Name: ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs
Uploaded: 2013-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

Forfatterne erkjenner finansiering gjennom Department of Defense Congressionally Regissert Medical Research Program (# W81XWH-10-1-0445), National Institutes of Health (NIH R21 HL110056) og American Heart Association (# 11SDG4890030).

1. Forberedelse og sterilisering av buffere og Test Agenter <ol><li> 150 mM NaCl buffer: Oppløs 4,383 g NaCl krystaller i 500 ml nanopure vann. </li><li> pH-buffere: Forbered fosfat buffere på 5,6 pH, 6,2, 6.8, og 7,4 ved å blande passende mengder av monobasisk og dibasisk natriumfosfat. Hvis prøvene skal testes ved lavere pH-verdier (dvs. pH &lt;5,6) og deretter en mer hensiktsmessig buffer, for eksempel sitratbuffer, brukes. Bufferområder oppskrifter er lett tilgjengelig, og et eksempel referanse har b...

<ol>
	<li>Alberts, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Biology of the Cell. , (2002).</li><li>Boasson, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+Bacteriolysis+by+Lysozyme.">On the Bacteriolysis by Lysozyme.</a> The Journal of Immunology. 34, 281-293 (1938).</li><li>Convertine, A. J., Benoit, D. S., Duvall, C. L., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+endosomolytic+diblock+copolymer+for+siRNA+delivery.">Development of a novel endosomolytic diblock copolymer for siRNA delivery.</a> J. Control. Release. 133, 221-229 (2009).</li><li>Duvall, C. L., Convertine, A. J., Benoit, D. S., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Delivery+of+a+Proapoptotic+Peptide+via+Conjugation+to+a+RAFT+Synthesized+Endosomolytic.">Intracellular Delivery of a Proapoptotic Peptide via Conjugation to a RAFT Synthesized Endosomolytic.</a> 7, 468-476 (2010).</li><li>Varkouhi, A. K., Scholte, M., Storm, G., Haisma, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+escape+pathways+for+delivery+of+biologicals.">Endosomal escape pathways for delivery of biologicals.</a> Journal of Controlled Release. 151, 220-228 (2011).</li><li>Plank, C., Oberhauser, B., Mechtler, K., Koch, C., Wagner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+endosome-disruptive+peptides+on+gene+transfer+using+synthetic+virus-like+gene+transfer+systems.">The influence of endosome-disruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like gene transfer systems.</a> Journal of Biological Chemistry. 269, 12918-12924 (1994).</li><li>Ratner, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+Cells+Are+Sensitive+Detectors+of+Bacterial+Pore-forming+Toxins.">Epithelial Cells Are Sensitive Detectors of Bacterial Pore-forming Toxins.</a> Journal of Biological Chemistry. 281, 12994-12998 (2006).</li><li>Saar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptides:+A+comparative+membrane+toxicity+study.">Cell-penetrating peptides: A comparative membrane toxicity study.</a> Analytical Biochemistry. 345, 55-65 (2005).</li><li>Kichler, A., Leborgne, C., Coeytaux, E., Danos, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylenimine-mediated+gene+delivery:+a+mechanistic+study.">Polyethylenimine-mediated gene delivery: a mechanistic study.</a> The Journal of Gene Medicine. 3, 135-144 (2001).</li><li>Behr, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Proton+Sponge:+a+Trick+to+Enter+Cells+the+Viruses+Did+Not+Exploit.">The Proton Sponge: a Trick to Enter Cells the Viruses Did Not Exploit.</a> CHIMIA International Journal for Chemistry. 51, 34-36 (1997).</li><li>Dawson, R. M. C., Elliot, D. C., Elliot, W. H., Jones, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Data for Biochemical Research. , (1986).</li><li>Ernst, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Applied Phlebotomy. , (2005).