Name: cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in mice
Uploaded: 2013-02-10T14:00:00
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Ringraziamo il Dott. Helio Salgado, Renata Lataro e Mauro de Oliveira, Facoltà di Medicina di Ribeirão Preto, Università di San Paolo e il dottor Ben Janssen, Cardiovascular Research Institute di Maastricht, Università di Maastricht, per la generosa assistenza durante il processo di configurazione. Questo lavoro è stato sostenuto da FONDECYT concessione n ° 11090114 di DSC

Protocollo è stato approvato dal Comitato Etico di Medicina Clinica Alemana Facultad de-Universidad del Desarrollo. I. Preparazione infusione di dobutamina <ol><li> Sciogliere 10 mg di dobutamina in 20 ml di acqua distillata sterile, per ottenere una soluzione stock di 500 ug / ml dobutamina. Aliquotare e conservare a -20 ° C. Questa soluzione può essere utilizzata per almeno 3 mesi. </li><li> Scongelare una aliquota di soluzione di dobutamina a temperatura ambiente. </li><li> Diluire l...

<ol>
	<li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice.">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).</li><li>Janssen, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anesthetics+on+systemic+hemodynamics+in+mice.">Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).</li><li>Lorenz, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+guide+to+evaluating+cardiovascular,+renal,+and+pulmonary+function+in+mice.">A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).</li><li>Lorenz, J. N., Robbins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+intraventricular+pressure+and+cardiac+performance+in+the+intact+closed-chest+anesthetized+mouse.">Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse.</a> Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).</li><li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+catheterization+technique+in+a+closed-chest+murine+model.">Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).</li><li>Daniels, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+cardiac+functional+reserve+in+type+2+diabetic+db/db+mice+is+associated+with+metabolic,+but+not+structural,+remodelling.">Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling.</a> Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).</li><li>De Celle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+structural+and+functional+consequences+of+cardiac+ischaemia-reperfusion+injury+in+vivo+in+mice.">Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice.</a> Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).</li><li>Huntgeburth, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor+beta+oppositely+regulates+the+hypertrophic+and+contractile+response+to+beta-adrenergic+stimulation+in+the+heart.">Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart.</a> PLoS One. 6, e26628 (2011).</li><li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+function+in+young+and+old+Little+mice.">Cardiac function in young and old Little mice.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).</li><li>Christoffersen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+lipid+accumulation+associated+with+diastolic+dysfunction+in+obese+mice.">Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice.</a> Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).</li></ol>

Stress test cardiaco indotto da dobutamina e monitorato da cateterismo cardiaco è laborioso. Tuttavia, secondo il protocollo qui descritto e con un breve tempo di formazione, è possibile valutare sei parametri emodinamici in un singolo esperimento che durano circa un&#39;ora. Le fasi critiche del protocollo qui presentati sono i cannulazioni di vasi sanguigni. Per quanto riguarda la cannulazione della carotide, l&#39;incisione effettuata deve essere sufficientemente profonda per rompere i ...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> Reagenti </td></tr><tr><td> PE-50/10 </td><td> Warner Instruments </td><td> 64-0752 </td><td></td></tr><tr><td> Filo di seta 6/0 HR17 </td><td> Tagum </td><td> SN0713K </td><td></td></tr><tr><td> Xylacin 20 mg / ml </td><td> Laboratorio Centrovet </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ketamina 100 mg / ml </td><td> Trascina Pharma </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cloruro di sodio 0,9% </td><td> Lab Sanderson SA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cloridrato Dobutamina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D0676 </td><td></td></tr><tr><td> Siringa insulina U-100 29G x ½ &quot; </td><td> Terumo Medical Co. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Pinze per dissezione Micro Style 11,5 cm 7 </td><td> LawtonMedizintechnik </td><td> 09-0959 </td><td></td></tr><tr><td> Graefe Pinze Cvd 0,7 millimetri 7 centimetri </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 62-0263 </td><td></td></tr><tr><td> Morsetti Dieffenbach bulldog Cl Str 38 millimetri </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 60-010 </td><td></td></tr><tr><td> Forbici Vannas 8 centimetri Str Fh </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 63-1400 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Attrezzatura </td></tr><tr><td> SPR-671 Mikro-Tip pressione catetere </td><td> Millar strumenti </td><td> 840-6719 </td><td></td></tr><tr><td> PCU-2000 Pressure Control Unit </td><td> Millar strumenti </td><td> 880-0129 </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab 4/30 </td><td> ADinstruments Pty Ltd. </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> LabChartPro 7 </td><td> ADinstruments Pty Ltd. </td><td> MLU260 / 7 </td><td></td></tr><tr><td> Legato200 pompa di infusione </td><td> KdScientific </td><td> KD-KDS210P </td><td></td></tr><tr><td> TCAT-2LV Regolatore di temperatura e la piastra di riscaldamento isotermico </td><td> PhysiTemp strumenti Inc. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dotazioni di ossigeno medica </td><td> Indura </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Sonda rettale </td><td> ADinstruments Pty Ltd. </td><td> MLT1404 </td><td></td></tr><tr><td> Microscopio trinoculare, illuminazione assiale </td><td> LW scientifico </td><td> Z2B-TRI-Etne, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF </td><td></td></tr></tbody></table>

cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in mice

Dobutamina è un β-adrenergico con un&#39;affinità maggiore per il recettore espresso nel cuore (β 1) rispetto ai recettori espressi nelle arterie (β 2). Quando somministrato per via sistemica, aumenta la domanda cardiaca. Così, dobutamina smaschera ritmo anormale o aree ischemiche potenzialmente a rischio di infarto. Monitoraggio della funzione cardiaca durante una prova da sforzo può essere eseguita sia ecocardiografia o cateterizzazione cardiaca. Quest&#39;ultima è una tecnica invasiva ma più accurate e informative che il primo. Test di stress cardiaco indotto da dobutamina e monitorato da cateterismo cardiaco realizzato come qui descritto consente, in un singolo esperimento, la misurazione dei seguenti parametri emodinamici: frequenza cardiaca (HR), la pressione sistolica, pressione diastolica, pressione telediastolica, massima pressione positiva sviluppo (dP / dtmax) e la massima stampa negativaure sviluppo (dP / dt min), in condizioni basali e in dosi crescenti di dobutamina. Come previsto, in topi normali, abbiamo osservato una dobutamina aumento dose-correlato in HR, dP / dt max e dP / dt min. Inoltre, alla massima dose testata (12 ng / g / min), lo scompenso cardiaco di alto contenuto di grassi topi obesi indotta dalla dieta è stato smascherato.

Il segnale di pressione arteriosa è definita da pressione sistolica e diastolica. Quando il sensore di pressione è all&#39;interno del ventricolo sinistro, la sua pressione (LVP) della forma d&#39;onda è caratterizzata da una caduta a zero della pressione diastolica e l&#39;aspetto della contrazione atriale sinistra prima contrazione ventricolare (Figura 1). In condizioni originarie, topi anestetizzati ketamina-xilazina normali aveva HR di 280 ± 24, P max di 107 ± 8, P min di ...

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Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Descriviamo il protocollo di eseguire un test di stress cardiaco indotto da dobutamina e monitorato da cateterizzazione cardiaca in topi normali. Inoltre ci mostra la sua applicazione per smascherare subclinica cardiopatia in alto contenuto di grassi topi obesi indotta dalla dieta.

Stress Test cardiaca indotta da dobutamina e monitorato da cateterizzazione cardiaca nei topi

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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