Name: skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery
Uploaded: 2012-10-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery at JoVE.com

Biz onların yardım ve teknik destek için İşbirlikçi Bilim, NYUMC Mikroskopisi Core Ofisi&#39;nde Kong Lab ve Dr Yan Deng tüm üyelerine teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma AIDS Araştırma için New York Üniversitesi Merkezi (CFAR, NIH hibe AI027742) adlı bir pilot hibe ile desteklenmiştir.

1. Plazmid DNA Saflaştırma <ol><li> DH5α E.coli yetkili hücrelere ökaryotik plazmid DNA kodlaması EGFP (fK-EGFP) Transform. FK boş vektör ayrıca, bir negatif kontrol olarak da kullanılabilir. </li><li> Kültür ve hasat DH5α E.coli hücreleri ve Qiagen EndoFree Plazmid Arıtma Handbook göre pDNA arındırmak. </li><li> Filtre pDNA 0.22 mikron PVDF steril filtre ile çözüm ve kullanıma kadar -20 ° C&#39;de saklayın. </li></ol> 2. Dövme Sistem Hazırlama <ol>...

<ol>
	<li>Bins, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+potent+DNA+vaccination+strategy+defined+by+in+vivo+monitoring+of+antigen+expression.">A rapid and potent DNA vaccination strategy defined by in vivo monitoring of antigen expression.</a> Nat Med. 11, 899-904 (2005).</li><li>Pokorna, D., Rubio, I., Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-vaccination+via+tattooing+induces+stronger+humoral+and+cellular+immune+responses+than+intramuscular+delivery+supported+by+molecular+adjuvants.">DNA-vaccination via tattooing induces stronger humoral and cellular immune responses than intramuscular delivery supported by molecular adjuvants.</a> Genet. Vaccines Ther. 6, 4 (2008).</li><li>van den Berg, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+intradermal+vaccination+by+DNA+tattooing+in+human+skin.">Optimization of intradermal vaccination by DNA tattooing in human skin.</a> Hum. Gene Ther. 20, 181-189 (2009).</li><li>Liu, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines:+a+review.">DNA vaccines: a review.</a> J. Intern. Med. 253, 402-410 (2003).</li><li>Koide, Y., Nagata, T., Yoshida, A., Uchijima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+vaccines.">DNA vaccines.</a> Jpn. J. Pharmacol. 83, 167-174 (2000).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Verstrepen, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+HIV-1+specific+T-cell+responses+by+short-interval+DNA+tattooing+as+compared+to+intramuscular+immunization+in+non-human+primates.">Improved HIV-1 specific T-cell responses by short-interval DNA tattooing as compared to intramuscular immunization in non-human primates.</a> Vaccine. 26, 3346-3351 (2008).</li><li>Potthoff, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunogenicity+and+efficacy+of+intradermal+tattoo+immunization+with+adenoviral+vector+vaccines.">Immunogenicity and efficacy of intradermal tattoo immunization with adenoviral vector vaccines.</a> Vaccine. 27, 2768-2774 (2009).</li><li>Quaak, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+tattoo+vaccination:+effect+on+plasmid+purity+and+transfection+efficiency+of+different+topoisoforms.">DNA tattoo vaccination: effect on plasmid purity and transfection efficiency of different topoisoforms.</a> J. Control Release. 139, 153-159 (2009).</li><li>Pokorna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccination+with+human+papillomavirus+type+16-derived+peptides+using+a+tattoo+device.">Vaccination with human papillomavirus type 16-derived peptides using a tattoo device.</a> Vaccine. 27, 3519-3529 (2009).</li></ol>

Bunun manipülasyon gerektiren, ya canlı veya zayıflatılmış patojen 4 aşılar göstermiyor gibi DNA aşılama geleneksel aşılama stratejileri daha güvenli olarak kabul edilir. Ancak DNA aşılama sonucu teslimat güzergahı üzerinde büyük ölçüde bağlıdır. Deri gibi Langerhans Hücreleri ve dendritik hücreler 1, ve böylece immunojenite ve erişim 5,6 kolaylığı açısından bağışıklama için ideal bir site olarak antijen sunan hücreler, bol miktarda bulunur. Son...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif / Malzeme Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> fK-EGFP plazmid DNA </td><td> Clontech </td><td></td><td></td></tr><tr><td> STEALTH Rotary Dövme Sistemi </td><td> Dünya Dövme Tedarik </td><td> STEALTH-L </td><td></td></tr><tr><td> Dövme iğneleri </td><td> Dünya Dövme Tedarik </td><td> 1207RSB </td><td></td></tr><tr><td> EndoFree Plazmid Maxi Seti </td><td> Qiagen </td><td> 12362 </td><td></td></tr><tr><td> 0.22 mikron PVDF steril filtre </td><td> Millipore </td><td> SLGV013SL </td><td></td></tr><tr><td> elektrikli saç düzeltici </td><td> Ticari olarak temin edilebilen </td><td></td><td></td></tr><tr><td> tek güvenlik jilet </td><td> Ticari olarak temin edilebilen </td><td></td><td></td></tr><tr><td> GümüşSülfadiazin Krem </td><td> Watson </td><td> NDC 0591-0810-55 </td><td></td></tr><tr><td> Ketamin HCL </td><td></td><td> NDC 0856-2012-01 </td><td></td></tr><tr><td> Zylazine Steril Solüsyonu </td><td></td><td> NADA 139-236 </td><td></td></tr></tbody></table>

