Name: antigens protected functional red blood cells by the membrane grafting of compact hyperbranched polyglycerols
Uploaded: 2013-01-02T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols at JoVE.com

Bu araştırma, Kanada Kan Hizmetleri (CBS) ve Sağlık Bilimleri (CIHR) Araştırma Ortaklığı Fonu Kanada Enstitüleri tarafından finanse edildi. Yazarların kendi araştırma tesislerinin kullanımı için Kan araştırma UBC Merkezi&#39;nde LMB Makromolekül Hub ederim. Altyapı tesisi Yenilik Kanada temeli (CFI) ve Sağlık Araştırma Michael Smith Vakfı (MSFHR) tarafından desteklenmektedir. R. Chapanian (CIHR / CBS) doktora sonrası Transfüzyon Bilim burs ve MSFHR araştırma stajyer doktora sonrası dostluk bir alıcı bir alıcı olduğunu. JN Kizhakkedathu MSFHR Kariyer Araştırmacı Scholar Ödülü bir alıcı olduğunu.

A. Hyperbranched poligliserol Modifikasyonu (SS-HPG) <ol><li> Sıra bir tabanı yuvarlak bir şişe içerisinde 60 kDa (0,5 g, 0,0083 mol) HPG liyofilize edildi ve 90 C&#39;de vakum altında gece boyunca kurutun ° C. </li><li> Oda sıcaklığına soğutmak şişeye, ve susuz piridin (3 ml) içinde kuru HPG çözülür. </li><li> Karboksil grupları ile HPG üzerinde yaklaşık olarak sekiz hidroksil gruplarının fonksiyonalize, HPG çözeltisine dimetilaminopiridin ve katalitik miktarda (piridin içinde 5 mg / ml ç...

<ol>
	<li>Bradley, A. J., Murad, K. L., Regan, K. L., Scott, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biophysical+consequences+of+linker+chemistry+and+polymer+size+on+stealth+erythrocytes:+size+does+matter.">Biophysical consequences of linker chemistry and polymer size on stealth erythrocytes: size does matter.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1561 (2), 147-158 (2002).</li><li>Murad, K. T., Mahany, K. L., Brugnara, C., Kuypers, F. A., Eaton, J. W., Scott, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+consequences+of+antigenic+modulation+of+red+blood+cells+with+methoxypoly(ethylene+glycol.">Structural and functional consequences of antigenic modulation of red blood cells with methoxypoly(ethylene glycol.</a> Blood. 93 (6), 2121-2127 (1999).</li><li>Scott, M. D., Murad, K. L., Koumpouras, F., Talbot, M., Eaton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+camouflage+of+antigenic+determinants:+Stealth+erythrocytes.">Chemical camouflage of antigenic determinants: Stealth erythrocytes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94 (14), 7566-7571 (1997).</li><li>Daniels, G., Reid, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+groups:+the+past+50+years.">Blood groups: the past 50 years.</a> Transfusion. 50 (2), 281-289 (2010).</li><li>Murad, K. L., Gosselin, E. J., Eaton, J. W., Scott, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stealth+cells:+Prevention+of+major+histocompatibility+complex+class+II-mediated+T-cell+activation+by+cell+surface+modification.">Stealth cells: Prevention of major histocompatibility complex class II-mediated T-cell activation by cell surface modification.</a> Blood. 94 (6), 2135-2141 (1999).</li><li>Kainthan, R. K., Hester, S. R., Levin, E., Devine, D. V., Brooks, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+biological+evaluation+of+high+molecular+weight+hyperbranched+polyglycerols.">In vitro biological evaluation of high molecular weight hyperbranched polyglycerols.</a> Biomaterials. 28 (31), 4581-4590 (2007).</li><li>Kainthan, R. K., Janzen, J., Levin, E., Devine, D. V., Brooks, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatibility+testing+of+branched+and+linear+polyglycidol.">Biocompatibility testing of branched and linear polyglycidol.</a> Biomacromolecules. 7 (3), 703-709 (2006).</li><li>Chapanian, R., Constantinescu, I., Brooks, D. E., Scott, M. D., Kizhakkedathu, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+circulation,+clearance,+and+biodistribution+of+polyglycerol+grafted+functional+red+blood+cells.">In vivo circulation, clearance, and biodistribution of polyglycerol grafted functional red blood cells.</a> Biomaterials. 33 (10), 3047-3057 (2012).</li><li>Chapanian, R., Constantinescu, I., Rossi, N. A. A., Medvedev, N., Brooks, D. E., Scott, M. D., Kizhakkedathu, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+polymer+architecture+on+antigens+Camouflage,+CD47+protection+and+complement+mediated+lysis+of+surface+grafted+red+blood+cells.">Influence of polymer architecture on antigens Camouflage, CD47 protection and complement mediated lysis of surface grafted red blood cells.</a> Biomaterials. 33 (31), 7871-7883 (2012).</li><li>Rossi, N. A. A., Constantinescu, I., Brooks, D. E., Scott, M. D., Kizhakkedathu, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+cell+surface+polymer+grafting+in+concentrated+and+nonreactive+aqueous+polymer+solutions.">Enhanced cell surface polymer grafting in concentrated and nonreactive aqueous polymer solutions.</a> J. Am. Chem. Soc. 132 (10), 3423-3430 (2010).</li><li>Rossi, N. A. A., Constantinescu, I., Kainthan, R. K., Brooks, D. E., Scott, M. D., Kizhakkedathu, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Red+blood+cell+membrane+grafting+of+multi-functional+hyperbranched+polyglycerols.">Red blood cell membrane grafting of multi-functional hyperbranched polyglycerols.</a> Biomaterials. 31 (14), 4167-4178 (2010).</li><li>Muzykantov, V. R., Smirnov, M. D., Domogatsky, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolytic+complement+activity+assay+in+microtitration+plates.">Hemolytic complement activity assay in microtitration plates.</a> J. App. Biochem. 7 (3), 223-227 (1985).</li><li>Walter, H., Brooks, D. E., Fisher, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Partitioning in aqueous two-phase systems: theory, methods, uses, and applications to biotechnology. , (1985).</li><li>Rossi, L., Serafini, S., Pierige, F., Antonelli, A., Cerasi, A., Franternale, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythrocyte-based+drug+delivery.">Erythrocyte-based drug delivery.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 2 (2), 311-322 (2005).</li><li>Walter, H., Krob, E. J., Brooks, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+surface+properties+other+than+charge+involved+in+cell+separation+by+partition+in+polymer,+aqueous+2-phase+systems.">Membrane surface properties other than charge involved in cell separation by partition in polymer, aqueous 2-phase systems.</a> Biochemistry. 15 (14), 2959-2964 (1976).</li><li>Muzykantov, V. R., Murciano, J. C., Taylor, R. P., Atochina, E. N., Herraez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+the+complement-mediated+elimination+of+red+blood+cells+modified+with+biotin+and+streptavidin.">Regulation of the complement-mediated elimination of red blood cells modified with biotin and streptavidin.</a> Anal Biochem. 241 (1), 109-119 (1996).</li></ol>

