Name: skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery
Uploaded: 2012-10-18T13:00:00
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Nous tenons à remercier tous les membres du Laboratoire Kong et le Dr Yan Deng chez Core microscopie, Bureau de la science collaborative, NYUMC pour leur aide et soutien technique. Ce travail a été soutenu par une subvention pilote à partir du Centre de New York University for AIDS Research (CFAR, NIH AI027742).

1. Purification d&#39;ADN plasmidique <ol><li> Transformer les cellules eucaryotes plasmide d&#39;ADN codant EGFP (pCX-EGFP) dans des cellules E. coli DH5a compétentes. Le vecteur vide pCX peut également être utilisé comme contrôle négatif. </li><li> Culture et récolte les cellules DH5a de E. coli et de purifier le ADNp selon le Manuel de Qiagen Endofree Purification plasmidique. </li><li> Filtre ADNp solution à travers un filtre de 0,22 um PVDF stérile, et de le stocker à -20 ° C jusqu&#3...

<ol>
	<li>Bins, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+potent+DNA+vaccination+strategy+defined+by+in+vivo+monitoring+of+antigen+expression.">A rapid and potent DNA vaccination strategy defined by in vivo monitoring of antigen expression.</a> Nat Med. 11, 899-904 (2005).</li><li>Pokorna, D., Rubio, I., Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-vaccination+via+tattooing+induces+stronger+humoral+and+cellular+immune+responses+than+intramuscular+delivery+supported+by+molecular+adjuvants.">DNA-vaccination via tattooing induces stronger humoral and cellular immune responses than intramuscular delivery supported by molecular adjuvants.</a> Genet. Vaccines Ther. 6, 4 (2008).</li><li>van den Berg, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+intradermal+vaccination+by+DNA+tattooing+in+human+skin.">Optimization of intradermal vaccination by DNA tattooing in human skin.</a> Hum. Gene Ther. 20, 181-189 (2009).</li><li>Liu, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines:+a+review.">DNA vaccines: a review.</a> J. Intern. Med. 253, 402-410 (2003).</li><li>Koide, Y., Nagata, T., Yoshida, A., Uchijima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines.">DNA vaccines.</a> Jpn. J. Pharmacol. 83, 167-174 (2000).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Verstrepen, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+HIV-1+specific+T-cell+responses+by+short-interval+DNA+tattooing+as+compared+to+intramuscular+immunization+in+non-human+primates.">Improved HIV-1 specific T-cell responses by short-interval DNA tattooing as compared to intramuscular immunization in non-human primates.</a> Vaccine. 26, 3346-3351 (2008).</li><li>Potthoff, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunogenicity+and+efficacy+of+intradermal+tattoo+immunization+with+adenoviral+vector+vaccines.">Immunogenicity and efficacy of intradermal tattoo immunization with adenoviral vector vaccines.</a> Vaccine. 27, 2768-2774 (2009).</li><li>Quaak, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+tattoo+vaccination:+effect+on+plasmid+purity+and+transfection+efficiency+of+different+topoisoforms.">DNA tattoo vaccination: effect on plasmid purity and transfection efficiency of different topoisoforms.</a> J. Control Release. 139, 153-159 (2009).</li><li>Pokorna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccination+with+human+papillomavirus+type+16-derived+peptides+using+a+tattoo+device.">Vaccination with human papillomavirus type 16-derived peptides using a tattoo device.</a> Vaccine. 27, 3519-3529 (2009).</li></ol>

La vaccination par ADN est considéré comme plus sûr que les stratégies de vaccination traditionnels car il ne nécessite pas de manipulation, ou exposer les vaccins, les agents pathogènes vivants ou atténués 4. Toutefois, le résultat de la vaccination ADN dépend fortement de l&#39;itinéraire de livraison. La peau est abondante dans les cellules présentatrices d&#39;antigène, comme les cellules de Langerhans et les cellules dendritiques 1, et donc un site idéal pour la vaccination en te...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom de réactif / Matériel </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> pCX-EGFP ADN plasmidique </td><td> Clontech </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Système Tattoo STEALTH Rotary </td><td> Tattoo Supply dans le monde entier </td><td> STEALTH-L </td><td></td></tr><tr><td> Aiguilles de tatouage </td><td> Tattoo Supply dans le monde entier </td><td> 1207RSB </td><td></td></tr><tr><td> Kit Endofree Plasmid Maxi </td><td> Qiagen </td><td> 12362 </td><td></td></tr><tr><td> PVDF 0,22 um filtre stérile </td><td> Millipore </td><td> SLGV013SL </td><td></td></tr><tr><td> Tondeuse électrique </td><td> Disponible dans le commerce </td><td></td><td></td></tr><tr><td> jetable rasoirs de sûreté </td><td> Disponible dans le commerce </td><td></td><td></td></tr><tr><td> ArgentCrème sulfadiazine </td><td> Watson </td><td> NDC 0591-0810-55 </td><td></td></tr><tr><td> La kétamine HCL </td><td></td><td> NDC 0856-2012-01 </td><td></td></tr><tr><td> Zylazine solution stérile </td><td></td><td> NADA 139-236 </td><td></td></tr></tbody></table>

skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery

Base d&#39;acide nucléique vaccination est un sujet d&#39;intérêt croissant, en particulier l&#39;ADN plasmidique (ADNp) codant pour des antigènes immunologiquement importants. Après la ADNp ingénierie est administré aux vaccins, il est transcrite et traduite en protéines immunogènes qui peuvent provoquer des réactions du système immunitaire. De nombreux moyens de fournir des vaccins à ADN ont été étudiées, mais chaque itinéraire de livraison a ses propres avantages et inconvénients. Tatouage de la peau est une nouvelle technique qui est sûr, rentable et pratique. En outre, les piqûres infligées par l&#39;aiguille pourrait également servir un adjuvant puissant. Ici, on a) démontrer l&#39;administration intradermique de codage ADN plasmidique amélioré la protéine fluorescente verte (pCX-EGFP) dans un modèle de souris à l&#39;aide d&#39;un dispositif de tatouage et b) de confirmer l&#39;expression effective de l&#39;EGFP dans les cellules de la peau en utilisant la microscopie confocale.

L&#39;expression de l&#39;EGFP avec un pic d&#39;excitation à 488 nm et pic d&#39;émission à 509 nm peut être observée dans les cellules de peau de souris. D&#39;une dose de 1,875 ug d&#39;ADN, contenant environ 3 × 10 17 copies du plasmide, on observe habituellement 10-20 signaux EGFP dans les 1 cm 2 tatoués région. Ce nombre relativement faible de cellules transfectées est cohérent avec les résultats d&#39;une étude précédente 3. L&#39;expression de l&#39;EGFP (Fi...

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Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

Tatouage de la peau est un moyen puissant et sûr de vaccin à ADN livraison par voie intradermique. Ici, un ADN plasmidique codant pour la EGFP est délivré par le tatouage sur la peau d&#39;une souris de laboratoire, et l&#39;expression de la EGFP dans les cellules de la peau est alors contrôlé par microscopie confocale.

Peau tatouage comme une nouvelle approche pour la livraison des vaccins ADN

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

Research

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Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

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Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

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Un procédé amélioré pour la préparation de collagène de type I de la peau

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Caractérisation des systèmes complexes à l&#39;aide de la conception des expériences approche: l&#39;expression transitoire de protéines dans le tabac comme une étude de cas

Plants provide multiple benefits for the production of biopharmaceuticals including low costs, scalability, and safety. Transient expression offers the ...

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Une peau pleine de défauts modèle pour évaluer la vascularisation des biomatériaux<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

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Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

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