Name: 2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

1. הכנה כל הניסויים בבעלי החיים חייבים להתאים להנחיות מוסדיות ולקבל אישור על ידי ועדה בהתאמה טיפול בבעלי חיים קודם לחניכה. כל הנהלים המוצגים כאן אושרו על ידי הטיפול בבעלי החיים המוסדי ויין סטייט ומשתמשים הוועדה ופעל בהתאם להנחיות ...

<ol>
	<li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia.">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li><li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia.">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li><li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax/Bcl-XL+binding.">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia.">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+(PERK)+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins.">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li><li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death.">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li><li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li><li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia,+resuscitation,+and+reperfusion:+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection.">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li><li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion:+a+proposed+biochemical+sequence.">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li><li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation.">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li><li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978 (2011).</li><li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia.">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li><li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest:+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia.">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li><li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia.">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li><li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+by+design:+apoptosis,+necrosis+and+autophagy.">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li><li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia.">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li><li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats.">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li><li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia.">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39 (1999).</li><li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li><li>Ross, D. T., Ebner, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thalamic+retrograde+degeneration+following+cortical+injury:+an+excitotoxic+process.">Thalamic retrograde degeneration following cortical injury: an excitotoxic process.</a> Neuroscience. 35, 525-550 (1990).</li><li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction.">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li><li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+inhibitor+transiently+reduces+neuronal+death+in+the+thalamus+of+spontaneously+hypertensive+rats+following+cortical+infarction.">Protein synthesis inhibitor transiently reduces neuronal death in the thalamus of spontaneously hypertensive rats following cortical infarction.</a> Neuroscience Letters. 233, 25-28 (1997).</li><li>Wei, L., Ying, D. J., Cui, L., Langsdorf, J., Yu, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrosis,+apoptosis+and+hybrid+death+in+the+cortex+and+thalamus+after+barrel+cortex+ischemia+in+rats.">Necrosis, apoptosis and hybrid death in the cortex and thalamus after barrel cortex ischemia in rats.</a> Brain Research. 1022, 54-61 (2004).</li><li>Zong, W. X., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+death+as+a+cell+fate.">Necrotic death as a cell fate.</a> Genes &amp; Development. 20, 1-15 (2006).</li><li>Ito, U., Spatz, M., Walker, J. T., Klatzo, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+cerebral+ischemia+in+mongolian+gerbils.+I.+Light+microscopic+observations.">Experimental cerebral ischemia in mongolian gerbils. I. Light microscopic observations.</a> Acta Neuropathologica. 32, 209-223 (1975).</li><li>Saver, J. L., Albers, G. W., Dunn, B., Johnston, K. C., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+recommendations+for+extended+window+acute+stroke+therapy+trials.">Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) recommendations for extended window acute stroke therapy trials.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 40, 2594-2600 (2009).</li><li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury.">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li><li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage:+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin.">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li><li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat.">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li><li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat.">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li><li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model.">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li></ol>

המודל שתואר כאן מייצר עלבון איסכמי למוח, אשר יכול להתרחש כתוצאה ממעצרו וההחייאה, מתן פציעה דומה לזו שנמצאה בבני אדם. שיטה זו להפקת איסכמיה המוח הגלובלית היא אחד מפרוטוקולים מרובים. אנו משתמשים בפרוטוקול זה ובראשונה לשיעורה הנמוך comparably התמותה, התאוששות מהירה, ותוצאות...

