Name: vertical t-maze choice assay for arthropod response to odorants
Uploaded: 2013-02-14T13:00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants at JoVE.com

מחקר ההדרים וקרן פיתוח הוא הודו על סיועם. הודות למלאך מיכאל הויט ופלורס לביצוע מבדקים.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסיפה מותאם במיוחד, חלק שני נמל T-olfactometer תואר קודם לכן במאן ואח&#39; 10. מוצג באיור 1. Olfactometer מורכב משפופרת זכוכית 30 סנטימטרים כי הוא מפוצל לשתי יציאות נפרדות עם רצועת טפלון להרכיב T-מבוך. כל מחצית מקבילה לזרוע של olfactometer סגנון 2-בחירה מאפשרת הנבדק לבחור בין שני שדות ריח פוטנציאליים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכבה ולאחר המבחנים אמורים להתרחש בתוך חדר עם הטמפרטורה מבוקרת או קאמרי סביבתית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> olfactometer הר זכוכית T-מבוך האנכי כפי שמוצג באיור 1 ולמקם אותו מתחת לנורת ניאון 900 לוקס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאור פיזור אופטימלי, ההרכבה צריכה להיות מותקנת בתוך 1.0 x 0.6 x 0.6 מ &#39;מכל אטום כדי למקסם את הדיפוזיה אור אחידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את זרועות olfactometer למקורות ריח שישוכנו במייקרו מיצוי אחזקה / ריח המקור chamb מוצק שלבאה (SPMEC) (ARS, Inc, גיינסוויל, פלורידה) דרך טפלון; מחברי צינור זכוכית. כל SPMEC מורכב משפופרת זכוכית ישרה (17.5 סנטימטרים x 3.5 סנטימטרי רוחב) תמכה בכניסה ושסתום פורקן לזרמי אוויר נכנסים ויוצאים (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מערכת אספקת האוויר למקור חיצוני של האוויר ופחמן humidified מטוהר שנמצא תחת לחץ מתמיד (מערכת אספקת האוויר יש גם פילטר פנימי פחם לטיהור אוויר וbubbler אוויר לאידוי אם מקורות חיצוניים אינם זמינים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממס דגימות כימיות רצויות בתוך diluent המתאים (ממס) ופיפטה על מצע שחרור איטי כגון פתיל כותנה (פטי ג&#39;ון אריזה, Inc, קונקורד, צפון קרוליינה). טיפול ביקורת צריך להיות מורכב מפתיל כותנה ספוג ממס בלבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת למנוע זיהום משמעותי של כלי הזכוכית, עוטף את פתילות הכותנה שטופלו ושליטה ברקמת מעבדה (Kimwipes, קימברלי קלארק, רוזוול, GA) ומקום לשתי זרועות SPMEC (ARS, Inc, גיינסוויל, פלורידה). במקרה של דגימות צמחים חיות, קאמרי אוסף הגיליוטינה הפכפכה יכולה להיות מחובר לolfactometer מכיל טיפולים במקום SPMEC (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק מטוהר ואוויר humidified דרך SPMEC (או קאמרי הגיליוטינה נדיף) באמצעות שתי משאבות הקשורים למערכת אספקת אוויר (איור 1). לשמור על קצב זרימת אוויר ברמה של 0.1 ליטר / דקה בשתי זרועות של olfactometer. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העסקת olfactometer לבדוק את התגובה לפרוקי רגלי דוחים משוערים. בתיאור ההווה, חרקי hemipteran, psyllid הדרים האסיאניים, Diaphorina citri, שמש כפרוקי רגלי בדיקה. תגובה נוסתה עד נדיפים הדרים לבד או בשילוב עם (דיסולפיד דימתיל) דוחה ואוויר נקי כמקורות ריח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את כל הניסויים בטמפרטורה אחידה ולחות יחסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני כל הבדיקות, לא תחשוףest נושאים לאוויר נקי לעומת אוויר נקי או אוויר נקי לעומת ממס בolfactometer T-המבוך כדי לוודא היעדר הטית מיקומית או שפעת הממס על התנהגותו של הנבדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת מקור ריח באופן אקראי