Name: live imaging of drug responses in the tumor microenvironment in mouse models of breast cancer
Uploaded: 2013-03-24T14:00:00
Duration: 8 min 26 s
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हम तकनीकी सहायता के लिए जे Cappellani और जे Qiu धन्यवाद. यह काम राष्ट्रीय कैंसर संस्थान (CA141451 U01), स्टार कैंसर कंसोर्टियम, इलाज के लिए सुसान जी Komen, लांग आईलैंड 2 दिन स्तन कैंसर, स्तन कैंसर के खिलाफ Manhasset महिला मुझे गठबंधन लड़ो वॉक, और एक से निधियों द्वारा समर्थित किया गया के लिए अमेरिका ESNESN, Congressionally निर्देशित स्तन कैंसर रिसर्च प्रोग्राम से के पूर्व डॉक्टरेट फैलोशिप भी वाटसन बायोलॉजिकल साइंसेज के स्कूल से लेस्ली सी. त्वरित और विलियम Randolph Hearst फाउंडेशन फैलोशिप के प्राप्तकर्ता है. HAA नॉर्वे के अनुसंधान परिषद (160698/V40 और +१५१८८२), और दक्षिण क्षेत्रीय स्वास्थ्य अधिकारियों (2,007,060) से धन के द्वारा समर्थित किया गया था.

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लेखक ब्याज की कोई संघर्ष का खुलासा है. सभी पशु प्रयोगों IACUC अनुमोदित प्रोटोकॉल के साथ अनुसार में आयोजित की गई.