</li><li>Bulmus, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+pH-responsive+and+glutathione-reactive,+endosomal+membrane-disruptive+polymeric+carrier+for+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">A new pH-responsive and glutathione-reactive, endosomal membrane-disruptive polymeric carrier for intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 93, 105-120 (2003).</li><li>Lackey, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolytic+Activity+of+pH-Responsive+Polymer-Streptavidin+Bioconjugates.">Hemolytic Activity of pH-Responsive Polymer-Streptavidin Bioconjugates.</a> Bioconjugate Chemistry. 10, 401-405 (1999).</li><li>Murthy, N., Campbell, J., Fausto, N., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinspired+pH-responsive+polymers+for+the+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">Bioinspired pH-responsive polymers for the intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Bioconjugate chemistry. 14, 412-419 (2003).</li><li>Murthy, N., Robichaud, J. R., Tirrell, D. A., Stayton, P. S., Hoffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+and+synthesis+of+polymers+for+eukaryotic+membrane+disruption.">The design and synthesis of polymers for eukaryotic membrane disruption.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 61, 137-143 (1999).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+endosomal+barrier+by+amphotericin+B-loaded+dual+pH-responsive+PDMA-b-PDPA+micelleplexes+for+siRNA+delivery.">Overcoming endosomal barrier by amphotericin B-loaded dual pH-responsive PDMA-b-PDPA micelleplexes for siRNA delivery.</a> ACS nano. 5, 9246-9255 (2011).</li><li>Nelson, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+local+delivery+of+siRNA+from+an+injectable+scaffold.">Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold.</a> Biomaterials. 33, 1154-1161 (2012).</li><li>Miozzari, G. F., Niederberger, P., H&#252;tter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+microorganisms+by+Triton+X-100.">Permeabilization of microorganisms by Triton X-100.</a> Analytical Biochemistry. 90, 220-233 (1978).</li><li>Chen, H., Zhang, H., McCallum, C. M., Szoka, F. C., Guo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unsaturated+Cationic+Ortho+Esters+for+Endosome+Permeation+in+Gene+Delivery.">Unsaturated Cationic Ortho Esters for Endosome Permeation in Gene Delivery.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 50, 4269-4278 (2007).</li><li>Roth, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Measurements+and+Rational+Materials+Design+for+Intracellular+Delivery+of+Oligonucleotides.">Quantitative Measurements and Rational Materials Design for Intracellular Delivery of Oligonucleotides.</a> Biotechnology Progress. 24, 23-28 (2008).</li><li>Blumenthal, R., Seth, P., Willingham, M. C., Pastan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-dependent+lysis+of+liposomes+by+adenovirus.">pH-dependent lysis of liposomes by adenovirus.</a> Biochemistry. 25, 2231-2237 (1986).</li><li>Moore, N. M., Sheppard, C. L., Barbour, T. R., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+endosomal+escape+peptides+on+in+vitro+gene+delivery+of+polyethylene+glycol-based+vehicles.">The effect of endosomal escape peptides on in vitro gene delivery of polyethylene glycol-based vehicles.</a> The Journal of Gene Medicine. 10, 1134-1149 (2008).</li><li>Panyam, J., Zhou, W. Z., Prabha, S., Sahoo, S. K., Labhasetwar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+endo-lysosomal+escape+of+poly(DL-lactide-co-glycolide)+nanoparticles:+implications+for+drug+and+gene+delivery.">Rapid endo-lysosomal escape of poly(DL-lactide-co-glycolide) nanoparticles: implications for drug and gene delivery.</a> The FASEB Journal. 16, 1217-1226 (2002).</li></ol>

