Name: endothelin-1 induced middle cerebral artery occlusion model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in rat
Uploaded: 2013-02-16T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat at JoVE.com

Bu çalışma Amerikan Kalp Derneği Büyükşehir Güneydoğu Ortaklık (09GRNT2060421), Amerikan Tıp Derneği, ve Florida Klinik ve Translational Bilim Enstitüsü Üniversitesi bağışları ile desteklenmiştir. Adam Mekke bir NIH / NINDS, NRSA predoctoral fellow (F30 NS-060335) &#39;dir. Robert Regenhardt Hipertansiyon Florida Multidisipliner Eğitim Programı Üniversitesi (T32 HL-083810) den predoctoral burs desteğini aldı.

Bu protokol Florida Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu (IACUC) tarafından onaylanmış ve uygun olduğunu &quot;Bakım Rehberi ve Laboratuvar Hayvanlarının Kullanımı&quot; (sekizinci baskı, Ulusal Bilimler Akademisi, 2011) oldu. Malzemeler <ol><li> Hayvanlar: Ameliyat sırasında 250-300 g Sekiz haftalık, erkek, Sprague Dawley sıçan (Charles River Çiftlikler, Wilmington, ABD MA). </li><li> Anestezi <ol class="lalpha"><li> İnhalasyon anestezi sistemi (VetEqui...

<ol>
	<li>Stroke--1989. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+on+stroke+prevention,+diagnosis,+and+therapy.+Report+of+the+WHO+Task+Force+on+Stroke+and+other+Cerebrovascular+Disorders.">Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders.</a> Stroke. 20, 1407-1431 (1989).</li><li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2009+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee.">Heart disease and stroke statistics--2009 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 119, 480-486 (2009).</li><li>Mohr, J. P., Gautier, J. C., Hier, D., Stein, R. W., Barnett, H. J. M., Stein, B. M., Mohr, J. P., Yatsu, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stroke: pathophysiology, diagnosis, and management. , 377-450 (1986).</li><li>Robinson, M. J., Macrae, I. M., Todd, M., Reid, J. L., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+local+cerebral+blood+flow+to+pathological+levels+by+endothelin-1+applied+to+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Reduction of local cerebral blood flow to pathological levels by endothelin-1 applied to the middle cerebral artery in the rat.</a> Neurosci. Lett. 118, 269-272 (1990).</li><li>Sharkey, J., Ritchie, I. M., Kelly, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+microapplication+of+endothelin-1:+a+new+model+of+focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat.">Perivascular microapplication of endothelin-1: a new model of focal cerebral ischaemia in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 13, 865-871 (1993).</li><li>O'Neill, M. J., Clemens, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Rodent models of focal cerebral ischemia.</a> Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 9 (Unit 9), (2001).</li><li>Mecca, A. P., O'Connor, T. E., Katovich, M. J., Sumners, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candesartan+pretreatment+is+cerebroprotective+in+a+rat+model+of+endothelin-1-induced+middle+cerebral+artery+occlusion.">Candesartan pretreatment is cerebroprotective in a rat model of endothelin-1-induced middle cerebral artery occlusion.</a> Exp. Physiol. 94, 937-946 (2009).</li><li>Braeuninger, S., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia:+procedural+pitfalls+and+translational+problems.">Rodent models of focal cerebral ischemia: procedural pitfalls and translational problems.</a> Exp. Transl. Stroke Med. 1, 8 (2009).</li><li>Tomsick, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+thrombolysis+for+acute+ischemic+stroke.">Intravenous thrombolysis for acute ischemic stroke.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 15, 67-76 (2004).</li><li>Olsen, T. S., Lassen, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dynamic+concept+of+middle+cerebral+artery+occlusion+and+cerebral+infarction+in+the+acute+state+based+on+interpreting+severe+hyperemia+as+a+sign+of+embolic+migration.">A dynamic concept of middle cerebral artery occlusion and cerebral infarction in the acute state based on interpreting severe hyperemia as a sign of embolic migration.</a> Stroke. 15, 458-468 (1984).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon.">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586 (2011).</li><li>Gonzalez, C. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+different+models+of+stroke+on+behaviour+and+brain+morphology.">A comparison of different models of stroke on behaviour and brain morphology.</a> Eur. J. Neurosci. 18, 1950-1962 (2003).</li><li>Ansari, S., Azari, H., McConnell, D. J., Afzal, A., Mocco, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+(MCAO)+model+for+ischemic+stroke+with+laser+doppler+flowmetry+guidance+in+mice.">Intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in mice.</a> J. Vis. Exp. (51), e2879 (2011).</li><li>Sharkey, J., Butcher, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+an+experimental+model+of+stroke+produced+by+intracerebral+microinjection+of+endothelin-1+adjacent+to+the+rat+middle+cerebral+artery.">Characterisation of an experimental model of stroke produced by intracerebral microinjection of endothelin-1 adjacent to the rat middle cerebral artery.</a> J. Neurosci. Methods. 60, 125-131 (1995).</li><li>Macrae, I. M., Robinson, M. J., Graham, D. I., Reid, J. L., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelin-1-induced+reductions+in+cerebral+blood+flow:+dose+dependency,+time+course,+and+neuropathological+consequences.">Endothelin-1-induced reductions in cerebral blood flow: dose dependency, time course, and neuropathological consequences.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 13, 276-284 (1993).</li><li>Mecca, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebroprotection+by+angiotensin-(1-7)+in+endothelin-1-induced+ischaemic+stroke.">Cerebroprotection by angiotensin-(1-7) in endothelin-1-induced ischaemic stroke.</a> Exp. Physiol. 96 (1-7), 1084-1096 (2011).</li><li>Fisher, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+of+the+stroke+therapy+academic+industry+roundtable+preclinical+recommendations.">Update of the stroke therapy academic industry roundtable preclinical recommendations.</a> Stroke. 40, 2244-2250 (2009).</li></ol>

