Name: ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs
Uploaded: 2013-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

الكتاب يقر تمويل من خلال وزارة الدفاع الكونغرس إخراج برامج البحوث الطبية (# W81XWH-10-1-0445)، المعاهد الوطنية للصحة (NIH R21 HL110056)، وجمعية القلب الأمريكية (# 11SDG4890030).

1. إعداد وتعقيم المخازن وكلاء الاختبار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 150 ملي كلوريد الصوديوم العازلة: 4،383 ز حل بلورات كلوريد الصوديوم في 500 مل من الماء nanopure. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المخازن المؤقتة درجة الحموضة: إعداد مخازن الفوسفات في درجة الحمو?...

<ol>
	<li>Alberts, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Biology of the Cell. , (2002).</li><li>Boasson, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+Bacteriolysis+by+Lysozyme.">On the Bacteriolysis by Lysozyme.</a> The Journal of Immunology. 34, 281-293 (1938).</li><li>Convertine, A. J., Benoit, D. S., Duvall, C. L., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+endosomolytic+diblock+copolymer+for+siRNA+delivery.">Development of a novel endosomolytic diblock copolymer for siRNA delivery.</a> J. Control. Release. 133, 221-229 (2009).</li><li>Duvall, C. L., Convertine, A. J., Benoit, D. S., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Delivery+of+a+Proapoptotic+Peptide+via+Conjugation+to+a+RAFT+Synthesized+Endosomolytic.">Intracellular Delivery of a Proapoptotic Peptide via Conjugation to a RAFT Synthesized Endosomolytic.</a> 7, 468-476 (2010).</li><li>Varkouhi, A. K., Scholte, M., Storm, G., Haisma, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+escape+pathways+for+delivery+of+biologicals.">Endosomal escape pathways for delivery of biologicals.</a> Journal of Controlled Release. 151, 220-228 (2011).</li><li>Plank, C., Oberhauser, B., Mechtler, K., Koch, C., Wagner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+endosome-disruptive+peptides+on+gene+transfer+using+synthetic+virus-like+gene+transfer+systems.">The influence of endosome-disruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like gene transfer systems.</a> Journal of Biological Chemistry. 269, 12918-12924 (1994).</li><li>Ratner, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+Cells+Are+Sensitive+Detectors+of+Bacterial+Pore-forming+Toxins.">Epithelial Cells Are Sensitive Detectors of Bacterial Pore-forming Toxins.</a> Journal of Biological Chemistry. 281, 12994-12998 (2006).</li><li>Saar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptides:+A+comparative+membrane+toxicity+study.">Cell-penetrating peptides: A comparative membrane toxicity study.</a> Analytical Biochemistry. 345, 55-65 (2005).</li><li>Kichler, A., Leborgne, C., Coeytaux, E., Danos, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylenimine-mediated+gene+delivery:+a+mechanistic+study.">Polyethylenimine-mediated gene delivery: a mechanistic study.</a> The Journal of Gene Medicine. 3, 135-144 (2001).</li><li>Behr, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Proton+Sponge:+a+Trick+to+Enter+Cells+the+Viruses+Did+Not+Exploit.">The Proton Sponge: a Trick to Enter Cells the Viruses Did Not Exploit.</a> CHIMIA International Journal for Chemistry. 51, 34-36 (1997).</li><li>Dawson, R. M. C., Elliot, D. C., Elliot, W. H., Jones, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Data for Biochemical Research. , (1986).</li><li>Ernst, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Applied Phlebotomy. , (2005).</li><li>Bulmus, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+pH-responsive+and+glutathione-reactive,+endosomal+membrane-disruptive+polymeric+carrier+for+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">A new pH-responsive and glutathione-reactive, endosomal membrane-disruptive polymeric carrier for intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 93, 105-120 (2003).