Evrensel donör eritrositler kan transfüzyonu tedavisi için artan kan kullanılabilirliği ve güvenliği büyük bir potansiyele sahiptir. Eritrosit aynı zamanda uzun sirkülasyon ve doğal biyolojik uyumluluk, 14, 15 bağlı olarak umut verici bir ilaç verme araçları olarak kabul edilir. Bu yazıda sunulan deneyler modifiye RBCs HPG in vitro özellikleri değerlendirir. In vitro özelliklerine ve HPG modifiye RBCs vivo dolaşımda son 8, 11 bizim grupta incelenmi?...

<table border="1"><tbody><tr><td> Glisidol </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Trimetilolpropan </td><td> Fluka </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Potasyum metilat </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Susuz piridin </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> 4-Dimetilaminopiridin </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Süksinik anhidrit </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Aseton </td><td> Fisher Scientific </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> Susuz dimetil formamid </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> N-hidroksisüksinimid </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> N, N&#39;-diizopropilkarbodiimid </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> MTS kartları </td><td></td><td></td><td> Micro Typing System (MTS) kartlar (FL, ABD) </td></tr><tr><td> Dekstran 500 kDa </td><td> Pharmacia Fine Chemicals </td><td></td><td> (İsveç) </td></tr><tr><td> PEG 8 kDa </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td> FITC monoklonal anti-Rh D (Rh) </td><td> Bölüm Biodiagnostics </td><td></td><td> (PA, ABD) </td></tr><tr><td> PE monoklonal anti-CD47 </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> (NJ, ABD) </td></tr><tr><td> Drabkin reaktifi </td><td> Sigma Aldrich </td><td></td><td> (ON, Kanada) </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Tablo. RBC membran ve onların analizi polimerlerin HPG aşılama için kullanılan kimyasallar ve reaktifler. </td></tr></tbody></table>

antigens protected functional red blood cells by the membrane grafting of compact hyperbranched polyglycerols

