Name: collecting and measuring wound exudate biochemical mediators in surgical wounds
Uploaded: 2012-10-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds at JoVE.com

Dr Carvalho&#39;s werk werd ondersteund door een onderzoekssubsidie ​​van het Office of Research on Women&#39;s Health en National Institute of Child Health and Human Development van de National Institutes of Health (5K12 HD043452). Dr Angst levert (On-Q PainBuster Post-Op Pain Relief System) en fondsen (voor de biochemische assays) ontvangen van I-Flow (Lake Forest, Californië).

1. Studie protocol <ul><li> Verkrijgen van Institutional Review Board goedkeuring en schriftelijke informed consent. </li><li> Selecteer een geschikte chirurgische populatie voor onderzoek uit te voeren. Deze methodologie is alleen van toepassing op keizersnede wonden, maar de meeste chirurgische wonden passend zou zijn. </li><li> Overweeg in-en exclusiecriteria voor uw deelname aan het onderzoek. Patiënten en procedures met hoge tarieven van chirurgische wondinfectie wellicht niet geschikt. </li><li> Standaardiseren...

<ol>
	<li>Carvalho, B., Clark, D. J., Angst, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+and+Systemic+Release+of+Cytokines,+Nerve+Growth+Factor,+Prostaglandin+E2,+and+Substance+P+in+Incisional+Wounds+and+Serum+Following+Cesarean+Delivery.">Local and Systemic Release of Cytokines, Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Substance P in Incisional Wounds and Serum Following Cesarean Delivery.</a> J. Pain. 9, 650-657 (2008).</li><li>Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D. C., Angst, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+subcutaneous+instillation+of+bupivacaine+compared+to+saline+reduces+interleukin+10+and+increases+substance+P+in+surgical+wounds+after+cesarean+delivery.">Continuous subcutaneous instillation of bupivacaine compared to saline reduces interleukin 10 and increases substance P in surgical wounds after cesarean delivery.</a> Anesth. Analg. 111, 1452-1459 (2010).</li><li>Verri, W. A., Cunha, T. M., Parada, C. A., Poole, S., Cunha, F. Q., Ferreira, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypernociceptive+role+of+cytokines+and+chemokines:+targets+for+analgesic+drug+development.">Hypernociceptive role of cytokines and chemokines: targets for analgesic drug development.</a> Pharmacol. Ther. 112, 116-138 (2006).</li><li>Watkins, L. R., Maier, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+regulation+of+central+nervous+system+functions:+from+sickness+responses+to+pathological+pain.">Immune regulation of central nervous system functions: from sickness responses to pathological pain.</a> J. Intern. Med. 257, 139-155 (2005).</li><li>Beilin, B., Bessler, H., Mayburd, E., Smirnov, G., Dekel, A., Yardeni, I., Shavit, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+preemptive+analgesia+on+pain+and+cytokine+production+in+the+postoperative+period.">Effects of preemptive analgesia on pain and cytokine production in the postoperative period.</a> Anesthesiology. 98, 151-155 (2003).</li><li>Wu, C. T., Jao, S. W., Borel, C. O., Yeh, C. C., Li, C. Y., Lu, C. H., Wong, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+epidural+clonidine+on+perioperative+cytokine+response,+postoperative+pain,+and+bowel+function+in+patients+undergoing+colorectal+surgery.">The effect of epidural clonidine on perioperative cytokine response, postoperative pain, and bowel function in patients undergoing colorectal surgery.</a> Anesth. Analg. 99, 502-509 (2004).</li><li>Buvanendran, A., Kroin, J. S., Berger, R. A., Hallab, N. J., Saha, C., Negrescu, C., Moric, M., Caicedo, M. S., Tuman, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Upregulation+of+prostaglandin+E2+and+interleukins+in+the+central+nervous+system+and+peripheral+tissue+during+and+after+surgery+in+humans.">Upregulation of prostaglandin E2 and interleukins in the central nervous system and peripheral tissue during and after surgery in humans.</a> Anesthesiology. 104, 403-410 (2006).</li><li>Kristiansson, M., Soop, M., Sundqvist, K. G., Soop, A., Suontaka, A. M., Blomback, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+vs.+systemic+immune+and+haemostatic+response+to+hip+arthroplasty.">Local vs. systemic immune and haemostatic response to hip arthroplasty.</a> Eur. J. Anaesthesiol. 15, 260-270 (1998).</li><li>Liu, S. S., Richman, J. M., Thirlby, R. C., Wu, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+continuous+wound+catheters+delivering+local+anesthetic+for+postoperative+analgesia:+a+quantitative+and+qualitative+systematic+review+of+randomized+controlled+trials.">Efficacy of continuous wound catheters delivering local anesthetic for postoperative analgesia: a quantitative and qualitative systematic review of randomized controlled trials.</a> J. Am. Coll. Surg. 203, 914-932 (2006).</li><li>Eriksson, A. S., Sinclair, R., Cassuto, J., Thomsen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+lidocaine+on+leukocyte+function+in+the+surgical+wound.">Influence of lidocaine on leukocyte function in the surgical wound.</a> Anesthesiology. 77, 74-78 (1992).</li><li>Clark, J. D., Shi, X., Li, X., Qiao, Y., Liang, D., Angst, M. S., Yeomans, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine+reduces+local+cytokine+expression+and+neutrophil+infiltration+after+incision.">Morphine reduces local cytokine expression and neutrophil infiltration after incision.</a> Mol. Pain. 3, 28 (2007).</li><li>Webb, S. T., Ghosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-articular+bupivacaine:+potentially+chondrotoxic.">Intra-articular bupivacaine: potentially chondrotoxic.</a> Br. J. Anaesth. 102, 439-441 (2009).</li><li>Scott, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+infiltration+for+surgery.">Wound infiltration for surgery.</a> Anaesthesia. 65, 67 (2010).</li></ol>

