Name: targeted labeling of neurons in a specific functional micro-domain of the neocortex by combining intrinsic signal and two-photon imaging
Uploaded: 2012-12-12T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Targeted Labeling of Neurons in a Specific Functional Micro-domain of the Neocortex by Combining Intrinsic Signal and Two-photon Imaging at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמכון הלאומי עין R01EY017925 וR21EY020985 ומימון מהיסודות דנה וייטהול לPK אנו מודים גם מתיו Petrella לסיוע בפעולות כירורגיות; גרייס הדיון לאיתור הדנדריטים המוצגים באיור 5A; וPratik Chhatbar עבור הערות על כתב היד.

1. הכנת כירורגים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום להרדמה ורציפות לפקח על קצב לב, בסופו של גאות ושפל CO 2, EEG, וטמפרטורה. כל הנהלים אושרו על ידי טיפול בבעלי החיים המוסדיים ועדה השתמשה ומן האוניברסיטה לרפואה של דרום קרוליינה והתבססו על אלה שפור?...

<ol>
	<li>Blasdel, G. G., Salama, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voltage-sensitive+dyes+reveal+a+modular+organization+in+monkey+striate+cortex.">Voltage-sensitive dyes reveal a modular organization in monkey striate cortex.</a> Nature. 321, 579-585 (1986).</li><li>Grinvald, A., Lieke, E., Frostig, R. D., Gilbert, C. D., Wiesel, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+architecture+of+cortex+revealed+by+optical+imaging+of+intrinsic+signals.">Functional architecture of cortex revealed by optical imaging of intrinsic signals.</a> Nature. 324, 361-364 (1986).</li><li>Bonhoeffer, T., Grinvald, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iso-orientation+domains+in+cat+visual+cortex+are+arranged+in+pinwheel-like+patterns.">Iso-orientation domains in cat visual cortex are arranged in pinwheel-like patterns.</a> Nature. 353, 429-431 (1991).</li><li>Ohki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+ordered+arrangement+of+single+neurons+in+orientation+pinwheels.">Highly ordered arrangement of single neurons in orientation pinwheels.</a> Nature. 442, 925-928 (2006).</li><li>Shmuel, A., Grinvald, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+organization+for+direction+of+motion+and+its+relationship+to+orientation+maps+in+cat+area+18.">Functional organization for direction of motion and its relationship to orientation maps in cat area 18.</a> J. Neurosci. 16, 6945-6964 (1996).</li><li>Ohki, K., Chung, S., Ch'ng, Y. H., Kara, P., Reid, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+imaging+with+cellular+resolution+reveals+precise+micro-architecture+in+visual+cortex.">Functional imaging with cellular resolution reveals precise micro-architecture in visual cortex.</a> Nature. 433, 597-603 (2005).</li><li>Li, Y., Van Hooser, S. D., Mazurek, M., White, L. E., Fitzpatrick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experience+with+moving+visual+stimuli+drives+the+early+development+of+cortical+direction+selectivity.">Experience with moving visual stimuli drives the early development of cortical direction selectivity.</a> Nature. 456, 952-956 (2008).</li><li>Bonhoeffer, T., Kim, D. S., Malonek, D., Shoham, D., Grinvald, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+imaging+of+the+layout+of+functional+domains+in+area+17+and+across+the+area+17/18+border+in+cat+visual+cortex.">Optical imaging of the layout of functional domains in area 17 and across the area 17/18 border in cat visual cortex.</a> Eur. J. Neurosci. 7, 1973-1988 (1995).</li><li>Kara, P., Boyd, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+micro-architecture+for+binocular+disparity+and+ocular+dominance+in+visual+cortex.">A micro-architecture for binocular disparity and ocular dominance in visual cortex.</a> Nature. 458, 627-631 (2009).</li><li>da Costa, N. M., Martin, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whose+Cortical+Column+Would+that+Be.">Whose Cortical Column Would that Be.</a> Frontiers in Neuroanatomy. 4, 16 (2010).