Name: genetic modification and recombination of salivary gland organ cultures
Uploaded: 2013-01-28T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures at JoVE.com

Yazarlar yararlı yorumlar ve elyazmasının eleştirel okuma için Dr Deirdre Nelson teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma Albany Üniversitesi, SUNY NIH hibe DE019244, DE019197 ve DE021841 ML, F32DE02098001 SJS, ve C06 RR015464 tarafından finanse edildi.

Protokol olarak Şekil 1 &#39;de gösterilen dört ana adımı içerir. Tüm adımlar tam detaylı olarak açıklanmıştır. Adenovirüs yapı viral ve arıtma parçalanmış epitel esasların genetik iletiminde kullanım için organ toplama önce yapılmalıdır. Adenovirüsler ile çalışırken tüm standart BSL-2 güvenlik önlemlerine uyulmalıdır. 1. Fare Embriyonik Submandibular tükrük bezi (SMG) Hasat ve Mikrodisseksiyon <ol><li> Embriyonik gün 13 de fare embr...

<ol>
	<li>Tucker, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+gland+development.">Salivary gland development.</a> Seminars in cell &amp; developmental biology. 18, 237-244 (2007).</li><li>Sakai, T., Onodera, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+organ+culture.">Embryonic organ culture.</a> Curr. Protoc. Cell Biol. Chapter 19, Unit 19 (2008).</li><li>Patel, V. N., Rebustini, I. T., Hoffman, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+gland+branching+morphogenesis.">Salivary gland branching morphogenesis.</a> Differentiation. 74, 349-364 (2006).</li><li>Sequeira, S. J., Larsen, M., DeVine, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+and+growth+factors+in+salivary+gland+development.">Extracellular matrix and growth factors in salivary gland development.</a> Frontiers of oral biology. 14, 48-77 (2010).</li><li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+detection+of+E1-containing+adenovirus+in+saliva+after+the+delivery+of+a+first-generation+adenoviral+vector+to+human+parotid+gland.">Transient detection of E1-containing adenovirus in saliva after the delivery of a first-generation adenoviral vector to human parotid gland.</a> J. Gene Med. 12, 3-10 (2010).</li><li>Larsen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+PI+3-kinase+and+PIP3+in+submandibular+gland+branching+morphogenesis.">Role of PI 3-kinase and PIP3 in submandibular gland branching morphogenesis.</a> Developmental biology. 255, 178-191 (2003).</li><li>Hoffman, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+profiles+of+mouse+submandibular+gland+development:+FGFR1+regulates+branching+morphogenesis+in+vitro+through+BMP-+and+FGF-dependent+mechanisms.">Gene expression profiles of mouse submandibular gland development: FGFR1 regulates branching morphogenesis in vitro through BMP- and FGF-dependent mechanisms.</a> Development. 129, 5767-5778 (2002).</li><li>Rebustini, I. T., Hoffman, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ECM+and+FGF-dependent+assay+of+embryonic+SMG+epithelial+morphogenesis:+investigating+growth+factor/matrix+regulation+of+gene+expression+during+submandibular+gland+development.">ECM and FGF-dependent assay of embryonic SMG epithelial morphogenesis: investigating growth factor/matrix regulation of gene expression during submandibular gland development.</a> Methods Mol. Biol. 522, 319-330 (2009).</li><li>Partanen, A. M., Thesleff, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transferrin+and+tooth+morphogenesis:+retention+of+transferrin+by+mouse+embryonic+teeth+in+organ+culture.">Transferrin and tooth morphogenesis: retention of transferrin by mouse embryonic teeth in organ culture.</a> Differentiation. 34, 25-31 (1987).</li><li>Naka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+branching+morphogenesis+of+fetal+mouse+submandibular+gland+by+sodium+ascorbate+and+epigallocatechin+gallate.">Modulation of branching morphogenesis of fetal mouse submandibular gland by sodium ascorbate and epigallocatechin gallate.