pH-responsive polymerer eller andre midler beregnet for endosomolytic funksjonen kan være raskt og effektivt screenet basert på lysis av røde blodlegemer ved pH-verdier som oppstår i endosome (figur 1; pH 6,8 - tidlig endosome, pH 6.2 - sen endosome, pH 5,6 - lysosomer). 14-17 pH-avhengig hemolyse har blitt brukt til å skjerme evne bærere å mediere endosomal frigjøring av biomacromolecular legemiddelselskap (f.eks peptider, siRNA, ODNs, proteiner), og resultatene av denne ana...

Selv om det er mange potensielle høy effekt terapeutiske mål inne i cellen, utgjør den intracellulære levering av agenter en betydelig utfordring. Ofte er narkotika, spesielt biologiske, internalisert av celler og trafikkert til vesikler som enten fører til nedbrytning av innholdet gjennom endo-lysosomal sti, eller er skytteltrafikk tilbake ut av cellen via eksocytose. 1. I sistnevnte prosessen, den interne pH av vesikler surgjøres til ca 5-6, som er den optimale pH for aktiviteten av enzymer som funksjon i denne avdeling, slik som lysozym. 2 Nylig har en rekke materialer er spesielt konstruert for å utnytte forsuring av endosomes å lette cytosoliske levering av lasten sin. Et eksempel på denne tilnærmingen bruker syntetiske, polymer micelle nanopartikler som kjernen er zwitterionisk og lade-nøytral ved fysiologisk pH (dvs. 7,4). Imidlertid, ved pH 6,0- 6.5, polymerene blir protonert og få en netto positiv ladning som destabiliserer micelle kjerne, og de eksponerte polymer segmentene samhandle med og forstyrre endosomal membran. Denne aktiviteten har blitt vist å fremme endosomal rømning av peptid og nukleinsyre-basert terapi, slik at de til å få tilgang til sine cytosoliske mål. 3,4 Andre eksempler på metoder utviklet for å mediere endosomal flykte som forstyrre membranen barrieren inkluderer &#39;fusogenic&#39; peptider eller proteiner som kan formidle membran fusjon eller forbigående poredannelse i fosfolipid bilayer. 5 Homopolymer av anioniske alkyl akrylsyrer slik som poly (propylacrylic syre) er en annen godt studert tilnærming, og i disse polymerer, dikterer protonering staten anheng karboksylsyre overgang inn i en hydrofob, membran-forstyrrende stat i endo-lysosomale pH-områder. 6,7 Et nyttig modellsystem for screening endosomolytic oppførsel er ex vivo pH-avhengig hemolyse analysen. 8 I denne modellen systemet, serverer erytrocytt membranen som et surrogat for lipid bilayer membran som omslutter endo-lysosomale vesikler. Dette generalizable modellen har blitt brukt av andre til å evaluere endosomolytic oppførselen celle-gjennomtrengende peptider og andre polymere genet levering systemer. 8-11 I dette eksperimentet, humane røde blodceller og testmaterialene er co-inkubert i buffere ved definerte pH-verdier som etterligner ekstracellulære (7,4), tidlig endosomal (6,8), og sent endo-lysosomal (&lt;6,8) miljøer. Mengden av hemoglobin frigjort under inkubasjonstiden er kvantifisert som et mål på rødt blod cellelyse, som er normalisert til mengden hemoglobin utgitt i positive kontrollprøver lysert med vaskemiddel. Fra screening et lite bibliotek av potensielt endosomolytic prøvemateriale, kan man antyde at prøvene som produserer ingen hemolyse ved pH 7,4, men signifikant forhøyet hemolysis ved pH &lt;6.5, vil være den mest effektive og cytocompatible kandidater til cytosoliske levering av legemidler. Materialer som passer disse kriteriene forventes å forbli inert og ikke ukritisk ødelegge lipid bilayer membraner (dvs. som kan forårsake cytotoksisitet) til å bli utsatt for et fall i den lokale pH etter internalisering inn endo-lysosomale avdelinger. I denne protokollen, er erytrocytter isolert fra en menneskelig donor og co-inkuberes på 5,6 pH, 6.2, 6.8, eller 7.4 med eksperimentelle endosomolytic levering av legemidler agenter. Intakte erytrocytter er pelletert, og supernatantene (som inneholder hemoglobin frigitt fra lyserte erytrocytter) analyseres for den karakteristiske absorbans av hemoglobin via en plateavleser (Figur 1).

<table border="1"><tr><td> Navnet på reagensen </td><td> Selskapet </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer (valgfritt) </td></tr><tr><td> BD Vacutainer - K2EDTA Vacutainer Tubes </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-253-145 </td><td> For blodprøvetaking </td></tr><tr><td> BD Vacutainer Blodprøvetaking Needles, 20,5-gauge </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-665-31 </td><td> For blodprøvetaking </td></tr><tr><td> BD Vacutainer Tube Holder / Needle Adapter </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-289-953 </td><td> For blodprøvetaking </td></tr><tr><td> BD Brand Isopropylalkohol Swabs </td><td> Fisher Scientific </td><td> 13-680-63 </td><td> For blodprøvetaking </td></tr><tr><td> BD Vacutainer Latex-Free Tourniquet </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-657-6 </td><td> For blodprøvetaking </td&gt; </tr><tr><td> Saltsyre (konsentrert) </td><td> Fisher Scientific </td><td> A144-500 </td><td> For justering av pH av D-PBS. </td></tr><tr><td> Triton X-100 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T8787 </td><td> Positiv kontroll </td></tr><tr><td> Dulbeccos PBS </td><td> Invitrogen </td><td> 14190 </td><td></td></tr><tr><td> Nalgene MF75 sterilt engangs Bottle-Top Filter Unit med SFCA Membran </td><td> Fisher Scientific </td><td> 09-740-44A </td><td></td></tr><tr><td> BD 96-brønners plater, flatbunnet, vev kultur-behandlet polystyren </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-772-2C </td><td> For plate-lesingen på slutten av analysen. </td></tr><tr><td> BD 96-brønners plater, rundbunnet, vevskultur-behandlet polystyren </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-772-17 </td><td> For inkubasjon av røde blodceller med eksperimentelle agenter. </td></tr></table&gt;

ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs

Fosfolipid bilayers som utgjør endo-lysosomale vesikler kan utgjøre en barriere for levering av biologiske legemidler til intracellulære mål. For å overvinne denne barrieren, har en rekke syntetiske stoffer bærere blitt utviklet for å aktivt forstyrre endosomal membran og levere lasten til cytoplasma. Her beskriver vi hemolyse assay som kan brukes som hurtig, high-throughput skjermbildet for cytocompatibility og endosomolytic aktivitet av intracellulære stoffet leveringssystemer. I hemolyse analysen, er humane røde blodceller og test materialer inkubert i buffere ved definerte pH-verdier som etterligner ekstracellulære, tidlig endosomal, og sent endo-lysosomale miljøer. Etter en sentrifugering trinn å pelletere intakte røde blodlegemer, er mengden av hemoglobin frigitt i mediet spektrofotometrisk målt (405 nm for beste dynamisk område). Det prosent røde blodlegemer avbrudd er da kvantifiseres i forhold til positive kontroll SAMPles lysert med vaskemiddel. I denne modellen systemet erytrocytt membranen fungerer som et surrogat for lipid bilayer membran som omslutter endo-lysosomale vesikler. Det ønskede resultatet er ubetydelig hemolyse ved fysiologisk pH (7,4) og robust hemolyse i endo-lysosomal pH varierer fra ca pH 5 til 6,8.

<html> Vanligvis må agentene som utviser ideelle pH-avhengig hemolytisk atferd har høyest potensial for cytosoliske levering av legemidler, nukleinsyrer eller andre bioaktive molekyler. Dette eksemplifiseres av Agent # 1 som skildret i figur 2, som oppviser minimal hemolyse ved pH 7,4, men en sterk økning i hemolytisk atferd på endosomal pH-områder (&lt;6,5). Noen midler kan vise betydelige nivåer av hemolytisk atferd ved fysiologiske pH-områder (Agent # 2 ved 40 ug / ml, figur 2),</strong...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

En hemolyse Målingen kan brukes som en hurtig, høy-throughput skjermen stoffet leveringssystemer &#39;cytocompatibility og endosomolytic aktivitet for intracellulær last levering. Analysen måler avbrudd av erytrocytt membraner som en funksjon av miljømessige pH.

Ex Vivo røde blodceller Hemolyse Assay for Evaluering av pH-responsive Endosomolytic Agenter for cytosoliske Levering av Biomacromolecular narkotika

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

CTL with optimal effector function play critical roles in mediating protection against various intracellular infections and cancer. However, individuals ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

A Quantitative Evaluation of Cell Migration by the Phagokinetic Track Motility Assay

En kvantitativ vurdering av Cell Migration ved Phagokinetic Track Motilitet Assay

Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Antigener Beskyttet Funksjonell røde blodceller av membranen Pode av kompakt hyperforgrenede Polyglycerols

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Metoder for kvantitativ påvisning av antistoff-indusert komplementaktivering på røde blodlegemer

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

Høy gjennomstrømming Kvantitativ Real-time RT-PCR-analyse for fastsetting Expression Profiler av type I og III Interferon Subtyper

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Bruk av en Monocyte ett lag Assay å evaluere Fcy Receptor-mediert Fagocytose

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dekstran forbedrer Lentiviral signaltransduksjon effektiviteten av Murine og menneskelig primære NK celler

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines

En enkel røde blodceller Lysis Metode for opprettelse av B lymfoblastoide cellelinjer

A number of methods exist for the transformation of B lymphocytes by the Epstein Barr virus in vitro into immortalized cell lines. We have developed a new ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

I Vivo Analysen for påvisning av Antigen-spesifikke T-celle Cytolytic funksjon med en vaksinasjon modell

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...