Name: production of disulfide-stabilized transmembrane peptide complexes for structural studies
Uploaded: 2013-03-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies at JoVE.com

Финансирование этой работы осуществляется национального здравоохранения и медицинских исследований Совета Австралии (NHMRC проекта грант в 1011352 MEC и MJC, независимыми исследовательскими институтами инфраструктуры поддержки схеме [IRIISS] грант WEHI) и правительство штата Виктория (ВЕСКИ инноваций стипендий для MEC; Викторианская государственного управления операционной инфраструктуры поддержки WEHI). MEC является королева Елизавета II членом Австралийского исследовательского совета. EFXB признает поддержку со стороны Norma Хильда Шустер стипендиальной программы в Университете Мельбурна.

1. Клонирование и построить Design Клонирование последовательности интерес в ПММ-пептида вектор (которая может быть предоставлена ​​по запросу) с помощью HindIII и BamHI сайты рестрикции (см. Рисунок 1). Двухцепочечной ДНК-вставки должны включать, в следующем порядке: сай...

<ol>
	<li>Call, M. E., Chou, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+view+into+the+blind+spot:+solution+NMR+provides+new+insights+into+signal+transduction+across+the+lipid+bilayer.">A view into the blind spot: solution NMR provides new insights into signal transduction across the lipid bilayer.</a> Structure. 18, 1559-1569 (2010).</li><li>Bocharov, E. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+structure+of+the+dimeric+transmembrane+domain+of+the+growth+factor+receptor+ErbB2+presumably+corresponding+to+the+receptor+active+state.">Spatial structure of the dimeric transmembrane domain of the growth factor receptor ErbB2 presumably corresponding to the receptor active state.</a> The Journal of Biological Chemistry. 283, 6950-6956 (2008).</li><li>Mineev, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+structure+of+the+transmembrane+domain+heterodimer+of+ErbB1+and+ErbB2+receptor+tyrosine+kinases.">Spatial structure of the transmembrane domain heterodimer of ErbB1 and ErbB2 receptor tyrosine kinases.</a> J. Mol. Biol. 400, 231-243 (2010).</li><li>Mineev, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+structure+and+dimer--monomer+equilibrium+of+the+ErbB3+transmembrane+domain+in+DPC+micelles.">Spatial structure and dimer--monomer equilibrium of the ErbB3 transmembrane domain in DPC micelles.</a> Biochim. Biophys Acta. 1808, 2081-2088 (2011).</li><li>Lau, T. L., Kim, C., Ginsberg, M. H., Ulmer, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+the+integrin+alphaIIbbeta3+transmembrane+complex+explains+integrin+transmembrane+signalling.">The structure of the integrin alphaIIbbeta3 transmembrane complex explains integrin transmembrane signalling.</a> The EMBO Journal. 28, 1351-1361 (2009).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+a+receptor+with+two+associating+transmembrane+domains+on+the+cell+surface:+integrin+alphaIIbbeta3.">The structure of a receptor with two associating transmembrane domains on the cell surface: integrin alphaIIbbeta3.</a> Molecular Cell. 34, 234-249 (2009).</li><li>Call, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+the+zetazeta+transmembrane+dimer+reveals+features+essential+for+its+assembly+with+the+T+cell+receptor.">The structure of the zetazeta transmembrane dimer reveals features essential for its assembly with the T cell receptor.</a> Cell. 127, 355-368 (2006).</li><li>Call, M. E., Wucherpfennig, K. W., Chou, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structural+basis+for+intramembrane+assembly+of+an+activating+immunoreceptor+complex.">The structural basis for intramembrane assembly of an activating immunoreceptor complex.