</a> In Vivo. 19, 883-888 (2005).</li><li>Bornstein, P., Traub, W., Neurath, H., Hill, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemistry+and+biology+of+collagen.">The chemistry and biology of collagen.</a> The Proteins. 4, 412-632 (1979).</li><li>Zhou, L., Higginbotham, E. J., Yue, B. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ascorbic+acid+on+levels+of+fibronectin,+laminin+and+collagen+type+1+in+bovine+trabecular+meshwork+in+organ+culture.">Effects of ascorbic acid on levels of fibronectin, laminin and collagen type 1 in bovine trabecular meshwork in organ culture.</a> Curr. Eye Res. 17, 211-217 (1998).</li><li>Daley, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROCK1-directed+basement+membrane+positioning+coordinates+epithelial+tissue+polarity.">ROCK1-directed basement membrane positioning coordinates epithelial tissue polarity.</a> Development. 139, 411-422 (2012).</li><li>Daley, W. P., Gulfo, K. M., Sequeira, S. J., Larsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+mechanochemical+checkpoint+and+negative+feedback+loop+regulating+branching+morphogenesis.">Identification of a mechanochemical checkpoint and negative feedback loop regulating branching morphogenesis.</a> Developmental biology. 336, 169-182 (2009).</li><li>Sequeira, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+focal+adhesion+complex+formation+and+salivary+gland+epithelial+cell+organization+by+nanofibrous+PLGA+scaffolds.">The regulation of focal adhesion complex formation and salivary gland epithelial cell organization by nanofibrous PLGA scaffolds.</a> Biomaterials. 33, 3175-3186 (2012).</li><li>Nogawa, H., Mizuno, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+control+over+elongating+and+branching+morphogenesis+in+salivary+gland+development.">Mesenchymal control over elongating and branching morphogenesis in salivary gland development.</a> Journal of embryology and. 66, 209-221 (1981).</li><li>Sakai, T., Larsen, M., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibronectin+requirement+in+branching+morphogenesis.">Fibronectin requirement in branching morphogenesis.</a> Nature. 423, 876-881 (2003).</li><li>Daley, W. P., Kohn, J. M., Larsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+focal+adhesion+protein-based+mechanochemical+checkpoint+regulates+cleft+progression+during+branching+morphogenesis.">A focal adhesion protein-based mechanochemical checkpoint regulates cleft progression during branching morphogenesis.</a> Developmental dynamics : an official publication of the American Association of Anatomists. 240, 2069-2083 (2011).</li><li>Knox, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parasympathetic+innervation+maintains+epithelial+progenitor+cells+during+salivary+organogenesis.">Parasympathetic innervation maintains epithelial progenitor cells during salivary organogenesis.</a> Science. 329, 1645-1647 (2010).</li><li>Larsen, M., Wei, C., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+and+fibronectin+dynamics+during+branching+morphogenesis.">Cell and fibronectin dynamics during branching morphogenesis.</a> J. Cell Sci. 119, 3376-3384 (2006).</li><li>Wei, C., Larsen, M., Hoffman, M. P., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-organization+and+branching+morphogenesis+of+primary+salivary+epithelial+cells.">Self-organization and branching morphogenesis of primary salivary epithelial cells.</a> Tissue Eng. 13, 721-735 (2007).</li><li>Zheng, C., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+viral+and+mammalian+promoters+for+use+in+gene+delivery+to+salivary+glands.">Evaluation of viral and mammalian promoters for use in gene delivery to salivary glands.</a> Mol. Ther. 12, 528-536 (2005).</li><li>Hsu, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+gene+transfer+to+developing+mouse+salivary+glands.">Viral gene transfer to developing mouse salivary glands.</a> J. Dent. Res. 91, 197-202 (2012).</li></ol>