לאחת מזרועותיו של olfactometer בתחילתו של כל מבדק. היפוך בעמדה זו לאחר כל 10 נבדקים assayed, לכל הפחות, לבטל את הפוטנציאל של הטית מיקומית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את התגובה של מינימום של 30 (ועד 120) נבדקים לשילוב טיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרשה נושאי מבחן 100-300 שניות להפגין תגובה התנהגותית המבוססת על תגובה הוקמה בעבר (חביון) מרווח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השיא אם הנושא נכנס לטיפול זרוע, זרוע שליטה או נשאר בנמל השחרור או מתחת חטיבת T-המבוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבקיע בחירת זרוע טיפול או שליטה כאשר נושא הבדיקה חוצה את החלוקה בT-המבוך ועובר לכל אחת מזרועות olfactometer. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבקיע בחירת זרוע שחרור כאשר מבחן שלubject נשאר בנמל השחרור או מתחת חטיבת T-המבוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה olfactometer וצינורות המחברים יסודיות עם 2% תמיסת סבון ולאפות את רכיבי הזכוכית ב 200 ° F בין השימוש בטיפולי ריח שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למבחנים שבטיפולים דוחים משוערים מוצגים בolfactometer T-המבוך עם או בלי טיפול כימי לעומת אוויר נקי, להשוות את מספר הנבדקים שנותרו בנקודת השחרור ולא להיכנס olfactometer בין טיפולים על ידי ניתוח דרך אחת של שונות ( ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05). במקרים שבו הנבדקים לעזוב את זרוע השחרור, להשוות את מספר בחירת זרוע השליטה לעומת זרוע הטיפול בצ&#39;י מרובע (χ 2) ניתוח בα &lt;0.05. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Resh, R. H., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Insects. , (2003).</li><li>Aluja, M., Lesky, T. C., Vincent, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biorational tree-fruit pest management. , (2009).</li><li>Rodriquez-Saona, C., Stelinski, L. L., Peshin, R., Dhawan, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior-modifying+strategies+in+IPM:+Theory+and+Practice.">Behavior-modifying strategies in IPM: Theory and Practice.</a> Integrated Pest Management: Innovation - Development Process. , 261-311 (2009).</li><li>Card&#233;, R. T., Millar, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in insect chemical ecology. , (2004).</li><li>Knight, A. L., Stelinski, L. L., Hebert, V., Gut, L., Light, D., Brunner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+dispensers+simultaneously+releasing+pear+ester+and+sex+pheromone+for+disruption+of+codling+moth+(Lepidoptera:+Tortricidae).">Novel dispensers simultaneously releasing pear ester and sex pheromone for disruption of codling moth (Lepidoptera: Tortricidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 79-86 (2012).</li><li>Mann, R. S., Tiwari, S., Smoot, J. M., Rouseff, R. L., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repellency+and+toxicity+of+plant-based+essential+oils+and+their+constituents+against+Diaphorina+citri+Kuwayama+(Hemiptera:+Psyllidae).">Repellency and toxicity of plant-based essential oils and their constituents against Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 87-96 (2012).</li><li>Forbes, A. A., Powell, H. Q., Stelinski, L. L., Smith, J. J., Feder, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequential+sympatric+speciation+across+trophic+levels.">Sequential sympatric speciation across trophic levels.