Name: ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs
Uploaded: 2013-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

Авторы признают, финансирование через Министерство обороны Конгрессом Режиссер медицинских программ исследований (# W81XWH-10-1-0445), Национальных Институтов Здоровья (NIH R21 HL110056) и Американской ассоциации сердца (# 11SDG4890030).

1. Подготовка и стерилизация буферов и агентов тестирования <ol><li> 150 мМ NaCl буфера: Растворить 4,383 г NaCl кристаллов в 500 мл воды NanoPure. </li><li> рН буфера: Подготовка фосфатного буфера рН на 5,6, 6,2, 6,8 и 7,4 путем смешивания соответствующих количеств одноосновных и двухосновных фосфат натрия. Если о?...

<ol>
	<li>Alberts, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Biology of the Cell. , (2002).</li><li>Boasson, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+Bacteriolysis+by+Lysozyme.">On the Bacteriolysis by Lysozyme.</a> The Journal of Immunology. 34, 281-293 (1938).</li><li>Convertine, A. J., Benoit, D. S., Duvall, C. L., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+endosomolytic+diblock+copolymer+for+siRNA+delivery.">Development of a novel endosomolytic diblock copolymer for siRNA delivery.</a> J. Control. Release. 133, 221-229 (2009).</li><li>Duvall, C. L., Convertine, A. J., Benoit, D. S., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Delivery+of+a+Proapoptotic+Peptide+via+Conjugation+to+a+RAFT+Synthesized+Endosomolytic.">Intracellular Delivery of a Proapoptotic Peptide via Conjugation to a RAFT Synthesized Endosomolytic.</a> 7, 468-476 (2010).</li><li>Varkouhi, A. K., Scholte, M., Storm, G., Haisma, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+escape+pathways+for+delivery+of+biologicals.">Endosomal escape pathways for delivery of biologicals.</a> Journal of Controlled Release. 151, 220-228 (2011).</li><li>Plank, C., Oberhauser, B., Mechtler, K., Koch, C., Wagner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+endosome-disruptive+peptides+on+gene+transfer+using+synthetic+virus-like+gene+transfer+systems.">The influence of endosome-disruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like gene transfer systems.</a> Journal of Biological Chemistry. 269, 12918-12924 (1994).</li><li>Ratner, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+Cells+Are+Sensitive+Detectors+of+Bacterial+Pore-forming+Toxins.">Epithelial Cells Are Sensitive Detectors of Bacterial Pore-forming Toxins.</a> Journal of Biological Chemistry. 281, 12994-12998 (2006).</li><li>Saar, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-penetrating+peptides:+A+comparative+membrane+toxicity+study.">Cell-penetrating peptides: A comparative membrane toxicity study.</a> Analytical Biochemistry. 345, 55-65 (2005).</li><li>Kichler, A., Leborgne, C., Coeytaux, E., Danos, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyethylenimine-mediated+gene+delivery:+a+mechanistic+study.">Polyethylenimine-mediated gene delivery: a mechanistic study.</a> The Journal of Gene Medicine. 3, 135-144 (2001).</li><li>Behr, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Proton+Sponge:+a+Trick+to+Enter+Cells+the+Viruses+Did+Not+Exploit.">The Proton Sponge: a Trick to Enter Cells the Viruses Did Not Exploit.</a> CHIMIA International Journal for Chemistry. 51, 34-36 (1997).</li><li>Dawson, R. M. C., Elliot, D. C., Elliot, W. H., Jones, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Data for Biochemical Research. , (1986).</li><li>Ernst, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Applied Phlebotomy. , (2005).