Name: isolation of human atrial myocytes for simultaneous measurements of ca2+ transients and membrane currents
Uploaded: 2013-07-03T12:00:00
Duration: 10 min 53 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents at JoVE.com

In addition, we thank the cardiac surgeons at Heidelberg University for the provision of human atrial tissue and Claudia Liebetrau, Katrin Kupser and Ramona Nagel for their excellent technical support. Special thanks also to Andy W. Trafford for his helpful suggestions and advice during the establishment of the Ca2+ transient measurements. The authors wish to express their deepest gratitude to the members of the Department of Pharmacology and Toxicology (head: Ursula Ravens) of the Dresden University of Technology for the opportunity they offered us to learn basic techniques and skills in cellular electrophysiology and cardiomyocyte isolation.
The authors' research is supported by the German Research Foundation (Do769/1-1-3), the German Federal Ministry of Education and Research through the Atrial Fibrillation Competence Network (01Gi0204) and the German Centre for Cardiovascular Research, the European Union through the European Network for Translational Research in Atrial Fibrillation (EUTRAF, FP7-HEALTH-2010, large-scale integrating project, Proposal No. 261057) and the European-North American Atrial Fibrillation Research Alliance (ENAFRA) grant of Fondation Leducq (07CVD03).
The schematic overview shown in the video file was produced using Servier medical art.

<ol>
	<li>Wakili, R., Voigt, N., Kaab, S., Dobrev, D., Nattel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+the+molecular+pathophysiology+of+atrial+fibrillation.">Recent advances in the molecular pathophysiology of atrial fibrillation.</a> J. Clin. Invest. 121, 2955-2968 (2011).</li><li>Margaret, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulsation,+migration+and+division+in+dissociated+chick+embryo+heart+cells+in+vitro.">Pulsation, migration and division in dissociated chick embryo heart cells in vitro.</a> Journal of Experimental Zoology. 128, 573-589 (1955).</li><li>Bustamante, J. O., Watanabe, T., Murphy, D. A., McDonald, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+single+atrial+and+ventricular+cells+from+the+human+heart.">Isolation of single atrial and ventricular cells from the human heart.</a> Can. Med. Assoc. J. 126, 791-793 (1982).</li><li>Dobrev, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G-Protein+&#946;3-subunit+825T+allele+is+associated+with+enhanced+human+atrial+inward+rectifier+potassium+currents.">G-Protein &#946;3-subunit 825T allele is associated with enhanced human atrial inward rectifier potassium currents.</a> Circulation. 102, 692-697 (2000).</li><li>Voigt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+phosphorylation-dependent+regulation+of+constitutively+active+and+muscarinic+receptor-activated+IK,ACh+channels+in+patients+with+chronic+atrial+fibrillation.">Differential phosphorylation-dependent regulation of constitutively active and muscarinic receptor-activated IK,ACh channels in patients with chronic atrial fibrillation.</a> Cardiovasc. Res. 74, 426-437 (2007).</li><li>Voigt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+IK,ACh+current+may+contribute+to+clinical+efficacy+of+class+I+and+class+III+antiarrhythmic+drugs+in+patients+with+atrial+fibrillation.">Inhibition of IK,ACh current may contribute to clinical efficacy of class I and class III antiarrhythmic drugs in patients with atrial fibrillation.</a> Naunyn. Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 381, 251-259 (2010).</li><li>Dobrev, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+G+protein-gated+potassium+current+IK,ACh+is+constitutively+active+in+patients+with+chronic+atrial+fibrillation.">The G protein-gated potassium current IK,ACh is constitutively active in patients with chronic atrial fibrillation.</a> Circulation. 112, 3697-3706 (2005).