Deze methodologie hierboven beschreven is gebleken is gevoelig genoeg om biochemische inflammatoire mediatoren en nociceptieve detecteren wondvocht. Bemonstering op verschillende tijdstippen heeft ook ons toegestaan ​​om veranderingen van deze mediatoren in de tijd. 1,2 Wij zijn niet op de hoogte van andere menselijke operatiewond test die serieel kan meten het afgifteprofiel van inflammatoire en nociceptieve mediatoren in chirurgische wond exsudaat te observeren. Resultaten van onze methodiek wondexsudaa...

Na een chirurgische incisie, verblijvende en migrerende ontstekingscellen vrij pro-en anti-inflammatoire cytokines, prostanoïden, neuropeptiden en chemokines die belangrijk zijn voor het initiëren en onderhouden pijn. 3,4 De mogelijkheid om site-specifieke biochemische markers verzamelen is essentieel voor het bepalen tussen niveaus in serum en chirurgische wond begrijpen complexe relatie tussen mediatorafgifte en chirurgische pijn en kunnen het effect van zowel systemische als perifere toediening evalueren operatiewond biochemie. Studies gericht op systemische metingen van biochemische mediators en niet als plaats-specifieke afgifte. 5,6 Serum metingen van cytokines en chemokines hoeft niet representatief voor lokale operatiewond biochemische gebeurtenissen en slechts dan een globale systemische reactie op chirurgische letsel. Dit artikel geeft een gedetailleerde en unieke visuele beschrijving van deze methodiek dat was sparst waarnaar verwezen wordt in 2008 in de Journal of Pain. 1 Het doel van deze Jove artikel is om een unieke en visueel verbeterde beschrijving van de methoden.

collecting and measuring wound exudate biochemical mediators in surgical wounds

We beschrijven een methode waarmee we kunnen verzamelen en biochemische inflammatoire mediatoren en nociceptieve meten op de chirurgische wond. Het verzamelen van site-specifieke biochemische markers belangrijk om te begrijpen van de relatie tussen niveaus in serum en chirurgische wond vast die associaties tussen mediatorafgifte, pijn, pijnstillend gebruik en andere uitkomsten van belang, en evalueren van het effect van systemische en perifere toediening van het geneesmiddel op chirurgische wonden biochemie. Deze methodologie is toegepast op gezonde vrouwen die een electieve keizersnede met spinale anesthesie. We hebben gemeten wondexsudaat en serum mediators op dezelfde tijdsintervallen als pijnpatiënt scores en analgetica verbruik tot 48 uur na keizersnede. Met deze methode hebben we verschillende biochemische mediatoren waaronder nerve growth factor (NGF), prostaglandine E2 (PG-E2) substance P, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7 detecteren, IL-8,IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, TNFa, INFγ, G-CSF, GM-CSF, MCP-1 en MIP-1β. Studies van dit menselijk wond bioassay hebben geen correlaties tussen wond en serum cytokine concentraties of de time-afgifteprofiel (J Pain 2008;. 9 (7) :650-7) 1 wij gedocumenteerd de bruikbaarheid van de techniek te identificeren. drug-gemedieerde veranderingen in de wond cytokine-inhoud (Anesth Analg 2010; 111:1452-9). 2

