Name: skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery
Uploaded: 2012-10-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery at JoVE.com

ברצוננו להודות לכל החברים של קונג מעבדת ד&quot;ר יאן דנג בליבה מיקרוסקופית, משרד המדע שיתופי, NYUMC על הסיוע והתמיכה טכנית. עבודה זו נתמכה על ידי מענק טייס מניו יורק מרכז האוניברסיטאי לחקר מחלת איידס (CFAR, מענק NIH AI027742).

1. טיהור DNA פלסמיד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפוך האיקריוטים פלסמיד דנ&quot;א קידוד EGFP (PCX-EGFP) לתוך תאים מוסמכים DH5α E.coli. וקטור PCX הריק עשוי לשמש גם כשלט שלילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרבות וקציר תאי DH5α E.coli ולטהר pDNA פי מדריך טיהור פלסמי...

<ol>
	<li>Bins, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+potent+DNA+vaccination+strategy+defined+by+in+vivo+monitoring+of+antigen+expression.">A rapid and potent DNA vaccination strategy defined by in vivo monitoring of antigen expression.</a> Nat Med. 11, 899-904 (2005).</li><li>Pokorna, D., Rubio, I., Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-vaccination+via+tattooing+induces+stronger+humoral+and+cellular+immune+responses+than+intramuscular+delivery+supported+by+molecular+adjuvants.">DNA-vaccination via tattooing induces stronger humoral and cellular immune responses than intramuscular delivery supported by molecular adjuvants.</a> Genet. Vaccines Ther. 6, 4 (2008).</li><li>van den Berg, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+intradermal+vaccination+by+DNA+tattooing+in+human+skin.">Optimization of intradermal vaccination by DNA tattooing in human skin.</a> Hum. Gene Ther. 20, 181-189 (2009).</li><li>Liu, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines:+a+review.">DNA vaccines: a review.</a> J. Intern. Med. 253, 402-410 (2003).</li><li>Koide, Y., Nagata, T., Yoshida, A., Uchijima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines.">DNA vaccines.</a> Jpn. J. Pharmacol. 83, 167-174 (2000).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Verstrepen, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+HIV-1+specific+T-cell+responses+by+short-interval+DNA+tattooing+as+compared+to+intramuscular+immunization+in+non-human+primates.">Improved HIV-1 specific T-cell responses by short-interval DNA tattooing as compared to intramuscular immunization in non-human primates.</a> Vaccine. 26, 3346-3351 (2008).</li><li>Potthoff, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunogenicity+and+efficacy+of+intradermal+tattoo+immunization+with+adenoviral+vector+vaccines.">Immunogenicity and efficacy of intradermal tattoo immunization with adenoviral vector vaccines.</a> Vaccine. 27, 2768-2774 (2009).</li><li>Quaak, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+tattoo+vaccination:+effect+on+plasmid+purity+and+transfection+efficiency+of+different+topoisoforms.">DNA tattoo vaccination: effect on plasmid purity and transfection efficiency of different topoisoforms.</a> J. Control Release. 139, 153-159 (2009).</li><li>Pokorna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccination+with+human+papillomavirus+type+16-derived+peptides+using+a+tattoo+device.">Vaccination with human papillomavirus type 16-derived peptides using a tattoo device.</a> Vaccine. 27, 3519-3529 (2009).</li></ol>

חיסון DNA נחשב בטוח יותר מאשר אסטרטגיות חיסון מסורתיות כפי שהוא אינו דורש מניפולציה שלו, או חושף את החיסונים לפתוגנים, חיים או מוחלשים 4. עם זאת, התוצאה של חיסון DNA תלויה בכבדות על מסלול המשלוח. עור הוא בשפע בתאי מציגי אנטיגן-, כגון תאים לנגרהנס ותאים דנדריטיים 1,<...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב / חומרים </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> PCX-EGFP DNA פלסמיד </td><td> Clontech </td><td></td><td></td></tr><tr><td> מערכת התגנבות קעקוע רוטרי </td><td> אספקת קעקוע ברחבי עולם </td><td> התגנבות-L </td><td></td></tr><tr><td> מחטי קעקוע </td><td> אספקת קעקוע ברחבי עולם </td><td> 1207RSB </td><td></td></tr><tr><td> קיט מקסי פלסמיד EndoFree </td><td> Qiagen </td><td> 12362 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 מיקרומטר PVDF סטרילי מסנן </td><td> Millipore </td><td> SLGV013SL </td><td></td></tr><tr><td> גוזם שיער חשמלי </td><td> זמין מסחרי </td><td></td><td></td></tr><tr><td> סכיני גילוח חד פעמיים </td><td> זמין מסחרי </td><td></td><td></td></tr><tr><td> כסףקרם Sulfadiazine </td><td> ווטסון </td><td> NDC 0591-0810-55 </td><td></td></tr><tr><td> קטמין HCL </td><td></td><td> NDC 0856-2012-01 </td><td></td></tr><tr><td> תמיסה סטרילית Zylazine </td><td></td><td> נדא 139-236 </td><td></td></tr></tbody></table>

skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery

חיסון מבוסס חומצת גרעין הוא נושא להתעניינות הולכת וגובר, במיוחד DNA פלסמיד (pDNA) קידוד אנטיגנים immunologically חשובים. לאחר pDNA המהונדס ניתן לחיסונים, הוא עבד ותרגם לחלבוני immunogen שיכול לעורר תגובות מהמערכת החיסונית. דרכים רבות של אספקת חיסוני DNA נחקרו, אך כל מסלול יש יתרונות ומשלוח חסרונות משלה. קעקוע עור הוא טכניקה חדשנית שהיא בטוח, יעיל וחסכוני, ונוח. בנוסף, נקבים שנגרמו על ידי המחט יכולים גם לשמש כאדג&#39;ובנט חזק. כאן, אנו) להפגין משלוח intradermal של קידוד ה-DNA פלסמיד משופר ירוק זרחני חלבון (PCX-EGFP) במודל של עכברים באמצעות מכשיר קעקוע וב) לאשר את הביטוי האפקטיבי של EGFP בתאי העור באמצעות מיקרוסקופיה confocal.

הביטוי של EGFP עם שיא עירור ב488 ננומטר ושיא פליטה ב 509 ננומטר ניתן להבחין בתאי עור של עכבר. ממינון 1.875 מיקרוגרם של ה-DNA, המכיל כ 3 × 10 17 עותקים של פלסמיד, אנחנו בדרך כלל 10-20 נצפינו אותות EGFP ב1 הסנטימטר 2 מקועקעים אזור. מספר זה נמוך יחסית של תאי transfected עולה בקנה אחד עם...

Watch this Scientific Journal Video about Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery at JoVE.com

Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

קעקוע עור הוא דרך חזקה ובטוחה לאספקת חיסון DNA intradermally. כאן, EGFP קידוד DNA פלסמיד מועבר בקעקוע על העור של עכבר מעבדה, והביטוי של EGFP בתאי העור ואז ייבדק על ידי מיקרוסקופיה confocal.

עור קעקוע כגישה חדשה לאספקת חיסון ה-DNA

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

לוחץ תא כחזק, Microfluidic תאית פלטפורמה להצגה

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

שיטה משופרת להכנת סוג I קולגן מעור

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

אפיון של מערכות מורכבות באמצעות העיצוב של גישת ניסויים: ביטוי חלבון חלוף בטבק כמקרה מבחן

Plants provide multiple benefits for the production of biopharmaceuticals including low costs, scalability, and safety. Transient expression offers the ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של Biomaterials<em&gt; בVivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Electroporator למשלוח סדרתית מולקולרי בסיוע וורטקס microscale

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Fabrication of a Functionalized Magnetic Bacterial Nanocellulose with Iron Oxide Nanoparticles

המצאה של ננוצלולוז בקטריאלי המגנטי פונקציונלי עם חלקיקים של תחמוצת ברזל

In this study, bacterial nanocellulose (BNC) produced by the bacteria Gluconacetobacter xylinus is synthesized and impregnated in situ with iron oxide ...

Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity

פיתוח תאיים תלת ממד Organotypic דגם של אדם המעיים הריריים Grown במיקרוגרבטיציה

Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

תרבות משלוח Cell mesenchymal סטרומה ב עצמי תנאים: גישה חכמה עבור יישומים אורתופדיות

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

DNA Nanotubes as a Versatile Tool to Study Semiflexible Polymers

ה-DNA צינוריות כמו כלי רב-תכליתי ללמוד פולימרים Semiflexible

Mechanical properties of complex, polymer-based soft matter, such as cells or biopolymer networks, can be understood in neither the classical frame of ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

Bioprinting של הסחוס, תחליפי רקמת העור ניצול פסיבים הרומן ערבוב טכניקה יחידה עבור Bioink Precellularization

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...