Name: the citrobacter rodentium mouse model: studying pathogen and host contributions to infectious colitis
Uploaded: 2013-02-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af driftstilskud til BAV fra Crohns og Colitis Foundation of Canada (CCFC) og den canadiske Institutes for Health Research (CIHR). DK blev finansieret af en afgangselev studentship fra CIHR. BAV er de Børn med tarm-og leversygdomme (CHILD) Foundation Chair of Pediatric IBD Research og Canada Research Chair i Pediatric Gastroenterology.

1. Fremstilling af Citrobacter rodentium Inoculum og oral gavage af mus <ol><li> Forbered og autoklaveres Luria Bertani bouillon (LB). </li><li> Opnå levedygtig C. rodentium fra en frossen glycerol lager og streak på LB agarplade med en steril podning løkke eller pipettespids. Inkuber ved 37 ° C natten over. Inokulere 3 ml sterilt LB-bouillon i en falk kultur rør med kolonier fra LB-plade under anvendelse af en podning løkke eller pipettespids. Fremstilling af inoculum bør ske under anvendelse...

<ol>
	<li>Nell, S., Seurbaum, S., Josenhans, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+microbiota+on+the+pathogenesis+of+IBD:+lessons+from+mouse+infection+models.">The impact of microbiota on the pathogenesis of IBD: lessons from mouse infection models.</a> Nature Reviews Microbiology. 8, 564-577 (2010).</li><li>Cario, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+Receptors+in+Inflammatory+Bowel+Diseases:+A+Decade+Later.">Toll-like Receptors in Inflammatory Bowel Diseases: A Decade Later.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 16 (9), 1583-1597 (2010).</li><li>Eckmann, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Inflammatory+Bowel+Disease.">Animal Models of Inflammatory Bowel Disease.</a> Annals New York Academy of Sciences. , 1027-38 (2006).</li><li>Mundy, R., MacDonald, T. T., Dougan, G., Frankel, G., Wiles, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Citrobacter+rodentium+of+mice+and+man.">Citrobacter rodentium of mice and man.</a> Cellular Microbiology. 7, 1697-1706 (2005).</li><li>Luperchio, S., Schauer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+of+Citrobacter+rodentium+and+transmissible+murine+colonic+hyperplasia.">Molecular pathogenesis of Citrobacter rodentium and transmissible murine colonic hyperplasia.</a> Microbes and Infection. 3 (4), 333-340 (2001).</li><li>Bergstrom, K. S., Sham, H. P., Zarepour, M., Vallance, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+host+responses+to+enteric+bacterial+pathogens:+a+balancing+act+between+resistance+and+tolerance.">Innate host responses to enteric bacterial pathogens: a balancing act between resistance and tolerance.</a> Cellular Microbiology. 14, 475-484 (2012).</li><li>MacDonald, T. T., Frankel, G., Dougan, G., Goncalves, N. S., Simmons, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+defences+to+Citrobacter+rodentium.">Host defences to Citrobacter rodentium.</a> International Journal of Medical Microbiology. 293, 87-93 (2003).</li><li>Borenshtein, D., McBee, M. E., Schauer, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+the+Citrobacter+rodentium+infection+model+in+laboratory+mice.">Utility of the Citrobacter rodentium infection model in laboratory mice.</a> Current Opinion in Gastroenterology. 24, 32-37 (2008).