Kırmızı kan hücresi (RBC) transfüzyonu gibi talasemi ve orak hücreli anemi 1-3 gibi akut ve kronik sağlık sorunları bir dizi tedavi için hayati önem taşımaktadır. RBC yüzey (~ 308 bilinen antijen 4), kronik kan transfüzyonu hastalarda eritrosit transfüzyonu, 4, 5, küçük antijen bayan maçı nedeniyle alloantibodies geliştirmek üzerinde çok sayıda antijen varlığı nedeniyle. Polietilen glikol (PEG) ve hyperbranched poligliserol (HPG) gibi hidrofilik polimerler eklenme oksijen, glukoz, ve iyon 3 gibi küçük moleküllerin geçit etkilemeden yüzey antijenleri ile antikorların etkileşimi engelleyen RBC zar üzerinde bir dışlama bir tabaka oluşturur. Şu anda herhangi bir yöntem çünkü RBC yüzey ve D antijenlerinin çok sayıda (göre protein ve karbonhidrat) varlığı tarafından sunulan zor bir meydan okuma parçası olarak evrensel verici kırmızı kan hücrelerinin üretimi için kullanılabilirBu tür yöntemlerin evelopment anlamlı transfüzyon güvenliği artırmak ve dramatik RBCs durumu ve kullanımı artıracaktır. Bu raporda, HPG ve karakterizasyonunu greftleme membran antijen korunan fonksiyonel RBCs geliştirmek için kullanılan deneyler sunulmuştur. HPGS son derece kompakt polimerler 6, 7, biyo-uyumlu, ve lipid membran 8, 9 ve maske RBC yüzey antijenleri 10, 11, çevreleyen hücre glycocalyx içinde bulunması beklenmektedir.

Rh D antijen CD47 ve RBC yüzey proteini Kamuflaj floresan işaretli monoklonal antikorlar kullanılarak akış sitometresi ile ölçüldü, ve bir temsili sonucu, Şekil 1 &#39;de verilmiştir. HPG-aşılı eritrositler durumunda (gri), sinyalin yoğunluğu yüzeyi proteinlerini maskeleme belirtmek hücre yüzeyine bağlanarak antikorlar bir azalma gösteren kontrol eritrositler (kırmızı ve yeşil) ile karşılaştırıldığında (sola doğru kayar tepe noktası) azalmıştır . <p class="jove_...

Watch this Scientific Journal Video about Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols at JoVE.com

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Hyperbranched poligliserol (HPG) ile kırmızı kan hücrelerinin hücre zarı modifikasyonu (eritrositler) sunulmuştur. Modifiye RBCs sulu iki faz bölümleme, osmotik frajilitesi ve kompleman aracılı lizis ile karakterize edildi. Yüzey proteinleri ve antijenlerin kamuflaj akım sitometri ve Mikro Yazma Sistemi (MTS) kan fenotipleme kartları kullanılarak değerlendirilmiştir.

Antijenler Kompakt Hyperbranched Polyglycerols Of Aşılama Membran By Fonksiyonel Kırmızı Kan Hücreleri Korumalı

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

Kompleman tükenmesi Özel Hücre Populasyonlarının tükenmesi

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

Fare Periton Boşluk Hücreleri İzolasyon

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

Floresan Aktive Hücre Ayırma (FACS) Özgül Hücre Nüfus Arıtma

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

Genişleme, Saflaştırılması, ve İnsan Periferik Kan NK Hücrelerinin Fonksiyonel Değerlendirme

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Kırmızı kan hücreleri üzerinde antikor kaynaklı kompleman aktivasyon sayısal tespiti için Yöntemler

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Miyeloid hücrelerin Dynamics Gerçek zamanlı Görüntüleme<em&gt; Süm<sup&gt; Min / +</sup</em&gt; Bağırsak Tümörleri Disk Eşodaklı Mikroskopi Spinning tarafından

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques ...

Detecting Glycogen in Peripheral Blood Mononuclear Cells with Periodic Acid Schiff Staining

Periyodik Asit Schiff Boyama ile periferik kan mononükleer hücreleri glikojen algılama

Periodic acid Schiff (PAS) staining is an immunohistochemical technique used on muscle biopsies and as a diagnostic tool for blood samples. ...

Development of an Antigen-driven Colitis Model to Study Presentation of Antigens by Antigen Presenting Cells to T Cells

Bir Antijen odaklı Kolit Modelinin Geliştirilmesi Antijen T hücreleri için Hücreler sunulması ile Antijen Sunumu Eğitim için

Inflammatory bowel disease (IBD) is a chronic inflammation which affects the gastrointestinal tract (GIT). One of the best ways to study the immunological ...

Using X-ray Crystallography, Biophysics, and Functional Assays to Determine the Mechanisms Governing T-cell Receptor Recognition of Cancer Antigens

X-ışını kristalografisi, biyofizik ve fonksiyonel tahliller kullanılarak mekanizmalar Yönetim T hücresi kanser antijenleri Reseptör tanıma belirlemek için

Human CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs) are known to play an important role in tumor control. In order to carry out this function, the cell ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran fare ve insan birincil NK hücreleri Lentiviral iletim verimliliğini artırır

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...