</li><li>Voigt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left-to-right+atrial+inward+rectifier+potassium+current+gradients+in+patients+with+paroxysmal+versus+chronic+atrial+fibrillation.">Left-to-right atrial inward rectifier potassium current gradients in patients with paroxysmal versus chronic atrial fibrillation.</a> Circ. Arrhythm. Electrophysiol. 3, 472-480 (2010).</li><li>Amos, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+between+outward+currents+of+human+atrial+and+subepicardial+ventricular+myocytes.">Differences between outward currents of human atrial and subepicardial ventricular myocytes.</a> J. Physiol. 491 (Pt. 1), 31-50 (1996).</li><li>Feng, J., Xu, D., Wang, Z., Nattel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrarapid+delayed+rectifier+current+inactivation+in+human+atrial+myocytes:+properties+and+consequences.">Ultrarapid delayed rectifier current inactivation in human atrial myocytes: properties and consequences.</a> Am. J. Physiol. 275, H1717-H1725 (1998).</li><li>Voigt, N., Makary, S., Nattel, S., Dobrev, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voltage-clamp-based+methods+for+the+detection+of+constitutively+active+acetylcholine-gated+IK,ACh+channels+in+the+diseased+heart.">Voltage-clamp-based methods for the detection of constitutively active acetylcholine-gated IK,ACh channels in the diseased heart.</a> Methods Enzymol. 484, 653-675 (2010).</li><li>Trafford, A. W., Diaz, M. E., Eisner, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel,+rapid+and+reversible+method+to+measure+Ca2++buffering+and+time-course+of+total+sarcoplasmic+reticulum+Ca2++content+in+cardiac+ventricular+myocytes.">A novel, rapid and reversible method to measure Ca2+ buffering and time-course of total sarcoplasmic reticulum Ca2+ content in cardiac ventricular myocytes.</a> Pflugers Arch. 437, 501-503 (1999).</li><li>Voigt, N., Nattel, S., Dobrev, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proarrhythmic+atrial+calcium+cycling+in+the+diseased+heart.">Proarrhythmic atrial calcium cycling in the diseased heart.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 740, 1175-1191 (2012).</li><li>Hamill, O. P., Marty, A., Neher, E., Sakmann, B., Sigworth, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+patch-clamp+techniques+for+high-resolution+current+recording+from+cells+and+cell-free+membrane+patches.">Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches.</a> Pflugers Arch. 391, 85-100 (1981).</li><li>Voigt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+sarcoplasmic+reticulum+Ca2++leak+and+increased+Na+-Ca2++exchanger+function+underlie+delayed+afterdepolarizations+in+patients+with+chronic+atrial+fibrillation.">Enhanced sarcoplasmic reticulum Ca2+ leak and increased Na+-Ca2+ exchanger function underlie delayed afterdepolarizations in patients with chronic atrial fibrillation.</a> Circulation. 125, 2059-2070 (2012).</li><li>Berry, M. N., Friend, D. S., Scheuer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+and+metabolism+of+intact+muscle+cells+isolated+from+adult+rat+heart.">Morphology and metabolism of intact muscle cells isolated from adult rat heart.</a> Circ Res. 26, 679-687 (1970).</li><li>Farmer, B. B., Mancina, M., Williams, E. S., Watanabe, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+calcium+tolerant+myocytes+from+adult+rat+hearts:+review+of+the+literature+and+description+of+a+method.">Isolation of calcium tolerant myocytes from adult rat hearts: review of the literature and description of a method.</a> Life Sci. 33, 1-18 (1983).</li><li>Zimmerman, A. N., Hulsmann, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paradoxical+influence+of+calcium+ions+on+the+permeability+of+the+cell+membranes+of+the+isolated+rat+heart.">Paradoxical influence of calcium ions on the permeability of the cell membranes of the isolated rat heart.</a> Nature. 211, 646-647 (1966).</li><li>Bielecki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+changes+in+pH+of+the+perfusion+fluid+on+the+occurrence+of+the+calcium+paradox+in+the+isolated+rat+heart.">The influence of changes in pH of the perfusion fluid on the occurrence of the calcium paradox in the isolated rat heart.