vivo में प्रणालीगत उपचार के लिए ट्यूमर की प्रतिक्रिया में नाटकीय रूप से इन विट्रो में कैंसर कोशिकाओं के उन लोगों के लिए अलग अलग हो सकता है, के रूप में microenvironment दोनों तीव्र प्रतिक्रिया और 5 पलटा को प्रभावित कर सकते हैं. Vivo chemoresistance रास्ते में सबसे बड़ी explicating करने के लिए बाधाओं में से एक कैंसर की कोशिकाओं और उनके microenvironment के बीच बातचीत की जटिलता है. विशेष रूप से, क्योंकि ठोस ट्यूमर कैंसर और stromal कोशिकाओं, कोशिका मृत्यु कि विरोधी कैंसर के इलाज के दौरान होता है के रूप में एक घटक के perturbations, के बीच एक संतुलन विकसित किया है, ऊतक संगठन पर नाटकीय प्रभाव में परिणाम कर सकते हैं. intravital इमेजिंग तकनीक यहाँ प्रदान की विरोधी कैंसर दवाओं के साथ इलाज के दौरान रहते हैं, anesthetized चूहों के ट्यूमर के भीतर कैंसर कोशिका stroma बातचीत के प्रत्यक्ष दृश्य के लिए अनुमति देता है. हम कताई डिस्क confocal माइक्रोस्कोपी का उपयोग करते हैं, जो एक रिश्तेदार सीमित प्रवेश गहराई (17 देखने के </&gt; समर्थन), लेकिन हमारे शल्य चिकित्सा और लेबलिंग तकनीक माइक्रोस्कोपी के अन्य प्रकार के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है. इन प्रयोगों से प्राप्त फिल्मों के लिए प्रक्रियाओं है कि प्रतिदीप्ति तीव्रता में परिवर्तन (उदाहरण के लिए एक लेबल या कोशिका मृत्यु का जनसंख्या प्रेरण की घुसपैठ के कारण), सेल गतिशीलता, injectables का वितरण (संवहनी रिसाव को ट्रैक करने के लिए करने के लिए उदाहरण के लिए), और सह शामिल पर नज़र रखने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है फ्लोरोसेंट 5,12,17,20 संकेतों का स्थानीयकरण. हम नियमित रूप से 6 घंटे से अधिक के लिए छवि चूहों और 18 से अधिक घंटे के लिए भी प्रदर्शन इमेजिंग. यह इन लंबे समय अवधि के लिए संज्ञाहरण के तहत लगातार चूहों को बनाए रखने की आवश्यकता है. उचित संज्ञाहरण के साथ, हमारे पशुओं की 90% से अधिक 6 घंटे जीवित है, और 80% के बारे में 18 घंटे से अधिक जीवित रहते हैं. कैसे प्रदर्शन करने के लिए लंबी अवधि के संज्ञाहरण विवरण 19 पहले प्रकाशित किया गया है. हमारे अनुभव में, पांच कारक महत्वपूर्ण हैं: हाइपोथर्मिया से परहेज है, निर्जलीकरण से परहेज, शारीरिक रक्त में ऑक्सीजन संतृप्ति स्तर को बनाए रखने, यूisoflurane के लिए humidified वाहक गैस गाते हैं, और संज्ञाहरण के निम्नतम स्तर है जिस पर वे दर्द के लक्षण नहीं दिखा पशुओं को रखने के. शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए, हम एक गर्म कंबल के तहत चूहों को रखने के लिए (38 ° C). निर्जलीकरण से बचने के लिए, हम पूरे इमेजिंग प्रक्रिया में खारा आईपी की छोटी मात्रा इंजेक्षन. शारीरिक रक्त में ऑक्सीजन संतृप्ति स्तर को बनाए रखने के लिए, हम वाहक गैस (बल्कि आमतौर पर इस्तेमाल किया तुलना में 100%) में 21% ऑक्सीजन के साथ शुरू करते हैं. एक प्रयोग में घंटे - यह हमें एक माउस अगर लिए साँस ऑक्सीजन का स्तर बढ़ाने के लिए सक्षम बनाता है रक्त में ऑक्सीजन संतृप्ति में एक कमी को दर्शाता है. हमारे अनुभव में, ऐसे समय (जैसे 30-40%) में साँस ऑक्सीजन के स्तर में वृद्धि लगभग हमेशा अतिरिक्त इमेजिंग के घंटे के लिए अनुमति देता है पशु स्थिर होगा. संज्ञाहरण के इष्टतम स्तर सबसे 1-1.5% isoflurane और 60-65/min और 400-450/min की पल्स दर की सांस दरों में परिणाम के साथ प्राप्त चूहों के लिए है. हमारे इमेजिंग प्रयोगों में, हम मुख्य रूप से ट्रांसजेनिक माउस मॉडल का उपयोग(MMTV - PyMT और C3 [1] - टैग) जिसमें ट्यूमर multifocal हैं, कई एक्स, वाई पदों पर एक एकल इमेजिंग सत्र के दौरान समानांतर में ट्यूमर प्रगति के विभिन्न चरणों में कई घावों की इमेजिंग के लिए अनुमति देता है. इस मंच पर निर्भर चिकित्सकीय प्रतिक्रियाओं की पहचान करने के उद्देश्य से किए गए प्रयोगों के लिए सम्मान के साथ माउस माउस भिन्नता के बारे में चिंताओं को कम हो जाती है, और इमेजिंग के लिए आवश्यक पशुओं की संख्या को कम कर देता है. मॉडल MMTV PyMT (और अन्य सहज कैंसर मॉडल) प्रगतिशील histopathological चरणों कि intravital इमेजिंग के दौरान पहचाना जा सकता है के माध्यम से जाना हालांकि ट्यूमर घावों कि intravital इमेजिंग के दौरान किया जा सकता है का रोग मचान से अलग है, और कम विस्तृत है, की तुलना में histological वर्गों 5,17. इसके विपरीत, प्रत्यारोपण मॉडल देर चरण ट्यूमर सबसे अच्छा प्रतिबिंबित करते हैं, के रूप में कैंसर की कोशिकाओं को आमतौर पर उन्नत ट्यूमर से