</a> Nat. Immunol. 11, 1023-1029 (2010).</li><li>Diefenderfer, C., Lee, J., Mlyanarski, S., Guo, Y., Glover, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliable+expression+and+purification+of+highly+insoluble+transmembrane+domains.">Reliable expression and purification of highly insoluble transmembrane domains.</a> Anal. Biochem. 384, 274-278 (2009).</li><li>Schnell, J. R., Chou, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+mechanism+of+the+M2+proton+channel+of+influenza+A+virus.">Structure and mechanism of the M2 proton channel of influenza A virus.</a> Nature. 451, 591-595 (2008).</li><li>Xie, X. Q., Zhao, J., Zheng, H. E. x. p. r. e. s. s. i. o. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=purification,+and+isotope+labeling+of+cannabinoid+CB2+receptor+fragment,+CB2(180-233).">purification, and isotope labeling of cannabinoid CB2 receptor fragment, CB2(180-233).</a> Protein Expr. Purif. 38, 61-68 (2004).</li><li>Miozzari, G. F., Yanofsky, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translation+of+the+leader+region+of+the+Escherichia+coli+tryptophan+operon.">Translation of the leader region of the Escherichia coli tryptophan operon.</a> J. Bacteriol. 133, 1457-1466 (1978).</li><li>North, C. L., Blacklow, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+independence+of+ligand-binding+modules+five+and+six+of+the+LDL+receptor.">Structural independence of ligand-binding modules five and six of the LDL receptor.</a> Biochemistry. 38, 3926-3935 (1999).</li><li>Staley, J. P., Kim, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+a+native-like+subdomain+in+a+partially+folded+intermediate+of+bovine+pancreatic+trypsin+inhibitor.">Formation of a native-like subdomain in a partially folded intermediate of bovine pancreatic trypsin inhibitor.</a> Protein Sci. 3, 1822-1832 (1994).</li><li>Narayanan, S., Sato, T., Wolfe, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+C-terminal+region+of+signal+peptide+peptidase+defines+a+functional+domain+for+intramembrane+aspartic+protease+catalysis.">A C-terminal region of signal peptide peptidase defines a functional domain for intramembrane aspartic protease catalysis.</a> The Journal of Biological Chemistry. 282, 20172-20179 (2007).</li><li>Klunk, W. E., Pettegrew, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+beta-amyloid+protein+is+covalently+modified+when+dissolved+in+formic+acid.">Alzheimer's beta-amyloid protein is covalently modified when dissolved in formic acid.</a> J. Neurochem. 54, 2050-2056 (1990).</li><li>Klunk, W. E., Xu, C. J., Pettegrew, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMR+identification+of+the+formic+acid-modified+residue+in+Alzheimer's+amyloid+protein.">NMR identification of the formic acid-modified residue in Alzheimer's amyloid protein.</a> J. Neurochem. 62, 349-354 (1994).</li><li>Previero, A., Coletti-Previero, M. A., Cavadore, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reversible+chemical+modification+of+the+tryptophan+residue.">A reversible chemical modification of the tryptophan residue.</a> Biochim. Biophys. Acta. 147, 453-461 (1967).</li><li>Kim, H. J., Howell, S. C., Van Horn, W. D., Jeon, Y. H., Sanders, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+Advances+in+the+Application+of+Solution+NMR+Spectroscopy+to+Multi-Span+Integral+Membrane+Proteins.">Recent Advances in the Application of Solution NMR Spectroscopy to Multi-Span Integral Membrane Proteins.</a> Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 55, 335-360 (2009).</li></ol>