Met deze methode hebben we kunnen alle biochemische mediators hierboven beschreven, met uitzondering van IL-5 in wondexsudaat en plasma gedetecteerd. 1,2 Enkelen cytokines werden niet gedetecteerd in plasma (IL-4, IL-17, TNFa, INFγ , GM-CSF). 1 Het tijdsverloop van de gemeten cytokines en chemokines in de gerapporteerde studies consistent waren, het bereiken van een plateau in de eerste uren dat werd volgehouden voor de 24 uur observatieperiode .. 1,2 Echter, NGF gestaag toegenomen in d...

Watch this Scientific Journal Video about Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds at JoVE.com

Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds

Dit artikel geeft een gedetailleerde en visuele beschrijving van een methodologie voor het verzamelen en meten van biochemische inflammatoire en nociceptieve bemiddelaars op de chirurgische wond na keizersnede. Deze menselijke bioassay werd gebruikt om correlaties tussen wond en serum cytokine concentraties en drug-gemedieerde veranderingen in wond cytokines, chemokines en neuropeptiden bepalen.

Het verzamelen van en het meten van wondexsudaat Biochemische Mediators In chirurgische wonden

We describe a methodology by which we are able to collect and measure biochemical inflammatory and nociceptive mediators at the surgical wound site. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Biochemical Measurement of Neonatal Hypoxia

Biochemische Meting van Neonatale Hypoxie

Neonatal hypoxia ischemia is characterized by inadequate blood perfusion of a tissue or a systemic lack of oxygen. This condition is thought to ...

Murine Model of Wound Healing

Muizenmodel van wondgenezing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Collecting Saliva and Measuring Salivary Cortisol and Alpha-amylase in Frail Community Residing Older Adults via Family Caregivers

Het verzamelen van speeksel en meten cortisol en Alpha-amylase in Frail Gemeenschap wonende ouderen via mantelzorgers

Salivary measures have emerged in bio-behavioral research  that are easy-to-collect, minimally invasive, and relatively inexpensive  biologic markers of ...

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

In utero Meting van de hartslag in de Muis door invasieve M-mode echocardiografie

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease ...

Intravital Microscopy of Tumor-associated Vasculature Using Advanced Dorsal Skinfold Window Chambers on Transgenic Fluorescent Mice

Intravital microscopie van Tumor-geassocieerde therapieën met behulp van geavanceerde dorsale huidplooien venster Chambers op transgene fluorescerende muizen

Tumor and tumor vessel development, as well as tumor response to therapeutics, are highly dynamic biological processes. Histology provides static ...

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

Met behulp van In Vitro Live-cel Imaging om te verkennen chemotherapeutica geleverd door lipide gebaseerde nanodeeltjes

Conventional imaging techniques can provide detailed information about cellular processes. However, this information is based on static images in an ...

Collecting Hair Samples for Hair Cortisol Analysis in African Americans

Verzamelen van haar monsters voor Cortisol haaranalyse in Afro-Amerikanen

The hormone cortisol is typically assessed in saliva, serum, or urine samples. More recently, cortisol has been successfully extracted from hair, ...

Application of End-to-end Anastomosis in Robotic Central Pancreatectomy

Toepassing van End-to-end Anastomosis in Robotic centrale Pancreatectomy

Central pancreatectomy is carried out for the treatment of benign or low-malignant potential tumors located in the pancreatic neck or proximal part of ...

Protocol to Create Chronic Wounds in Diabetic Mice

Protocol voor het maken van chronische wonden bij diabetische muizen

Chronic wounds develop as a result of defective regulation in one or more complex cellular and molecular processes involved in proper healing. They impact ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Hoornvlies epitheliale schuren met oogbeschadigingen en/of Burr als een Model voor hoornvlies wondgenezing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...