</li><li>Kaschube, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Universality+in+the+evolution+of+orientation+columns+in+the+visual+cortex.">Universality in the evolution of orientation columns in the visual cortex.</a> Science. 330, 1113-1116 (2010).</li><li>Villeneuve, M. Y., Vanni, M. P., Casanova, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+organization+in+area+21a+of+the+cat+revealed+by+optical+imaging:+comparison+with+the+primary+visual+cortex.">Modular organization in area 21a of the cat revealed by optical imaging: comparison with the primary visual cortex.</a> Neuroscience. 164, 1320-1333 (2009).</li><li>Chen, X., Leischner, U., Rochefort, N. L., Nelken, I., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+mapping+of+single+spines+in+cortical+neurons+in+vivo.">Functional mapping of single spines in cortical neurons in vivo.</a> Nature. 475, 501-505 (2011).</li><li>Stosiek, C., Garaschuk, O., Holthoff, K., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+two-photon+calcium+imaging+of+neuronal+networks.">In vivo two-photon calcium imaging of neuronal networks.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100, 7319-7324 (2003).</li><li>Shen, Z., Lu, Z., Chhatbar, P. Y., O'Herron, P., Kara, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+artery-specific+fluorescent+dye+for+studying+neurovascular+coupling.">An artery-specific fluorescent dye for studying neurovascular coupling.</a> Nat. Methods. 9, 273-276 (2012).</li><li>Nevian, T., Helmchen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+indicator+loading+of+neurons+using+single-cell+electroporation.">Calcium indicator loading of neurons using single-cell electroporation.</a> Pflugers Archiv. 454, 675-688 (2007).</li><li>Kitamura, K., Judkewitz, B., Kano, M., Denk, W., Hausser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+patch-clamp+recordings+and+single-cell+electroporation+of+unlabeled+neurons+in+vivo.">Targeted patch-clamp recordings and single-cell electroporation of unlabeled neurons in vivo.</a> Nat. Methods. 5, 61-67 (2008).</li><li>Pohl-Guimaraes, F., Krahe, T. E., Medina, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+valproic+acid+exposure+alters+functional+organization+in+the+primary+visual+cortex.">Early valproic acid exposure alters functional organization in the primary visual cortex.</a> Exp. Neurol. 228, 138-148 (2011).</li><li>Bock, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Network+anatomy+and+in+vivo+physiology+of+visual+cortical+neurons.">Network anatomy and in vivo physiology of visual cortical neurons.</a> Nature. 471, 177-182 (2011).</li><li>Rochefort, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+direction+selectivity+in+mouse+cortical+neurons.">Development of direction selectivity in mouse cortical neurons.</a> Neuron. 71, 425-432 (2011).</li><li>Mrsic-Flogel, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeostatic+regulation+of+eye-specific+responses+in+visual+cortex+during+ocular+dominance+plasticity.">Homeostatic regulation of eye-specific responses in visual cortex during ocular dominance plasticity.</a> Neuron. 54, 961-972 (2007).</li><li>Bonhoeffer, T., Grinvald, A., Toga, A. W., Mazziotta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+Imaging+Based+on+Intrinsic+Signals.">Optical Imaging Based on Intrinsic Signals.</a> Brain mapping: The Methods. , 55-97 (1996).</li><li>Kerr, J. N., Greenberg, D., Helmchen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+input+and+output+of+neocortical+networks+in+vivo.">Imaging input and output of neocortical networks in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 14063-14068 (2005).</li><li>Hofer, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+connectivity+and+response+dynamics+of+excitatory+and+inhibitory+neurons+in+visual+cortex.">Differential connectivity and response dynamics of excitatory and inhibitory neurons in visual cortex.</a> Nat. Neurosci. 14, 1045-1052 (2011).</li></ol>

