Name: ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs
Uploaded: 2013-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

लेखकों के रक्षा विभाग के माध्यम से Congressionally निर्देशित चिकित्सा अनुसंधान (# W81XWH 10-1-+०,४४५) कार्यक्रम, राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (R21 HL110056 NIH), और अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन (11SDG4890030 #) धन को स्वीकार करते हैं.

1. और Buffers और टेस्ट एजेंटों की तैयारी बंध्याकरण <ol><li> 150 मिमी NaCl बफर: 4.383 छ NaCl क्रिस्टल nanopure पानी की 500 मिलीलीटर में भंग. </li><li> पीएच Buffers पीएच 5.6, 6.2, 6.8, और 7.4 में एक भस्मक और dibasic सोडियम फॉस्फेट की उचित मात्रा के मिश्रण से तैया?...

<ol>
	<li>Alberts, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Biology of the Cell. , (2002).</li><li>Boasson, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+Bacteriolysis+by+Lysozyme.">On the Bacteriolysis by Lysozyme.</a> The Journal of Immunology. 34, 281-293 (1938).</li><li>Convertine, A. J., Benoit, D. S., Duvall, C. L., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+endosomolytic+diblock+copolymer+for+siRNA+delivery.">Development of a novel endosomolytic diblock copolymer for siRNA delivery.</a> J. Control. Release. 133, 221-229 (2009).</li><li>Duvall, C. L., Convertine, A. J., Benoit, D. S., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Delivery+of+a+Proapoptotic+Peptide+via+Conjugation+to+a+RAFT+Synthesized+Endosomolytic.">Intracellular Delivery of a Proapoptotic Peptide via Conjugation to a RAFT Synthesized Endosomolytic.</a> 7, 468-476 (2010).</li><li>Varkouhi, A. K., Scholte, M., Storm, G., Haisma, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+escape+pathways+for+delivery+of+biologicals.">Endosomal escape pathways for delivery of biologicals.</a> Journal of Controlled Release. 151, 220-228 (2011).</li><li>Plank, C., Oberhauser, B., Mechtler, K., Koch, C., Wagner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+endosome-disruptive+peptides+on+gene+transfer+using+synthetic+virus-like+gene+transfer+systems.">The influence of endosome-disruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like gene transfer systems.</a> Journal of Biological Chemistry. 269, 12918-12924 (1994).</li><li>Ratner, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+Cells+Are+Sensitive+Detectors+of+Bacterial+Pore-forming+Toxins.">Epithelial Cells Are Sensitive Detectors of Bacterial Pore-forming Toxins.</a> Journal of Biological Chemistry. 281, 12994-12998 (2006).</li><li>Saar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptides:+A+comparative+membrane+toxicity+study.">Cell-penetrating peptides: A comparative membrane toxicity study.</a> Analytical Biochemistry. 345, 55-65 (2005).</li><li>Kichler, A., Leborgne, C., Coeytaux, E., Danos, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylenimine-mediated+gene+delivery:+a+mechanistic+study.">Polyethylenimine-mediated gene delivery: a mechanistic study.</a> The Journal of Gene Medicine. 3, 135-144 (2001).</li><li>Behr, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Proton+Sponge:+a+Trick+to+Enter+Cells+the+Viruses+Did+Not+Exploit.">The Proton Sponge: a Trick to Enter Cells the Viruses Did Not Exploit.</a> CHIMIA International Journal for Chemistry. 51, 34-36 (1997).</li><li>Dawson, R. M. C., Elliot, D. C., Elliot, W. H., Jones, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Data for Biochemical Research. , (1986).</li><li>Ernst, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Applied Phlebotomy. , (2005).</li><li>Bulmus, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+pH-responsive+and+glutathione-reactive,+endosomal+membrane-disruptive+polymeric+carrier+for+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">A new pH-responsive and glutathione-reactive, endosomal membrane-disruptive polymeric carrier for intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 93, 105-120 (2003).