Name: skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery
Uploaded: 2012-10-18T13:00:00
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우리는 그들의 지원 및 기술 지원에 대한 공동 과학, NYUMC의 현미경 코어, 사무실에서 홍콩 연구실 박사 연 덩의 모든 회원에게 감사하고 싶습니다. 이 작품은 AIDS 연구 뉴욕 대학 센터 (CFAR, NIH 보조금 AI027742)에서 파일럿 보조금에 의해 지원되었다.

1. 플라스미드 DNA의 정제 <ol><li> DH5α E.coli 관할 세포에 플라스미드 DNA 진핵 세포 인코딩 EGFP (PCX-EGFP)를 변환 할 수 있습니다. 빈 PCX 벡터는 또한 대조군으로 사용하실 수 있습니다. </li><li> 문화와 수확 DH5α E.coli 세포를하고 Qiagen EndoFree 플라스미드 정화 핸드북에 따라 pDNA를 정화. </li><li> 필터 pDNA의 0.22 μm PVDF 살균 필터를 통해 솔루션 및 사용하기 전까지 -20 ° C에서 저장합니다. </li><...

<ol>
	<li>Bins, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+potent+DNA+vaccination+strategy+defined+by+in+vivo+monitoring+of+antigen+expression.">A rapid and potent DNA vaccination strategy defined by in vivo monitoring of antigen expression.</a> Nat Med. 11, 899-904 (2005).</li><li>Pokorna, D., Rubio, I., Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-vaccination+via+tattooing+induces+stronger+humoral+and+cellular+immune+responses+than+intramuscular+delivery+supported+by+molecular+adjuvants.">DNA-vaccination via tattooing induces stronger humoral and cellular immune responses than intramuscular delivery supported by molecular adjuvants.</a> Genet. Vaccines Ther. 6, 4 (2008).</li><li>van den Berg, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+intradermal+vaccination+by+DNA+tattooing+in+human+skin.">Optimization of intradermal vaccination by DNA tattooing in human skin.</a> Hum. Gene Ther. 20, 181-189 (2009).</li><li>Liu, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines:+a+review.">DNA vaccines: a review.</a> J. Intern. Med. 253, 402-410 (2003).</li><li>Koide, Y., Nagata, T., Yoshida, A., Uchijima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines.">DNA vaccines.</a> Jpn. J. Pharmacol. 83, 167-174 (2000).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Verstrepen, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+HIV-1+specific+T-cell+responses+by+short-interval+DNA+tattooing+as+compared+to+intramuscular+immunization+in+non-human+primates.">Improved HIV-1 specific T-cell responses by short-interval DNA tattooing as compared to intramuscular immunization in non-human primates.</a> Vaccine. 26, 3346-3351 (2008).</li><li>Potthoff, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunogenicity+and+efficacy+of+intradermal+tattoo+immunization+with+adenoviral+vector+vaccines.">Immunogenicity and efficacy of intradermal tattoo immunization with adenoviral vector vaccines.</a> Vaccine. 27, 2768-2774 (2009).</li><li>Quaak, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+tattoo+vaccination:+effect+on+plasmid+purity+and+transfection+efficiency+of+different+topoisoforms.">DNA tattoo vaccination: effect on plasmid purity and transfection efficiency of different topoisoforms.</a> J. Control Release. 139, 153-159 (2009).</li><li>Pokorna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccination+with+human+papillomavirus+type+16-derived+peptides+using+a+tattoo+device.">Vaccination with human papillomavirus type 16-derived peptides using a tattoo device.</a> Vaccine. 27, 3519-3529 (2009).</li></ol>

이 조작을 필요로하거나, 라이브 또는 감소 병원체 4로 백신을 제공하지 않는 한 DNA 예방 접종은 기존의 예방 접종 전략보다 더 안전한 것으로 간주됩니다. 그러나, DNA 예방 접종의 결과는 배달 경로에 크게 의존한다. 피부는 Langerhans 세포와 수지상 세포 1, 따라서 immunogenicity 및 액세스 5,6의 용이성의 측면에서 예방 접종을위한 이상적인 사이트와 항원 제시 세포에 풍부하?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약 / 재료의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 </td></tr><tr><td> PCX-EGFP 플라스미드 DNA </td><td> Clontech </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 스텔스 로터리 문신 시스템 </td><td> 전세계 문신 공급 </td><td> 은신-L </td><td></td></tr><tr><td> 문신 바늘 </td><td> 전세계 문신 공급 </td><td> 1207RSB </td><td></td></tr><tr><td> EndoFree 플라스미드 맥시 키트 </td><td> Qiagen </td><td> 12,362 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 μm PVDF 무균 필터 </td><td> Millipore </td><td> SLGV013SL </td><td></td></tr><tr><td> 전기 헤어 트리머 </td><td> 상업적으로 이용 가능한 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 일회용 안전 면도기 </td><td> 상업적으로 이용 가능한 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 은Sulfadiazine 크림 </td><td> 왓슨 </td><td> NDC 0591-0810-55 </td><td></td></tr><tr><td> 케타민 HCL </td><td></td><td> NDC 0856-2012-01 </td><td></td></tr><tr><td> Zylazine 무균 솔루션 </td><td></td><td> 나다 139-236 </td><td></td></tr></tbody></table>

skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery

핵산 기반의 예방 접종은 성장 관심 주제 immunologically 중요한 항원을 인코딩 특히 플라스미드 DNA (pDNA)입니다. 엔지니어링 pDNA이 백신에 투여 한 후,이 베꼈와 면역 시스템의 반응을 유도 할 수 immunogen 단백질로 번역되어 있습니다. DNA 백신을 제공하는 대부분의 방법은 조사 된 있지만 각 배달 경로는 자신의 장점과 함정이 있습니다. 피부 문신은 안전 비용 효과적인지, 그리고 편리 소설 기법이다. 또한, 바늘 자국으로 구멍은 강력한 도움이되는 역할을 수 있습니다. 여기, 우리가) 플라스미드 DNA 인코딩의 intradermal 배달을 보여 강화 된 녹색 형광 공 촛점 현미경을 사용하여 피부 세포의 EGFP의 효과적인 표현을 확인 문신 장치 및 B)를 사용하여 마우스 모델에서 단백질 (PCX-EGFP).

509 나노 미터에서 488 나노 미터와 방출 피크에서 여기 피크와 EGFP의 표현은 마우스 피부 세포에서 관찰 할 수 있습니다. 약 3 × 포함 DNA의 1.875 μg 선량에서 10 플라스미드 17 사본, 우리는 일반적으로 2 영역을 문신 1cm에서 10-20 EGFP 신호를 관찰했다. transfected 세포의이 상대적으로 낮은 숫자는 이전 연구 (3)의 결과와 일치한다. EGFP 표현 (그림 1) 플라스미드 EGFP가 ...

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Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

피부 문신은 intradermally 배달 DNA 백신에 대한 강력한하고 안전한 방법입니다. 여기 DNA 플라스미드 인코딩 EGFP는 실험실 쥐의 피부에 문신으로 전달되고 피부 세포에서 EGFP의 표현 그 다음 공 촛점 현미경으로 검사합니다.

피부는 DNA 백신 배달을위한 새로운 접근 방식으로 문신

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

강력한, 미세 유체 세포 내 전달 플랫폼으로 휴대 뒤쪽에서

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

연구

생체공학

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

피부에서 타입 I 콜라겐의 제조를위한 개선 된 방법

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

사례 연구로 담배에 과도 단백질 발현 : 실험 접근의 디자인을 사용하여 복잡한 시스템의 특성

Plants provide multiple benefits for the production of biopharmaceuticals including low costs, scalability, and safety. Transient expression offers the ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

전체 피부 결함 모델은 생체의 혈관 신생을 평가하기<em&gt; 생체</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

마이크로 소용돌이를 이용한 순차 분자 전달을위한 Electroporator을

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Fabrication of a Functionalized Magnetic Bacterial Nanocellulose with Iron Oxide Nanoparticles

철 산화물 나노 입자와 기능화 자기 세균 Nanocellulose의 제작

In this study, bacterial nanocellulose (BNC) produced by the bacteria Gluconacetobacter xylinus is synthesized and impregnated in situ with iron oxide ...

Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity

인간의 장 점막의 다세포 3 차원의 Organotypic 모델의 개발은 미세 중력 하에서 성장

Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

중간 엽 기질자가 조건에서 세포 배양 배송 : 정형 외과 응용 프로그램에 대한 스마트 접근

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

DNA Nanotubes as a Versatile Tool to Study Semiflexible Polymers

Semiflexible 고분자 공부를 다양 한 도구로 DNA 나노튜브

Mechanical properties of complex, polymer-based soft matter, such as cells or biopolymer networks, can be understood in neither the classical frame of ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

연골과 피부 조직 아날로그 소설 수동 Bioink Precellularization에 대 한 단위 기술 혼합을 이용 하 여 Bioprinting

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...