Name: 2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

En. Forberedelse Alle dyreforsøk må følge institusjonelle retningslinjer og motta godkjenning av en respektiv dyr omsorg komité før oppstart. Alle prosedyrer som presenteres her har blitt godkjent av Wayne State University Institutional Animal Care og bruk komité og følge retningslinjene på etisk behandling av dyr som fremsatt i Guide for omsorg og bruk av forsøksdyr og den amerikanske regjeringen Prinsipper for Utnyttelse og vedlikehold av virveldyr som brukes i testing, forskning og...

<ol>
	<li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia.">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li><li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia.">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li><li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax/Bcl-XL+binding.">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia.">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li><li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+(PERK)+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins.">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li><li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death.">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li><li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li><li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia,+resuscitation,+and+reperfusion:+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection.">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li><li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion:+a+proposed+biochemical+sequence.">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li><li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation.">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li><li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978 (2011).</li><li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia.">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li><li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest:+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia.">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li><li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia.">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li><li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+by+design:+apoptosis,+necrosis+and+autophagy.">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li><li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia.">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li><li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats.">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li><li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia.">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39 (1999).</li><li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat.">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li><li>Ross, D. T., Ebner, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thalamic+retrograde+degeneration+following+cortical+injury:+an+excitotoxic+process.">Thalamic retrograde degeneration following cortical injury: an excitotoxic process.</a> Neuroscience. 35, 525-550 (1990).</li><li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction.">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li><li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+inhibitor+transiently+reduces+neuronal+death+in+the+thalamus+of+spontaneously+hypertensive+rats+following+cortical+infarction.">Protein synthesis inhibitor transiently reduces neuronal death in the thalamus of spontaneously hypertensive rats following cortical infarction.</a> Neuroscience Letters. 233, 25-28 (1997).</li><li>Wei, L., Ying, D. J., Cui, L., Langsdorf, J., Yu, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrosis,+apoptosis+and+hybrid+death+in+the+cortex+and+thalamus+after+barrel+cortex+ischemia+in+rats.">Necrosis, apoptosis and hybrid death in the cortex and thalamus after barrel cortex ischemia in rats.</a> Brain Research. 1022, 54-61 (2004).</li><li>Zong, W. X., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+death+as+a+cell+fate.">Necrotic death as a cell fate.</a> Genes &amp; Development. 20, 1-15 (2006).</li><li>Ito, U., Spatz, M., Walker, J. T., Klatzo, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+cerebral+ischemia+in+mongolian+gerbils.+I.+Light+microscopic+observations.">Experimental cerebral ischemia in mongolian gerbils. I. Light microscopic observations.</a> Acta Neuropathologica. 32, 209-223 (1975).</li><li>Saver, J. L., Albers, G. W., Dunn, B., Johnston, K. C., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+(STAIR)+recommendations+for+extended+window+acute+stroke+therapy+trials.">Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) recommendations for extended window acute stroke therapy trials.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 40, 2594-2600 (2009).</li><li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury.">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li><li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage:+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin.">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li><li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat.">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li><li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat.">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li><li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model.">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li></ol>

Modellen som er beskrevet her gir en iskemisk hån mot hjernen som kan oppstå som et resultat av hjertestans og gjenoppliving, noe som gir en skade lik den som finnes i mennesker. Denne fremgangsmåte for fremstilling av global hjerne-ischemi er en av flere protokoller. Vi bruker denne protokollen fremst for sin relativt lav dødelighet, rask gjenoppretting, og reproduserbare resultater. Den hjertestans / lungeredning modellen er uten tvil den mest klinisk relevant modell, men teknisk sett mest vanskelig å stadig repr...