</li><li>Lackey, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolytic+Activity+of+pH-Responsive+Polymer-Streptavidin+Bioconjugates.">Hemolytic Activity of pH-Responsive Polymer-Streptavidin Bioconjugates.</a> Bioconjugate Chemistry. 10, 401-405 (1999).</li><li>Murthy, N., Campbell, J., Fausto, N., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinspired+pH-responsive+polymers+for+the+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">Bioinspired pH-responsive polymers for the intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Bioconjugate chemistry. 14, 412-419 (2003).</li><li>Murthy, N., Robichaud, J. R., Tirrell, D. A., Stayton, P. S., Hoffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+and+synthesis+of+polymers+for+eukaryotic+membrane+disruption.">The design and synthesis of polymers for eukaryotic membrane disruption.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 61, 137-143 (1999).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+endosomal+barrier+by+amphotericin+B-loaded+dual+pH-responsive+PDMA-b-PDPA+micelleplexes+for+siRNA+delivery.">Overcoming endosomal barrier by amphotericin B-loaded dual pH-responsive PDMA-b-PDPA micelleplexes for siRNA delivery.</a> ACS nano. 5, 9246-9255 (2011).</li><li>Nelson, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+local+delivery+of+siRNA+from+an+injectable+scaffold.">Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold.</a> Biomaterials. 33, 1154-1161 (2012).</li><li>Miozzari, G. F., Niederberger, P., H&#252;tter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+microorganisms+by+Triton+X-100.">Permeabilization of microorganisms by Triton X-100.</a> Analytical Biochemistry. 90, 220-233 (1978).</li><li>Chen, H., Zhang, H., McCallum, C. M., Szoka, F. C., Guo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unsaturated+Cationic+Ortho+Esters+for+Endosome+Permeation+in+Gene+Delivery.">Unsaturated Cationic Ortho Esters for Endosome Permeation in Gene Delivery.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 50, 4269-4278 (2007).</li><li>Roth, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Measurements+and+Rational+Materials+Design+for+Intracellular+Delivery+of+Oligonucleotides.">Quantitative Measurements and Rational Materials Design for Intracellular Delivery of Oligonucleotides.</a> Biotechnology Progress. 24, 23-28 (2008).</li><li>Blumenthal, R., Seth, P., Willingham, M. C., Pastan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-dependent+lysis+of+liposomes+by+adenovirus.">pH-dependent lysis of liposomes by adenovirus.</a> Biochemistry. 25, 2231-2237 (1986).</li><li>Moore, N. M., Sheppard, C. L., Barbour, T. R., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+endosomal+escape+peptides+on+in+vitro+gene+delivery+of+polyethylene+glycol-based+vehicles.">The effect of endosomal escape peptides on in vitro gene delivery of polyethylene glycol-based vehicles.</a> The Journal of Gene Medicine. 10, 1134-1149 (2008).</li><li>Panyam, J., Zhou, W. Z., Prabha, S., Sahoo, S. K., Labhasetwar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+endo-lysosomal+escape+of+poly(DL-lactide-co-glycolide)+nanoparticles:+implications+for+drug+and+gene+delivery.">Rapid endo-lysosomal escape of poly(DL-lactide-co-glycolide) nanoparticles: implications for drug and gene delivery.</a> The FASEB Journal. 16, 1217-1226 (2002).</li></ol>

पीएच उत्तरदायी पॉलिमर या अन्य एजेंट endosomolytic समारोह के लिए बनाया गया हो तेजी से और प्रभावी ढंग से पीएच endosome में सामना करना पड़ा मूल्यों में लाल रक्त कोशिकाओं की lysis (1 चित्र के आधार पर जांच कर सकते हैं, पी...