</a> Cardiovasc. Res. 3, 268-271 (1969).</li><li>Kramer, J. H., Chovan, J. P., Schaffer, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+taurine+on+calcium+paradox+and+ischemic+heart+failure.">Effect of taurine on calcium paradox and ischemic heart failure.</a> Am. J. Physiol. 240, H238-H246 (1981).</li><li>Rich, T. L., Langer, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+depletion+in+rabbit+myocardium.+Calcium+paradox+protection+by+hypothermia+and+cation+substitution.">Calcium depletion in rabbit myocardium. Calcium paradox protection by hypothermia and cation substitution.</a> Circ. Res. 51, 131-141 (1982).</li><li>Isenberg, G., Klockner, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+tolerant+ventricular+myocytes+prepared+by+preincubation+in+a+"KB+medium".">Calcium tolerant ventricular myocytes prepared by preincubation in a "KB medium".</a> Pflugers Arch. 395, 6-18 (1982).</li><li>Diaz, M. E., Trafford, A. W., Eisner, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+exogenous+calcium+buffers+on+the+systolic+calcium+transient+in+rat+ventricular+myocytes.">The effects of exogenous calcium buffers on the systolic calcium transient in rat ventricular myocytes.</a> Biophys. J. 80 (01), 1915-1925 (2001).</li><li>Worthington, K., Worthington, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Worthington Enzyme Manual. , (1993).</li><li>Christ, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology-specific+effects+of+the+IKur/Ito/IK,ACh+blocker+AVE0118+on+ion+channels+in+human+chronic+atrial+fibrillation.">Pathology-specific effects of the IKur/Ito/IK,ACh blocker AVE0118 on ion channels in human chronic atrial fibrillation.</a> Br. J. Pharmacol. 154, 1619-1630 (2008).</li><li>Dobrev, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+downregulation+of+G-protein-coupled+inward+rectifying+K++current+IK,ACh+in+chronic+human+atrial+fibrillation:+decrease+in+GIRK4+mRNA+correlates+with+reduced+IK,ACh+and+muscarinic+receptor-mediated+shortening+of+action+potentials.">Molecular basis of downregulation of G-protein-coupled inward rectifying K+ current IK,ACh in chronic human atrial fibrillation: decrease in GIRK4 mRNA correlates with reduced IK,ACh and muscarinic receptor-mediated shortening of action potentials.</a> Circulation. 104, 2551-2557 (2001).</li><li>Hatem, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+compartments+of+sarcoplasmic+reticulum+participate+in+the+excitation-contraction+coupling+process+in+human+atrial+myocytes.">Different compartments of sarcoplasmic reticulum participate in the excitation-contraction coupling process in human atrial myocytes.</a> Circ. Res. 80, 345-353 (1997).</li><li>Heidbuchel, H., Vereecke, J., Carmeliet, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+different+potassium+channels+in+human+atrium.+Contribution+to+the+basal+potassium+conductance.">Three different potassium channels in human atrium. Contribution to the basal potassium conductance.</a> Circ. Res. 66, 1277-1286 (1990).</li><li>Hove-Madsen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+fibrillation+is+associated+with+increased+spontaneous+calcium+release+from+the+sarcoplasmic+reticulum+in+human+atrial+myocytes.">Atrial fibrillation is associated with increased spontaneous calcium release from the sarcoplasmic reticulum in human atrial myocytes.</a> Circulation. 110, 1358-1363 (2004).</li><li>Molina, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+adenosine+monophosphate+phosphodiesterase+type+4+protects+against+atrial+arrhythmias.">Cyclic adenosine monophosphate phosphodiesterase type 4 protects against atrial arrhythmias.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 59, 2182-2190 (2012).</li></ol>

वर्थिंगटन बायोकेमिकल कार्पोरेशन वीडियो फ़ाइल के उत्पादन की लागत को कवर द्वारा इस प्रकाशन का समर्थन किया. funders कोई अध्ययन डिजाइन में भूमिका, डेटा संग्रह और विश्लेषण, प्रकाशित करने का निर्णय, या पांडुलिपि की तैयारी की थी.