</li><li>Gibson, D. L., Ma, C., Rosenberger, C. M., Bergstrom, K. S. B., Valdez, Y., Huang, J. T., Khan, M. A., Vallance, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+2+plays+a+critical+role+in+maintaining+mucosal+integrity+during+Citrobacter+rodentium-induced+colitis.">Toll-like receptor 2 plays a critical role in maintaining mucosal integrity during Citrobacter rodentium-induced colitis.</a> Cellular Microbiology. 10, 388-403 (2008).</li><li>Dennis, A., Kudo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+p50+subunit+of+NF-&#954;B+is+critical+for+in+vivo+clearance+of+the+non-invasive+enteric+pathogen+Citrobacter+rodentium.">The p50 subunit of NF-&#954;B is critical for in vivo clearance of the non-invasive enteric pathogen Citrobacter rodentium.</a> Infection &amp; Immunity. 76 (11), 4978-4988 (2008).</li><li>Gibson, D. L., Ma, C., Bergstrom, K. S. B., Huang, J. T., Man, C., Vallance, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MyD88+signalling+plays+a+critical+role+in+host+defence+by+controlling+pathogen+burden+and+promoting+epithelial+cell+homeostasis+during+Citrobacter+rodentium-induced+colitis.">MyD88 signalling plays a critical role in host defence by controlling pathogen burden and promoting epithelial cell homeostasis during Citrobacter rodentium-induced colitis.</a> Cellular Microbiology. 10 (3), 618-631 (2008).</li><li>Lebeis, S. L., Bommarius, B., Parkos, C. A., Sherman, M. A., Kalman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TLR+signaling+mediated+by+MyD88+is+required+for+a+protective+innate+immune+response+by+neutrophils+to+Citrobacter+rodentium.">TLR signaling mediated by MyD88 is required for a protective innate immune response by neutrophils to Citrobacter rodentium.</a> Journal of Immunology. 179 (1), 566-577 (2007).</li><li>Bry, L., Brenner, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+of+T+cell+dependent+serum+antibody,+but+not+the+gut-associated+lymphoid+tissue,+for+surviving+acute+mucosal+infection+with+Citrobacter+rodentium,+an+attaching+and+effacing+pathogen.">Critical role of T cell dependent serum antibody, but not the gut-associated lymphoid tissue, for surviving acute mucosal infection with Citrobacter rodentium, an attaching and effacing pathogen.</a> Journal of Immunology. 172 (1), 433-441 (2004).</li><li>Simmons, C. P., Clare, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+role+for+B+lymphocytes+and+CD4++T+cells+in+immunity+to+infection+by+the+attaching+and+effacing+pathogen+Citrobacter+rodentium.">Central role for B lymphocytes and CD4+ T cells in immunity to infection by the attaching and effacing pathogen Citrobacter rodentium.</a> Infection &amp; Immunity. 71 (9), 5077-5086 (2003).</li><li>Ahmed, I., Chandrakesan, P., Tawfik, O., Xia, L., Anant, S., Umar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+Roles+of+Notch+and+Wnt/&#946;-Catenin+Pathways+in+the+Regulation+of+Hyperplasia+and/or+Colitis+in+Response+to+Bacterial+Infection.">Critical Roles of Notch and Wnt/&#946;-Catenin Pathways in the Regulation of Hyperplasia and/or Colitis in Response to Bacterial Infection.</a> Infection &amp; Immunity. 80 (9), 3107-3121 (2012).</li></ol>

Citrobacter rodentium infektion er en værdifuld model til undersøgelse af både smitsom sygdom og colitis hos mus. Denne unikke model giver mulighed for karakterisering af både vært reaktioner såvel som de patogene egenskaber bakterier. De skridt, der er skitseret i denne protokol detalje den vellykkede brug af denne model. Der er flere kritiske skridt i denne protokol at huske på, når der induceres colitis og analysere svarene. For det første fremstillingen af en frisk over...