</li><li>Bulmus, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+pH-responsive+and+glutathione-reactive,+endosomal+membrane-disruptive+polymeric+carrier+for+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">A new pH-responsive and glutathione-reactive, endosomal membrane-disruptive polymeric carrier for intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 93, 105-120 (2003).</li><li>Lackey, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemolytic+Activity+of+pH-Responsive+Polymer-Streptavidin+Bioconjugates.">Hemolytic Activity of pH-Responsive Polymer-Streptavidin Bioconjugates.</a> Bioconjugate Chemistry. 10, 401-405 (1999).</li><li>Murthy, N., Campbell, J., Fausto, N., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinspired+pH-responsive+polymers+for+the+intracellular+delivery+of+biomolecular+drugs.">Bioinspired pH-responsive polymers for the intracellular delivery of biomolecular drugs.</a> Bioconjugate chemistry. 14, 412-419 (2003).</li><li>Murthy, N., Robichaud, J. R., Tirrell, D. A., Stayton, P. S., Hoffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+and+synthesis+of+polymers+for+eukaryotic+membrane+disruption.">The design and synthesis of polymers for eukaryotic membrane disruption.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 61, 137-143 (1999).</li><li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+endosomal+barrier+by+amphotericin+B-loaded+dual+pH-responsive+PDMA-b-PDPA+micelleplexes+for+siRNA+delivery.">Overcoming endosomal barrier by amphotericin B-loaded dual pH-responsive PDMA-b-PDPA micelleplexes for siRNA delivery.</a> ACS nano. 5, 9246-9255 (2011).</li><li>Nelson, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+local+delivery+of+siRNA+from+an+injectable+scaffold.">Sustained local delivery of siRNA from an injectable scaffold.</a> Biomaterials. 33, 1154-1161 (2012).</li><li>Miozzari, G. F., Niederberger, P., H&#252;tter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+microorganisms+by+Triton+X-100.">Permeabilization of microorganisms by Triton X-100.</a> Analytical Biochemistry. 90, 220-233 (1978).</li><li>Chen, H., Zhang, H., McCallum, C. M., Szoka, F. C., Guo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unsaturated+Cationic+Ortho+Esters+for+Endosome+Permeation+in+Gene+Delivery.">Unsaturated Cationic Ortho Esters for Endosome Permeation in Gene Delivery.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 50, 4269-4278 (2007).</li><li>Roth, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Measurements+and+Rational+Materials+Design+for+Intracellular+Delivery+of+Oligonucleotides.">Quantitative Measurements and Rational Materials Design for Intracellular Delivery of Oligonucleotides.</a> Biotechnology Progress. 24, 23-28 (2008).</li><li>Blumenthal, R., Seth, P., Willingham, M. C., Pastan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-dependent+lysis+of+liposomes+by+adenovirus.">pH-dependent lysis of liposomes by adenovirus.</a> Biochemistry. 25, 2231-2237 (1986).</li><li>Moore, N. M., Sheppard, C. L., Barbour, T. R., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+endosomal+escape+peptides+on+in+vitro+gene+delivery+of+polyethylene+glycol-based+vehicles.">The effect of endosomal escape peptides on in vitro gene delivery of polyethylene glycol-based vehicles.</a> The Journal of Gene Medicine. 10, 1134-1149 (2008).</li><li>Panyam, J., Zhou, W. Z., Prabha, S., Sahoo, S. K., Labhasetwar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+endo-lysosomal+escape+of+poly(DL-lactide-co-glycolide)+nanoparticles:+implications+for+drug+and+gene+delivery.">Rapid endo-lysosomal escape of poly(DL-lactide-co-glycolide) nanoparticles: implications for drug and gene delivery.</a> The FASEB Journal. 16, 1217-1226 (2002).</li></ol>