אנו מציגים שיטה למקד את התיוג של גופי תאים עצביים (או דנדריטים ואקסונים) בתחומי מייקרו תפקודיים שנקבעו מראש של הניאוקורטקס. מיזוג הדמיה אופטית אות פנימית עם מיקרוסקופ שני פוטונים מציע אפשרות לקביעת שהסינפסות ותאים לתרום לתחום המייקר של כל מפה, בין אם פונקציונלית קוש...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב / חומרים </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 1. תמיכת חיים / ניסוי מכין </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> וטרינר ובסטר </td><td> NDC 57319-474-05 </td><td></td></tr><tr><td> מאדה isoflurane </td><td> Midmark </td><td> VIP 3000 </td><td></td></tr><tr><td> חימום שמיכת משוב מוסדרת </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 50-7079F </td><td></td></tr><tr><td> א.ק.ג. לפקח </td><td> Digicare יורפואית </td><td> LifeWindow לייט </td><td></td></tr><tr><td> מגבר EEG </td><td> מערכות AM </td><td> 1800 </td><td></td></tr><tr><td> צג התצוגה EEG </td&gt; <td> היולט פקארד </td><td> 78304A </td><td></td></tr><tr><td> בסופו 2 צג CO גאות </td><td> RESPIRONICS </td><td> Novametrix Capnoguard 1265 </td><td> לייעל אוורור </td></tr><tr><td> שבבי מקדח קרביד לעצם קידוח </td><td> הנרי שיין </td><td> בסדר (0.5 מ&quot;מ קצה) וגס (1.25 טיפ מ&quot;מ) </td><td></td></tr><tr><td> מלט לheadplate / קאמרי </td><td> Dentsply </td><td> 675571, 675572 </td><td></td></tr><tr><td> צבע שחור אבקת טמפרה </td><td> סרג&#39;נט האמנות בע&quot;מ </td><td> 22-7185 </td><td> הוסף למלט כדי לשפר אור מיגון ולצמצם השתקפויות </td></tr><tr><td> Agarose - סוג III- </td><td> סיגמא </td><td> A9793 </td><td> לצמצום פעימות במהלך אות הפנימית והדמית שני פוטונים </td></tr><tr><td> Coverglass: קוטר 5 או 8 מ&quot;מ, עובי 0.17 מ&quot;מ </td><td> דיוק בעולםstruments </td><td> 502040, 502041 </td><td> לצמצום פעימות במהלך ההדמיה, coverglass ניתן לחתוך לפי צורך </td></tr><tr><td> curettes Brudon </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann </td><td> 105-715-0, 105-715-3 </td><td> ניקוי משטח גולגולת </td></tr><tr><td> שעוות עצם </td><td> Ethicon </td><td> W31G </td><td> מהירות לעצור את הדימום </td></tr><tr><td> כותנת כטיפ מוליך </td><td> מדעי מיקרוסקופ אלקטרונים </td><td> 72308-05 </td><td> משטח עצם נקי ויבש </td></tr><tr><td> דומון # 5CO מלקחיים </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 11295-20 </td><td> תפוס שכבות בודדות של דורה או פחז </td></tr><tr><td> Vannas מספרי האביב </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 15000-03 </td><td> Cut דורה </td></tr><tr><td> Gelfoam </td><td> פייזר </td><td> 09-0396-05 </td><td> כדי לעצור את הדימום בדורה </td></tr><tr><td> חניתות קליטה</td><td> כלי מדע פיין </td><td> 18105-01 </td><td> פתילת אולטרה מהיר ונטול מוך של CSF </td></tr><tr><td> חומרי Blackout </td><td> Thorlabs </td><td> BK5 </td><td> החומה craniotomy </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 2. לצבוע הכנה / זריקה </td></tr><tr><td> Sulphoxide דימתיל (DMSO) </td><td> סיגמא </td><td> D2650 </td><td></td></tr><tr><td> Pluronic </td><td> סיגמא </td><td> P2443 </td><td></td></tr><tr><td> אורגון גרין 488 Bapta-01:00 </td><td> Invitrogen </td><td> O6807 </td><td> מחוון סידן </td></tr><tr><td> Alexa פלואוריד 594 </td><td> Invitrogen </td><td> A10438 </td><td></td></tr><tr><td> מסנן צנטריפוגלי (0.45 