Infektion med enteriske bakterielle patogener udløser gastrointestinal (GI) inflammation, samt intestinal patologi og patofysiologi, herunder diarré og intestinale epiteliale barriere-dysfunktion. Virulensen mekanismer, hvorved bakterielle patogener koloniserer mavetarmkanalen af ​​deres værter, samt specifikke vært reaktioner, der forsvarer mod sådanne infektioner er dårligt forstået, har dog de seneste fremskridt inden for modellering af enteriske bakterielle infektioner begyndt at hjælpe vores forståelse af disse processer. Enteriske bakterier er også blevet forbundet med inflammatoriske tarmsygdomme (IBDS). The IBDS Crohns Sygdom (CD) og UC er komplekse sygdomme af ukendt ætiologi, karakteriseret ved kronisk intestinal inflammation og vævsbeskadigelse. Mange musemodeller for tarmbetændelse findes, fra spontan inflammation i genetisk modificerede stammer, såsom IL10 - / - mus, til kemiske udfordringer med forbindelser såsom dextran natriumsulfat (DSS) og dinitrobenzene sulfonsyre (DNBS) 1. Det er blevet antaget, at de utilpasset kroniske inflammatoriske responser stede i IBD-patienter udvikler i genetisk modtagelige individer ved unormal påvirkning af den intestinale mucosale immunsystem til enteriske bakterier 2, således studiet af modeller af infektiøs colitis også betydeligt potentiale til at definere potentielt patogene host . svar på enteriske bakterier Citrobacter rodentium induceret colitis er et af de sjældne modeller af infektiøs colitis, der er blevet godt karakteriseret 1,3, hvilket muliggør analysen af værts-reaktioner på enteriske bakterier og en yderligere forståelse af potentielle mekanismer af IBD patogenese, et væsentligt trin i udvikling af nye forebyggende og terapeutiske behandlinger. C. rodentium er en gramnegativ fastgørelse og effacing (A / E), murine specifikke bakterielt patogen, der er tæt forbundet med den vigtige humanepatogener enteropatogene E. coli (EPEC) og entero E. coli (EHEC) 3-8. Familien af ​​A / E patogener tæt vedhæfte til den apikale værtscellemembranen af ​​den coecale og tyktarmsepitel, danner en ikke-invasiv piedestal-lignende struktur af værtscellen. Oral smitte med C. rodentium af 10 8 -10 9 organismer frembringer en robust model for infektiøs colitis kendetegnet ved colon hyperplasi eller forlængelse af krypterne, mononukleær immune celleinfiltration og bægerceller udtømning 3,4. Det oprindelige sted for kolonisering, få timer efter belastning, er på cecal patch, efterfulgt af progression til den distale colon 2 til 3 dage efter infektion 3. Hos immunkompetente musestammer, der clearance af patogenet opnået 3 til 4 uger efter infektion 1,3,4. Imidlertid mange genetisk modificerede stammer, dvs genet deficient eller knockout (- / -) er mus, vist sig at vise increased modtagelighed for infektion resulterer i overdreven skade og / eller kronisk infektion og inflammation 9-14. Brug af denne infektiøs colitis model i disse knockout-stammer, mange mangler medfødte signalproteiner, er blevet uundværlige i afsløre flere værtsproteiner integreret til løsning af intestinal infektion og inflammation.