נזק מוחי כתוצאה ממעצר ושבץ לב הוא גורם מוביל של מוות ונכות לטווח ארוך. בעוד החייאה לנפגעי דום הלב מצליחה להשיב את הזרימה ספונטנית בכ -70,000 מטופלים בשנה בארה&quot;ב 7,8 לפחות 60% מהחולים הללו לאחר מכן נפטרו בבית החולים כתוצאה מניזק מוחי נרחב ורק 3-10% החייאה של חולים יכול לחזור לאורח החיים הקודמים שלהם 9,10. ברור, הבנת המנגנונים שיובילו לנזק מוחי בעקבות איסכמיה המוחית העולמית ותכנון התערבויות טיפוליות כדי למזער את טראומת נוירולוגית היא בעל חשיבות קריטית. יכולה להיות מודל איסכמיה ניצול שיטות מרובות. ברוב המקרים, איסכמיה מיוצרת במכרסם ידי occluding כלי דם גדול במוח, עורק המוח האמצעי, ובכך לייצר שבץ איסכמי 11,12 מוקד. בעוד חשיבות קלינית,איסכמיה מוקד היא לא שיטה מדויקת ללמוד נזק מוחי המיוצר על ידי מעצר / החייאת לב. למודל הפרדיגמה קלינית זו את המוח כולו חייבת להתבצע איסכמי ואחרי חידוש של זרימת דם. כדי לחקות את המצגת קלינית זה מקרוב, חוקרים בניסוי לגרום דום לב ואחריו החייאה עם החייאה ודפיברילציה 13,14. מודל זה הוא רלוונטי מבחינה קלינית, פעמים החייאה אך בלתי צפויות יכולות להגדיל את השונות ועלולות להפוך את ניתוח הנתונים קשה לפרש. בנוסף, מודל זה קשור לשיעור תמותה גבוה, נוסף להגדיל את מספר בעלי החיים דרוש כדי לבדוק את השערה. חוקר את תגובת המוח לאיסכמיה העולמית ו / או בreperfusion עלבון יותר לשחזור, עולה בקנה אחד, ולשרוד עשוי להיות מועדף. איסכמיה גלובלית יכולה להיגרם במוח תוך שמירה על כמה זרימת דם מערכתית. זה מפחית את התמותה, ובמקביל לאפשר investigation של המנגנונים של נזק לרקמות במוח 2. כדי לייצר איסכמיה המוחית הגלובלית, יש צורך להפסיק או להגביל באופן משמעותי את הזרימה בכל ארבעת כלי המספקים את המוח, עורקי הראש הפנימיים ועורקי חוליות. כלים אלה מספקים למוח את זרימת דם דרך מבנה כלי דם הנקרא מעגל ויליס, המהווה לולאת anastomotic. ארכיטקטורה זו מאפשרת לכלי דם במוח כדי לשמור זלוף במקרה של חסימת כלי דם הפרוקסימלי. לכן, כדי לגרום לאיסכמיה של המוח, זרימת הדם מלאה בכל כלי התורמים חייבת להתרחש. ניתן להשיג זאת באמצעות חסימת העורק הראשי בצוואר פולשנית הגחון חתך למטה ויישום של קליפים פרצה לתקופה רצויה. הפרעה בזרימת דם דרך העורקים בחוליות יכולה להיות קשה, כפי שהם כלוא בforamina הרוחבי של עמוד השדרה. חוקרים התייחסו לזה על ידי electrocauterizing העורקים בחוליות 24-48 שעות לפני התרדמההחסימה ואיסכמיה (4VO דגם) 15. בניגוד לגישה זו, סמית ואח&#39;. פיתחה שיטה של גרימת איסכמיה מוח הגלובלית על ידי צמצום מתכוון לחץ דם העורקי (MAP) מערכתית עד 40 מ&quot;מ כספית כדי להפחית זלוף דרך העורקים בחוליות לנקודה שבה זרימת דם הולכת לאיבוד או מופחתת במידה ניכרת 2 . כאשר בשילוב עם חסימת עורק תרדמה, שיטה זו מייצרת איסכמיה לאורך המוח הקדמי, וכתוצאה מדפוס של נזק מוחי שמחק באופן הדוק זה של ניצולי דום לב. בחידוד נוסף של שיטה זו, המודל שאנו מציגים כאן דורש רגולציה הדוקה מפה ב30 מ&quot;מ כספית ± 1mHg במהלך דקות 8 השלם של איסכמיה. מצאנו שינוי זה משפר את שחזור של נזק מוחי הנגרם על ידי מודל זה תוך שמירה על שיעור התמותה הנמוך של הטכניקה המקורית שתוכננה על ידי סמית ואח&#39;. הפנוטיפ המדויק של מוות של תאים והיקף כולל של נזק לרקמות שנגרם על ידיהמודל המוצג כאן תלוי באופן ישיר משך 16 איסכמי. בעקבות 8 דקות של איסכמיה, CA1 נוירונים התערוכה עכבו מוות של תאים, מה שמרמז שיש חלון זמן להתערבות טיפולית בשלב reperfusion 15,17. בתחילת reperfusion, הנוירונים להחזיר במהירות תפקוד ולא מוות של תאים לזיהוי מיידי הוא 18. עם זאת עלבון זה גורם לאינדוקציה של מפלי מוות של תאים (אפופטוזיס) המגיע לשיאה בשחרורו של חלבוני apoptogenic ממיטוכונדריה, כולל ציטוכרום C, בין 4-6 שעות של reperfusion 3,19. בין 6 ל 24 שעות של reperfusion, נוירונים ביפוקמפוס CA1 התחייבו מותו של תא, ואת תכנית המוות של תאי אפופטוטיים מבוצעת 19. יש לציין שהתא פנוטיפ המוות האחראי לפגיעה איסכמית הוא שנוי במחלוקת. מחקרים מוקדמים הראו נמק הוא הפנוטיפ המוות של תאים הראשוני 20,21, בעוד שאחרים ידווחו אחרים apoptOSIS כמנגנון העיקרי 22,23. בסך הכל, ראיות נוכחי מצביעות על כך שהתאים מתים מספקטרום של פנוטיפים מוות של תאים הנעים בין קלאסי לאפופטוזיס נמק. המצב הספציפי של מוות של תאים תלוי בגורמים רבים, במידת התרומה של כל פנוטיפ בהתאם לחומרה של העלבון, בין גורמים אחרים 24,25. ב -24 שעות של reperfusion, תאים מתים בעלי גרעיני pyknotic, cytosol המרוכז עם ראיות ברורות של תוכן סלולרי מצטבר, והפסד של המיטוכונדריה מורפולוגיה פונקציונלית. תאים מתים שבורים עוד יותר למטה, נבלעו על ידי תאי מערכת חיסון כגון מקרופאגים ו / או מיקרוגלים, ופינו מאזור CA1 בהיפוקמפוס. על ידי 4-7 ימים של reperfusion, תאים מתים יוסרו, וכל מה שנשאר הם תאים דלקתיים והופעלו תאי גלייה 17,26. לכן, 7 ימים של reperfusion מייצגים זמן אופטימלי שבו ניתן לכמת CA1 מוות עצבי בהיפוקמפוס באמצעות כתמים סלולריים פשוטים, שאינם ספציפיים בcluding סגול cresyl או hemotoxylin-eosin וספר מבוססים על קריטריוני הכללה המורפולוגיים. תאים שנותרו במרווח reperfusion מאוחר זה יכול להיחשב כתאים ששרדו, ובכך לספק מדד של נזק מוחי. אם המודל הזה הוא להיות מנוצל כדי לבדוק התערבויות טיפוליות, הוא הציע שעיצוב הניסיון לעקוב אחר קריטריוני מדרגות (תעשייה אקדמית טיפול שבץ שולחן עגול) 27. הנחיות אלה צריכה להיות מלווה בעת תכנון וביצוע מחקר, אולם הם לא נדונו כאן.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Material Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5-0 VICRYL suture, reverse cutting </td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>J391H</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Scalpel, No.10</td>
 <td>Swann-Morton</td>
 <td>6601</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Gauze Sponges</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>22-362-178</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18G x 1 &frac12; in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305201</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>23G x 1 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305145</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>26 G x 3/8 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305110</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18 G x 1 &frac14; catheter</td>
 <td>EXEL</td>
 <td>26735</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309659</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309604</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>60 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309653</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Surgilube</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1152666</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>.9% Saline, plastic IV bag</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1537468</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Suture 3-0 Silk</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1007842</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Puralube Ophthalmic Ointment</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>3390017</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Betadine</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>6903564</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sterile Towel Drape</td>
 <td>Moore Medical</td>
 <td>14170</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Polyethylene Tubing, 50</td>
 <td>Intramedic</td>
 <td>427411</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stopcock, 3 way</td>
 <td>Smiths medical</td>
 <td>MX9311L</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Drug Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>AERRANE (isoflurane)</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>2091966</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mapap Liquid (Tylenol)</td>
 <td>Major Pharmaceuticals</td>
 <td>1556</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Kedavet (ketamine)</td>
 <td>Ketathesia Butney</td>
 <td>NDC 50989-996-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Butorphic (butorphanol)</td>
 <td>Lloyd Labs</td>
 <td>4881</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heparin</td>
 <td>APP Pharmaceuticals</td>
 <td>504011</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Chemical Name </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paraformaldehyde prills</td>
 <td>Elecron Microscopy Sci.</td>
 <td>19202</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>2-methylbutane</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>270342</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cresyl Violet Acetate</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>C5042</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sucrose</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>S9378</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Software</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ImageJ</td>
 <td>NIH</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia

דום לב ואחריו החייאה לעתים קרובות תוצאות נזק מוחי שנגרם על ידי איסכמיה דרמטי וreperfusion הבאה של המוח. איסכמיה המוחית העולמית מייצרת נזק לאזורים ספציפיים במוח המוצגים להיות רגיש מאוד לאיסכמיה 1. יש נוירונים בהיפוקמפוס רגישות גבוהה יותר לעלבונות איסכמי בהשוואה לאוכלוסיות תאים אחרים, ובמיוחד באזור CA1 של ההיפוקמפוס הוא פגיע במיוחד לאיסכמיה / reperfusion 2. העיצוב של התערבויות טיפוליות, או לימוד של מנגנונים המעורבים בנזק מוחי, מחייב מודל שמייצר נזק דומה למצב הקליני ובאופן שחזור. חסימת כלי דם עורק תרדמה דו צדדי עם ירידה בלחץ דם (2VOH) הוא מודל שמייצר מוח קדמי איסכמיה הפיכה, לחקות את האירועים המוחיים שיכול להתרחש בעת מעצר ובהחייאת לב. אנו מתארים מודל שונה מסמית et al. (1984) 2, כפי שהוצג לראשונה במתכונתו הנוכחית בשנת סנדרסון et al. (2008) 3, אשר מייצר פגיעה לשחזור לאזורים במוח פגיע סלקטיבי 3-6. האמינות של הדגם הזה מוכתבת על ידי שליטה מדויקת של לחץ דם תת לחץ דם מערכתי במהלך מוחל, את משך הזמן של איסכמיה, בקרת טמפרטורה קרובה, משטר הרדמה ספציפי, וטיפול שלאחר הניתוח חרוץ. עלבון איסכמי 8 דקות מייצר מוות של תאי CA1 של נוירונים בהיפוקמפוס שמתקדם לאורך המסלול של 6 עד 24 שעות של reperfusion, ואילו אזורים במוח פחות פגיעים הם חסכו. מוות של תאים מתקדמים זה הוא לכמת בקלות לאחר 7-14 ימים של reperfusion, כאובדן מוחלט כמעט של CA1 עצב ניכר בשלב זה. בנוסף למודל פגיעה מוחית זו, אנו מציגים שיטה לכימות נזק CA1 באמצעות פשוטה, אך יסודית, מתודולוגיה. חשוב מכך, ניתן להשיג כימות באמצעות מיקרוסקופ מצלמה רכוב פשוט,(NIH) תוסף דה החופשי ImageJ תוכנה, מייתר את הצורך בתוכנות Stereology עלות אוסרני ושלב מיקרוסקופי ממונע להערכת נזק.