Выражение trpLE-TM слияния. По нашему опыту, trpLE-TM слияния слабо выражены в богатой питательной среде при температуре 37 ° C, и культура условиях, описанных здесь оказались успешными для различных последовательностей, содержащих от одного до четырех TM областях с выходами в пределах от 50 ...

Этот протокол подробности процедуры мы разработали для получения дисульфида стабилизировалась комплексов трансмембранных (ТМ) пептиды для структурных исследований с использованием решения ЯМР. Процедура использует надежные выражения предоставляемой ΔtrpLE1413 слияние системы (см. ниже) и позволяет TM пептидных комплексов определенного состава, которые будут созданы с использованием сложных стабильных изотопных методов маркировки для современного многомерного ЯМР экспериментов. Мы использовали эти методы, чтобы определить несколько структур ЯМР, который показал новую важную информацию о том, как лимфоцит-активирующих immunoreceptors собираются из нескольких субъединиц мембранного белка через взаимодействие среди своих TM области (недавно рассмотрели в 1). Эти методы применимы ко многим другим мембранным белком систем, а также широкий спектр вниз по течению аналитических методов в дополнение к решению ЯМР. Хотя пример, приведенный здесь используется родной остатков цистеинасоздать комплекс, который имитирует естественно дисульфидными связями белка, дизайн одинаково хорошо подходит для создания инженерных дисульфидные связи для стабилизации комплексов, которые обычно удерживаются вместе слабыми, нековалентных взаимодействий, таких как гомо-и гетеро-TM димерных комплексов рецептора эпидермального фактора роста (EGFR)-белков семейства 2-4 или гетеродимерные αβ интегрина комплексы 5,6. Чрезвычайно гидрофобных пептидных последовательностей, таких как полученные из липидного бислоя, охватывающий часть белков TM чрезвычайно трудных предметов для биохимических и биофизических исследований. Кроме того, что очень сложно манипулировать с использованием стандартных белков и методы химии пептидов, они часто весьма токсичны для клеток и, следовательно, трудно производить рекомбинантно. Мы 7,8 и др. 9-11 имели значительный успех выражения таких сложных пептидных последовательностей у бактерий, как в рамке карбоксиконцевойслияния с модифицированной версией ΔtrpLE1413 последовательность, полученную из E. оперона кишечной ГТО 12. ~ 13 кДа trpLE полипептида, кодируемого этой последовательности могут быть произведены на высоком уровне под промотором Т7 и полностью локализованы тельца включения, где проблемы, связанные с токсичностью и / или нестабильности обойти. Модификация последовательности путем добавления аминоконцевой 9-гистидин тегов 13 и устранения внутренних метионина и цистеина из trpLE последовательности позволило trpLE 14-пептид слияния должна быть очищена от иона металла аффинной хроматографии и переваривается использованием цианогенбромидом (CNBr ), чтобы освободить желаемого пептидной последовательности. Мы успешно использовали эту систему, чтобы выразить более десятка различных последовательностей, как trpLE слияния представляют мембранные белки, которые содержат фрагменты целых четыре TM областях (7,8 и неопубликованные результаты, см. также раздел обсуждения). Основным новшеством в этом протоколе является определение условий, при которых неструктурированные и очень плохо растворимы trpLE-TM слияния может быть эффективно дисульфида сшитые в контексте рационализации процессов. Некоторые аспекты высокодоходные выражения, обработки и очистки пептидов продукты также были тщательно оптимизированы, и рекомендации, представленные здесь, являются одинаково актуальными для производства не-дисульфид-сшитого (мономерные) продукции ТМ пептидов.