рН-отзывчивым полимеров или других агентов, предназначенных для эндосомолитический функции могут быть быстро и эффективно экранируется на основе лизиса эритроцитов при значениях рН, встречающихся в ядрышко (рис. 1; рН 6,8 - начале ядрышко, рН 6,2 - поздно ядрышко, рН 5,6 - лизосом). <sup...

Хотя есть много потенциально высокой отдачей терапевтические мишени внутри клетки, внутриклеточной доставки агентов представляет собой значительную проблему. Часто, наркотики, особенно биопрепаратов, усваиваются клетками и продают в пузырьках, которые либо приводят к ухудшению их содержимого через эндо-лизосомальных пути, или курсировал обратно из клетки с помощью экзоцитоза. 1 В последнем процессе, внутренние рН пузырьков подкисляют до примерно 5-6, который является оптимальным рН на активность ферментов, которые функционируют в этот отсек, такие как лизоцим 2. В последнее время ряд материалов, которые были специально разработаны для привлечения подкисления эндосомы для облегчения цитозольного доставки своего груза. Одним из примеров такого подхода используются синтетические, полимерные мицеллы наночастиц ядро которого цвиттерионные и заряда нейтральными при физиологических рН (т.е. 7,4). Тем не менее, при рН 6,0- 6,5, полимеры становятся протонирована и приобретают положительный заряд, что дестабилизирует мицеллы ядро, и открытые сегменты полимера взаимодействуют и нарушить эндосомного мембраны. Эта деятельность была показана по содействию эндосомного выхода пептидов и нуклеиновых кислот основе терапии, что позволит им получить доступ к своим цитозольного целей. 3,4 Другие примеры методов, разработанных для посредников эндосомного побега, которые разрушают мембраны барьера включают &quot;fusogenic&quot; пептиды или белков, что может выступить посредником слияние мембран или переходные образования пор в фосфолипидного бислоя. 5 Гомополимеры анионных алкил кислот акрилового такие как поли (propylacrylic кислоты) являются еще одним хорошо изученный подход, и в этих полимеров, протонирование состояние кулон карбоновой кислоты диктует переход в гидрофобных, мембраны прерывания государства в эндо-лизосомальных диапазонах рН. 6,7 Одним из полезных модель системы для скрининга эндосомолитический поведение электроннойх естественных условиях рН-зависимого гемолиза анализа. 8 В этой модельной системы, мембраны эритроцита служит заменителем липидного бислоя мембраны, окружающие эндо-лизосомных пузырьков. Это обобщению модели была использована другими для оценки эндосомолитический поведение клеточной проникающих пептидов и других полимерных систем доставки генов. 8-11 В этом эксперименте, эритроциты человека и испытания материалов совместно инкубируют в буфер при определенных значениях рН, которые имитируют внеклеточный (7,4), рано эндосомного (6,8), и в конце эндо-лизосомальных (&lt;6,8) среде. Количество гемоглобина выпущен в течение инкубационного периода количественно как меру красно лизис клеток крови, которая нормирована на количество гемоглобина выпущен в положительные контрольные образцы лизируются с моющим средством. От скрининга небольшая библиотека потенциально эндосомолитический тестовых материалов, можно сделать вывод, что образцы, которые не производят гемолиз при рН 7,4, но значительно повышенные подолеolysis при рН &lt;6,5, будет наиболее эффективным и cytocompatible кандидатов на цитозольной доставки лекарственных средств. Материалы, которые соответствуют этим критериям можно было бы ожидать, чтобы оставаться инертным и не без разбора уничтожить двухслойных липидных мембран (например, которые могут привести к цитотоксичности), пока не подвергаясь капля в местном рН после интернализации в эндо-лизосомальных отсеков. В этом протоколе, эритроциты изолированы от человека-донора и совместно инкубировали при рН 5,6, 6,2, 6,8 или 7,4 с экспериментальными эндосомолитический агентов доставки лекарственных средств. Интактные эритроциты осаждают, а супернатанты (содержащие гемоглобин освобожден из лизированных эритроцитов), анализируются характерные для поглощения гемоглобина через ридер (рис. 1).

<table border="1"><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер в каталоге </td><td> Комментарии (по желанию) </td></tr><tr><td> BD Vacutainer - K2EDTA Vacutainer трубы </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-253-145 </td><td> Для сбора крови </td></tr><tr><td> BD Vacutainer сбору крови иглы, 20,5 калибра </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-665-31 </td><td> Для сбора крови </td></tr><tr><td> BD Vacutainer держатель трубки / иглы адаптер </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-289-953 </td><td> Для сбора крови </td></tr><tr><td> BD Марка изопропиловый спирт тампоны </td><td> Fisher Scientific </td><td> 13-680-63 </td><td> Для сбора крови </td></tr><tr><td> BD Vacutainer латекса Tourniquet </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-657-6 </td><td> Для сбора крови </TD&gt; </tr><tr><td> Соляная кислота (конц.) </td><td> Fisher Scientific </td><td> A144-500 </td><td> Для регулировки рН D-PBS. </td></tr><tr><td> Triton X-100 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T8787 </td><td> Положительный контроль </td></tr><tr><td> Дульбекко PBS </td><td> Invitrogen </td><td> 14190 </td><td></td></tr><tr><td> Nalgene MF75 стерильные одноразовые бутылки-Top фильтр с SFCA мембранные </td><td> Fisher Scientific </td><td> 09-740-44A </td><td></td></tr><tr><td> BD 96-луночные планшеты с плоским дном, культуры тканей обработанных полистирола </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-772-2C </td><td> Для пластины чтении в конце анализа. </td></tr><tr><td> BD 96-луночные, с круглым дном, культуры тканей обработанных полистирола </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-772-17 </td><td> Для инкубации эритроцитов с экспериментальными средствами. </td></tr></Таблица&gt;

ex vivo red blood cell hemolysis assay for the evaluation of ph-responsive endosomolytic agents for cytosolic delivery of biomacromolecular drugs

