Name: 2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

1.. Forberedelse Alle dyreforsøg skal overholde de institutionelle retningslinjer og modtage godkendelse fra en respektiv dyrepleje udvalg forud for indledningen. Alle procedurer, der præsenteres her er blevet godkendt af Wayne State University Institutional Animal Care og brug Udvalg og følge de retningslinjer for etisk behandling af dyr, som rakte i Guide til Pleje og anvendelse af forsøgsdyr, og den amerikanske regering principper for Udnyttelse og pleje af hvirveldyr, der anvendes i te...

<ol>
	<li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia.">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li><li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia.">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li><li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax/Bcl-XL+binding.">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia.">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+(PERK)+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins.">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li><li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death.">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li><li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li><li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia,+resuscitation,+and+reperfusion:+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection.">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li><li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion:+a+proposed+biochemical+sequence.">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li><li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation.">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li><li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978 (2011).</li><li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia.">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li><li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest:+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia.">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li><li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia.">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li><li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+by+design:+apoptosis,+necrosis+and+autophagy.">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li><li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia.">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li><li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats.">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li><li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia.">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39 (1999).</li><li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li><li>Ross, D. T., Ebner, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thalamic+retrograde+degeneration+following+cortical+injury:+an+excitotoxic+process.">Thalamic retrograde degeneration following cortical injury: an excitotoxic process.</a> Neuroscience. 35, 525-550 (1990).</li><li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction.">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li><li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+inhibitor+transiently+reduces+neuronal+death+in+the+thalamus+of+spontaneously+hypertensive+rats+following+cortical+infarction.">Protein synthesis inhibitor transiently reduces neuronal death in the thalamus of spontaneously hypertensive rats following cortical infarction.</a> Neuroscience Letters. 233, 25-28 (1997).</li><li>Wei, L., Ying, D. J., Cui, L., Langsdorf, J., Yu, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrosis,+apoptosis+and+hybrid+death+in+the+cortex+and+thalamus+after+barrel+cortex+ischemia+in+rats.">Necrosis, apoptosis and hybrid death in the cortex and thalamus after barrel cortex ischemia in rats.</a> Brain Research. 1022, 54-61 (2004).</li><li>Zong, W. X., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+death+as+a+cell+fate.">Necrotic death as a cell fate.</a> Genes &amp; Development. 20, 1-15 (2006).</li><li>Ito, U., Spatz, M., Walker, J. T., Klatzo, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+cerebral+ischemia+in+mongolian+gerbils.+I.+Light+microscopic+observations.">Experimental cerebral ischemia in mongolian gerbils. I. Light microscopic observations.</a> Acta Neuropathologica. 32, 209-223 (1975).</li><li>Saver, J. L., Albers, G. W., Dunn, B., Johnston, K. C., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+recommendations+for+extended+window+acute+stroke+therapy+trials.">Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) recommendations for extended window acute stroke therapy trials.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 40, 2594-2600 (2009).</li><li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury.">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li><li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage:+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin.">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li><li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat.">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li><li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat.">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li><li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model.">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li></ol>

Den her beskrevne model giver en iskæmisk fornærmelse til hjernen, der kan opstå som følge af hjertestop og genoplivning, giver en skade svarende til den, der findes hos mennesker. Denne fremgangsmåde til fremstilling af den globale hjerneiskæmi er en af ​​flere protokoller. Vi bruger denne protokol fremmest for sin forholdsvis lav dødelighed, hurtig genopretning og reproducerbare resultater. Den hjertestop / genoplivning model er velsagtens den mest klinisk relevant model, men teknisk set den mest vanskelige...