skin tattooing as a novel approach for dna vaccine delivery

Nükleik asit tabanlı aşılamanın artan ilgi bir konu, immünolojik önemli antijenleri kodlayan özellikle plazmid DNA (pDNA) &#39;dir. Mühendislik pDNA aşılar uygulandı sonra, transkripsiyonu ve bağışıklık sistemi tepkiler olabilir immünojen proteinler tercüme edilmiştir. DNA aşıları sunma Birçok yönden araştırılmıştır, ancak her teslimat rotayı kendi avantajları ve tuzaklar vardır. Cilt dövme, güvenli maliyet-etkin ve uygun bir roman tekniğidir. Buna ek olarak, iğne tarafından uygulanan delikler de güçlü bir yardımcı madde olarak hizmet edebilir. Burada, a) plazmid DNA kodlama intradermal teslimat göstermek gelişmiş yeşil flüoresan konfokal mikroskopi kullanılarak cilt hücrelerinde EGFP etkili ifade onaylayın dövme cihazı ve b) kullanılarak bir fare modelinde protein (fK-EGFP).

509 nm 488 nm ve emisyon zirvesinde bir uyarma zirve ile EGFP ifadesi fare deri hücreleri görülebilir. Yaklaşık 3 × içeren bir DNA 1.875 mikrogram doz, 10 Gönderen plazmid 17 kopya, biz genellikle 2 alana dövme 1 cm 10-20 EGFP sinyalleri görülmektedir. Transfekte edilmiş hücrelerin Bu, nispeten az sayıda bir önceki çalışmada, 3 sonuçları ile uyum içindedir. EGFP ifade (Şekil 1) plazmid EGFP DNA dövme tekniği kullanarak hayvanın deri hücrelerine ...

Watch this Scientific Journal Video about Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery at JoVE.com

Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

Cilt dövme intradermal teslimat DNA aşısı için güçlü ve güvenli bir yoldur. Burada, bir DNA plazmid kodlama EGFP bir laboratuvar fare cilt dövme tarafından teslim edilir ve cilt hücrelerinde EGFP ifadesi ardından konfokal mikroskopi tarafından denetlenir.

Cilt DNA Aşı Teslim İçin Yeni Bir Yaklaşım olarak Dövme

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

Sağlam, mikroakışkan Hücre içi Delivery Platform olarak hücre Sıkma

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

Cilt Tip I Kolajen hazırlanması için geliştirilmiş bir yöntem

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Characterization of Complex Systems Using the Design of Experiments Approach: Transient Protein Expression in Tobacco as a Case Study

Bir Vaka Çalışması Olarak Tütün Geçici Protein Expression: Deneyler Yaklaşımı Tasarım Kullanma Karmaşık Sistemler Karakterizasyonu

Plants provide multiple benefits for the production of biopharmaceuticals including low costs, scalability, and safety. Transient expression offers the ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Tam Cilt Hata Modeli Biyomateryallerin vaskülarizasyonunu değerlendirin<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Microscale Vortex destekli Sıralı Moleküler Teslimat için Electroporator

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Fabrication of a Functionalized Magnetic Bacterial Nanocellulose with Iron Oxide Nanoparticles

Demir Oksit Nanopartiküller ile Fonksiyonlu Manyetik Bakteriyel Nanocellulose Fabrikasyon

In this study, bacterial nanocellulose (BNC) produced by the bacteria Gluconacetobacter xylinus is synthesized and impregnated in situ with iron oxide ...

Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity

İnsan bağırsak mukozasının bir Multisellüler Üç boyutlu Organotipik Modelinin Geliştirilmesi yerçekimi Yetiştirilen

Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

Mezenkimal Stromal Otolog Koşullarında Hücre Kültürü ve Teslimat: Ortopedik Uygulamalar için Akıllı Yaklaşım

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

DNA Nanotubes as a Versatile Tool to Study Semiflexible Polymers

DNA nanotüpler Semiflexible polimerler eğitim için çok yönlü bir araç olarak

Mechanical properties of complex, polymer-based soft matter, such as cells or biopolymer networks, can be understood in neither the classical frame of ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

Bioprinting kıkırdak ve cilt doku analogları bir roman pasif birimi teknik Bioink Precellularization için karıştırma kullanmak

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...