Ex vivo epitelyal-mezenkimal rekombinasyon tekniği ilk kez 1981 16 submandibular tükürük bezleri için yayınlandı. Bu protokol, biz bir rekombine bezinin kapsamında epitel hücre gen ekspresyonu işlemek için adenoviral infeksiyonun kullanarak, orijinal yöntem geliştirmektedir. Biz enfekte hücrelerin yüzdesi viral promotör özellikleri, viral titresi ve viral saflık bağlıdır ise epitel hücrelerinin yüzdesi, adenovirüs ile enfekte olduğunu göstermektedir. Biz bu verimli transdük...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Fenol kırmızısı olmadan DMEM / Ham &#39;s F12 Orta </td><td> Yaşam Teknolojileri </td><td> 21041-025 </td><td></td></tr><tr><td> Penisilin ve Streptomisin </td><td> Yaşam Teknolojileri </td><td> 15070-163 </td><td> 10X stok </td></tr><tr><td> Dispase </td><td> Yaşam Teknolojileri </td><td> 17105-041 </td><td> Tek kullanımlık alikotları dondurun at-20C </td></tr><tr><td> BSA </td><td> Sigma </td><td> A2934-100G </td><td> Fraksiyon V, düşük endotoksin </td></tr><tr><td> Adeno-X-GFP </td><td> BD Biosciences </td><td> 8138-1 </td><td> Yüksek titrede (1x10 10 pfu / ml) olmalı. CsCl saflaştırılmış virüs bu tahlil içinde virüsler kolon saflaştırılmış daha etkili olduğu görülmüştür. </td></tr><tr><td> % 16 paraformaldehit </td><td&gt; Elektron Mikroskobu Bilimleri </td><td> 15710 </td><td> % 5 sakkaroz (w / v) ile PBS içinde% 2 ile seyreltildi </td></tr><tr><td> 1X fosfat-tamponlu salin (PBS) </td><td> Yaşam Teknolojileri </td><td> 70011-044 </td><td> 10X stok hazırlandı </td></tr><tr><td> Hank Dengeli Tuz Çözeltisi </td><td> Yaşam Teknolojileri </td><td> 14175095 </td><td> Hiçbir Kalsiyum, Magnezyum hayır, hayır Fenol Kırmızısı </td></tr><tr><td> Transferrin </td><td> Sigma </td><td> T8158 </td><td> 25 mg / ml DMEM/F12 ortamı içinde stok çözeltisi. Tek kullanımlık alikotları at-20C dondurun </td></tr><tr><td> L-Askorbik asit (C vitamini) </td><td> Sigma </td><td> A4403 </td><td> DMEM/F12 media.Freeze tek kullanımlık alikotları 75 mg / ml stok çözelti-20C </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Tablo 1. Rekombinasyon protokol SMG için gerekli ayıraçlar listesi. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td&gt; <td></td></tr><tr><td> 10 cm steril plastik tabaklar </td><td> Corning </td><td> 430167 </td><td> Non-doku kültür plakaları ile tedavi de kullanılabilir. </td></tr><tr><td> Iletilen ışık tabanı ile Stereo diseksiyon mikroskobu </td><td> Nikon </td><td> SMZ645 </td><td> Herhangi bir stereo mikroskop kesme bir geçen ışık tabana sahip olduğu da kullanılabilir. </td></tr><tr><td> 35 mm doku kültür tabaklarında </td><td> Şahin </td><td> 353001 </td><td> Non-doku kültür plakaları ile tedavi de kullanılabilir. </td></tr><tr><td> 50 mm çaplı mikro yemekler </td><td> Mattek Corporation, </td><td> P50-G-1.5-14F </td><td></td></tr><tr><td> Nuclepore Parça-Etch membran filtreleri </td><td> Whatman </td><td> 110405 </td><td> 13 mm çapında, 0.1 mm gözenek boyutu </td></tr><tr><td> Geniş açılı, flöresanlı bir mikroskop </td><td> Carl Zeiss, ABD </td><td> Axio Gözlemci Z1 </td><td> Herhangi bir floresan mikroskop (dik, i) nverted veya mikroskop diseksiyon stereo bağlı bir dijital fotoğraf makinesi ile düşük büyütmede GFP ifade izlemek için kullanılabilir. </td></tr><tr><td> Konfokal mikroskop </td><td> Leica Microsystems </td><td> TCS SP5 </td><td> Konfokal mikroskopi detaylı hücre yapıları görmek için gereklidir. Herhangi bir konfokal mikroskop kullanılır. </td></tr><tr><td> Zamanlı-Hamile dişi farelerde, gerginlik CD-1 veya ICR </td><td> Charles River Laboratuvarları </td><td></td><td> Embriyolar gün 13 (gün 0 olarak belirlenmiş fiş keşif gün) hasat edilir. </td></tr><tr><td> Neşter bıçağı # 11 </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 10011-00 </td><td></td></tr><tr><td> Bisturi sapı # 3 </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 10003-12 </td><td></td></tr><tr><td> Dumont # 5 forseps inox alaşım, 0.05mm X 0.02mm </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 11252-20 </td><td> Embriyolardan bezleri hasat için ideal </td></tr><tr><td&gt; Dumont # 5 forseps dumostar alaşım, 0.05mm X 0.01mm </td><td> Güzel Bilim Araçları </td><td> 11295-20 </td><td> İnce ipuçları epitel mezenşim çıkarılması için gereklidir. Tungsten iğneler de kullanılabilir. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Tablo 2. Ekipman rekombinasyon protokolü SMG kullanılır. </td></tr></tbody></table>