Hjerneskade som følge af hjertestop og slagtilfælde er en førende årsag til død og langvarig invaliditet. Mens genoplivningsudstyr til ofre for hjertestop lykkes at genoprette spontan cirkulation i omkring 70.000 patienter om året i USA 7,8 mindst 60% af disse patienter efterfølgende dør på hospitalet som følge af en omfattende hjerneskade og kun 3-10% af genoplivet patienterne kan genoptage deres tidligere livsstil 9,10. Det er klart, at forstå de mekanismer, der fører til hjerneskade efter global hjerneiskæmi og designe terapeutiske indgreb for at minimere neurologiske traumer er af afgørende betydning. Hjerneiskæmi kan modelleres udnytte flere metoder. Mest almindeligt er hjerneiskæmi produceret i gnaver ved okkludere et større blodkar i hjernen, den midterste cerebrale arterie, hvilket frembringer en fokal iskæmisk slagtilfælde 11,12. Mens klinisk vigtig,fokal hjerneiskæmi er ikke en præcis metode til at studere hjerneskade fremstillet ved hjertestop / genoplivning. At modellere denne kliniske paradigme hele hjernen skal gøres iskæmisk efterfulgt af genindførelse af blodgennemstrømningen. Til nøje at efterligne denne kliniske præsentation, efterforskere eksperimentelt fremkalde hjertestop efterfulgt af genoplivning med hjertemassage og defibrillering 13,14. Denne model er klinisk relevant, kan dog uforudsigelige genoplivning tider øger variabilitet og kan gøre dataanalyse vanskeligt at fortolke. Derudover er denne model forbundet med en høj dødelighed, hvilket yderligere øger dyrenummer nødvendigt at teste en hypotese. Undersøgelse af cerebral reaktion på global iskæmi og / eller reperfusion i en mere reproducerbar, sammenhængende og levedygtige fornærmelse kan foretrækkes. Global iskæmi kan induceres i hjernen og samtidig bevare nogle blodgennemstrømningen systemisk. Dette reducerer dødelighed, samtidig med at investigation af mekanismerne i vævsskade i hjernen 2.. At producere globale hjerneiskæmi, er det nødvendigt at afbryde eller i høj grad begrænse strømning i alle fire blodkar, som forsyner hjernen, de interne halspulsårer og vertebrale arterier. Disse skibe forsyne hjernen med blod flow gennem en vaskulær struktur kaldet Circle of Willis, som udgør en anastomotisk løkke. Denne vaskulære arkitektur tillader hjernen at fastholde perfusion i tilfælde af proximale vaskulær okklusion. Derfor skal til at inducere fuldstændig iskæmi af hjernen blodgennemstrømning gennem alle bidragende fartøjer forekomme. Halspulsåren okklusion kan opnås ved hjælp af en minimalt invasiv ventrale hals cut-ned og anvendelse af aneurisme klip for en ønsket periode. Afbrydelse af blodgennemstrømningen via vertebrale arterier kan være vanskelig, da de er incased i tværgående huller af rygsøjlen. Efterforskere har behandlet dette ved at electrocauterizing vertebrale arterier 24-48 hr før carotisokklusion og hjerneiskæmi (4VO model) 15. I modsætning til denne fremgangsmåde, udviklede Smith et al. En fremgangsmåde til induktion af globale hjerneiskæmi ved at reducere betyde arterielt blodtryk (MAP) systemisk til 40 mmHg at reducere perfusion gennem de vertebrale arterier til et punkt, hvor blodgennemstrømningen er tabt eller reduceres kraftigt 2 . Når kombineret med carotis okklusion, denne metode giver iskæmi hele forhjernen, hvilket resulterer i et mønster af hjerneskade, der nøje efterligner hjertestop overlevende. I en yderligere forfining af denne metode kræver den model, vi præsenterer her tight MAP regulering på 30 mmHg ± 1mHg under hele 8 min af iskæmi. Vi fandt dette ændring forbedrer reproducerbarheden af hjerneskade induceret af denne model og samtidig bevare den lave dødelighed af den oprindelige teknik designet af Smith et al. Den præcise fænotype celledød og samlede omfang af vævsskader forårsaget afden model, der præsenteres her er direkte afhængige af iskæmisk varighed 16. Efter 8 min iskæmi, udviser CA1 neuroner forsinket celledød, hvilket antyder, at der er en tidsmæssig vindue til terapeutisk intervention i reperfusionsfasen 15,17. Ved starten af reperfusion hurtigt neuroner genvinde funktion og ikke umiddelbart celledød er påviseligt 18.. Men dette fornærmelse forårsager induktion af celledød kaskader (apoptose), der kulminerer med frigivelsen af apoptogenic proteiner fra mitokondrier, herunder cytochrom c, mellem 4-6 hr reperfusion 3,19. Mellem 6 og 24 timers reperfusion, har neuroner i CA1 hippocampus forpligtet til celle død, og den apoptotiske celledød program gennemføres 19.. Det skal bemærkes, at celledød fænotype ansvarlig for iskæmisk skade er yderst kontroversiel. Tidlige undersøgelser har antydet nekrose er den primære celledød fænotype 20,21, mens andre andre rapporterer apoptOSIS som den vigtigste mekanisme 22,23. I alt tyder aktuelle beviser for, at cellerne dør af et spektrum af celledød fænotyper spænder fra klassisk apoptose til nekrose. Den specifikke form for celledød er afhængig af mange faktorer, med graden af bidragene fra hver fænotype afhængigt af sværhedsgraden af den fornærmelse, blandt andre faktorer 24,25. Ved 24 timers reperfusion, besidder døende celler pyknotiske kerner, kondenseret cytosol med klare beviser for aggregerede cellulære indhold og tab af funktionel mitokondrie morfologi. Døde celler er yderligere opdelt, opslugt af immunceller såsom makrofager og / eller mikroglia og slettes fra CA1 hippocampus region. Ved 4-7 dage reperfusion er døde celler fjernes, og alle, der er tilbage er inflammatoriske celler og aktiverede gliaceller 17,26. Derfor 7 dages reperfusion repræsenterer en optimal tid, hvor CA1 hippocampus neuronal død kan kvantificeres ved hjælp af enkle, uspecifikke celle pletterinklusive cresylviolet eller hemotoxylin-eosin og tælles baseret på morfologiske inklusionskriterier. Celler forbliver på dette sene reperfusion interval kan regnes som overlevende celler, hvilket giver et indeks for hjerneskade. Hvis denne model er at blive udnyttet til at teste terapeutiske indgreb, foreslås det, at den eksperimentelle design følge TRAPPE kriterier (Stroke Terapi Academic Industri Roundtable) 27. Disse retningslinjer bør følges ved udformning og gennemførelse af en undersøgelse, der dog ikke behandles her.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Material Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5-0 VICRYL suture, reverse cutting </td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>J391H</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Scalpel, No.10</td>
 <td>Swann-Morton</td>
 <td>6601</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Gauze Sponges</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>22-362-178</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18G x 1 &frac12; in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305201</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>23G x 1 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305145</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>26 G x 3/8 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305110</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18 G x 1 &frac14; catheter</td>
 <td>EXEL</td>
 <td>26735</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309659</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309604</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>60 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309653</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Surgilube</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1152666</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>.9% Saline, plastic IV bag</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1537468</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Suture 3-0 Silk</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1007842</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Puralube Ophthalmic Ointment</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>3390017</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Betadine</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>6903564</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sterile Towel Drape</td>
 <td>Moore Medical</td>
 <td>14170</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Polyethylene Tubing, 50</td>
 <td>Intramedic</td>
 <td>427411</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stopcock, 3 way</td>
 <td>Smiths medical</td>
 <td>MX9311L</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Drug Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>AERRANE (isoflurane)</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>2091966</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mapap Liquid (Tylenol)</td>
 <td>Major Pharmaceuticals</td>
 <td>1556</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Kedavet (ketamine)</td>
 <td>Ketathesia Butney</td>
 <td>NDC 50989-996-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Butorphic (butorphanol)</td>
 <td>Lloyd Labs</td>
 <td>4881</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heparin</td>
 <td>APP Pharmaceuticals</td>
 <td>504011</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Chemical Name </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paraformaldehyde prills</td>
 <td>Elecron Microscopy Sci.</td>
 <td>19202</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>2-methylbutane</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>270342</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cresyl Violet Acetate</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>C5042</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sucrose</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>S9378</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Software</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ImageJ</td>
 <td>NIH</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia

Hjertestop efterfulgt af genoplivning ofte resulterer i en dramatisk hjerneskade forårsaget af iskæmi og efterfølgende reperfusion af hjernen. Globale hjerneiskæmi producerer skade på bestemte områder af hjernen har vist sig at være meget følsomme over for iskæmi 1. Hippocampale neuroner har højere følsomhed til iskæmiske fornærmelser forhold til andre cellepopulationer, og specifikt, CA1-regionen af hippocampus er særligt udsatte for iskæmi / reperfusion 2. Udformningen af ​​terapeutiske interventioner, og til undersøgelse af mekanismer involveret i cerebral skade, kræver en model, der producerer lignende skader den kliniske tilstand og på en reproducerbar måde. Bilateral carotis tillukning af blodkar med hypotension (2VOH) er en model, der producerer reversibel forhjerneiskæmi, efterligne cerebrale begivenheder, der kan opstå under hjertestop og genoplivning. Vi beskriver en model modificeret fra Smith et al. (1984) 2, Som første gang præsenteret i sin nuværende form i Sanderson et al. (2008) 3, der producerer reproducerbar skade selektivt sårbare områder af hjernen 3-6. Pålideligheden af ​​denne model er dikteret af præcis styring af systemiske blodtryk under anvendt hypotension, varigheden af ​​iskæmi tæt temperaturkontrol, en specifik anæstesi regime, og omhyggelig postoperativ pleje. 8 minutter iskæmiske skade producerer celledød af CA1 hippocampale neuroner, der skrider i løbet af 6 til 24 timer af reperfusion, mens mindre sårbare hjerneregioner skånet. Denne progressiv celledød nemt kvantificeres efter 7-14 dage reperfusion, som et næsten komplet tab af CA1 neuroner er tydeligt på dette tidspunkt. Ud over denne hjerneskade model præsenterer vi en metode til CA1 skade kvantificering hjælp af en simpel, men grundig, metodologi. Vigtigere, kan kvantificering opnås ved anvendelse af en simpel kameramonteret mikroskop, enda fri ImageJ (NIH) software-plugin, der ikke er behov for omkostningseffektive uoverkommelige stereologi softwareprogrammer og et motoriseret mikroskopisk scene for skadesvurdering.