</li><li>Lackey, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolytic+Activity+of+pH-Responsive+Polymer-Streptavidin+Bioconjugates.">Hemolytic Activity of pH-Responsive Polymer-Streptavidin Bioconjugates.</a> Bioconjugate Chemistry. 10, 401-405 (1999).</li><li>Murthy, N., Campbell, J., Fausto, N., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinspired+pH-responsive+polymers+for+the+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">Bioinspired pH-responsive polymers for the intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Bioconjugate chemistry. 14, 412-419 (2003).</li><li>Murthy, N., Robichaud, J. R., Tirrell, D. A., Stayton, P. S., Hoffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+and+synthesis+of+polymers+for+eukaryotic+membrane+disruption.">The design and synthesis of polymers for eukaryotic membrane disruption.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 61, 137-143 (1999).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+endosomal+barrier+by+amphotericin+B-loaded+dual+pH-responsive+PDMA-b-PDPA+micelleplexes+for+siRNA+delivery.">Overcoming endosomal barrier by amphotericin B-loaded dual pH-responsive PDMA-b-PDPA micelleplexes for siRNA delivery.</a> ACS nano. 5, 9246-9255 (2011).</li><li>Nelson, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+local+delivery+of+siRNA+from+an+injectable+scaffold.">Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold.</a> Biomaterials. 33, 1154-1161 (2012).</li><li>Miozzari, G. F., Niederberger, P., H&#252;tter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+microorganisms+by+Triton+X-100.">Permeabilization of microorganisms by Triton X-100.</a> Analytical Biochemistry. 90, 220-233 (1978).</li><li>Chen, H., Zhang, H., McCallum, C. M., Szoka, F. C., Guo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unsaturated+Cationic+Ortho+Esters+for+Endosome+Permeation+in+Gene+Delivery.">Unsaturated Cationic Ortho Esters for Endosome Permeation in Gene Delivery.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 50, 4269-4278 (2007).</li><li>Roth, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Measurements+and+Rational+Materials+Design+for+Intracellular+Delivery+of+Oligonucleotides.">Quantitative Measurements and Rational Materials Design for Intracellular Delivery of Oligonucleotides.</a> Biotechnology Progress. 24, 23-28 (2008).</li><li>Blumenthal, R., Seth, P., Willingham, M. C., Pastan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-dependent+lysis+of+liposomes+by+adenovirus.">pH-dependent lysis of liposomes by adenovirus.</a> Biochemistry. 25, 2231-2237 (1986).</li><li>Moore, N. M., Sheppard, C. L., Barbour, T. R., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+endosomal+escape+peptides+on+in+vitro+gene+delivery+of+polyethylene+glycol-based+vehicles.">The effect of endosomal escape peptides on in vitro gene delivery of polyethylene glycol-based vehicles.</a> The Journal of Gene Medicine. 10, 1134-1149 (2008).</li><li>Panyam, J., Zhou, W. Z., Prabha, S., Sahoo, S. K., Labhasetwar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+endo-lysosomal+escape+of+poly(DL-lactide-co-glycolide)+nanoparticles:+implications+for+drug+and+gene+delivery.">Rapid endo-lysosomal escape of poly(DL-lactide-co-glycolide) nanoparticles: implications for drug and gene delivery.</a> The FASEB Journal. 16, 1217-1226 (2002).</li></ol>

يمكن الرقم الهيدروجيني التي تستجيب للبوليمرات أو غيرها من العوامل صممت لتكون وظيفة endosomolytic بسرعة وفعالية فحص يعتمد على تحلل كريات الدم الحمراء عند قيم الرقم الهيدروجيني ووجهت في دخلول؛ جسيم داخلي (الشكل 1؛ درجة الحموضة 6.8 - دخلول؛ جسيم داخلي في وقت مبكر، ودر?...