גודל נקבובי מיקרומטר) </td><td> Millipore </td><td> UFC30HV00 </td><td> כדי להסיר זיהומים לפני ההזרקה </td></tr><tr><td> זכוכית פיפטה חולץ </td><td> סאטר מכשירים </td><td> P97 </td><td></td></tr><tr><td> ורוסיליקט זכוכית filamented נימים (בקוטר 1.5 מ&quot;מ חיצוני) </td><td> מכשירי Precision העולם </td><td> 1B150F-4 </td><td> פיפטה הפליטה דיי </td></tr><tr><td> Microloader </td><td> אפנדורף </td><td> 5242 956 003 </td><td> לטעינת צבע לתוך פיפטה </td></tr><tr><td> Micromanipulator </td><td> סאטר מכשירים </td><td> MP-285 </td><td> כדי למקם פיפטה </td></tr><tr><td> בקר דופק לחץ </td><td> פארקר Hannifin </td><td> PicoSpritzer III </td><td> להזרקת לחץ של הצבע </td></tr><tr><td> electroporator תא בודד </td><td> התקנים מולקולריים </td><td> Axoporator 800A </td><td> לelectroporation של הצבע </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 3. העצמותי imaגינג </td></tr><tr><td> מטרת 4x (0.13 NA, 17 המ&quot;מ WD) </td><td> אולימפוס </td><td> UPLFLN4X </td><td></td></tr><tr><td> חומרה / תוכנה פנימית </td><td> אופטי הדמיה בע&quot;מ </td><td> Imager 3001 / VDAQ </td><td> תוכנת VDAQ משמשת להדמית אפיזודי </td></tr><tr><td> CCD מצלמה </td><td> Adimec </td><td> Adimec-1000 </td><td></td></tr><tr><td> אספקת חשמל מקור אור </td><td> KEPCO </td><td> ATE 15-15 מ&#39; </td><td></td></tr><tr><td> מקור אור </td><td> אופטי הדמיה בע&quot;מ </td><td> HAL 100 </td><td> עוצמת אור על פני השטח של קליפת המוח היא 3-5 mW </td></tr><tr><td> גרין מסנן (לתמונת כלי דם) </td><td> אופטי הדמיה בע&quot;מ </td><td> λ = 546 ננומטר (30 ננומטר bandpass) </td><td> לתמונת התייחסות של מערכת כלי דם לפני שטח </td></tr><tr><td> מסנן אדום (לאות פנימית) </td><td> האופטי Imaging בע&quot;מ </td><td> λ = 630 ננומטר (30 ננומטר bandpass) </td><td> כדי לאסוף את האותות פנימיים </td></tr><tr><td> חום מסנן </td><td> אופטי הדמיה בע&quot;מ </td><td> KG-1 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 4. שני פוטוני אסדה / הדמיה </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ שני פוטונים ותוכנה </td><td> טכנולוגיות ערבה </td><td></td><td> ראה שן et al. 2012 לנתיב אור, מסננים וכוח הליזר </td></tr><tr><td> טי: ספיר ליזר </td><td> ספקטרה-פיסיקה </td><td> מאי טאי XF </td><td></td></tr><tr><td> 20x (0.5 NA; 3.5 המ&quot;מ WD) </td><td> אולימפוס </td><td> UMPLFLN20X </td><td> מטרת 0.5 NA משמשת רק ליישור פיפטה מעל craniotomy (לא עבור הדמית 2 פוטון) </td></tr><tr><td> 20x (1.0 NA; 2.0 המ&quot;מ WD) </td><td> אולימפוס </td><td> XLUMPLFLN20X </td><td></td></tr><tr><td> 40X (0.8 NA; 3.3 המ&quot;מ WD) </td><td> אולימפוס </td><td> LUMPLFLN40X/IR </td><td></td></tr><tr><td> שולחן אוויר </td><td> ניופורט </td><td> ST-200 </td><td> הכנה מבודדת מתנודות חיצוניות </td></tr><tr><td> שלב xy </td><td> של מייק המכונית ושות (Attleboro, MA) </td><td></td><td> נושא ניסוי וmicromanipulator סאטר הונח על במת xy </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan="2"> מתכונים </td></tr><tr><td> נוזלים מלאכותיים Cerebro-Spinal </td><td> NaCl (135 מ&quot;מ), KCl (5.4 מ&quot;מ), MgCl 2 (1.0 מ&quot;מ), CaCl 2 (1.8 מ&quot;מ), HEPES (5 מ&quot;מ), 7.4 pH </td></tr><tr><td> פתרון פיפטה 14 </td><td> NaCl (150 מ&quot;מ), KCl (2.5 מ&quot;מ), HEPES (10 מ&quot;מ), 7.4 pH </td></tr></tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