यहाँ हम खुले दिल की सर्जरी के दौर से गुजर रोगियों से प्राप्त सही आलिंद उपांग से मानव आलिंद myocytes के अलगाव के लिए एक विधि का वर्णन है. साइटोसोलिक सीए 2 की माप के लिए इन myocytes उपयोग करने के लिए + हम भंडारण समाधान से EGTA omitting द्वारा एक पहले से वर्णित विधि 4-11 रूपांतरित किया. पहले से ही 1970 में यह myocytes + पाचन के दौरान 2 सीए की उपस्थिति में अलग कर देना है, हालांकि उनमें से सब इसलिए contracture और अलाभकारी. 16,17 में थे कि मनाया गया, सेल अलगाव सीए 2 + मुक्त समाधान में किया जाता है. हालांकि, 2 सीए के शारीरिक सांद्रता की फिर से शुरूआत + तेजी सीए 2 + में बाढ़ और कोशिका मृत्यु हुई. यह मूल रूप से Zimmerman और Hulsman द्वारा perfused दिलों में मनाया गया, जिसमें सीए 2 + विरोधाभास घटना के रूप में वर्णित किया गया है. 7.0 पीएच की कमी, सहित अलगाव मीडिया के 18 संशोधनों &lt;taurin 20 का या सीए 2 + (3.2 कदम और 4.1 देखें), 21 के साथ ही भंडारण समाधान 22 युक्त EGTA में पृथक myocytes के भंडारण की थोड़ी मात्रा के&gt; 19 अतिरिक्त समर्थन सीए 2 + विरोधाभास. 17 को रोकने के लिए सुझाव दिया गया है हालांकि, यह अच्छी तरह से सीए 2 + EGTA माध्यम बफरिंग एल प्रकार 2 सीए के आयाम + वर्तमान प्रेरित सीए 2 + क्षणिक आयाम और सीए 2 + यात्रियों की एक Biphasic क्षय में परिणाम कम कर देता है कि जाना जाता है. 23 इसलिए, हम EGTA लोप विशिष्ट गुण और monophasic decays के साथ सीए 2 + यात्रियों को प्राप्त करने के क्रम में पूरे अलगाव प्रक्रिया के दौरान. सीए 2 से कोशिकाओं की रक्षा करने के लिए + विरोधाभास हम 0.2 मिमी तक एक चरणबद्ध तरीके से भंडारण समाधान के अंतिम सीए 2 + एकाग्रता में वृद्धि हुई. collagenase के चुनाव शायद सफल myocyte अलगाव के लिए सबसे महत्वपूर्ण कदम है. पारंपरिक महाagenases क्लोस्ट्रीडियम histolyticum से प्राप्त कच्चे तेल की तैयारी कर रहे हैं और अन्य proteinases, polysaccharidases और lipases के एक नंबर के अलावा collagenase होते हैं. उनके सामान्य संरचना collagenases के आधार पर विभिन्न प्रकार में विभाजित किया जाता है. 24 वर्थिंगटन collagenase प्रकार मैं और द्वितीय सफलतापूर्वक हमारे वर्तमान में वर्णित प्रोटोकॉल में मानव आलिंद myocytes से अलगाव. 4-10,15,25-30 के लिए इस्तेमाल किया गया है हम collagenase के इस्तेमाल की सिफारिश हम भी collagenase प्रकार द्वितीय का उपयोग कर व्यवहार्य कोशिकाओं की स्वीकार्य मात्रा में प्राप्त करने में सक्षम थे, हालांकि मैं टाइप करें. हालांकि, एक भी collagenase प्रकार के भीतर एंजाइम की गतिविधियों के बारे में एक महत्वपूर्ण बैच को बैच भिन्नता है. इन बदलावों सावधान बैच चयन और अलगाव की प्रक्रिया का अनुकूलन करने के लिए विभिन्न बैचों के परीक्षण की आवश्यकता होती है. वर्थिंगटन बायोकेमिकल कार्पोरेशन (से ऑनलाइन उपलब्ध बैच चयन उपकरण <a href="http://www.worthington-biochem.com/cls/match.php" target="_blank">http://www.worthington-bio</a>chem.com / CLS / match.php) मानव आलिंद myocytes के अलगाव के लिए उपयुक्त होना दिखाया गया है कि एक रचना के साथ उपलब्ध बैचों को खोजने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. वर्तमान में हम collagenase 250 यू / मिलीग्राम collagenase गतिविधि, 345 यू / मिलीग्राम caseinase गतिविधि, 2.16 यू / मिलीग्राम clostripain गतिविधि और 0.48 यू / मिलीग्राम tryptic गतिविधि (बहुत # 49H11338) के साथ मैं प्रकार का उपयोग करें. इस पांडुलिपि में वर्णित प्रक्रिया का उपयोग कर प्राप्त कोशिकाओं पैच दबाना पढ़ाई, सीए 2 + क्षणिक माप और इसके अलावा दोनों. 15 का एक संयोजन के लिए 8 घंटे के भीतर इस्तेमाल किया जा सकता है, इन कोशिकाओं को बिजली के क्षेत्र उत्तेजना के जवाब में सेलुलर संकुचन की माप की अनुमति या बिजली उत्तेजना पैच दबाना पिपेट (अप्रकाशित टिप्पणियों) का उपयोग कर.

