Name: genetic modification and recombination of salivary gland organ cultures
Uploaded: 2013-01-28T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures at JoVE.com

המחברים מבקשים להודות לד&quot;ר דידרה נלסון על הערות מועילות ולקריאה ביקורתית של כתב היד. עבודה זו מומנה על ידי מענקי NIH DE019244, DE019197, וDE021841 למ&quot;ל, F32DE02098001 לי&quot;ש, וC06 RR015464 לאוניברסיטת אולבני, SUNY.

הפרוטוקול מכיל ארבעה שלבים עיקריים, כמתואר באיור 1. כל הצעדים מתוארים בפירוט מלא. בניית adenovirus וטיהור נגיפית צריכות להיות מופעלים מראש של קצירת האיברים לשימוש בהתמרה הגנטית של יסודות אפיתל גזור. כל אמצעי בטיחות BSL-2 הסטנדרטי צריך להיות אחרי כשעובד עם adenoviruses. </p...

<ol>
	<li>Tucker, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+gland+development.">Salivary gland development.</a> Seminars in cell &amp; developmental biology. 18, 237-244 (2007).</li><li>Sakai, T., Onodera, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+organ+culture.">Embryonic organ culture.</a> Curr. Protoc. Cell Biol. Chapter 19, Unit 19 (2008).</li><li>Patel, V. N., Rebustini, I. T., Hoffman, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+gland+branching+morphogenesis.">Salivary gland branching morphogenesis.</a> Differentiation. 74, 349-364 (2006).</li><li>Sequeira, S. J., Larsen, M., DeVine, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+and+growth+factors+in+salivary+gland+development.">Extracellular matrix and growth factors in salivary gland development.</a> Frontiers of oral biology. 14, 48-77 (2010).</li><li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+detection+of+E1-containing+adenovirus+in+saliva+after+the+delivery+of+a+first-generation+adenoviral+vector+to+human+parotid+gland.">Transient detection of E1-containing adenovirus in saliva after the delivery of a first-generation adenoviral vector to human parotid gland.</a> J. Gene Med. 12, 3-10 (2010).</li><li>Larsen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+PI+3-kinase+and+PIP3+in+submandibular+gland+branching+morphogenesis.">Role of PI 3-kinase and PIP3 in submandibular gland branching morphogenesis.</a> Developmental biology. 255, 178-191 (2003).</li><li>Hoffman, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+profiles+of+mouse+submandibular+gland+development:+FGFR1+regulates+branching+morphogenesis+in+vitro+through+BMP-+and+FGF-dependent+mechanisms.">Gene expression profiles of mouse submandibular gland development: FGFR1 regulates branching morphogenesis in vitro through BMP- and FGF-dependent mechanisms.</a> Development. 129, 5767-5778 (2002).</li><li>Rebustini, I. T., Hoffman, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ECM+and+FGF-dependent+assay+of+embryonic+SMG+epithelial+morphogenesis:+investigating+growth+factor/matrix+regulation+of+gene+expression+during+submandibular+gland+development.">ECM and FGF-dependent assay of embryonic SMG epithelial morphogenesis: investigating growth factor/matrix regulation of gene expression during submandibular gland development.</a> Methods Mol. Biol. 522, 319-330 (2009).</li><li>Partanen, A. M., Thesleff, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transferrin+and+tooth+morphogenesis:+retention+of+transferrin+by+mouse+embryonic+teeth+in+organ+culture.">Transferrin and tooth morphogenesis: retention of transferrin by mouse embryonic teeth in organ culture.</a> Differentiation. 34, 25-31 (1987).</li><li>Naka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+branching+morphogenesis+of+fetal+mouse+submandibular+gland+by+sodium+ascorbate+and+epigallocatechin+gallate.">Modulation of branching morphogenesis of fetal mouse submandibular gland by sodium ascorbate and epigallocatechin gallate.</a> In Vivo. 19, 883-888 (2005).