अलग कर रहे हैं. इस तरह के मॉडल इस प्रकार अधिक ट्यूमर stroma का अध्ययन करने के लिए उत्तरदायी हैंदेर चरण ट्यूमर के विभिन्न चरणों के बीच इन संबंधों में मतभेद से बातचीत. हम कैसे छवि परमाणु संरचनात्मक परिवर्तन कि सेल थेरेपी से प्रेरित मौत के बाद होने के उदाहरण दिखाते हैं. विरोधी कैंसर उपचार के अभाव में, बजाय इस लेबल रणनीति में सीटू छवि कोशिका विभाजन के लिए इस्तेमाल किया जा, elucidating, उदाहरण के लिए, कैसे सेल प्रसार और निद्रा microenvironment प्रभावित है. भविष्य में, mitochondrial घटकों के फ्लोरोसेंट लेबलिंग apoptotic कोशिका मृत्यु के दौरान होने छवि mitochondrial परिवर्तन संभव बना सकता है. इस प्रोटोकॉल में, हम भी छवि सेल प्रतिरक्षा कैंसर उपचार के बाद सेल बातचीत करने के लिए कैसे, लेकिन अन्य microenvironmental घटक भी कल्पना और imaged किया जा सकता है के उदाहरण दिखाया गया है. मौजूदा stromal घटकों के लिए ट्रांसजेनिक संवाददाता लाइनों fibroblasts के लिए उन लोगों में शामिल हैं (जैसे., 17 FSP1-EGFP, 21 αSMA - आरएफपी, COL1A1 ईजी21 एफ पी) या vasculature की कोशिकाओं (Tie2 GFP जैसे 22, 23 VEGF-GFP). Intravital इमेजिंग दृश्य वास्तविक समय के लिए बातचीत और प्रक्रियाओं है कि vivo निम्नलिखित कीमोथेरपी प्रशासन में होने की अनुमति देता है. प्रौद्योगिकी वर्तमान में उपलब्ध के साथ, हम समझ कैसे माइलॉयड कोशिकाओं चिकित्सकीय प्रतिक्रिया को प्रभावित करने में प्रमुख प्रगति की है, तथापि, क्योंकि ट्यूमर microenvironment इतनी जटिल है, प्रमुख प्रगति अभी भी करने के लिए पर्यावरण की मध्यस्थता दवा प्रतिरोध अंतर्निहित प्रक्रियाओं में mechanistically तल्लीन करना शुरू की जरूरत है. सबसे महत्वपूर्ण अभी भी अपेक्षित प्रगति के एक विशेष सेल आबादी के लिए बेहतर मार्करों की पहचान है. बेहतर मार्करों के महत्व को अच्छी तरह से दो सबसे प्रमुख स्तन ट्यूमर microenvironment, fibroblasts और प्रतिरक्षा कोशिकाओं के stromal सेल घटकों के साथ सचित्र है. α चिकनी पेशी actin (αSMA) अक्सर की पहचान के लिए प्रयोग किया जाता हैfibroblasts, लेकिन प्रोटीन भी संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं और myoepithelial कोशिकाओं 24 द्वारा व्यक्त की है. इस प्रकार, हालांकि αSMA GFP संवाददाता चूहों मौजूद हैं, विशेष सेल प्रकार का निर्धारण एक intravital इमेजिंग प्रयोग के दौरान निम्नलिखित चुनौती दे रहा है. इसी तरह, EGFP के रूप में एक ही फ्लोरोसेंट मार्कर प्रमोटर ग एफएमएस के तहत व्यक्त अक्सर प्रतिरक्षा कोशिकाओं 12,17 के कई subpopulations की पहचान करेगा. इस प्रकार, हालांकि एक आदर्श के लिए एक एकल मार्कर का उपयोग करने के लिए एक विशेष सेल प्रकार की पहचान करना चाहते हैं अंतर्निहित जीव विज्ञान की जटिलता इस दृष्टिकोण का उपयोग करने में एक बड़ी चुनौती बन गया है. इस समस्या का आंशिक समाधान करने के लिए इंजेक्शन लेबल का उपयोग करने के लिए आगे ही फ्लोरोसेंट संवाददाता व्यक्त कक्षों की subpopulations अंतर है. उदाहरण के लिए, फ्लोरोसेंट dextrans मैक्रोफेज द्वारा लिया जाता है और बृहतभक्षककोशिका subpopulations है कि ग एफएमएस EGFP और Fsp1-EGFP ट्रांसजेनिक संवाददाता चूहों में चिह्नित कर रहे हैं लेबल के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है <sup17. फ्लोरोसेंट जांच संयुग्मित एंटीबॉडी भी विशिष्ट subpopulations (माइलॉयड c-एफएमएस EGFP 17 पत्रकार ने लेबल कोशिकाओं की आबादी GR1 पॉजिटिव जैसे) की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. ट्यूमर प्रतिक्रिया कैलिपर माप है जो कैसे या क्यों ट्यूमर प्रशासित, चिकित्सीय, या histological श्रृंखला अलग अलग समय बिंदुओं कि बड़े साथियों के जानवरों की आवश्यकता पर काटा ऊतकों से प्राप्त करने के लिए जवाब के बारे में थोड़ा यंत्रवत जानकारी प्रदान करते हैं द्वारा उत्पन्न घटता के विपरीत, हमारी तकनीक प्रत्यक्ष, quantifiable जानकारी प्रदान करता है कोशिका मृत्यु की गतिशीलता पर और छोटे साथियों में कैंसर की कोशिकाओं के साथ stromal कोशिकाओं की बातचीत पर. इस प्रकार, यहाँ की सूचना प्रक्रिया का उपयोग करने का लाभ यह है कि यह वास्तविक समय में एक अक्षुण्ण ट्यूमर microenvironment के संदर्भ में दवा प्रतिक्रियाओं पर गतिशील जानकारी प्रदान करता है. इस तरह की सूचना के अंतर्निहित प्रक्रियाओं है कि चिकित्सीय प्रतिक्रियाओं 5 ड्राइव में महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि के लिए नेतृत्व कर सकते हैं &lt;/&gt; समर्थन.