ET-1 ile indüklenen MCAO düzenli birden sıçan suşları kullanılmıştır deneysel iskemik inme kurulmuş bir modeldir. Bu model 5, 14 kullanırken böyle sıçan suşu, hayvan yaşı, vücut ısısı, anestezi yöntemi ve operatör uzmanlığı gibi birçok değişken, infarkt hacimleri artan değişkenliği yol açabilir. Ancak, bazı araştırmacılar bu modelin avantajları nispeten non-invaziv yaklaşım, ET-1 ile serebral kan akımı doz yanıt, ve bilinçli sıçanlar 14, 15 ET-1 infü...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td><ol><li> Hayvanlar: Ameliyat sırasında 250-300 g Sekiz haftalık, erkek, Sprague Dawley sıçan (Charles River Çiftlikler, Wilmington, ABD MA). </li><li> Anestezi <ol class="lalpha"><li> İnhalasyon anestezi sistemi (VetEquip A.Ş., Pleasanton, CA, USA) </li><li> Izofluran anestezi (Baxter İlaç sanayii, Deerfield, IL, ABD) </li></ol></li><li> Stereotaksik sistemi (David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA) <ol class="lalpha"><li> Küçük hayvan stereotaksik sistemi </li><li> Sıçanlarda Non-rüptürü kulak çubukları </li><li> Sıçanlar için gaz anestezi kafa tutucu </li></ol></li><li> Sıcaklık ayarı <ol class="lalpha"><li> BAT-12 mikroprob termometre (Dünya Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, ABD) </li><li> T / POMPA, TP600 Termal battaniye (Gaymar Industries, Inc, Orchard Park, NY, ABD) </li></ol></li><li> Cerrahi aletler <ol class="lalpha"><li> Bisturi sapı ve 11. bıçak, iris forseps, Graefe forseps, tornavida bulldog klemp Retraktörler, 26 ayar eğimli iğne (Dünya Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA) 10 ul şırınga </li><li> Mikromotor matkap ve stereotaksik tutucu, Quintessential Stereotaksik Enjektör (Stoelting, Wood Dale, IL, ABD) </li><li> 1,0 mm yuvarlak matkap bur, 1,0 mm ters koni matkap frez (Roboz Cerrahi Instrument Co, Inc, Gaithersburg, MD, USA) </li></ol></li><li> Cerrahi Malzemeleri <ol class="lalpha"><li> 2.4 mm şaft uzunluğu, 21-gauge kılavuz kanül [uzun kaide altında 4mm] ve kanül kukla (Plastik biri, Roanoke, VA, USA) ile vidaları 0-80 X 3/32 Montaj </li><li> Jet protez akrilik ve sıvı (Lang Diş Manufacturing Co, Inc, Wheeling, IL, ABD) </li><li> 3,0 naylon sütür (Oasis, Mettawa, IL, ABD) </li><li> Pamuklu çubuklar, Puralube göz merhemi (Fisher Scientific, Pittsburg, PA, ABD) </li><li> Elektrikli saç kesme makineleri (Oster, Providence, RI, ABD) </li></ol></li><li> Kimyasallar <ol class="lalpha"><li> Endotelin-1 (Amerikan Peptid, Sunnyvale, CA, USA) </li><li> Klorheksidin% 2 (Agrilabs, Joseph, MO, ABD) </li><li> Buprenorfin HCl (Hospira Inc, Lake Forest, IL, ABD) </li></ol></li><li> Görselleştirme Ekipmanları <ol class="lalpha"><li> Cerrahi mikroskop (Seiler Instrument ve Üretim; St Louis, MO, USA) </li><li> Fiber Optik aydınlatıcı (TechniQuip Corp, Livermore, CA, USA) </li></ol></li><li> Lazer Doppler flowmetre sistemi (ADInstruments, Inc, Colorado Springs, CO, ABD) <ol class="lalpha"><li> Standart Kalem Probu </li><li> Prob tutucu </li><li> Kan Debimetre </li><li> LabChart 7 ile PowerLab 4/30 </li></ol></li><li> Infarkt hacminin ölçümü <ol class="lalpha"><li> Sıçan beyinmatriks (Zivic-Miller Lab., Inc, Allison Park, PA, USA) </li><li> 2,3,5-Triphenyftetrazoliumchlorid (Sigma-Aldrich Co, St Louis, MO, ABD), PBS içinde% 0.05 ile seyreltildi </li><li> Flatbed tarayıcı (Epson Perfection V30, Epson America, Inc, Long Beach, CA, USA) </li><li> Image J yazılımı (ImageJ 1.42q yazılım, ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri, Bethesda, MA, ABD) </li></ol></li></ol></td></tr></tbody></table>