على الرغم من أن هناك العديد من إمكانيات عالية التأثير الأهداف العلاجية داخل الخلية، وتسليم من وكلاء داخل الخلايا يشكل تحديا كبيرا. في كثير من الأحيان، يتم إدماج المخدرات، وخاصة البيولوجية، والاتجار من قبل خلايا الحويصلات التي تؤدي إلى إما إلى تدهور محتوياتها من خلال مسار إندو-الليزوزومية، أو مكوكية مرة أخرى خارج الخلية عبر الإيماس. 1 في العملية الأخيرة، ودرجة الحموضة الداخلية من الحويصلات ويحمض إلى 5-6 تقريبا، وهو الرقم الهيدروجيني الأمثل لنشاط الإنزيمات التي تعمل في هذا الحيز، مثل الليزوزيم .. 2 مؤخرا، تم عدد من المواد المهندسة وتحديدا للاستفادة من تحمض الإندوسومات لتسهيل تسليم عصاري خلوي من حمولتها. واحد الأمثلة على هذا النهج يستخدم الاصطناعية، والبوليمر النانوية التي مذيلة الأساسية هي ثنائي الشحنة وهو ورسوم محايدة في درجة الحموضة الفسيولوجية (أي 7.4). ومع ذلك، عند 6.0 درجة الحموضة- 6.5، البوليمرات تصبح البروتونية والحصول على شحنة موجبة صافية أن يزعزع استقرار مذيلة الأساسية، وشرائح البوليمر يتعرض التفاعل مع وتعطيل الغشاء endosomal. وقد تبين هذا النشاط لتعزيز الهروب من endosomal التداوي القائم على حمض النووي الببتيد و، والسماح لهم للوصول إلى أهدافها عصاري خلوي. 3،4 أمثلة أخرى من الطرق وضعت للتوسط الهروب endosomal التي تعطل حاجز الغشاء تشمل &#39;fusogenic &quot;الببتيدات أو البروتينات التي يمكن أن توسط الانصهار الغشاء أو تشكيل المسام عابرة في طبقة ثنائية فسفوليبيد .. 5 مجموعة السلفات من الأحماض أنيوني الاكريليك ألكيل مثل بولي (حمض propylacrylic) هي مقاربة أخرى مدروسة، وهذه البوليمرات في، الدولة بروتوناتيون من حمض الكربوكسيلية قلادة يملي الانتقال في مسعور، غشاء التخريبية الدولة في نطاقات درجة الحموضة إندو-الليزوزومية. 6،7 نظام واحد نموذجا مفيدا لفحص السلوك هو endosomolytic هX فيفو مقايسة درجة الحموضة التي تعتمد على انحلال الدم. 8 في هذا النظام النموذجي، وغشاء كرات الدم الحمراء بمثابة بديل للطبقة ثنائية المادة الدهنية التي إحاطة غشاء إندو-الليزوزومية الحويصلات. وقد استخدم هذا النموذج للتعميم من قبل الآخرين لتقييم السلوك endosomolytic من اختراق الخلايا الببتيدات وغيرها من أنظمة توصيل الجينات البوليمرية. 8-11 في هذه التجربة، الإنسان خلايا الدم الحمراء ومواد الاختبار شارك في المحتضنة في مخازن في تعريف بالوسط التي تحاكي خارج الخلية (7.4)، في وقت مبكر endosomal (6.8)، وأواخر إندو-الليزوزومية (&lt;6.8) البيئات. وكميا كمية الهيموجلوبين صدر خلال فترة الحضانة كمقياس لتحلل الخلايا الحمراء في الدم، والتي يتم تطبيع لكمية الهيموجلوبين صدر في عينات مراقبة إيجابية هي lysed مع المنظفات. من فحص مكتبة صغيرة من مواد الاختبار endosomolytic يحتمل، يمكن للمرء أن يستنتج أن العينات التي تنتج أي انحلال الدم في درجة الحموضة 7.4، ولكن تنحنح مرتفعة بشكل ملحوظolysis في درجة الحموضة &lt;6.5، وسوف يكون المرشحين الأكثر فعالية وcytocompatible لتسليم المخدرات عصاري خلوي. ومن المتوقع أن المواد التي تناسب هذه المعايير أن تظل خاملة وليس بشكل عشوائي تدمير الأغشية طبقة ثنائية المادة الدهنية (أي التي يمكن أن تسبب السمسة) حتى التعرض لانخفاض الرقم الهيدروجيني في استيعاب المحلية بعد في إندو-الليزوزومية المقصورات. في هذا البروتوكول، يتم عزل الكريات الحمراء من المتبرع الإنسان وشارك في حضنت في درجة الحموضة 5.6، 6.2، 6.8، أو 7.4 مع وكلاء التجريبية endosomolytic تسليم المخدرات. الكريات الحمراء سليمة هي مكعبات، ويتم تحليل supernatants (التي تحتوي على الهيموغلوبين أفرج عنه من الكريات الحمراء هي lysed) لامتصاص سمة من الهيموجلوبين عن طريق قارئ لوحة (الشكل 1).