कैंसर की कोशिकाओं और stromal घटक (दोनों सेलुलर और गैर सेलुलर) है कि ट्यूमर 1 विकास के लिए एक उपयुक्त वातावरण को बनाए रखने में सहायता: ठोस ट्यूमर दो प्रमुख डिब्बों के शामिल हैं. इन stromal घटक के कैंसर के स्तन 2-5 की उन सहित कई प्रकार के विकास, प्रगति और मेटास्टेसिस में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. stromal परिवेश भी चिकित्सकीय प्रतिक्रियाओं 2,4,5 को प्रभावित करती है. इस प्रकार, का निर्धारण कैसे कैंसर की कोशिकाओं को बरकरार microenvironment के संदर्भ में पारंपरिक और उपन्यास उपचार के लिए जवाब कैंसर जीव विज्ञान के बारे में हमारी समझ को आगे बढ़ाने और मौजूदा चिकित्सीय रणनीतियों में सुधार के लिए महत्वपूर्ण है. इसके अलावा, परिभाषित कैसे कैंसर कोशिका stroma बातचीत को बदलने के लिए चिकित्सा के प्रशासन के बाद ट्यूमर के डूबने के जीव विज्ञान को समझने के लिए महत्वपूर्ण है. Organotypic सह संवर्धन प्रणाली ट्यूमर stroma बातचीत के अध्ययन के लिए उपयोगी किया गया है <s&gt; ऊपर 6, लेकिन यह स्पष्ट है कि वर्तमान में उपलब्ध तरीकों को सफलतापूर्वक इन विट्रो में बरकरार ट्यूमर संवहनी समारोह और प्रतिरक्षा कोशिकाओं की भर्ती करने के लिए सम्मान के साथ विशेष रूप से, microenvironment नहीं पुनरावृत्ति कर सकते हैं. दरअसल, कैंसर उपचार है कि इन विट्रो में मनाया जाता है सेल प्रतिक्रिया अक्सर में काफी vivo में मनाया, जहां microenvironment 5 बरकरार है उन लोगों से अलग कर रहे हैं. इस प्रकार, चिकित्सकीय प्रतिक्रिया पर ट्यूमर stroma बातचीत और उनके प्रभाव का अध्ययन करने के लिए vivo मॉडल में बेहतर चिकित्सकीय प्रासंगिक तंत्र 7 को प्रतिबिंबित कर सकते हैं. vivo में विरोधी कैंसर चिकित्सा के लिए प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के प्राथमिक साधन के ट्यूमर के आकार और इलाज पशुओं या मरीजों से प्राप्त ऊतकों के histological मूल्यांकन के मापन के माध्यम से किया गया है. हालांकि, माइक्रोस्कोपी और फ्लोरोसेंट संवाददाताओं से में पिछले दो दशकों में प्रगति के अंतर और intracellular प्रक्रियाओं के दृश्य सक्षम हैरहते हैं, anesthetized जानवरों में उच्च संकल्प (intravital इमेजिंग) 8. ये intravital माइक्रोस्कोपी प्रौद्योगिकियों spatially और अस्थायी सेलुलर और उप सेलुलर संकल्प 8,9 में ट्यूमर stroma बातचीत के vivo गतिशीलता में विदारक के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण हो सिद्ध कर दिया है. प्रक्रियाओं है कि intravital इमेजिंग द्वारा सुलझाया विरोधी ट्यूमर टी सेल 10,11 cytotoxicity, टी कोशिकाओं और माइलॉयड कोशिकाओं 12 के बीच बातचीत, कोलेजन संरचना और चिकित्सीय उपचार 13, बृहतभक्षककोशिका निर्भर कैंसर सेल intravasation और मेटास्टेसिस के बाद संगठन में परिवर्तन की गतिशीलता 14, और संवहनी पारगम्यता 15. Intravital इमेजिंग के लिए तीन प्रमुख आवश्यकताओं हैं. इन ऊतकों की उचित तैयारी और जोखिम इमेजिंग, हित के ऊतक घटकों के फ्लोरोसेंट लेबलिंग के लिए, और एक जोड़ी माइक्रोस्कोपी कैमराछवियों 16 प्राप्त करने के सक्षम ystem. सबसे आम इन आवश्यकताओं का पता करने के लिए प्रयोग किया जाता रणनीतियों में शामिल हैं. 