</a> Science. 323 (5915), 776-779 (2009).</li><li>Kennedy, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+visual+responses+of+flying+mosquitos.">The visual responses of flying mosquitos.</a> Proceedings of the Zoological Society of London A. 109 (4), 221-242 (1940).</li><li>Miller, J. R., Roelofs, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained-flight+tunnel+for+measuring+insect+responses+to+wind-borne+sex+pheromones.">Sustained-flight tunnel for measuring insect responses to wind-borne sex pheromones.</a> Journal of Chemical Ecology. 4 (2), 187-198 (1978).</li><li>Mann, R. S., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Castle, W. S., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sulfur+volatiles+from+Allium+spp.+affect+Asian+citrus+psyllid,+Diaphorina+citri+Kuwayama+(Hemiptera:+Psyllidae),+response+to+citrus+volatiles.">Sulfur volatiles from Allium spp. affect Asian citrus psyllid, Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae), response to citrus volatiles.</a> Bulletin of Entomological Research. 101 (1), 89-97 (2011).</li><li>Onagbola, E. O., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guava+leaf+volatiles+and+dimethyl+disulfide+inhibit+response+of+Diaphorina+citri+Kuwayama+to+host+plant+volatiles.">Guava leaf volatiles and dimethyl disulfide inhibit response of Diaphorina citri Kuwayama to host plant volatiles.</a> Journal of Applied Entomology. 135 (6), 404-414 (2011).</li><li>Baker, T. C., Linn, C. E., Hummel, H., Miller, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wind+tunnels+in+pheromone+research.">Wind tunnels in pheromone research.</a> Techniques in Pheromone Research. , 75-110 (1984).</li><li>Stelinski, L. L., Rodriguez-Saona, C., Meyer, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+of+foreign+oviposition+marking+pheromone+in+a+multitrophic+context.">Recognition of foreign oviposition marking pheromone in a multitrophic context.</a> Naturwissenschaften. 96 (5), 585-592 (2009).</li><li>G&#246;k&#231;e, A., Stelinski, L. L., Whalon, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+electrophysiological+responses+of+leafroller+moths+to+selected+plant+extracts.">Behavioral and electrophysiological responses of leafroller moths to selected plant extracts.</a> Environmental Entomology. 34 (6), 1426-1432 (2005).</li><li>Ali, J. G., Alborn, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=herbivore-induced+plant+volatile+increases+biological+control+activity+of+multiple+beneficial+nematode+species+in+distinct+habitats.">herbivore-induced plant volatile increases biological control activity of multiple beneficial nematode species in distinct habitats.</a> PLoS ONE. 7 (6), e38146 (2012).</li><li>Mann, R. S., Ali, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+release+of+a+plant+defense+volatile+'deceptively'+attracts+insect+vectors+to+plants+infected+with+a+bacterial+pathogen.">Induced release of a plant defense volatile 'deceptively' attracts insect vectors to plants infected with a bacterial pathogen.</a> PLoS Pathogens. 8 (3), e1002610 (2012).</li></ol>