endothelin-1 induced middle cerebral artery occlusion model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in rat

İnme 2009 1, 2 ABD&#39;de tahmini 70000000000 $ maliyetlendirme, sakatlık ve dünyada ölüm üçüncü önde gelen nedenidir bir numaralı nedenidir. Serebral iskemi çeşitli modeller inme insanlık durumu taklit etmek için geliştirilmiştir. Bu orta serebral arter (OSA) alanında 3 iskemik hasardan tüm vuruşları sonucu% 80 o kadar ileri sürülmüştür. 1990&#39;ların başlarında, endotelin-1 (ET-1) 4 kranyotomi sonra MCA yüzeyine doğrudan doğruya bitişik uygulayarak ve iskemi indüklemek için kullanılmıştır. Daha sonra, bu model fokal serebral iskemi üretmek için MCA ET-1, bitişik bir stereotaksik enjeksiyon ile 5 modifiye edilmiştir. Bu modelin ana avantajları hızlı yordamı gerçekleştirmek için yeteneği, ET-1 dozunda değiştirerek arter daralmasına kontrol etme yeteneği teslim, beyne kan tedarik yanı sıra kademeli reperfusi ekstrakraniyal damarların işlemek gerek vardıroranları o daha yakından 5-7 insanlarda reperfüzyon taklit eder. Diğer taraftan, ET-1 model bir kranyotomi için ihtiyaç yanı sıra, inme hacim 8 daha yüksek değişkenlik aşağıdaki dezavantajları vardır. Bu değişkenlik ET-1 infüzyonu sırasında serebral iskemi doğrulamak için lazer Doppler flowmetre (LDF) kullanımı ile azaltılabilir. Strok değişkenliği etkileyen faktörler infüzyon ve ET-1 toplu hassas 6. kullanılan içerir. Başka bir önemli husus da reperfüzyon insan felç sık karşılaşılan bir durumdur ki, ET-1 indüklenmiş MCAO için tıkanma süresinin yakından, insan felç birçok hasta tıkanma 9 gün sonraki saatlik bir süre boyunca kısmi reperfüzyon kalmamıştır taklit olmayabilir 10. Bu protokol ayrıntılı sıçanlarda iskemik inme için ET-1 ile indüklenen MCAO modeli anlatacağız. Aynı zamanda işlem boyunca özel hususlar ve potansiyel sakıncaları dikkat çekecek.

1. Post-Op nörolojik değerlendirme Hayvanlarda bilinç kavuşur sonra testler çeşitli denge, kavrama kuvveti, pençe yerleştirerek, postural asimetri ve tırmanma merdiven içeren nörolojik defisitler değerlendirmek için kullanılabilir. Ayçiçeği tohumu görevi motor ve infarkt hacmi 7, 12 arasında anlamlı bir ilişki vardır duyusal fonksiyon brüt değerlendirmesidir. Açılması ve 5 ayçiçeği tohumu tüketen bu görevi sırasında, fareler zamanlanmış. Beş tohum...

Watch this Scientific Journal Video about Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat at JoVE.com

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Serebral iskemi Çeşitli hayvan modellerinde inme insanlık durumu simüle etmek için geliştirilmiştir. Bu protokol sıçanlarda iskemik inme için endotelin-1 (ET-1) bağlı orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli anlatılmaktadır. Buna ek olarak, önemli hususlar, avantajlar, ve bu modelin eksiklikler ele alınmaktadır.

Rat Lazer Doppler Flowmetri Rehberlik ile İskemik İnme için Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Modeli

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Fare lazer Doppler flowmetre Rehberlik İskemik İnme intraluminal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO) Model

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

Odak Serebral İskemi Erken İskemik Tolerans tetikleyebilecek bir Yeterli Önkoşullama Uyarıcı olarak bilateral Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı sırasında Orta Serebral Arter görselleştirin bir Kranial Pencere kullanmak

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Farelerde Modelleme İnme: Distal Orta Serebral Arter Daimi Pıhtılaşma

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Sıçanlar Homolog Kan pıhtısı ile İskemik İnme emboli Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Farelerde Tekrarlanan Hipoksik Önkoşullanma ve Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ardından Nörovasküler Koruma Kantitasyonu

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...