2) ट्रांसजेनिक फ्लोरोसेंट संवाददाताओं से) 1 heterotopic (जैसे, कान या आँख कक्षीय के टीका) की तैयारी, स्थायी इमेजिंग खिड़कियां, या exteriorized तैयारियाँ (जैसे, पृष्ठीय त्वचा प्रालंब): फ्लोरोसेंट injectables ऊतक घटक लेबल करने के लिए, और) 3 multiphoton या confocal माइक्रोस्कोपी प्रणालियों के साथ बनती photomultiplier ट्यूब या आरोप युग्मित डिवाइस (सीसीडी) कैमरों, क्रमशः 9. हम एक शल्य चिकित्सा तैयार त्वचा प्रालंब anesthetized जानवरों है कि फ्लोरोसेंट संवाददाताओं से एन्कोडिंग transgenes व्यक्त इमेजिंग के लिए वंक्षण स्तन ग्रंथि का पर्दाफाश मॉडल का उपयोग करें. छवियाँ 12 से 40 घंटे का उपयोग करते हुए एक तेज (ICCD) सीसीडी कैमरा चार लेजर कताई डिस्क confocal खुर्दबीन 17 प्रणाली के साथ जोड़ा की एक अवधि में प्राप्त कर रहे हैं. इस तरीके में इमेजिंग vivo दवा वितरण, मंच पर निर्भर चर्चा के रूप में हमें इस तरह की प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए अनुमति दी गई हैemotherapeutic प्रतिक्रियाओं, कीमोथेरपी प्रेरित कोशिका मृत्यु, और माइलॉयड सेल 5 व्यवहार के प्रकार. हम विरोधी कैंसर चिकित्सा और स्तन कैंसर के माउस मॉडल में ट्यूमर stroma बातचीत कैंसर कोशिका प्रतिक्रियाओं का intravital इमेजिंग के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं. इस प्रोटोकॉल के लिए व्यवहार और दोनों कैंसर की कोशिकाओं और stromal घटकों के की मौत के ट्रांसजेनिक और इंजेक्शन फ्लोरोसेंट लेबल की एक विस्तृत विविधता के साथ अप करने के लिए एक एकल इमेजिंग सत्र में 40 घंटे के लिए अवधि के लिए दोनों ट्रांसजेनिक और प्रत्यारोपण मॉडल में ट्रैक करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> अभिकर्मक </td></tr><tr><td> MMTV - PyMT चूहों </td><td> जैक्सन प्रयोगशाला </td><td> 2374 </td><td></td></tr><tr><td> C3 (1) टैग चूहों </td><td> जैक्सन प्रयोगशाला </td><td> 13591 </td><td></td></tr><tr><td> ACTB - ECFP चूहों </td><td> जैक्सन प्रयोगशाला </td><td> 3773 </td><td></td></tr><tr><td> ACTB H2B-EGFP चूहों </td><td> जैक्सन प्रयोगशाला </td><td> 5418 </td><td></td></tr><tr><td> 1 x पीबीएस </td><td> घर में निर्मित </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2 एमडी Dextran, Fluorescein संयुग्मित </td><td> Invitrogen </td><td> D-7137 </td><td> पतला करने के लिए 1/1 x पीबीएस में मिलीग्राम मिलीलीटर, DH 2 हे (4 -20 डिग्री सेल्सियस पर दुकान मिलीग्राम / एमएल) में reconstitute </td></tr><tr><td> 10 केडी Dextran, Alexa 647-संयुग्मित Fluor </td><td&gt; Invitrogen </td><td> D-22,914 </td><td> पतला करने के लिए 1/1 x पीबीएस में मिलीग्राम मिलीलीटर, DH 2 हे (4 -20 डिग्री सेल्सियस पर दुकान मिलीग्राम / एमएल) में reconstitute </td></tr><tr><td> डॉक्सोरूबिसिन हाइड्रोक्लोराइड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 44583 </td><td> DH 2 हे और दुकान में 4 में reconstitute ° C, 1 x पीबीएस में जलमिश्रित </td></tr><tr><td> Isothesia (isoflurane) </td><td> बटलर पशु स्वास्थ्य की आपूर्ति </td><td> 029450 </td><td> 250 मिलीलीटर </td></tr><tr><td> Propidium आयोडाइड </td><td> Invitrogen </td><td> P3566 </td><td> 1 मिलीग्राम / एमएल, 1 x पीबीएस में पतला 1:15 </td></tr><tr><td> नाइट्रोजन </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> ऑक्सीजन </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> 18G 1 x ½ &quot;नियमित बेवल सुई </td><td> BD </td><td> 305196 </td><td></td></tr><tr><td> μManager </td><td> घाटी लैब, UCSF </td><td> <a href="www.micro-manager.org" target="_blank">www.micro - manager.org</a> </td><td> खुले स्रोत सॉफ्टवेयर </td></tr><tr><td> शराब झाड़ू </td><td> BD </td><td> 326895 </td><td> 70% isopropyl शराब swabs </td></tr><tr><td> संज्ञाहरण प्रणाली </td><td> आण्विक इमेजिंग उत्पाद, कं </td><td></td><td></td></tr><tr><td> कांच के कवर </td><td> कोर्निंग </td><td> 2940-245 </td><td> 1 साढ़े, मिमी 24x50 नहीं, 70% isopropanol पोंछे साथ कीटाणुरहित </td></tr><tr><td> Curity धुंध स्पंज (बाँझ) </td><td> केंडल </td><td> 6939 </td><td></td></tr><tr><td> ग्लास खुर्दबीन स्लाइड </td><td> कोर्निंग </td><td> 2948-75x25 </td><td> पूर्व साफ है, अगर नहीं साफ पूर्व, 70% isopropanol पोंछे साथ कीटाणुरहित </td></tr><tr><td> कठोर ठीक कैंची </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 14090-11 </td><td> स्टेनलेस स्टील, तेज तेज युक्तियाँ, सीधे टिप, 26 मिमी काटने के किनारे, 11 सेमी लंबाई, 2 जोड़ी </td></tr><tr><td> गर्म कंबल </td><td> Gaymar इंडस्ट्रीज </td><td></td><td></td></tr><tr><td> गरम मनका अजीवाणु बनानेवाला पदार्थ </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 18000-45 </td><td> उपयोग करने से पहले लगभग 30 मिनट पर मुड़ें,&gt; 200 उपकरण बाँझ बनाना ° C 30 सेकंड के लिए </td></tr><tr><td> Imaris </td><td> Bitplane </td><td> <a href="www.bitplane.com" target="_blank">www.bitplane.com</a> </td><td></td></tr><tr><td> Krazy गोंद </td><td> एल्मर उत्पाद </td><td> KG484 </td><td></td></tr><tr><td> प्रयोगशाला टेप (आधा) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> प्रयोगशाला टेप (1) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> ढक्कनएक स्टायरोफोम शिपिंग कूलर </td><td></td><td></td><td> इस शल्य चिकित्सा के मंच के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा </td></tr><tr><td> माइक्रो विदारक संदंश </td><td> Roboz </td><td> RS-5153 </td><td> 1x2 दांत, मामूली वक्र, 0.8 मिमी टिप चौड़ाई, 4 &quot;लंबाई </td></tr><tr><td> माइक्रो विदारक संदंश </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td><td> दाँतेदार, मामूली वक्र, 0.8 मिमी टिप चौड़ाई, 4 &quot;लंबाई </td></tr><tr><td> माइक्रोस्कोप </td><td></td><td></td><td> स्पिनिंग डिस्क confocal, XYZ Piezo मंच, epifluourescence 17,25 capablility </td></tr><tr><td> माइक्रोस्कोप चरण डालने </td><td> एप्लाइड वैज्ञानिक उपकरण </td><td></td><td> कस्टम दो परिपत्र इमेजिंग बंदरगाहों के साथ गढ़े, </td></tr><tr><td> MouseOx oximeter, सॉफ्टवेयर, और सेंसर </td><td> स्टार लाइफ साइंसेज </td><td> <a href="www.starrlifesciences.com" target="_blank">www.starrlifescience</a>s.com </td><td></td></tr><tr><td> Nalgene सुपर Versi सूखी प्रयोगशाला soakers </td><td> थर्मो वैज्ञानिक </td><td> 74218-00 </td><td> शल्य चिकित्सा मंच अस्तर के लिए चौथाई में काटें </td></tr><tr><td> छिटकानेवाला </td><td> Salter लैब्स </td><td> 8901 </td><td> गैसों गीला करने के लिए किया जाता है, फेफड़े के ऊतकों की जलन को रोकता है </td></tr><tr><td> स्लिप टिप डिस्पोजेबल tuberculin सिरिंज (1 मिलीग्राम) </td><td> BD </td><td> 309659 </td><td></td></tr><tr><td> Surflo पंखों वाला जलसेक सेट </td><td> Terumo </td><td> SV-23BLK </td><td> टयूबिंग 23g ¾ x &quot;अल्ट्रा पतली सुई, 12&quot; </td></tr><tr><td> Betadine स्प्रे </td><td> पर्ड्यू फार्मा </td><td> BASP3H </td><td></td></tr></tbody></table>