targeted labeling of neurons in a specific functional micro-domain of the neocortex by combining intrinsic signal and two-photon imaging

בקליפת המוח החזותית הראשונית של יונקים שאינם מכרסמים, נוירונים מקובצים בהתאם להעדפותיהם לתכונות גירוי כגון כיוון 1-4, כיוון דומיננטי 5-7, 8,9 עיני ופער משקף 9. הסלקטיביות יווניות היא התכונה למדה הנרחב ביותר והמפה רציפה עם פריסת עין תקופתית לכיוון מועדף היא הווה על פני כל קליפת המוח החזותי הראשונית 10,11. שילוב התרומות סינפטיים, סלולריות ורשת המובילות לתגובות סלקטיבית גירוי במפות תפקודיות אלה מחייב את ההכלאה של שיטות הדמיה שמשתרעות על פני תת מיקרון לקשקשים מרחביים מילימטר. עם הדמית אות אופטית פנימית קונבנציונלית, הפריסה הכללית של מפות פונקציונליות על פני כל השטח של קליפת המוח החזותית ניתן לקבוע 12. הפיתוח של מיקרוסקופיה in vivo שני פוטונים באמצעות סיד צבעים רגישים מאפשר לאדם לקבוע synaptקלט ic מגיע קוצים הדנדריטים בודדים פעילות 13 או להקליט בו זמנית ממאה גופי תא עצביים בודדים 6,14. כתוצאה מכך, שילוב הדמית אות פנימית עם הרזולוציה מרחבית תת מיקרון של מיקרוסקופיה שני פוטונים מציע את האפשרות של קביעה בדיוק אילו מגזרים ותאים דנדריטיים לתרום לתחום המייקר של כל מפה תפקודית בהניאוקורטקס. כאן אנו מדגימים שיטת תשואה גבוהה להשגת מהירות מפת התמצאות קליפת מוח ומיקוד תחומים ספציפיים במייקר המפה פונקציונלית זו לתיוג נוירונים עם צבעי ניאון ביונקים שאינם מכרסמים. עם אותו מיקרוסקופ המשמש להדמית שני פוטונים, אנחנו מייצרים 1 מפת התמצאות באמצעות דימות אופטי אות פנימית. ואז אנו מראים כיצד למקד-תחום המיקרו של ריבית באמצעות micropipette עמוס צבע או לתווית אוכלוסייה של גופי תא עצביים או תווית נוירון כזה שדנדריטים, קוצים ואקסונים נראים באחתvivo. החידודים שלנו על פני שיטות הקודמות להקל בחינת מבנה יחסי תפקוד עצביים עם רזולוציה תת הסלולר במסגרת של ארכיטקטורות פונקציונליות neocortical.

