12. Durante essa tarefa, os ratos são cronometrados ao abrir...

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Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Vários modelos animais de isquemia cerebral foi desenvolvido para simular a condição humana de acidente vascular cerebral. Este protocolo descreve a endotelina-1 (ET-1) induzida por oclusão da artéria cerebral média do modelo (MCAO) para acidente vascular cerebral isquêmico em ratos. Além disso, considerações importantes, vantagens e inconvenientes deste modelo são discutidos.

Endotelina-1 Induzida Médio modelo de oclusão da artéria cerebral para AVC isquêmico com Laser Orientação Fluxometria Doppler em ratos

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Curso de modelagem em Ratos - Oclusão da Artéria Cerebral Média com o modelo de Filamento

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Medicina

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Modelo do rato de Oclusão da Artéria Cerebral Média

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal artéria cerebral média Oclusão Model (MCAO) para Acidente Vascular Cerebral Isquêmico com Laser Doppler Fluxometria Orientação em Ratos

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

Oclusão bilateral artéria carótida comum como um estímulo pré-condicionamento adequados para induzir a tolerância isquêmica início da Isquemia Cerebral Focal

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Utilizando uma janela craniana para Visualizar a artéria cerebral média Durante endotelina 1 Induzida por oclusão da artéria cerebral média

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Sistema otimizado para Monitorização de perfusão cerebral no modelo do rato do curso de oclusão da artéria cerebral média intraluminal

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Curso de modelagem em Ratos: Coagulação permanente da artéria distal Cerebral Média

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic artéria cerebral média Oclusão (MCAO) para Acidente Vascular Cerebral Isquêmico com homólogos Coágulos de sangue em ratos

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Quantificação de Proteção Neurovascular sequência repetitiva Hypoxic Pré-condicionamento e Transient Oriente oclusão da artéria cerebral em ratos

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Realizando Permanente Distal Oriente cerebral com carótida comum Oclusão da Artéria em ratos idosos para estudar Cortical Isquemia com Deficiência Sustentada

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...