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagens / Material </td><td> Firma </td><td> Catalog Number </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Luria Broth </td><td> ABM </td><td> G247 </td><td> Tilsæt 25 g LB pulver til 1 I vand. Autoklavér før brug. </td></tr><tr><td> Kvadratisk bundplade med gitter </td><td> Fisher </td><td> 08 til 757-11A </td><td></td></tr><tr><td> Falcon kultur rør </td><td> Sarstedt </td><td> 62.515.006 </td><td></td></tr><tr><td> Pære tippes mavesonde nål </td><td> Fin Science Tools </td><td> 18.060-20 </td><td></td></tr><tr><td> 1 ml sprøjte </td><td> BD Biosciences </td><td> 309.659 </td><td></td></tr><tr><td> 4 kDa FITC-dextran </td><td> Sigma </td><td> FD-4 </td><td></td></tr><tr><td> Citronsyre </td><td> Sigma </td><td> C7129 &lt;/ Td&gt; <td></td></tr><tr><td> Natriumcitrat </td><td> Fisher </td><td> S279-500 </td><td></td></tr><tr><td> Dextrose </td><td> Fisher </td><td> D16.1 </td><td></td></tr><tr><td> Sur citratdextrose </td><td></td><td></td><td> 20 mM ctiric acid, 110 mM natriumcitrat, 5 mM dextrose </td></tr><tr><td> Sort 96-brønds plade </td><td> Fisher </td><td> 07-200-762 </td><td></td></tr><tr><td> Metalkugler (5 mm) </td><td> Qiagen </td><td> 69.989 </td><td></td></tr><tr><td> 10% formalin </td><td> Fisher </td><td> 5F93-4 </td><td></td></tr><tr><td> 5 ml hætteglas </td><td> DIAMED </td><td> STK3205 </td><td></td></tr><tr><td> Hematoxylin </td><td> Fisher </td><td> H345-23 </td><td></td></tr><tr><td> Eosin </td><td> Fisher </td><td> E511-100 </td><td></td></tr><tr><td> Xylen </td><td> Fisher </td><td&gt; HC700-1GAL </td><td></td></tr><tr><td> Tween 20 </td><td> Sigma </td><td> P5927 </td><td></td></tr><tr><td> Coplin farvning krukke </td><td> VWR </td><td> 47751-792 </td><td></td></tr><tr><td> Natriumcitratpuffer </td><td></td><td></td><td> 10 mM natriumcitrat, 0,05% Tween 20, pH 6,0 </td></tr><tr><td> Pap pen </td><td> Cedarlane </td><td> Mu22 </td><td></td></tr><tr><td> Gedeserum </td><td> Sigma </td><td> G902-3 </td><td></td></tr><tr><td> Bovint serumalbumin (BSA) </td><td> Fisher </td><td> BP1600-100 </td><td></td></tr><tr><td> Triton X-100 </td><td> Sigma </td><td> T8532 </td><td></td></tr><tr><td> Natriumazid </td><td> Sigma </td><td> SZ002 </td><td></td></tr><tr><td> Blokeringspuffer </td><td></td><td></td><td> 2% gedeserum, 1% BSA, 0,1% Triton X-100, 0,05% Tween 20, 0,05% natriumazid, 0,01 M PBS, pH 7,2, blandes og opbevares ved 4 ° C. </td></tr><tr><td> Antistoffortynding puffer </td><td></td><td></td><td> 0,1% Triton X-100, 0,1% BSA, 0,05% natriumazid, 0,04% EDTA </td></tr><tr><td> Blokeringsbuffer &amp; antistoffortynding buffer til tir </td><td></td><td></td><td> Samme opskrifter som ovenfor, men uden tilsætning af detergenter (triton X-100 og Tween 20) </td></tr><tr><td> Forlænge Gold antiblegemiddel Reagens med DAPI </td><td> Invitrogen </td><td> P-36931 </td><td></td></tr><tr><td> Dækglas </td><td> Fisher </td><td> 12.54SE </td><td></td></tr><tr><td> Benchtop inkubation shaker </td><td> Barnstead Lab Linje </td><td> Max Q4000 </td><td></td></tr><tr><td> Fluorometer </td><td> Perkin Elmer </td><td> Victor2D </td><td></td></tr><tr><td> Kølecentrifuge </td><td> Beckman Coulter </td><td> Microfuge 22R</td><td></td></tr><tr><td> Steamer </td><td> Black &amp; Decker </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fluorescensmikroskop </td><td> Zeiss </td><td> Axio Image.Z1 </td><td></td></tr></tbody></table>

the citrobacter rodentium mouse model: studying pathogen and host contributions to infectious colitis