हालांकि वहाँ कई सेल के अंदर संभावित उच्च प्रभाव चिकित्सकीय लक्ष्य कर रहे हैं, एजेंटों के intracellular वितरण एक महत्वपूर्ण चुनौती बन गया है. अक्सर, दवाओं, विशेष रूप से biologics, कोशिकाओं द्वारा भली भाँति हैं और vesicles में तस्करी कि या तो उनकी सामग्री की गिरावट एंडो - lysosomal मार्ग के माध्यम से करने के लिए नेतृत्व कर रहे हैं या वापस सेल के बाहर shuttled exocytosis के माध्यम से बाद की प्रक्रिया में, आंतरिक पीएच 1. vesicles के लगभग 5-6 acidified है, जो एंजाइमों की गतिविधि के लिए इष्टतम पीएच है कि इस डिब्बे में लाइसोजाइम के रूप में इस तरह के समारोह 2. हाल ही में, सामग्री की संख्या विशेष रूप से किया गया है का लाभ उठाने के अम्लीकरण के लिए अपने माल की साइटोसोलिक वितरण की सुविधा endosomes इंजीनियर. इस दृष्टिकोण का एक उदाहरण सिंथेटिक बहुलक micelle नैनोकणों जिसका मुख्य शारीरिक पीएच (7.4) अर्थात् zwitterionic और आरोप तटस्थ है का उपयोग करता है. हालांकि, पीएच 6.0 पर- 6.5, पॉलिमर protonated हो जाते हैं और एक सकारात्मक चार्ज शुद्ध है कि micelle कोर destabilizes के अधिग्रहण, और उजागर बहुलक क्षेत्रों के साथ बातचीत और endosomal झिल्ली को बाधित. इस गतिविधि पेप्टाइड और न्यूक्लिक एसिड आधारित चिकित्सा विज्ञान की endosomal भागने को बढ़ावा देने के लिए, उन्हें अपने साइटोसोलिक लक्ष्य तक पहुँचने के लिए अनुमति देता है के लिए दिखाया गया है endosomal भागने मध्यस्थता है कि झिल्ली बाधा को बाधित करने के लिए विकसित की विधियों की 3,4 अन्य उदाहरण है. &#39;Fusogenic&#39; पेप्टाइड्स शामिल हैं या प्रोटीन है कि फॉस्फोलिपिड bilayer में झिल्ली संलयन या क्षणिक ताकना गठन मध्यस्थता कर सकते हैं. anionic (propylacrylic एसिड) पाली में alkyl एक्रिलिक एसिड की 5 homopolymers दूसरे दृष्टिकोण अच्छी तरह से अध्ययन कर रहे हैं, और इन पॉलिमर में, लटकन कार्बोक्जिलिक एसिड के protonation राज्य संक्रमण पैदा करती है एक hydrophobic में एंडो lysosomal पीएच पर्वतमाला में राज्य झिल्ली विघटनकारी 6,7. स्क्रीनिंग endosomolytic व्यवहार के लिए एक उपयोगी मॉडल प्रणाली ई हैx vivo निर्भर पीएच hemolysis इस मॉडल प्रणाली में. परख 8, एरिथ्रोसाइट झिल्ली लिपिड bilayer झिल्ली कि एंडो - lysosomal vesicles संलग्न करने के लिए एक किराए के रूप में कार्य करता है. इस generalizable मॉडल दूसरों के द्वारा इस्तेमाल किया गया है सेल मर्मज्ञ पेप्टाइड्स और अन्य polymeric जीन वितरण प्रणाली के endosomolytic व्यवहार का मूल्यांकन करने के लिए इस प्रयोग में 8-11, मानव लाल रक्त कोशिकाओं और परीक्षा सामग्री buffers में परिभाषित PHS है कि नकल पर सह incubated कोशिकी (7.4), जल्दी (6.8), और endosomal एंडो lysosomal देर वातावरण (&lt;6.8). ऊष्मायन अवधि के दौरान जारी हीमोग्लोबिन की मात्रा लाल रक्त सेल है, जो हीमोग्लोबिन की राशि एक साबुन के साथ सकारात्मक नियंत्रण lysed नमूनों में जारी करने के लिए normalized है की एक उपाय के रूप में मात्रा निर्धारित है. स्क्रीनिंग से संभावित endosomolytic परीक्षण सामग्री का एक छोटा सा पुस्तकालय, एक कि नमूने है कि पीएच 7.4 में कोई hemolysis उत्पादन अनुमान कर सकते हैं, लेकिन काफी ऊंचा हेम&lt;6.5 पीएच में olysis, साइटोसोलिक दवा वितरण के लिए सबसे प्रभावी और cytocompatible उम्मीदवार होगा. सामग्री है कि इन मानदंडों को फिट करने के लिए निष्क्रिय और अंधाधुंध एंडो lysosomal डिब्बों में internalization के बाद जब तक स्थानीय पीएच में एक बूंद के लिए उजागर झिल्ली bilayer लिपिड (यानी कि cytotoxicity का कारण बन सकता है) को नष्ट नहीं रहने की उम्मीद होगी. इस प्रोटोकॉल में एरिथ्रोसाइट्स एक मानव दाता से अलग कर रहे हैं और पीएच 5.6, 6.2, 6.8, या 7.4 प्रयोगात्मक endosomolytic दवा वितरण एजेंटों के साथ सह incubated. बरकरार एरिथ्रोसाइट्स pelleted हैं, और supernatants (lysed एरिथ्रोसाइट्स से जारी हीमोग्लोबिन युक्त) हीमोग्लोबिन की विशेषता absorbance के लिए एक प्लेट पाठक (1 चित्रा) के माध्यम से विश्लेषण कर रहे हैं.