מודל 2VOH של איסכמיה / reperfusion הגלובלית גורם למוות עצבי באזור CA1 של ההיפוקמפוס. איור 2 מייצג את פגיעה המיוצרת על ידי 8 דקות של איסכמיה המוחית העולמית, מעובד 14 ימים לאחר reperfusion. איורים 2 א ו -2 להשוות hippocampi מאחיזת העיניים ו מוחות פוסט איסכמי, מוכתמים עם סגול cre...

Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

חסימת עורק תרדמה דו צדדית בשילוב עם ירידה בלחץ דם מערכתי מייצרת איסכמיה המוחית העולמית בחולדה, וכתוצאה מכך לנזק ליפוקמפוס בחומרה לשחזור. נושאי בעלי החיים הם לקויים עם דפוסים צפויים של נזק מוחי, הם להתאושש expediently, ושיעורי תמותה הם נמוכים יחסית.

ספיגה של 2 כלי השיט / תת לחץ דם: מודל עכברוש של איסכמיה המוח הגלובלית

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Research

JoVE Journal

Medicine

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MRI-מודרך שיבוש של מחסום דם מוח באמצעות אולטרסאונד ממוקד Transcranial מודל עכברים

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

מודל עכברים של שיבוש מחסום דם מוח כדי לאפשר ממוקד Therapeutics Neurovascular

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

באתרו מדף רוחבי Rectus abdominis Myocutaneous: מודל עכברוש של הפגיעה reperfusion איסכמיה Myocutaneous

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

חמצן גלוקוז קיפוח וReoxygenation כ<em&gt; במבחנה</em&gt; איסכמיה reperfusion פציעת דגם לחוסר תפקוד מחסום דם-המוח לומד

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

דגם שבץ טרומבוטיים בהתבסס על היפוקסיה-איסכמיה מוחית חולפת

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

גרעון מוטורי חוזר לאחר חסימת אבי העורקים במודל חולדה של איסכמיה של חוט השדרה

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

מודל איסכמיה לב כרונית של החזירים באמצעות μ Ameroid

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

הערכת אנגיוגנזה תרפויטי במודל של מורטין של איסכמיה החוצה

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...