המחבר זכה למימון שהועמד על ידי מחקר ההדרים וקרן פיתוח.

<html> בזאת, מכשיר בדיקה ופרוטוקול מתואר למדידת התגובה של פרוקי רגליים קטנים (Insecta: Hemiptera: Psyllidae) לodorants. השיטה כרוכה במבחן אמריקאי, המאפשר לחרקים לעשות בחירה בין שני שדות odorant במקרה של מבחני הערכת attractant משוער. יתר על כן, נושא הבדיקה עשוי להציג שלושה סוגים של התנהגויות על ידי השארת זרוע השחרור וכניסה לכל אחד משני תחומי ריח פוטנציאליים, או שנותר בזרוע השחרור, במקרה של מבחני repellency. Olfactometer מאפשר איסוף נתוני תפוקה גבוהה משום שהיא מנצלת את geotactic השלילי (נטייה לנוע כלפי מעלה) וphototactic החיובי (נטייה לנוע לכיוון אור) תגובה התנהגותית טבעית של פרוקי רגליים רבים. למרות ההפגנה הנוכחית משתמשת בדוגמא מבחן חרקי psyllid, assay יכול להיות מותאם בקלות לפרוקי רגליים רחבה, כאלה שמשתמשים בטיסה או הליכה כמצבים דומיננטיים של תחבורה. Olfactometers &quot;jove_content&quot;&gt; המיועד למדידת התגובה של חרקים בתחילה פותחו לפני עשרות שנים ומלאה תפקיד מרכזי בהבהרת מושכים ודוחה חרקים 12. העיצובים הספציפיים של olfactometers כאלה להשתנות במידה רבה, עם זאת, וריאציות על הנושא הכללי של assay שתי הבחירה, כמו גם כפי שמתוארות כאן, מבחנים דומים Y-tube שלעתים קרובות משמשים למדידת תגובת פרוקי רגליים לכימיקלים. מנהרות טיסה גדולות יותר שעלול לגרום לבריחה מתמשכת של חרקים 9 הביאו גם אוסף של נתוני פורצים מאירים את המנגנונים הבסיסיים של טיסה וכיוון חרק semiochemicals, כמו גם, נתונים המודיעים שימוש מעשי בכלי דברה. זה לעתים קרובות יש צורך להתאים את עיצוב olfactometer ומכשור נלווה לביולוגיה של נושא בדיקת פרוקי רגליים המסוימות. olfactometers אלה שיכולים לשמש בקרב קבוצה רחבה של חרקים מועילים יותר מאלה specific לקבוצה קטנה, אך לעתים את המשמעות הכלכלית של קבוצה קטנה של חרקים מכתיבה את הצורך בפיתוח של olfactometer מאוד ספציפיים וטכניקת בדיקה. העיצוב תאר כרגע בונה על טכניקות חרקי העבר מוכרות. זה מאפשר לassay שתי בחירה סטנדרטי יותר מ-Y bioassays צינור שבזירת הניסוי או המבחן האמריקאי לובשת צורה של מכשיר זכוכית בצורת אות V 7. בדרך כלל, זרוע אחת של Y-צינור כזה תקבל odorant טיפול, ואילו השני יישאר ריק 13. וריאציות על olfactometers כאלה עשויות לכלול תוספת של זרועות מרובות חישורים, 14 ואפילו תוספת של אדמה בינונית לassaying ההתנהגות של יצורים הנעים בקרקע 15. בפיתוח olfactometers כאלה מבחנים נלווים, חשוב לשקול כמה הדוק תנאים טבעיים משוכפלים ולכן הרלוונטיות האמיתית של תגובות התנהגותיות הוערכו במונחים של הביולוגיה של הנבדקים. כדי להתואר rge, הנתונים שנאספו יהיה שימושי כמו הרלוונטיות של המבדק התנהגותי ביחס לאקולוגיה התנהגותית של האורגניזם 16 בלבד. Olfactometer תאר כרגע והמבדק ההתנהגותי תוכנן במיוחד עבור חרק hemipteran שנוטה ליזום טיסה כמו &quot;קפיצות&quot; קצרות 16. הכיוון האנכי של olfactometer וסידור מקור האור להקל חניכה של תנועת חרק ולכן התנהגות אורינטציה כימית בתיווך לאחר מכן ניתן assayed ביעילות ובתפוקה גבוהה. הסדר assay התנהגות זו סבירה יכול לשמש למגוון רחב של טיסה או הליכה או מיני פרוקי רגליים יכולים גם להיות שונים בקלות כדי להתאים את הצורך של יצורים שאינם חרקים.