<table border="1"><tr><td> अभिकर्मक के नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियां (वैकल्पिक) </td></tr><tr><td> BD Vacutainer - K2EDTA Vacutainer ट्यूबों </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 22-253-145 </td><td> रक्त संग्रह के लिए </td></tr><tr><td> BD Vacutainer रक्त संग्रह सुई, 20.5 गेज </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 02-665-31 </td><td> रक्त संग्रह के लिए </td></tr><tr><td> BD Vacutainer ट्यूब एडाप्टर धारक / सुई </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 22-289-953 </td><td> रक्त संग्रह के लिए </td></tr><tr><td> BD ब्रांड शराब swabs </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 13-680-63 </td><td> रक्त संग्रह के लिए </td></tr><tr><td> BD टूनिकेट Vacutainer लाटेकस मुक्त </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 02-657-6 </td><td> रक्त संग्रह के लिए </td&gt; </tr><tr><td> हाइड्रोक्लोरिक एसिड (conc.) </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> A144-500 </td><td> D-पीबीएस के पीएच के समायोजन के लिए. </td></tr><tr><td> X-100 ट्राइटन </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> T8787 </td><td> सकारात्मक नियंत्रण </td></tr><tr><td> Dulbecco पीबीएस </td><td> Invitrogen </td><td> 14190 </td><td></td></tr><tr><td> Nalgene MF75 बाँझ डिस्पोजेबल SFCA झिल्ली के साथ बोतल टॉप फिल्टर यूनिट </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 09-740-44A </td><td></td></tr><tr><td> BD 96-अच्छी तरह प्लेटें, फ्लैट तली, टिशू कल्चर का इलाज polystyrene </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 08-772-2C </td><td> थाली - परख के अंत में पढ़ने के लिए. </td></tr><tr><td> BD 96-अच्छी तरह प्लेटें, दौर तली, टिशू कल्चर का इलाज polystyrene </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> 08-772-17 </td><td> प्रयोगात्मक एजेंटों के साथ लाल रक्त कोशिकाओं के ऊष्मायन के लिए. </td></tr></table&gt;

ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs

फॉस्फोलिपिड bilayers कि एंडो - lysosomal vesicles का गठन जीवविज्ञान दवाओं के intracellular लक्ष्य को प्रसव के लिए एक बाधा पैदा कर सकते हैं. इस बाधा को दूर करने के लिए, सिंथेटिक दवा वाहक के एक नंबर के लिए सक्रिय रूप से endosomal झिल्ली बाधित और cytoplasm में माल देने के लिए इंजीनियर किया गया है. यहाँ, हम hemolysis परख है, जो तेजी से, cytocompatibility और intracellular दवा वितरण प्रणाली के endosomolytic गतिविधि के लिए उच्च throughput स्क्रीन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है का वर्णन करता है. Hemolysis परख में, मानव लाल रक्त कोशिकाओं और परीक्षण सामग्री परिभाषित PHS कि बाह्य है, जल्दी endosomal, और देर एंडो lysosomal वातावरण की नकल पर buffers में सह incubated. गोली बरकरार लाल रक्त कोशिकाओं को एक centrifugation कदम के बाद, हीमोग्लोबिन की मात्रा मध्यम में जारी spectrophotometrically (सबसे अच्छा गतिशील रेंज के लिए 405 एनएम) में मापा जाता है. प्रतिशत लाल रक्त कोशिका विघटन तो सकारात्मक नियंत्रण samp सापेक्ष मात्रा निर्धारित हैएक साबुन के साथ लेस lysed. इस मॉडल प्रणाली में एरिथ्रोसाइट झिल्ली लिपिड bilayer झिल्ली कि एंडो - lysosomal vesicles संलग्न करने के लिए एक किराए के रूप में कार्य करता है. वांछित परिणाम शारीरिक पीएच (7.4) और एंडो lysosomal लगभग 5-6.8 पीएच से पीएच रेंज में मजबूत hemolysis नगण्य hemolysis है.

<html> आमतौर पर, एजेंटों है है कि आदर्श पीएच निर्भर रक्तलायी व्यवहार एक्ज़िबिट दवाओं, nucleic एसिड, या अन्य bioactive अणुओं के साइटोसोलिक प्रसव के लिए उच्चतम क्षमता है. यह # 1 एजेंट द्वारा उदाहरण है के रूप में 2 चित्रा...

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Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

एक hemolysis परख दवा वितरण प्रणाली और intracellular माल डिलीवरी लिए endosomolytic गतिविधि cytocompatibility की एक तेजी से, उच्च throughput स्क्रीन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है. परख पर्यावरण पीएच के एक समारोह के रूप में एरिथ्रोसाइट झिल्ली के विघटन के उपाय.

पूर्व vivo पीएच biomacromolecular ड्रग्स साइटोसोलिक डिलिवरी के लिए उत्तरदायी Endosomolytic एजेंटों का मूल्यांकन करने के लिए लाल रक्त कोशिका hemolysis परख

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

एचएलए पुलिस महानिरीक्षक के आधार पर कुशल के लिए कृत्रिम प्रतिजन कोशिकाओं पूर्व vivo मानव सीटीएल का विस्तार

CTL with optimal effector function play critical roles in mediating protection against various intracellular infections and cancer. However, individuals ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

बैक्टीरियल आसंजन के अध्ययन में कतरें तनाव का परिचय

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

A Quantitative Evaluation of Cell Migration by the Phagokinetic Track Motility Assay

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Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

एंटीजन कॉम्पैक्ट hyperbranched Polyglycerols की ग्राफ्टिंग झिल्ली कार्यात्मक लाल रक्त कोशिकाओं की रक्षा

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी प्रेरित सक्रियण पूरक के मात्रात्मक जांच के लिए तरीके

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

उच्च throughput मात्रात्मक वास्तविक समय आरटी पीसीआर परख प्रकार मैं और तृतीय इंटरफेरॉन उपप्रकार की अभिव्यक्ति प्रोफाइल निर्धारण के लिए

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

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मूल्यांकन करने के लिए एक Monocyte Monolayer परख का उपयोग Fcγ रिसेप्टर की मध्यस्थता Phagocytosis

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran Murine और मानव प्राथमिक NK कोशिकाओं की Lentiviral Transduction क्षमता को बढ़ाता है

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A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines

एक सरल लाल रक्त कोशिका बी Lymphoblastoid सेल लाइनों की स्थापना के लिए Lysis विधि

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In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

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Vivo में एक टीकाकरण मॉडल का उपयोग कर प्रतिजन-विशिष्ट टी-सेल Cytolytic फ़ंक्शन का पता लगाने के लिए परख

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...