genetic modification and recombination of salivary gland organ cultures

Morfolojilerinden Dallanma birçok organların gelişim sırasında meydana gelen, ve embriyonik fare submandibular bez (SMG) morfolojilerinden dallanma çalışma için klasik bir modeldir. - Sonuçta oral kavite 1 içine, sırasıyla, tükürük üretirler ve değiştirmek / taşıma hizmet asinüs ve kanalların karmaşık dallı ağı, yol vermek, epitelyal tomurcuk ve kanal oluşumu adımları iteratif geliştirme SMG, bu süreci içerir 3. Nasıl hücresel ve moleküler olaylar henüz tam olarak anlaşılamamıştır koordine olmasına rağmen epitel ilişkili bazal membran ve bu hücreler tarafından üretilen mezenşimi hücreler, büyüme faktörleri ve ekstraselüler matriks dahil mezenkimal bölmesi, yönlerini, dallanma mekanizması için kritik olan 4 . Moleküler mekanizmaların çalışmada epitelyal morfolojilerinden gelişmeler gelişim mekanizmalarına anlayışımızı sürüş ve olası Rejenere içgörü sağlarative tıp yaklaşımları. Bu tür çalışmalar tükrük epitelin genetik manipülasyonu için etkili yöntemlerin eksikliği nedeniyle sekteye edilmiştir. Şu anda, adenoviral transdüksiyon vivo 5 yetişkin bezlerinin epitel hücrelerini hedef için en etkili yöntem temsil eder. Ancak, embriyonik eksplantlar, yoğun mezenşimi ve epitel hücreleri çevreleyen bazal membran epitel hücreleri viral erişimi engellemektedir. Mezenşim çıkarılırsa, epitelyum adenovirüsler kullanılarak transfekte edilebilir ve epitel esaslar Matrigel ya da laminin-111 6,7 varlığında, morfojenezi dallanma devam edebilir. Mesenchyme serbest epitelyal yitiren organ büyüme de çözünür büyüme faktörleri ile ek takviyesi gerektirir ve bozulmamış bezleri 8 oluşuyor gibi tamamen dallanma morfolojilerinden özetlemek değil. Burada transfekte e epitel hücreleri ve kültür adenoviral iletimi kolaylaştıran bir yöntem tanımlamakilişkili mezenşimi ile pithelium. Embriyonik SMGs, mezenşimi çıkarılması ve bir GFP içeren adenovirüs ile epitel viral enfeksiyon mikrodisseksiyon ardından, epitel kendiliğinden sağlam SMG glandüler yapısı recapitulating ve morfonogenezi dallanma, bulaşmamış mezenşimi ile yeniden birleştirilmesi kastedilmektedir olduğunu göstermektedir. Genetiği değiştirilmiş epitel hücre popülasyonu kolayca floresan etiketli varsa adenoviral yapıları kullanılır, standart floresan mikroskobu yöntemleri kullanılarak izlenebilir. Burada açıklanan yöntem, şu anda doku rekombinasyon transgenik hayvanların üretimi gerektirmeyen bir kompleks 3B doku yapısı içinde, bir vahşi-tip ya da mutant vektör ile epitel hücrelerinin transfeksiyonu için en etkili ve ulaşılabilir bir yöntemdir.