פרוקי רגליים (כולל חרקים ועכבישים) לעתים קרובות מוגדרים כמזיקים, כי הם גם להתחרות עם מאכל אדם בהגדרות חקלאיות או עירוניות או להעביר פתוגנים סיבתיות של מחלה 1. כמות גדולה של השקעה נעשית לפיתוח כלי בקרה למזיקים כאלה. כלים אלה יכולים להשתנות במידה רבה והתקדמות משמעותית נעשתה בפיתוח כלי biorational כי גם לשנות או לנצל את ההתנהגות הטבעית של מזיקים עם השימוש במשיכה או דוחי 2,3 התנהגותיים. מזיקי פרוקי רגליים לעתים קרובות מסתמכים על אותות או רמזי חוש ריח לזוג ו / או מיקום 4 מארח. לכן גילוי של משיכה או דוחים יעילות למזיקים יכול להוביל לעתים קרובות לפיתוח כלי בקרה. תהליך זה של גילוי כרוך במספר שלבים. ראשית, ההתנהגות הטבעית של הנבדק חייבת להיות מובנת. לדוגמה, יש לוודא אם מין אחד ממינים נתונים מושך את ההפךסקס למיקום זוג. אם כך, צריך לקבוע אם משיכה זו מתווכת על ידי חומר כימי והיכן שמיוצר כימי. צעדים נוספים כוללים קביעה מתי הכימי מופק וזיהוי הסופי שלה. במשך כל התהליך, (חרקים או קרדית) התגובה התנהגותית של נושא המבחן לodorants חייבת להיבדק. בתחילה, את ההתנהגות של הנבדק תיבחן לחומר הטבעי. לדוגמה, תגובתו של עש זכר עשויה להיבדק לזה של התמצית של בלוטת הפרומו שלה הנשית conspecific. לחלופין, תגובה של אוכלי עשב לריחות הטבעיים של הצמח הפונדקאי שלו יכולה להיבדק. למרות חקירות אלה יש לעתים קרובות התמקדות מעשית בפיתוח של כלי ניהול 5,6, הם יכולים להיות מיושמים גם על מחקר שעוסק בשאלות עקרוניות יותר, כגון התפצלות 7. השלבים הבאים כרוכים בבדיקת התגובה של פרוקי הרגליים לגרסות סינטטיות של מוצרים טבעיים שזוהו. Understanding כמה פרוקי רגליים מגיבים לכימיקלים מחייב פיתוח של כלים המתאימים כדי למדוד את התנהגותם. הנתונים המופקים על ידי כלים כאלה יהיו תלויים בכמה טובים הוא החוקר הצליח למדוד התנהגויות טבעיות בהגדרה מבוקרת. לפני למעלה משישה עשורים, olfactometers טיסה הממושכת ומנהרות שפותחו כדי למדוד תגובת חרק odorants 8,9. Olfactometers להשתנות באופן משמעותי בעיצוב, ולעתים קרובות הם מותאמים לחרק או הבעיה הספציפי הנחקר. המטרה של מאמר זה היא לתאר את העיצוב ושימוש ב, olfactometer T-מבוך כיוון אנכי למדידת תגובת חרק odorants (איור 1). הכיוון האנכי של olfactometer מנצל geotaxis השלילי (נטייה לנוע למעלה) הוצג על ידי חרקים רבים. מקור אור ממוקם ישירות מעל olfactometer מנצל phototaxis החיובי (נטייה לנוע לכיוון מקור האור) הוצג על ידי חרקים רבים. Olfactometer שימושי במיוחד לחרקי hemipteran שנוטים לא להציג בקלות בתנועה אופקית olfactometers אורינטציה ושהושפעו מאוד מעוצמת האור ביחס לאורינטציה. עם זאת, המכשיר הזה יכול לשמש למגוון רחב של חרקים מעופפים והזוחלים, כמו גם Arachnids. Olfactometer יכול להיות מועסק על מנת להעריך את שני מושכים ודוחה. במקרה של משיכה, שדה הריח המפוצל (איור 1) הוא הקים עם attractant המשוער שוחרר בצד אחד לעומת אוויר נקי שוחרר בצד הנגדי. בחירה נרשמת כאשר החרק שוחרר בבסיס olfactometer בוחר אחד משני שדות הריח. במקרה של דוחים, התנהגות שלישית היא אפשרית. בנוסף לתנועה כלפי מעלה בכל אחד משני שדות הריח, חוסר התנועה כלפי מעלה עשוי להיות מוקלט המציין גירוי שאינו מגיב או הדיפה מגירוי או שדות ריח.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם ציוד </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> שתיים יציאה מחולקת T-olfactometer </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> אף אחד (בהתאמה אישית) </td><td> אם אינן זמין מARS, דרום מדעי (גיינסוויל, פלורידה) גם כיום בונה ומפיצת ציוד כזה. </td></tr><tr><td> מוצק שלב החזקת מייקר חילוץ / קאמרי מקור ריח עם טפלון; מחברי צינור זכוכית. </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> RV-R3 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr><tr><td> מערכת אספקת אוויר </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> HADS-2AFM2C.4 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr><tr><td> גיליוטינה קאמרית </td><td> אנליטי reseקשת מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> L3GP3 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr></tbody></table>