<table border="1"><tbody><tr><td> Название Реагенты / Материал </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Цианогенбромидом </td><td> ALDRICH </td><td> P.No-C91492, CAS-506-68-3 </td><td> Опасного вещества. ОПАСНЫХ ГРУЗОВ. Очень токсичен при вдыхании, при контакте с кожей и при проглатывании. При контакте с кислотами выделяет очень токсичный газ. Очень токсичен для водных организмов, может вызывать долгосрочные неблагоприятные изменения в водной среде. </td></tr><tr><td> Трифторуксусной кислоты </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P.CODE-1000984387, CAS номер 76-05-1 </td><td> Опасного вещества. ОПАСНЫХ ГРУЗОВ., Вызывает сильные ожоги. Опасен при вдыхании. Вредно для водных организмов, может вызывать долгосрочные неблагоприятные изменения в водной среде. </td></tr><tr><td> 2-меркаптоэтанол </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P.No M7154, CAS номер 60-24-2 </td><td> Опасного вещества. ОПАСНЫХ ГРУЗОВ. Токсичен при вдыхании, при контакте с кожей и при проглатывании. Раздражает кожу. Риск серьезного повреждения глаз. Может вызвать сенсибилизацию путем контакта с кожей. Очень токсичен для водных организмов, может вызывать долгосрочные неблагоприятные изменения в водной среде. </td></tr><tr><td> 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропанол </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> Номер продукта 52512, CAS-No. 920-66-1 </td><td> Опасного вещества. ОПАСНЫХ ГРУЗОВ. Опасен при вдыхании и при проглатывании. Вызывает ожоги. </td></tr><tr><td> Муравьиная кислота </td><td> Merck KGaA </td><td> K41186564 </td><td> Горючая жидкость и пар. Вызывает серьезные ожоги кожи и повреждения глаз. </td></tr><tr><td> Мочевина </td><td> Univar, AJAX FINECHEM </td><td> Номер продукта, 817, КАС № 57-13-6 </td><td> При нагревании декабряomposes до диоксида углерода и аммиака, если сожжены, излучает небольшое количество оксидов азота. Может вызвать покраснение и раздражение кожи и глаз. </td></tr><tr><td> Гуанидингидрохлорида </td><td> Amresco </td><td> P.No-M110, CAS-номер: 50-01-1 </td><td> Опасно при проглатывании, вызывает серьезное раздражение глаз, вызывает раздражение кожи, острая токсичность Oral, раздражение кожи, раздражение глаз. </td></tr><tr><td> TRITON X-100 </td><td> SIGMA </td><td> Номер продукта-T8532 CAS No: 9002-93-1 </td><td> Тритон Х-100 представляет собой неионный моющих средств, 100% активного вещества, которое часто используется в биохимических приложений для растворения белков. Тритон Х-100 не имеет антимикробные свойства и считается сравнительно мягкий неденатурирующем моющих средств </td></tr><tr><td> Его-Select никель-Affinity Гель </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> Каталог Num-P6611 </td><td> IS-Select никель Affinity Гель иммобилизованными ионами металлов аффинной хроматографии (IMAC) продукта. HIS-Select NickAffinity-эль-гель является собственностью quadridentate хелатных на бисером агарозном взимается с никелем, который предназначен для специфически связываются гистидин содержащие белки. </td></tr><tr><td> (-)-Глутатион, окисленные </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> Каталог число 150568 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Misonix S-3000 ультразвуком </td><td> QSONICA </td><td> S-3000 (выпуск прекращен) </td><td> Максимальная выходная мощность 600 Вт. 1/2-inch сменным наконечником зонда имеет 1/2-дюймовый высокой интенсивности, большого объема советов и ряда высокой интенсивности, низким уровнем советы. Ближайший моделей в настоящее время от этой компании Q500 и Q700. </td></tr><tr><td> RP-HPLC: BioLogic DuoFlow хроматографической системы, программное обеспечение версии 5.3 </td><td> Bio-Rad Laboratories </td><td> Каталог Num 760-0047, Config No: AU500571, Serial No: 484BR3705 </td><td> Пептиды связываются с обращенной фазой столбцов в высоком воднueous подвижной фазы и элюируют с RP колонны высокоэффективной жидкостной хроматографии с высоким содержанием органических подвижной фазы. В RP ВЭЖХ пептидов разделяются в зависимости от их гидрофобный характер. Пептиды могут быть разделены работает линейного градиента органического растворителя. </td></tr><tr><td> Подготовка HT C3 ZORBAX 300SB-аналитической ВЭЖХ колонки, 21,2 х 150 мм, 5 мкм размер частиц </td><td> Agilent </td><td> Продукта: 895150-909 </td><td> Обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии столбе </td></tr><tr><td> NuPAGE 12% Bis-Tris Гели </td><td> Life Technologies </td><td> NP0341BOX </td><td> Предварительно гели, поданных за электрофореза белков </td></tr><tr><td> Слайд-A-анализатора G2 диализа Кассеты, 3.5K MWCO </td><td> Thermo Scientific </td><td> Номер продукта: 87724 </td><td> Пример диализа </td></tr></tbody></table>

production of disulfide-stabilized transmembrane peptide complexes for structural studies

Физическое взаимодействие между липидов встроенным альфа-спиральных областей мембранные белки играют важную роль в сворачивании и монтаж комплексов мембранных белков и в динамических процессов, таких как трансмембранный (ТМ) сигнализации и регуляции клеточной поверхности белка. Понимание особенностей вождения ассоциации определенных последовательностей требует сложных биофизических и биохимических анализов комплексов ТМ пептидов. Тем не менее, крайние гидрофобность TM области делает их очень трудно манипулировать, используя стандартные методики химии пептидов, и производство из подходящего материала исследования часто оказывается чрезмерно сложной. Определение условий, при которых пептиды могут принять стабильный винтовой конформации и образуют комплексы спонтанно добавляет дополнительный уровень сложности. Здесь мы приводим процедуру для получения гомо-или гетеро-димерных TM пептидные комплексы из материалов, которые выражаются в E. седлоЯ, таким образом позволяя включения стабильных изотопов этикетки для ядерного магнитного резонанса (ЯМР) или не природные аминокислоты для других приложений относительно недорого. Основным новшеством в этом методе является то, что ТМ комплексы производят и очищают, как ковалентно связаны (дисульфид-сшитого) сборки, которые могут образовывать стабильные, стехиометрические и однородной структуры при восстановлении в моющие средства, липидов или других мембран-миметического материалов. Мы также представляем тщательно оптимизированы процедуры для экспрессии и очистки, что в равной степени применимы ли производство единичных доменов TM или сшитые комплексы и предоставлять рекомендации для адаптации этих методов к новым последовательностям TM.