</li><li>Bornstein, P., Traub, W., Neurath, H., Hill, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemistry+and+biology+of+collagen.">The chemistry and biology of collagen.</a> The Proteins. 4, 412-632 (1979).</li><li>Zhou, L., Higginbotham, E. J., Yue, B. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ascorbic+acid+on+levels+of+fibronectin,+laminin+and+collagen+type+1+in+bovine+trabecular+meshwork+in+organ+culture.">Effects of ascorbic acid on levels of fibronectin, laminin and collagen type 1 in bovine trabecular meshwork in organ culture.</a> Curr. Eye Res. 17, 211-217 (1998).</li><li>Daley, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROCK1-directed+basement+membrane+positioning+coordinates+epithelial+tissue+polarity.">ROCK1-directed basement membrane positioning coordinates epithelial tissue polarity.</a> Development. 139, 411-422 (2012).</li><li>Daley, W. P., Gulfo, K. M., Sequeira, S. J., Larsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+mechanochemical+checkpoint+and+negative+feedback+loop+regulating+branching+morphogenesis.">Identification of a mechanochemical checkpoint and negative feedback loop regulating branching morphogenesis.</a> Developmental biology. 336, 169-182 (2009).</li><li>Sequeira, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+focal+adhesion+complex+formation+and+salivary+gland+epithelial+cell+organization+by+nanofibrous+PLGA+scaffolds.">The regulation of focal adhesion complex formation and salivary gland epithelial cell organization by nanofibrous PLGA scaffolds.</a> Biomaterials. 33, 3175-3186 (2012).</li><li>Nogawa, H., Mizuno, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+control+over+elongating+and+branching+morphogenesis+in+salivary+gland+development.">Mesenchymal control over elongating and branching morphogenesis in salivary gland development.</a> Journal of embryology and. 66, 209-221 (1981).</li><li>Sakai, T., Larsen, M., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibronectin+requirement+in+branching+morphogenesis.">Fibronectin requirement in branching morphogenesis.</a> Nature. 423, 876-881 (2003).</li><li>Daley, W. P., Kohn, J. M., Larsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+focal+adhesion+protein-based+mechanochemical+checkpoint+regulates+cleft+progression+during+branching+morphogenesis.">A focal adhesion protein-based mechanochemical checkpoint regulates cleft progression during branching morphogenesis.</a> Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists. 240, 2069-2083 (2011).</li><li>Knox, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parasympathetic+innervation+maintains+epithelial+progenitor+cells+during+salivary+organogenesis.">Parasympathetic innervation maintains epithelial progenitor cells during salivary organogenesis.</a> Science. 329, 1645-1647 (2010).</li><li>Larsen, M., Wei, C., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+and+fibronectin+dynamics+during+branching+morphogenesis.">Cell and fibronectin dynamics during branching morphogenesis.</a> J. Cell Sci. 119, 3376-3384 (2006).</li><li>Wei, C., Larsen, M., Hoffman, M. P., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-organization+and+branching+morphogenesis+of+primary+salivary+epithelial+cells.">Self-organization and branching morphogenesis of primary salivary epithelial cells.</a> Tissue Eng. 13, 721-735 (2007).</li><li>Zheng, C., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+viral+and+mammalian+promoters+for+use+in+gene+delivery+to+salivary+glands.">Evaluation of viral and mammalian promoters for use in gene delivery to salivary glands.</a> Mol. Ther. 12, 528-536 (2005).</li><li>Hsu, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+gene+transfer+to+developing+mouse+salivary+glands.">Viral gene transfer to developing mouse salivary glands.</a> J. Dent. Res. 91, 197-202 (2012).</li></ol>