live imaging of drug responses in the tumor microenvironment in mouse models of breast cancer

ट्यूमर microenvironment ट्यूमर दीक्षा, प्रगति, मेटास्टेसिस, और विरोधी कैंसर उपचार के लिए जवाब में एक निर्णायक भूमिका निभाता है. तीन आयामी सह संस्कृति प्रणालियों अक्सर दवा प्रतिक्रियाओं में उनकी भूमिका सहित ट्यूमर stroma बातचीत, बयान करना करने के लिए किया जाता है. हालांकि, कि बातचीत बरकरार microenvironment में vivo में होने की कई पूरी तरह से इन विट्रो सेटिंग में इन में नहीं दोहराया जा सकता है. इस प्रकार, वास्तविक समय में इन प्रक्रियाओं के प्रत्यक्ष दृश्य के उपचार के लिए ट्यूमर प्रतिक्रियाओं को समझने और कैंसर की कोशिकाओं के बीच बातचीत और stroma कि इन प्रतिक्रियाओं को प्रभावित कर सकते हैं की पहचान में एक महत्वपूर्ण उपकरण बन गया है. यहाँ हम रहते हैं, anesthetized चूहों की कताई डिस्क confocal माइक्रोस्कोपी का उपयोग करने के लिए सीधे दवा वितरण, कैंसर कोशिका प्रतिक्रियाओं और स्तन कैंसर मॉडल में प्रणालीगत थेरेपी के प्रशासन के बाद ट्यूमर stroma बातचीत में परिवर्तन का पालन करने के लिए एक विधि प्रदान करते हैं. हम labeli के लिए प्रक्रियाओं का वर्णनएनजी विभिन्न ट्यूमर घटकों, चिकित्सीय प्रतिक्रियाओं के अवलोकन के लिए पशुओं के उपचार और इमेजिंग के लिए ट्यूमर ऊतकों को उजागर 40 घंटे तक के लिए शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया. इस प्रोटोकॉल से प्राप्त परिणामों के समय चूक फिल्मों, जिसमें दवा घुसपैठ, कैंसर कोशिका मृत्यु और stromal सेल प्रवास जैसे प्रक्रियाओं छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग कर मूल्यांकन किया जा सकता हैं.