vertical t-maze choice assay for arthropod response to odorants

לאור החשיבות הכלכלית של חרקים ומזיקים כמו Arachnids של גידולים חקלאיים, סביבות עירוניות או כוקטורים של מפעל ומחלות אנושיות, טכנולוגיות שונות מפותחות ככלי בקרה. משנה של כלים אלה מתמקד בשינוי ההתנהגות של פרוקי רגליים על ידי משיכה או דחייה. לכן, פרוקי רגליים הם לעתים קרובות המוקד של חקירות התנהגותיים. כלים שונים פותחו כדי למדוד התנהגות פרוקי רגליים, כולל מנהרות רוח, טחנות טיסה, servospheres, וסוגים שונים של olfactometers. המטרה של הכלים הללו היא למדוד תגובת חרקים או עכבישים לרמזים ויזואליים או לעתים קרובות יותר חוש ריח. Oflactometer T-המבוך האנכי המתואר כאן מודד בחירות שבוצעו על ידי חרקים בתגובה למושכים או דוחים. זהו מכשיר בדיקת תפוקה גבוה שמנצל phototaxis החיובי (משיכה לאור) וgeotaxis השלילי (נטייה ללכת או לעוף כלפי מעלה) הוצג על ידי פרוקי רגליים רבים. Olfactometאה מורכב משפופרת זכוכית 30 סנטימטרים שמחולקת במחצית עם רצועת טפלון להרכיב T-מבוך. כל מחצית משמשת כזרוע של olfactometer מאפשר לנבדקים לבצע בחירה בין שני שדות ריח פוטנציאליים במבחנים המעורבים מושכים. במבחנים הכוללים דוחים, חוסר התגובה נורמלית למושכים ידועים אך ניתן למדוד כמשתנה שלישית.

אטרקציה של הדרי מבוגרי אסיה psyllid (Diaphorina citri) לריחות שלהם נדיפים הלידה המארחת הצמח (הדרים) מתוארת באיור 2 א. באופן משמעותי (α &lt;0.05) יותר מבוגרים בוחרים בזרועו של olfactometer T-המבוך מקבל ריחות מצמחי הדר מתגוררים בהשוואה לשליטה ריקה (אוויר נקי). דוגמה לדחייה מוצגת באיור 2 ב. במקרה זה, את החרקים נחשפו לזרוע אחת נדיפים ההדרים שקבלו T-המבוך, ואילו הזרוע השנייה קבלה נדיפים מצמח הדרים שטופל בדיסולפיד הידוע הדוחה, דימתיל 11. במקרה זה, שלושה סוגים של התנהגויות נצפו. מספר psyllids נעצר בזרוע השחרור ולא להגיב לא הייתה שונים סטטיסטית מהמספר נכנס זרוע קבלת הריחות מצמחי הדר בלבד (איור 2 ב &#39;). עם זאת, אין psyllids נכנס הזרוע המכילה tהוא יארח צמח הפכפך כאשר משותף הציג-עם הדוחה (2B איור). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig1.jpg" /> איור 1. התרשים סכמטי של olfactometer כיוון אנכי T-מבוך הצטרף למערכת מסירת אוויר ומכשירי שחרור טיפול ריח. התרשים הוא עיבוד של איור 1 במאן et al. 10. נושא הבדיקה ממוקם בנפרד לתוך תא שחרורו של T-2-olfactometer מחולק הנמל. הוא נע לכיוון הריחות דרך שסתום שער שמאפשר תנועה כלפי מעלה בשליטה אל olfactometer ומונע מהחרקים זוחלים בחזרה לאזור נקודת השחרור. צינור bifurcates 10 סנטימטרים אחרי ערך השער. תגובה חיובית לריח נרשמת פעם אחת החרק נע 0.5 סנטימטר לצד מסוים של החלוקה. קאמרי אוסף הגיליוטינה ההפכפכה יכול להיות בשימוש במקום המוצק PHAsדואר החזקת מייקר חילוץ / קאמרית מקור ריח (SPMEC) כמקור ריח. <img alt="איור 2" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2.jpg" /> איור 2. תגובה של הדרי מבוגרי אסיה psyllid (Diaphorina citri) לנדיפים מצמחי הדר מארחים לעומת בקרת אוויר נקיה () או נדיפים הדרים לעומת הדרי נדיפים שיתוף שוחרר-עם (דיסולפיד דימתיל) הדוחה (ב &#39;) בכיוון אנכי T מבוך-olfactometer איור 2 א:. ניתוח חד כיווני של שונות (ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05) בוצע כדי להשוות את מספר psyllid ביצוע בחירה בין שתי הזרועות (2 טיפולים, n = 120). עמודות שצוינו על ידי אותיות שונות שונות באופן משמעותי מזו (α &lt;0.05) התרשים 2B:. Analys כיוון אחדהוא שונים (ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05) בוצע כדי להשוות את מספר psyllid ביצוע בחירה בין כל אחת מזרועות או שנותר בנקודת השחרור (3 טיפולים, n = 120). עמודות שצוינו על ידי אותיות שונות שונות באופן משמעותי מזו (α &lt;0.05).