Hjerneskade som følge av hjertestans og hjerneslag er en ledende årsak til død og langsiktig uførhet. Mens hjerte-lungeredning for ofre for hjertestans lykkes i å gjenopprette spontan sirkulasjon i ca 70 000 pasienter per år i USA 7,8 minst 60% av disse pasientene senere dør på sykehuset som følge av omfattende hjerneskade og bare 3-10% av gjenopplivet pasienter kan gjenoppta sin tidligere livsstil 9,10. Åpenbart forstå mekanismene som fører til hjerneskade etter global hjerne iskemi og utforme terapeutiske intervensjoner for å redusere nevrologiske traumer er av avgjørende betydning. Hjerne-ischemi kan modelleres benytte flere metoder. Det vanligste er at hjerne-ischemi produsert i gnagere ved å blokkere en vesentlig blodkar i hjernen, den midtre cerebralarterie, og dermed produsere en focal ischemisk slag 11,12. Mens klinisk viktig,fokal hjerne-ischemi er ikke en nøyaktig metode for å studere hjerneskade produsert av hjertestans / lunge-redning. For å modellere denne kliniske paradigmet hele hjernen må gjøres iskemisk etterfulgt av gjeninnføring av blodstrøm. Å nøye etterligne denne kliniske presentasjon, etterforskere eksperimentelt indusere hjertestans etterfulgt av gjenoppliving med HLR og defibrillering 13,14. Denne modellen er klinisk relevant, kan imidlertid uforutsigbare gjenoppliving ganger øke variasjon og kan gjøre dataanalyse vanskelig å tolke. I tillegg er denne modellen forbundet med en høy dødelighet, som ytterligere øker antall dyr er nødvendig for å teste en hypotese. Gransker cerebral respons på global iskemi og / eller reperfusion i en mer reproduserbar, konsekvent og survivable fornærmelse kan bli foretrukket. Global ischemi kan induseres i hjernen og samtidig bevare noen blodstrøm systemisk. Dette reduserer dødeligheten, samtidig som investigation av mekanismene for vevsskade i hjernen to. For å produsere den globale hjerne-ischemi, er det nødvendig å avbryte eller i stor grad begrense strømning i alle fire kar som forsyner hjernen, den indre karotid-arteriene og vertebrale arterier. Disse fartøyene forsyne hjernen med blod flyte gjennom en vaskulær struktur kalt Circle of Willis, som danner en anastomotisk loop. Denne vaskulære arkitekturen gjør hjernen for å beholde perfusjon i tilfelle proksimale vaskulær okklusjon. Derfor må for å indusere fullstendig iskemi i hjernen, blodstrømmen gjennom alle medvirkende fartøyer forekommer. Halspulsåren okklusjon kan oppnås ved hjelp av en minimal invasiv ventral utsnitt ned og anvendelse av aneurisme klipp for en ønsket periode. Avbrudd av blodstrømmen gjennom de vertebrale arterier kan være vanskelig, slik de er incased i tverrgående foramina av virvelsøylen. Etterforskerne har adressert dette ved electrocauterizing ryggvirvel arteries 24-48 hr før carotisokklusjon og hjerne iskemi (4VO modell) 15. I motsetning til denne metode, som er utviklet Smith et al. Metode for å indusere en global hjerne-ischemi ved å redusere det gjennomsnittlige arterielle blodtrykk (MAP) systemisk til 40 mmHg for å redusere perfusjon gjennom de vertebrale arterier til et punkt hvor blodstrømmen er tapt eller sterkt redusert 2 . Når kombinert med carotis okklusjon, produserer denne metoden iskemi hele forhjerne, noe som resulterer i et mønster av hjerneskade som etterligner det av hjertestans overlevende. I en videreutvikling av denne fremgangsmåte, krever modellen presenterer vi her tett MAP regulering ved 30 mmHg ± 1mHg under hele 8 min av iskemi. Vi fant denne endring forbedrer reproduserbarhet av hjerneskade indusert av denne modell og samtidig bevare den lave dødeligheten av den opprinnelige teknikk utviklet av Smith et al. Den nøyaktige fenotype av celledød og totale omfanget av vevsskader forårsaket avden modellen som er presentert her er direkte avhengige av iskemisk varighet 16.. Etter åtte minutter av iskemi, utstillingsområde CA1 nevroner forsinket celledød, noe som tyder på at det er en temporal vindu for terapeutisk intervensjon under reperfusjon fase 15,17. Ved utbruddet av reperfusjon, nevroner raskt gjenvinne funksjon og ingen umiddelbar celledød er synlig 18. Men denne fornærmelse fører til induksjon av celledød kaskader (apoptose) som kulminerer i utgivelsen av apoptogenic proteiner fra mitokondriene, inkludert cytokrom c, mellom 4-6 timer av reperfusjon 3,19. Mellom 6 og 24 timer av reperfusjon, har nevroner av CA1 hippocampus forpliktet til celle død, og celledød ved apoptose programmet kjøres 19. Det bør bemerkes at celledød fenotype ansvarlig for iskemisk skade er svært kontroversiell. Tidlige studier har antydet nekrose er den primære celledød fenotype 20,21, mens andre andre rapporterer apoptosis som rektor mekanismen 22,23. Totalt gjeldende bevis tyder på at celler dør av et spekter av celledød fenotyper som spenner fra klassisk apoptose til nekrose. Den spesifikke modusen for celledød er avhengig av mange faktorer, med graden