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Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

हम इमेजिंग विरोधी कैंसर उपचार के लिए प्रतिक्रिया करने के लिए एक विधि का वर्णन<em&gt; Vivo में</em&gt; और एकल कोशिका प्रस्ताव पर.

स्तन कैंसर के माउस मॉडल में ट्यूमर microenvironment में दवा प्रतिक्रियाओं की इमेजिंग जीते

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Method for Novel Anti-Cancer Drug Development using Tumor Explants of Surgical Specimens

उपन्यास विरोधी कैंसर औषधि सर्जिकल नमूने के ट्यूमर Explants का उपयोग विकास के लिए विधि


The current therapies for malignant glioma have only palliative effect. For therapeutic development, one hurdle is the discrepancy of efficacy determined ...

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

मौखिक स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा के एक Orthotopic माउस मॉडल में ट्यूमर सेल आक्रमण की मल्टी फोटॉन इमेजिंग

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

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स्तन कैंसर मस्तिष्क मेटास्टेसिस के ट्यूमर Hypoxia गतिशीलता के vivo bioluminescence इमेजिंग में एक माउस मॉडल में

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression

MAME 4D ट्यूमर लाइव सेल इमेजिंग के लिए मॉडल: Microenvironment सहभागिता कि प्रभाव घातक प्रगति

We have developed 3D coculture models, which we term MAME (mammary architecture and microenvironment engineering), and used them for live-cell imaging in ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

स्तन कैंसर अस्थि मेटास्टेसिस की एक नग्न चूहा मॉडल चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग, बड़ा गणना टोमोग्राफी और अल्ट्रासाउंड का उपयोग मल्टी मोडल एंजियोजिनेसिस इमेजिंग

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Time-lapse Imaging of Primary Preneoplastic Mammary Epithelial Cells Derived from Genetically Engineered Mouse Models of Breast Cancer

प्राथमिक Preneoplastic स्तन उपकला कोशिकाओं के समय चूक इमेजिंग स्तन कैंसर के आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल से निकाली

Time-lapse  imaging can be used to compare behavior of cultured primary preneoplastic  mammary epithelial cells derived from different genetically ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

रोधगलन के माउस मॉडल में एमआरआई और पीईटी

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer

स्तन कैंसर के एक उपन्यास ट्रांसजेनिक माउस मॉडल: Adenovirus-Cre साथ Ductal उपकला के लक्षित करके metastatic स्तन कार्सिनोमा की शुरूआत

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in ...