Denne protokol beskriver de trin, der kræves for at producere en robust model af smitsomme sygdomme og colitis, samt de metoder, der anvendes til at karakterisere Citrobacter rodentium infektion i mus. C. rodentium er en gramnegativ, murine specifikke bakterielt patogen, der er nært beslægtet med det klinisk vigtige humane patogener enteropatogene E. coli og enterohæmoragisk E. coli. Efter infektion med C. rodentium, immunkompetente mus lider af beskeden og forbigående vægttab og diarré. Histologisk er intestinal krypt forlængelse, immun celle infiltration, og bægeret cellereduktion observeret. Clearance af infektion opnås efter 3 til 4 uger. Måling af intestinal epitelbarrieren integritet, bakteriel belastning, og histologiske skader på forskellige tidspunkter efter infektion, tillader karakteriseringen af ​​musestammer modtagelige for infektion. Virulens mekanismes ved hvilken bakterielle patogener koloniserer tarmkanalen hos deres værter, samt specifikke vært reaktioner, der forsvarer mod sådanne infektioner er dårligt forstået. Derfor C. rodentium model af enterisk bakteriel infektion fungerer som et værdifuldt redskab til at støtte i vores forståelse af disse processer. Enteriske bakterier er også blevet forbundet med inflammatoriske tarmsygdomme (IBDS). Det er blevet antaget, at de utilpasset kroniske inflammatoriske responser set i IBD-patienter udvikler i genetisk modtagelige individer efter unormal påvirkning af den intestinale mucosale immunsystem til enteriske bakterier. Derfor undersøgelse af modeller for infektiøs colitis har et betydeligt potentiale til at definere potentielt patogene vært reaktioner på enteriske bakterier. C. rodentium induceret colitis er en sådan sjælden model, som giver mulighed for analysen af værts-reaktioner på enteriske bakterier, fremme vores forståelse af potentielle mekanismer i IBD patogenese;afgørende for udviklingen af ​​nye forebyggende og terapeutiske behandlinger.

Under en standard infektion eksperiment musene inficeret med cirka 2,5 x 10 8 CFU ved gavage med 100 pi overnight C. rodentium kultur. Infektion af C57BL / 6 mus med C. rodentium resulterer i beskedne og forbigående vægttab og diarré. Selv om en sjælden begivenhed med C57BL / 6 mus, kan dyrene blive syg og kræver aflivning. Derfor bør mus overvåges for graden af ​​vægttab og symptomer på angst, såsom piloerect pels og krum stilling, for at bestemme i hvilket omfang forskellige ...

Watch this Scientific Journal Video about The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis at JoVE.com

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

Citrobacter rodentium infektion tilvejebringer en værdifuld model til at studere enteriske bakterieinfektioner og vært immunresponser og colitis hos mus. Denne protokol beskriver målingen af ​​barriere integritet, patogen belastning og histologisk skade giver mulighed for grundig karakterisering af patogene og vært bidrag til murine infektiøs colitis.

Den<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Model: Undersøgelse Patogen og Host Bidrag til infektiøs colitis

This protocol  outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and  colitis, as well as the methods used to characterize ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

A Comparative Approach to Characterize the Landscape of Host-Pathogen Protein-Protein Interactions

En komparativ tilgang til at karakterisere Landskab værtspatogene protein-protein interaktioner

Significant efforts were gathered to generate  large-scale comprehensive protein-protein interaction network maps. This is  instrumental to understand the ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodalitet Imaging af<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Infektioner i mus

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Brug Klik Chemistry at måle effekten af ​​Viral infektion på Host-celle RNA-syntese

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

En mus Model for Patogen-induceret kronisk inflammation på lokale og systemiske websteder

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

Eksperimentel infektion med<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Som en model til at studere Host Interferon-y Responses

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

En Ex Vivo kylling primære Bursal-cellekultur Model til at studere smitsomme Bursal Disease Virus patogenese

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Using a Bacterial Pathogen to Probe for Cellular and Organismic-level Host Responses

Ved hjælp af en bakteriel patogen til sonden for cellulære og organismens-niveau vært svar

There are a variety of strategies bacterial pathogens employ to survive and proliferate once inside the eukaryotic cell. The so-called 'cytosolic' ...

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Evaluering af vært-patogen svar og Vaccine effekt i mus

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...