av bidraget fra hver fenotype, avhengig av alvorlighetsgraden av fornærmelse, blant andre faktorer 24,25. Ved 24-timers av reperfusjon, døende celler besitter pyknotic kjerner, kondensert cytosol med klare bevis for aggregerte cellulære innholdet, og tap av funksjonelle mitokondrie morfologi. Døde celler er videre brutt ned, omsluttet av immunceller som makrofager og / eller microglia, og fjernes fra CA1 hippocampus regionen. Ved 4-7 dager reperfusion, er døde celler fjernes, og alt som gjenstår er betennelsesceller og aktivert gliaceller 17,26. Derfor representerer syv dager reperfusion en optimal tid hvor CA1 hippocampus neuronal død kan kvantifiseres ved hjelp av enkle, ikke-spesifikke celle flekker icluding Cresyl fiolett eller hemotoxylin-eosin og telles basert på morfologiske inklusjonskriteriene. Celler gjenværende på dette sene reperfusion intervall kan regnes som overlevende celler, og dermed gi en indeks for hjerneskade. Ved denne modell er å bli utnyttet for å teste terapeutiske intervensjoner, er det foreslått at den eksperimentell design følge trappetrinn kriterier (Stroke Therapy Academic Industry Roundtable) 27. Disse retningslinjer skal følges ved utforming og gjennomføring av en studie, er imidlertid ikke diskutert her.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Material Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5-0 VICRYL suture, reverse cutting </td>
 <td>Ethicon</td>
 <td>J391H</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Scalpel, No.10</td>
 <td>Swann-Morton</td>
 <td>6601</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Gauze Sponges</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>22-362-178</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18G x 1 &frac12; in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305201</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>23G x 1 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305145</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>26 G x 3/8 in needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>305110</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18 G x 1 &frac14; catheter</td>
 <td>EXEL</td>
 <td>26735</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309659</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309604</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>60 ml syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>309653</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Surgilube</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1152666</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>.9% Saline, plastic IV bag</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1537468</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Suture 3-0 Silk</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>1007842</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Puralube Ophthalmic Ointment</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>3390017</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Betadine</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>6903564</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sterile Towel Drape</td>
 <td>Moore Medical</td>
 <td>14170</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Polyethylene Tubing, 50</td>
 <td>Intramedic</td>
 <td>427411</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Stopcock, 3 way</td>
 <td>Smiths medical</td>
 <td>MX9311L</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Drug Name</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>AERRANE (isoflurane)</td>
 <td>Henry Schein</td>
 <td>2091966</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mapap Liquid (Tylenol)</td>
 <td>Major Pharmaceuticals</td>
 <td>1556</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Kedavet (ketamine)</td>
 <td>Ketathesia Butney</td>
 <td>NDC 50989-996-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Butorphic (butorphanol)</td>
 <td>Lloyd Labs</td>
 <td>4881</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heparin</td>
 <td>APP Pharmaceuticals</td>
 <td>504011</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Chemical Name </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paraformaldehyde prills</td>
 <td>Elecron Microscopy Sci.</td>
 <td>19202</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>2-methylbutane</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>270342</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cresyl Violet Acetate</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>C5042</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sucrose</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>S9378</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Software</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ImageJ</td>
 <td>NIH</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