Büyük deneysel adımların akış Şekil 1 &#39;de özetlenmiştir. Bozulmamış bir SMG, izole edilmiş bir epitel yitiren organ, ve karşılık gelen mezenşim bir örneği, Şekil 2&#39;de gösterilmiştir. Belirtilen zaman için ex vivo kültive, Şekil 3 &#39;de gösterilmiştir zaman morfojenezi dallanma geçmesi devam rekombine SMGs, bir aydınlık görüntüler. Epitel GFP ifade eden, 48 saat süreyle yetiştirilir Rekombine bezi <str...

Watch this Scientific Journal Video about Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures at JoVE.com

Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures

Genetik bütünü içinde epitel hücreleri manipüle etmek için bir tekniktir<em&gt; Ex vivo</emViral gen transferi kullanarak&gt; kültürlü embriyonik fare submandibular bezler (SMGs) tarif edilir. Bu yöntem, epitel ve kendiliğinden adenoviral vektörlerin epitelyal esasları ayrılması ve enfeksiyon sonrası rekombinasyona mezenşimi SMG arasında doğuştan gelen bir yetenek yararlanır.

Tükürük Bezi Organ Kültürleri Genetik Modifikasyon ve Rekombinasyon

Branching  morphogenesis occurs during the development of many organs, and the embryonic  mouse submandibular gland (SMG) is a classical model for the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

Ae midgut ve Tükürük Bezlerinin Diseksiyon. aegypti Sivrisinekler

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

PDMS Device Fabrication and Surface Modification

PDMS Cihaz İmalat ve Yüzey Modifikasyonu

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Erken Civciv Embriyolar ex vivo (Kültür) Kültür Yöntemi

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Erken Civciv Embriyolar in situ Hibridizasyon Çift Tüm Dağı

Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures

2-dGuo Boyalı Thymus Organ Kültürleri hazırlanması

In the thymus, interactions between developing T-cell precursors and stromal cells that include cortical and medullary epithelial cells are known to play ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

Fare Tükürük Bezi Kök Hücre İzolasyonu

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

DNA Methylation: Bisulphite Modification and Analysis

DNA Metilasyonu: bisülfit modifikasyonu ve Analiz

Epigenetics describes the heritable changes in gene function that occur independently to the DNA sequence. The molecular basis of epigenetic gene ...

Preparation of the Mgm101 Recombination Protein by MBP-based Tagging Strategy

MBP tabanlı Etiketleme Stratejisi Mgm101 Rekombinasyon Protein hazırlanması

The MGM101 gene was identified 20 years ago for its role in the maintenance of mitochondrial DNA. Studies from several groups have suggested that the ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

İnsan Pluripotent için alternatif Kültürleri Hücre Üretim, Bakım ve Genetik Analizi Kök

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

DNA Elektroporasyon, Myofibers İzolasyon ve Görüntüleme

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...