כדי להמחיש את הדיוק של שיטות תיוג הצבע שלנו, אנחנו ממוקדים בתחום מייקרו הקטן ביותר של כל מפה פונקציונלית ידועה בניאוקורטקס אינם המכרסם. מנוקד בדלילות לאורך מפת ההתמצאות בקליפת הראייה העיקרית הם נדירים. אלה מתרחשים בנקודות בי כל הכיוונים המועדפים להתכנס כך שבשנת צבע ...

Watch this Scientific Journal Video about Targeted Labeling of Neurons in a Specific Functional Micro-domain of the Neocortex by Combining Intrinsic Signal and Two-photon Imaging at JoVE.com

Targeted Labeling of Neurons in a Specific Functional Micro-domain of the Neocortex by Combining Intrinsic Signal and Two-photon Imaging

שיטה מתוארת לתיוג נוירונים עם צבעי ניאון בתחומי מייקר מראש תפקודיים של הניאוקורטקס. ראשית, דימות אופטי אות פנימית משמש להשגת מפה תפקודית. אז מיקרוסקופ שני פוטונים משמש לתווית ונוירונים תמונה בתוך תחום מייקרו של המפה.

תיוג ממוקד של תאי עצב בתחומים ספציפיים מייקר פונקציונליים של הניאוקורטקס ידי שילוב אותות פנימיים והדמית שני פוטונים

In the primary visual cortex of non-rodent mammals, neurons are clustered according to their preference for stimulus features such as orientation1-4, ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord Using Two-photon Microscopy

In vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord Using Two-photon Microscopy

בתחום ההדמיה vivo של חוט השדרה בעזרת עכבר דו פוטון מיקרוסקופית

In vivo imaging using two-photon microscopy 1 in mice that have been genetically engineered to express fluorescent proteins in specific cell types 2-3 has ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

זיהוי של היפוקסיה Microregional בקליפת עכבר מוחין על ידי הדמיה של שני הפוטונים אנדוגני NADH Fluorescence

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

תיוג של פלורסנט מדרדר מאפשר להקלטה ממוקדת חד תאית מיחידת נוירונים שזוהו<em&gt; בvivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In vivo שני פוטוני הדמיה של שינויים מולקולריים ניסיון תלוי בנוירונים בקליפת מוח

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

שני פוטונים<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה של קוצים הדנדריטים בCortex העכבר באמצעות דלילה, גולגולת הכנה

In the mammalian cortex, neurons form extremely complicated networks and exchange information at synapses. Changes in synaptic strength, as well as ...

Two-photon Imaging of Cellular Dynamics in the Mouse Spinal Cord

הדמיה שני פוטונים של Dynamics הסלולרי בחוט השדרה העכבר

Two-photon (2P) microscopy is utilized to reveal cellular dynamics and interactions deep within living, intact tissues. Here, we present a method for ...

Two-photon Calcium Imaging in Neuronal Dendrites in Brain Slices

שני הפוטונים סידן הדמיה של דנדריטים עצביים במוח פרוסות

Calcium (Ca2+) imaging is a powerful tool to investigate the spatiotemporal dynamics of intracellular Ca2+ signals in neuronal dendrites. Ca2+ ...

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

אין ויוו שני הפוטונים הדמיה של נוירונים בקליפת המוח בעכברים Neonatal

Two-photon imaging is a powerful tool for the in vivo analysis of neuronal circuits in the mammalian brain. However, a limited number of in vivo imaging ...

Advanced Diffusion Imaging in The Hippocampus of Rats with Mild Traumatic Brain Injury

הדמיה מתקדמת דיפוזיה בהיפוקמפוס של חולדות עם פגיעה מוחית טראומטית מתון

Mild traumatic brain injury (mTBI) is the most common type of acquired brain injury. Since patients with traumatic brain injury show a tremendous ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

בליסטי לתיוג של הנוירונים בתוך המוח בפרוסות ובתרבות התא הראשוני

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...