טכניקת רקומבינציה אפיתל-mesenchymal vivo לשעבר פורסמה לראשונה לבלוטות רוק לסת תחתונות בשנת 1981 16. בפרוטוקול זה, אנו עומדים בהרחבה על השיטה המקורית, באמצעות זיהום adenoviral כדי לתפעל ביטוי גני התא אפיתל בהקשר של בלוטה התחברה מחדש. אנו מראים כי אחוז של תאי האפיתל נגוע בא?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> DMEM / החם של F12 בינוני ללא פנול אדום </td><td> חי טכנולוגיות </td><td> 21041-025 </td><td></td></tr><tr><td> פניצילין וסטרפטומיצין </td><td> חי טכנולוגיות </td><td> 15070-163 </td><td> מניית 10X </td></tr><tr><td> Dispase </td><td> חי טכנולוגיות </td><td> 17105-041 </td><td> הקפא aliquots שימוש היחיד ב- 20C </td></tr><tr><td> BSA </td><td> סיגמא </td><td> A2934-100G </td><td> V שבריר, אנדוטוקסין הנמוך </td></tr><tr><td> Adeno-X-GFP </td><td> BD Biosciences </td><td> 8138-1 </td><td> צריך להיות כייל נוגדנים גבוה (1x10 10 pfu / מ&quot;ל). וירוסים מטוהרים CsCl יעילים יותר ממטוהר טור וירוסים בבדיקה זו. </td></tr><tr><td> 16% Paraformaldehyde </td><td&gt; מדעי מיקרוסקופ אלקטרונים </td><td> 15710 </td><td> דילול של 2% בPBS עם סוכרוז 5% (w / v) </td></tr><tr><td> 1X פוספט-נאגר מלוח (PBS) </td><td> חי טכנולוגיות </td><td> 70011-044 </td><td> הכין ממניות 10X </td></tr><tr><td> תמיסת המלח המאוזן של האנק </td><td> חי טכנולוגיות </td><td> 14175095 </td><td> לא סידן, לא מגנזיום, לא אדום פנול </td></tr><tr><td> Transferrin </td><td> סיגמא </td><td> T8158 </td><td> 25 מ&quot;ג / מיליליטר פתרון המניות בDMEM/F12 תקשורת. הקפא aliquots שימוש יחיד ב- 20C </td></tr><tr><td> חומצת L-אסקורבית (הוויטמין C) </td><td> סיגמא </td><td> A4403 </td><td> 75 מ&quot;ג / מיליליטר פתרון המניות בDMEM/F12 aliquots media.Freeze שימוש יחיד ב- 20C </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> טבלת 1. רשימה של חומרים כימיים הנדרש לSMG פרוטוקול רקומבינציה. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td&gt; <td></td></tr><tr><td> 10 מנות פלסטיק סטריליים סנטימטר </td><td> קורנינג </td><td> 430167 </td><td> צלחות ללא רקמת התרבות שטופלה יכולות לשמש גם. </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ לנתח סטריאו עם אור בסיס מועבר </td><td> ניקון </td><td> SMZ645 </td><td> כל סטריאו ביתור מיקרוסקופ ניתן להשתמש כי יש בסיס אור מועבר. </td></tr><tr><td> 35 מנות תרבות רקמות מ&quot;מ </td><td> בז </td><td> 353001 </td><td> צלחות ללא רקמת התרבות שטופלה יכולות לשמש גם. </td></tr><tr><td> 50 מנות microwell קוטר המ&quot;מ </td><td> מאטק תאגיד </td><td> P50-G-1.5-14F </td><td></td></tr><tr><td> מסננים הממברנה מסלול-Etch Nuclepore </td><td> Whatman </td><td> 110405 </td><td> קוטר מ&quot;מ 13, גודל נקבובי 0.1 מ&quot;מ </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ פלואורסצנטי widefield </td><td> Carl Zeiss, ארה&quot;ב </td><td> Axio אובזרוור Z1 </td><td> כל מיקרוסקופ פלואורסצנטי (זקוף, אניnverted או ביתור מיקרוסקופ סטריאו) ניתן להשתמש כדי לעקוב אחר ביטוי של GFP בהגדלה נמוכה עם מצלמה דיגיטלית מצורפת. </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ confocal </td><td> Microsystems היקה </td><td> TCS SP5 </td><td> מיקרוסקופיה confocal יש צורך לראות מבנים ניידים מפורטים. כל confocal מיקרוסקופ ניתן להשתמש. </td></tr><tr><td> עכברי מתוזמן בהריון נשים, מתח CD-1 או ICR </td><td> צ&#39;ארלס ריבר מעבדות </td><td></td><td> עוברים נקצרים ביום 13 (עם היום של גילוי תוסף המיועד כיום 0). </td></tr><tr><td> להב אזמל # 11 </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 10011-00 </td><td></td></tr><tr><td> ידית אזמל # 3 </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 10003-12 </td><td></td></tr><tr><td> דומון # 5 סגסוגת מלקחי inox, 0.05 X 0.02mm </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 11252-20 </td><td> אידיאלי לקציר בלוטות מעוברים </td></tr><tr><td&gt; דומון # 5 סגסוגת מלקחי dumostar, 0.05 X 0.01mm </td><td> כלי מדע פיין </td><td> 11295-20 </td><td> טיפי גלם דרושים להסרת mesenchyme מהאפיתל. מחטי טונגסטן יכולים לשמש גם. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> טבלה 2. ציוד המשמש בSMG פרוטוקול רקומבינציה. </td></tr></tbody></table>