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> BD Vacutainer - K2EDTA Vacutainer أنابيب </td><td> فيشر العلمية </td><td> 22-253-145 </td><td> لجمع الدم </td></tr><tr><td> BD إبر جمع الدم Vacutainer و 20.5 عيار </td><td> فيشر العلمية </td><td> 02-665-31 </td><td> لجمع الدم </td></tr><tr><td> BD Vacutainer أنبوب حامل / إبرة محول </td><td> فيشر العلمية </td><td> 22-289-953 </td><td> لجمع الدم </td></tr><tr><td> BD العلامة التجارية مسحات الكحول الآيزوبروبيل </td><td> فيشر العلمية </td><td> 13-680-63 </td><td> لجمع الدم </td></tr><tr><td> BD Vacutainer اللاتكس خالية العاصبة </td><td> فيشر العلمية </td><td> 02-657-6 </td><td> لجمع الدم </TD&gt; </tr><tr><td> حمض الهيدروكلوريك (conc.) </td><td> فيشر العلمية </td><td> A144-500 </td><td> لتعديل درجة الحموضة من D-PBS. </td></tr><tr><td> تريتون X-100 </td><td> سيغما الدريخ </td><td> T8787 </td><td> السيطرة الإيجابية </td></tr><tr><td> Dulbecco في PBS </td><td> إينفيتروجن </td><td> 14190 </td><td></td></tr><tr><td> Nalgene MF75 المعقمة المتاح زجاجة الأعلى وحدة تصفية مع غشاء SFCA </td><td> فيشر العلمية </td><td> 09-740-44A </td><td></td></tr><tr><td> 96-BD جيدا لوحات، والبوليسترين مسطحة، زراعة الأنسجة المعالجة </td><td> فيشر العلمية </td><td> 08-772-2C </td><td> لقراءة لوحة في نهاية الفحص. </td></tr><tr><td> 96-BD جيدا لوحات، والبوليسترين ذهابا والقاع، زراعة الأنسجة المعالجة </td><td> فيشر العلمية </td><td> 08-772-17 </td><td> لحضانة خلايا الدم الحمراء مع وكلاء التجريبية. </td></tr></الجدول&gt;

ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs

يمكن طبقات ثنائية فسفوليبيد التي تشكل إندو-الليزوزومية الحويصلات تشكل عائقا أمام تسليم المخدرات البيولوجية لأهداف داخل الخلايا. للتغلب على هذا الحاجز، لقد تم تصميم عدد من ناقلات المخدرات الاصطناعية لتعطيل بنشاط الغشاء endosomal وتسليم البضائع إلى السيتوبلازم. هنا، نحن تصف مقايسة انحلال الدم، والتي يمكن أن تستخدم الشاشة السريع الإنتاجية العالية، لcytocompatibility والنشاط داخل الخلايا endosomolytic من نظم لتقديم الأدوية. في مقايسة انحلال الدم، وخلايا الدم الحمراء ومواد الاختبار شارك في المحتضنة في مخازن في تعريف بالوسط التي تحاكي خارج الخلية، endosomal في وقت مبكر، وأواخر إندو-الليزوزومية البيئات. بعد الطرد المركزي خطوة لخلايا سليمة بيليه الدم الحمراء، يتم قياس طيفيا كمية الهيموجلوبين تطلق في المتوسط ​​(405 نانومتر لمجموعة ديناميكية أفضل). وكميا في المئة ثم خلايا الدم الحمراء نسبة إلى تعطيل عصيدة مراقبة إيجابيةليه هي lysed مع المنظفات. في هذا النظام النموذجي غشاء كرات الدم الحمراء بمثابة بديل للطبقة ثنائية المادة الدهنية التي إحاطة غشاء إندو-الليزوزومية الحويصلات. النتيجة المرجوة هي انحلال الدم لا يذكر في درجة الحموضة الفسيولوجية (7.4) وانحلال الدم قوية في نطاق درجة الحموضة إندو-الليزوزومية من الرقم الهيدروجيني 5-6،8 تقريبا.

<html> عادة، والعوامل التي يحمل الرقم الهيدروجيني المثالي التي تعتمد على السلوك الانحلالي لديها أعلى احتمال تسليم عصاري خلوي من المخدرات، والأحماض النووية، أو الجزيئات الحيوية النشطة الأخرى. ويتمثل ذلك من خلال وكيل # 1 كما صورت في الشكل 2، والذي يسلك انحلال الد...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

ويمكن استخدام فحص انحلال الدم كشاشة السريع الإنتاجية العالية، من cytocompatibility نظم لتقديم الأدوية &#39;والنشاط endosomolytic لنقل البضائع داخل الخلايا. الفحص يقيس تعطل الأغشية كرات الدم الحمراء بوصفها وظيفة من درجة الحموضة البيئية.

فيفو السابقين خلية الدم الحمراء الفحص انحلال الدم لتقييم درجة الحموضة التي تستجيب لتسليم وكلاء Endosomolytic عصاري خلوي من أدوية Biomacromolecular

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA - الإيج بناء خلايا مولدة الاصطناعي تقديم الكفء لل خارج الحي توسيع CTL الإنسان

CTL with optimal effector function play critical roles in mediating protection against various intracellular infections and cancer. However, individuals ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

إدخال إجهاد القص في دراسة الالتصاق الجرثومي

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

A Quantitative Evaluation of Cell Migration by the Phagokinetic Track Motility Assay

A التقييم الكمي للهجرة الخليوي من قبل مصلحة دمغ المصوغات المسار على الحركة Phagokinetic

Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

محمي مستضدات خلايا الدم الحمراء وظيفية بواسطة الغشاء مسمار Polyglycerols Hyperbranched الاتفاق

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

طرق للكشف الكمي للجسم التي يسببها تكملة التنشيط على خلايا الدم الحمراء.

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

عالية الإنتاجية الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR الفحص لتحديد ملامح التعبير من أنواع الأول والثالث الانترفيرون الأنواع الفرعية

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

استخدام الوحيدات أحادي الطبقة الفحص لتقييم البلعمة بوساطة مستقبلات Fcγ

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

ديكستران يعزز كفاءة توصيل لينتيفيرال الخلايا ناغورني كاراباخ الابتدائي مورين والبشرية

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines

وبسيط خلية الدم الحمراء تحلل طريقة لإنشاء خطوط الخلايا B Lymphoblastoid

A number of methods exist for the transformation of B lymphocytes by the Epstein Barr virus in vitro into immortalized cell lines. We have developed a new ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

في فيفو الفحص للكشف عن وظيفة محددة مستضد تي خلية عن استخدام نموذج التطعيم

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...