Den 2VOH model af global hjerne iskæmi / reperfusion forårsager neuronal død i CA1-regionen af hippocampus. Figur 2 repræsenterer den skade produceret af 8 min på globale hjerneiskæmi, forarbejdet 14 dage efter reperfusion. 2A og 2B sammenligne hippocampusen fra fingeret og post-iskæmiske hjerner, farvet med cresylviolet. 2A viser en hippocampus fra en skinopereret rotte, som udviser normal morfologi, herunder en intakt CA1. Figur 2B</str...

Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Bilateral carotis okklusion kombineret med systemisk hypotension producerer global hjerneiskæmi i rotter, hvilket resulterer i skader på hippocampus med reproducerbare sværhedsgrad. Animal fag er svækket med forudsigelige mønstre af hjerneskade, de kommer sig hensigtsmæssigt, og dødeligheden er forholdsvis lav.

2-tillukning af blodkar / Hypotension: A Rat Model of Global hjerneiskæmi

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Research

JoVE Journal

Medicine

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MR-guided Forstyrrelse af blod-hjerne barrieren ved hjælp af Transcranial fokuseret ultralyd i en rottemodel

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Et murint lukket bryst Model for myocardial iskæmi og reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Rottemodel af blod-hjerne barrieren Disruption at muliggøre målrettede neurovaskulær Therapeutics

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Tværgående Rectus abdominis Myocutaneous Flap: En Rat Model of Myocutaneous iskæmisk reperfusionsbeskadigelse

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Ilt-Glucose afsavn og reoxygenering som en<em&gt; In vitro</em&gt; Iskæmireperfusion Skade Model for studere blod-hjerne barrieren dysfunktion

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

En Trombotisk Stroke model baseret på Forbigående Cerebral Hypoxi-iskæmi

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Reproducerbart motorunderskud efter aortaeklusion i en rottemodel af rygmarvs-iskæmi

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

En kronisk hjerte iskæmi Model i svin ved hjælp af en Ameroid kvælerslange

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet måling af musen mesenterica arterie ved hjælp af Wire blodkar

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Vurdering af terapeutisk angiogenese i en murine model af baglemmer iskæmi

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...