genetic modification and recombination of salivary gland organ cultures

מסעף המורפוגנזה מתרחש במהלך ההתפתחות של איברים רבים, ובלוטת הלסת התחתונה העכבר העוברית (SMG) היא מודל קלסי ללימוד הסתעפות המורפוגנזה. בSMG פיתוח, תהליך זה כרוך איטרטיבי צעדים של ניצן אפיתל והיווצרות דביקה, סופו של דבר לתת לעלייה לרשת מסועפת של acini מורכבת וצינורות, המשמשת לייצור ולשנות / להעביר את הרוק, בהתאמה, לחלל הפה 1 - 3. קרום אפיתל הקשורים למרתף וההיבטים של תא mesenchymal, כוללים תאי mesenchyme, גורמי גדילה והתאי, המיוצרים על ידי תאים אלה, הם קריטיים למנגנון ההסתעפות, למרות כמה האירועים התאיים ומולקולריים מתואמים נשאר הבינו היטב 4 . המחקר של המנגנונים המולקולריים נהיגת התקדמות המורפוגנזה אפיתל הבנת מנגנוני התפתחות שלנו ומספק תובנה regener האפשריגישות רפואה ative. מחקרים כאלה כבר הקשו בשל העדר השיטות יעילות למניפולציה גנטית של האפיתל הרוק. נכון לעכשיו, תמרת adenoviral מייצגת את השיטה היעילה ביותר להכוונת תאי אפיתל בבלוטות למבוגרות in vivo 5. עם זאת, בexplants העוברי, mesenchyme צפוף וקרום המרתף המקיף את תאי האפיתל מונעים גישה נגיפית לתאי האפיתל. אם mesenchyme מוסר, האפיתל ניתן transfected באמצעות adenoviruses, ויסודות אפיתל יכולים לחדש את הסתעפות המורפוגנזה בנוכחות Matrigel או laminin-111 6,7. צמיחת הגמד אפיתל mesenchyme ללא דורשת גם תוספת נוספת עם גורמי גדילה מסיסים ולא לסכם המורפוגנזה הסתעפות באופן מלא כפי שהוא מתרחש בבלוטות שלמות 8. כאן אנו מתארים טכניקה המאפשרת תמרת adenoviral של תאי האפיתל והתרבות של דואר transfectedpithelium עם mesenchyme המשויך. בעקבות microdissection של SMGs העוברי, הסרת mesenchyme והזיהומים נגיפיים של האפיתל עם אדנווירוס GFP המכיל, אנו מראים כי האפיתל משלב מחדש באופן ספונטני עם mesenchyme הנגוע, משחזר מבנה בלוטות SMG שלם ומסועף המורפוגנזה. אוכלוסיית תאי אפיתל המהונדס גנטי ניתן לפקח בקלות באמצעות שיטות מיקרוסקופ פלואורסצנטי רגילות, אם תייג-fluorescently מבני adenoviral משמשים. שיטת רקומבינציה הרקמות המתוארות כאן היא כיום השיטה היעילה והנגישה ביותר לtransfection של תאי האפיתל עם וקטור פראי סוג או מוטציה בתוך מבנה רקמת 3D מורכב שאינו דורש דור של בעלי חיים מהונדסים.

הזרימה של צעדי הניסוי המרכזיים מתוארת באיור 1. דוגמה של SMG שלם, גמד אפיתל מבודד, וmesenchyme המקביל שלה מוצגת באיור 2. תמונות של brightfield SMGs מורכב, שממשיך לעבור הסתעפות המורפוגנזה כאשר vivo לשעבר תרבותי לזמנים שצוינו, המוצגים באיור 3. בלוטות recombined ...

Watch this Scientific Journal Video about Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures at JoVE.com

Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures

טכניקה גנטית כדי לתמרן בתוך כל תאי האפיתל<em&gt; Vivo לשעבר</em&gt; בלוטות תרבית עוברית של עכברי לסת תחתונה (SMGs) באמצעות העברת גנים נגיפית מתוארות. שיטה זו מנצלת את היכולת המולדת של SMG האפיתל וmesenchyme ספונטני לrecombine לאחר פרידה וזיהום של יסודות אפיתל עם וקטורי adenoviral.

שינוי ורקומבינציה גנטי של תרבויות איברי בלוטות רוק

Branching  morphogenesis occurs during the development of many organs, and the embryonic  mouse submandibular gland (SMG) is a classical model for the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

Dissection של בלוטות הרוק midgut ו מ AE. aegypti יתושים

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

PDMS ייצור המכשיר ושינוי פני השטח

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

שיטת לתרבות מוקדם של עוברים צ&#39;יק לשעבר vivo (תרבות חדש)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

הר שלם כפול באתרו הכלאה של עוברים צ&#39;יק מוקדם

Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures

הכנת 2-dGuo שטופלו תרבויות איברים קורנית

In the thymus, interactions between developing T-cell precursors and stromal cells that include cortical and medullary epithelial cells are known to play ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

בידוד של בלוטת הרוק עכבר תאים גזע

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

DNA Methylation: Bisulphite Modification and Analysis

מתילציה DNA: Bisulphite שינוי וניתוח

Epigenetics describes the heritable changes in gene function that occur independently to the DNA sequence. The molecular basis of epigenetic gene ...

Preparation of the Mgm101 Recombination Protein by MBP-based Tagging Strategy

הכנה של חלבון רקומבינציה Mgm101 ידי אסטרטגיה תיוג מבוססת MBP

The MGM101 gene was identified 20 years ago for its role in the maintenance of mitochondrial DNA. Studies from several groups have suggested that the ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

תרבויות אלטרנטיבי לפלוריפוטנטיים אנושיים לתאים גזע ייצור, תחזוקה וניתוח גנטי

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

DNA Electroporation, בידוד והדמיה של Myofibers

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...