2-vessel occlusion/hypotension: a rat model of global brain ischemia

Hjertestans etterfulgt av gjenoppliving ofte resulterer i dramatisk hjerneskade forårsaket av ischemi og påfølgende reperfusjon av hjernen. Global hjerne iskemi produserer skade på bestemte områder av hjernen vist seg å være svært følsomme for iskemi en. Hippokampale neuroner har høyere følsomhet for ischemiske fornærmelser sammenlignet med andre cellepopulasjoner, og spesielt er den CA1 regionen av hippocampus særlig utsatt for ischemi / reperfusjon 2.. Utformingen av terapeutiske intervensjoner, eller studie av mekanismene som er involvert i cerebral skade, krever en modell som produserer skade lik den kliniske tilstand, og på en reproduserbar måte. Bilateral carotis fartøy okklusjon med hypotensjon (2VOH) er en modell som produserer reversibel forhjerne iskemi, etterligning cerebrale hendelser som kan oppstå under hjertestans og gjenopplivning. Vi beskriver en modell modifisert fra Smith et al. (1984) 2, Som først ble presentert i sin nåværende form i Sanderson et al. (2008) 3, som produserer reproduserbar skade selektivt sårbare områder av hjernen 3-6. Påliteligheten av denne modellen er diktert av presis kontroll av systemisk blodtrykk under anvendt hypotensjon, varigheten av iskemi, tett temperaturkontroll, en bestemt anestesi diett, og flittig postoperativ omsorg. 8 minutters iskemisk fornærmelse produserer celledød av CA1 hippocampus nevroner som utvikler seg i løpet av 6-24 timer av reperfusjon, mens mindre sårbare områder av hjernen er spart. Denne progressive celledød enkelt kvantifisert etter 7-14 dager med reperfusjon, som et nesten fullstendig tap av CA1-neuroner er tydelig på dette tidspunktet. I tillegg til dette hjerneskade modell, presenterer vi en metode for CA1 skade kvantifisering ved hjelp av en enkel, men grundig, metodikk. Viktigere, kan kvantifisering oppnås ved hjelp av et enkelt kamera montert mikroskop, enda gratis ImageJ (NIH) programvare plugin, obviating behov for kostnadseffektive uoverkommelige stereology programmer og en motorisert mikroskopisk scene for skadevurdering.

Den 2VOH global modell av hjerne-ischemi / reperfusjon forårsaker neuronal død i CA1-regionen av hippocampus. Figur 2 representerer skade produsert ved 8 min for global hjerne-ischemi, behandlet 14 dager etter reperfusjon. Figurene 2A og 2B sammenligner hippocampi fra og forloren post-iskemisk hjerne, farget med Cresyl fiolett. Figur 2A viser en hippocampus fra en humbug-opererte rotte som viser normal morfologi, inkludert et intakt CA1. Figur...

Watch this Scientific Journal Video about 2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia at JoVE.com

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Bilateral carotis okklusjon kombinert med systemisk hypotensjon produserer global hjerne iskemi hos rotte, noe som resulterer i skader på hippocampus med reproduserbare alvorlighetsgrad. Er dyr fag svekket med forutsigbare mønstre av hjerneskade, gjenopprette de hensiktsmessig, og dødelighet er relativt lave.

2-Vessel Okklusjon / Hypotensjon: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Research

JoVE Journal

Medicine

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MR-veiledet Forstyrrelse av blod-hjerne-barrieren ved hjelp Transkraniell fokusert ultralyd i en rotte Model

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

En murint Lukket kiste Modell av myokardiskemi og reperfusjon

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Rotte modell av blod-hjerne barrieren avbrudd i Tillat Målrettet nevrovaskulære Therapeutics

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Tverrgående rectus abdominis myocutaneous Flap: A Rat Modell av myocutaneous Ischemia reperfusjonsskade

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glukose deprivasjon og reoksygenering som en<em&gt; In Vitro</em&gt; Iskemi-reperfusjonskade modell for å studere blod-hjernebarrieren Dysfunction

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

En trombotisk hjerneslag modell basert på Transient Cerebral Hypoksi-iskemi

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Reproducerbart motordefekt etter aortaoklusjon i rottemodell av ryggradssjikt

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

En kronisk hjertesvikt Ischemia modell i svin bruker en Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk Contractility måling av musen hvem arterien bruker Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Vurdering av terapeutiske angiogenese i en murine modell av Hindlimb bentap ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...