Фосфолипидного бислоя, которые представляют собой эндо-лизосомных пузырьков может создать барьер для доставки биологических препаратов на внутриклеточные мишени. Чтобы преодолеть этот барьер, количество синтетических наркотиков носителей были разработаны активно нарушать эндосомного мембраны и доставить груз в цитоплазму. Здесь мы описываем гемолиза анализа, который может быть использован в качестве быстрого, высокой пропускной способностью экрана для cytocompatibility и эндосомолитический активность внутриклеточных систем доставки лекарственных средств. В гемолиза анализ, эритроциты человека и испытания материалов совместно инкубируют в буфер при определенных значениях рН, которые имитируют внеклеточной, рано эндосомного, и в конце эндо-лизосомальных среды. После центрифугирования для осаждения нетронутыми эритроцитов, количество гемоглобина попадает в среду измеряется спектрофотометрически (405 нм для лучшего динамического диапазона). Процентов красные разрушение клеток крови, то количественно по сравнению с положительным контролем SAMPле лизируются с моющим средством. В этой модели система мембран эритроцитов служит заменителем липидного бислоя мембраны, окружающие эндо-лизосомных пузырьков. Желаемый результат можно пренебречь гемолиза при физиологических рН (7,4) и надежные гемолиза в эндо-лизосомальных диапазоне рН примерно от рН 5-6.8.

<html> Как правило, агенты, которые обладают идеальными рН-зависимые гемолитические поведения имеют самый высокий потенциал для цитозольного доставки лекарств, нуклеиновых кислот и других биологически активных молекул. Примером этого может служить агент № 1, как изображается на рис?...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs at JoVE.com

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

Гемолиз анализ может быть использован в качестве быстрого, высокую пропускную способность экрана системы доставки лекарственных средств &quot;cytocompatibility и эндосомолитический деятельности для внутриклеточной доставки грузов. Анализ измеряет нарушение мембран эритроцитов в зависимости от рН среды.

Ex Vivo красных клеток крови Гемолиз анализа для оценки рН реагировать эндосомолитический агентов для цитозольного поставки наркотиков Biomacromolecular

Phospholipid bilayers that constitute endo-lysosomal vesicles can pose a barrier to delivery of biologic drugs to intracellular targets. To overcome this ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Ex Vivo Red Blood Cell Hemolysis Assay for the Evaluation of pH-responsive Endosomolytic Agents for Cytosolic Delivery of Biomacromolecular Drugs

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA-Ig Based Artificial Antigen Presenting Cells for Efficient ex vivo Expansion of Human CTL

HLA-Ig основе искусственного антиген представляющих клеток для эффективного Исключая виво Расширение прав CTL

CTL with optimal effector function play critical roles in mediating protection against various intracellular infections and cancer. However, individuals ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Представляем напряжения сдвига в изучении бактериальной адгезии

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

A Quantitative Evaluation of Cell Migration by the Phagokinetic Track Motility Assay

Количественные оценки миграции клеток в Phagokinetic анализа подвижности трек

Cellular motility is an important biological process for both unicellular and multicellular organisms. It is essential for movement of unicellular ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Антигены охраняемых Функциональные эритроциты Мембрана прививки Компактный сверхразветвленных полиглицерины

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Методы количественного определения антител-индуцированной активации комплемента по ЭРИТРОЦИТОВ

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

Высокая пропускная способность Количественный реальном времени RT-PCR анализа для определения профилей экспрессии типов I и III интерферона подтипов

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Использование моноцитов монослоя анализе для оценки Fcγ рецептор-опосредованного Фагоцитоз

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Декстран повышает эффективность лентивирусные трансдукции мышиных и человеческие клетки первичной

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

A Simple Red Blood Cell Lysis Method for the Establishment of B Lymphoblastoid Cell Lines

Простой эритроцит Лизис Метод создании B лимфобластоидная клеточных линий

A number of methods exist for the transformation of B lymphocytes by the Epstein Barr virus in vitro into immortalized cell lines. We have developed a new ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

В естественных условиях Assay для обнаружения антиген специфические Т-лимфоцитов цитолитического функции с помощью вакцинации модели

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...