Уровень экспрессии достигается при trpLE слияния является переменной и сильно зависит от аминокислотной последовательности пептида прилагается. Рисунке 3 показан SDS-PAGE анализа предварительной индукции (полоса 1) и время-урожая (дорожка 2) образцы культуры, которые дали примерно 1...

Watch this Scientific Journal Video about Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies at JoVE.com

Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies

Биофизические и биохимические исследования взаимодействий между мембраной вложенных областей белка сталкиваются со многими техническими проблемами, первым из которых является получение соответствующего учебного материала. В этой статье описывается протокол для получения и очистки дисульфида стабилизированного трансмембранного пептидных комплексов, которые подходят для структурного анализа по решению ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и других аналитических приложений.

Производство дисульфид-стабилизировались трансмембранного пептидные комплексы для структурных исследований

Physical  interactions among the lipid-embedded alpha-helical domains of membrane  proteins play a crucial role in folding and assembly of membrane ...

Research

JoVE Journal

Chemistry

Surface Passivation for Single-molecule Protein Studies

Пассивации поверхности для одиночных молекул белка исследований

Single-molecule fluorescence spectroscopy has proven to be instrumental in understanding a wide range of biological phenomena at the nanoscale. Important ...

Steady-state, Pre-steady-state, and Single-turnover Kinetic Measurement for DNA Glycosylase Activity

Стационарная, Pre-стационарная, и односпальная кровать-оборота кинетические измерения активности ДНК гликозилаза

Human 8-oxoguanine DNA glycosylase (OGG1) excises the mutagenic oxidative DNA lesion 8-oxo-7,8-dihydroguanine (8-oxoG) from DNA. Kinetic characterization ...

Structure and Coordination Determination of Peptide-metal Complexes Using 1D and 2D 1H NMR

Structure and Coordination Determination of Peptide-metal Complexes Using 1D and 2D 1H NMR

Copper (I) binding by metallochaperone transport proteins prevents copper oxidation and release of the toxic ions that may participate in harmful redox ...

Thin-layer Chromatographic (TLC) Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

Thin-layer Chromatographic TLC Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

Тонкослойная Хроматографическое (ТСХ) Разделение и Биоанализы растительных экстрактов для идентификации антимикробные соединения

A common screen for plant antimicrobial compounds consists of separating plant extracts by paper or thin-layer chromatography (PC or TLC), exposing the ...

Controlled Photoredox Ring-Opening Polymerization of O-Carboxyanhydrides Mediated by Ni/Zn Complexes

Controlled Photoredox Ring-Opening Polymerization of O-Carboxyanhydrides Mediated by Ni/Zn Complexes

Под контролем Photoredox кольцо открытие полимеризации O- Carboxyanhydrides при посредничестве Ni/Zn комплексы

Here, we describe an effective protocol that combines photoredox Ni/Ir catalysis with the use of a Zn-alkoxide for efficient ring-opening polymerization, ...

Preparation of Stable Bicyclic Aziridinium Ions and Their Ring-Opening for the Synthesis of Azaheterocycles

Подготовка стабильной бициклических Aziridinium ионов и их кольцо открытие для синтеза Azaheterocycles

Bicyclic aziridinium ions were generated by the removal of an appropriate leaving group through internal nucleophilic attack by nitrogen atom in the ...

Novel Techniques for Observing Structural Dynamics of Photoresponsive Liquid Crystals

Новые методы для наблюдения за структурной динамики Photoresponsive жидких кристаллов

We discuss in this article the experimental measurements of the molecules in liquid crystal (LC) phase using the time-resolved infrared (IR) vibrational ...

Analyzing Protein Architectures and Protein-Ligand Complexes by Integrative Structural Mass Spectrometry

Анализ архитектуры белка и белка Ligand комплексов по интегративной структурных масс-спектрометрии

Proteins are an important class of biological macromolecules that play many key roles in cellular functions including gene expression, catalyzing ...

Experimental Methods for Efficient Solar Hydrogen Production in Microgravity Environment

Экспериментальные методы эффективного производства солнечного водорода в микрогравитационной среде

Long-term space flights and cis-lunar research platforms require a sustainable and light life-support hardware which can be reliably employed outside the ...