Watch this Scientific Journal Video about Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants at JoVE.com

Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Olfactometer אנכי, T-מבוך מתואר לassaying התגובה התנהגותית של פרוקי רגליים. Olfactometer מאפשר הנסיין למדוד בחירות שבוצעו על ידי נבדקים, כאשר נתון שני שדות ריח פוטנציאליים. שניהם המשיכה ולדחייה מodorants ניתן למדוד במכשיר זה.

Assay בחירה האנכי T-מבוך לתגובת פרוקי רגליים לodorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

An Isolated Retinal Preparation to Record Light Response from Genetically Labeled Retinal Ganglion Cells

הכנה רשתית מבודד להקליט תגובה האור תווית גנטית לתאי הגנגליון ברשתית

The first steps in vertebrate vision take place when light stimulates the rod and cone photoreceptors of the retina 1.  This information is then ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

T-מבוך לסירוגין בכפייה של שמאל וימין משימות אפליה להערכת עבודה וזיכרון העזר עכברים

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Enabling High Grayscale Resolution Displays and Accurate Response Time Measurements on Conventional Computers

הפעלת גווני אפור מציג ברזולוציה גבוהה ומדויקת זמן תגובה מדידות על במחשבים רגילים

Display systems based on conventional computer graphics cards are capable of generating images with 8-bit gray level resolution. However, most experiments ...

Methods to Assay Drosophila Behavior

Methods to Assay Drosophila Behavior

שיטות Assay תסיסנית התנהגות

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

תגובת פרוטוקול חוטם הרחבה לחקירת פלסטיות התנהגות בחרקים: בקשה ליסוד, ביו רפואית, ומחקר חקלאי

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

זיהוי תדר רדיו ווידאו Motion רגיש ביעילות אוטומציה של ההקלטה של ​​התנהגות unrewarded בחירה על ידי צרעות

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

זמן תלויי תגובת הרשת בתגובה לגירוי של תרבויות תאים עצביים על מערכי מיקרו-אלקטרודה

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...

Electroencephalographic, Heart Rate, and Galvanic Skin Response Assessment for an Advertising Perception Study: Application to Antismoking Public Service Announcements

Electroencephalographic, קצב הלב, והערכה בעור על התפיסה פרסום מחקר: ליישום תשדירי שירות תדמית

The evaluation of advertising, products, and packaging is traditionally performed through methods based on self-reports and focus groups, but these ...

Electrophysiological Recording from Drosophila Trichoid Sensilla in Response to Odorants of Low Volatility

Electrophysiological Recording from Drosophila Trichoid Sensilla in Response to Odorants of Low Volatility

הקלטה אלקטרופיזיולוגית מ<em&gt; תסיסנית</em&gt; Trichoid Sensilla בתגובה ריחות של תנודתיות נמוכה

Insects rely on their sense of smell to guide a wide range of behaviors that are critical for their survival, such as food-seeking, predator avoidance, ...

Assay Development for High Content Quantification of Sod1 Mutant Protein Aggregate Formation in Living Cells

פיתוח assay על כימות תוכן גבוהה של היווצרות צבירה של מוטציה בחלבון Sod1 בתאים חיים

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that can be caused by inherited mutations in the gene encoding copper-zinc ...