पैच दबाना तकनीक और + हैंडलिंग असामान्यताएं अलग cardiomyocytes की आवश्यकता सेलुलर 2 सीए के अन्वेषण के साथ हृदय आयन चैनल के electrophysiological गुणों का अध्ययन. ये आमतौर पर पाचन एंजाइमों को हृदय के ऊतकों के नमूनों की इन विट्रो जोखिम (collagenase, hyaluronidase, पेप्टिडेज़ आदि) के बाद प्राप्त कर रहे हैं. 1955 2 में व्यवहार्य हृदय myocytes के अलगाव की पहली रिपोर्ट के बाद से प्रोटोकॉल की एक बड़ी मात्रा माउस, चूहे, खरगोश, कुत्ता, गिनी पिग और मानव सहित विभिन्न प्रजातियों में से एक आलिंद और निलय cardiomyocytes की फसल के लिए आदेश में विकसित किया गया है. इस समीक्षा में हम मानव आलिंद myocytes के अलगाव पर ध्यान देते हैं. हम वर्थिंगटन बायोकेमिकल कार्पोरेशन, संयुक्त राज्य अमेरिका (द्वारा प्रदान &quot;वर्थिंगटन ऊतक हदबंदी गाइड &#39;का उल्लेख करने के अन्य प्रजातियों से myocytes के अलगाव के लिए प्रक्रियाओं के बारे में <a href="http://www.tissuedissociation.com" target="_blank">www.tissuedissociation.com</a> ). एट अल. 3 से वर्णित विधि से प्राप्त कर रहे हैं पैच दबाना प्रयोगों के लिए, लेकिन यह भी एक साथ intracellular सीए 2 + मापन के लिए न केवल उपयुक्त आलिंद myocytes प्राप्त करते हैं. 4-11

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td> &nbsp;</td>
 <td> &nbsp;</td>
 <td> &nbsp;</td>
 <td>Transport solution</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Albumin</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A3059</td>
 <td>Storage solution: 1%</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>BDM</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>31550</td>
 <td>Transport solution: 30</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DL-b-Hydroxy-butyric acid</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>H6501</td>
 <td>Storage solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glucose</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>G8270</td>
 <td>Transport solution: 20 
 Ca2+-free solution: 20 
 Enzyme solution E1 and E2: 20 
 Storage solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>L-Glutamic acid</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>G1251</td>
 <td>Storage solution: 70</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>KCl</td>
 <td>Merck</td>
 <td>1049360250</td>
 <td>Transport solution: 10 
 Ca2+-free solution: 10 
 Enzyme solution E1 and E2: 10 
 Storage solution: 20</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>KH2PO4</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>P5655</td>
 <td>Transport solution: 1.2 
 Ca2+-free solution: 1.2 
 Enzyme solution E1 and E2: 1.2 
 Storage solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MgSO4</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>M9397</td>
 <td>Transport solution: 5 
 Ca2+-free solution: 5 
 Enzyme solution E1 and E2: 5</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MOPS</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>M1254</td>
 <td>Transport solution: 5 
 Ca2+-free solution: 5 
 Enzyme solution E1 and E2: 5</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>NaCl</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>S3014</td>
 <td>Transport solution: 100 
 Ca2+-free solution: 100 
 Enzyme solution E1 and E2: 100</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Taurin</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>86330</td>
 <td>Transport solution: 50 
 Ca2+-free solution: 50 
 Enzyme solution E1 and E2: 50 
 Storage solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Collagenase I</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>4196</td>
 <td>Enzyme solution E1 and E2: 286 U/ml</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Protease XXIV</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>P8038</td>
 <td>Enzyme solution E1 and E2: 5 U/ml*</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Transport solution: 7.00 
 Ca2+-free solution: 7.00 
 Enzyme solution E1 and E2: 7.00 
 Storage solution: 7.40</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>adjusted with</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Transport solution: 1 M NaOH 
 Ca2+-free solution: 1 M NaOH 
 Enzyme solution E1 and E2: 1 M NaOH 
 Storage solution: 1 M KOH</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Concentrations in mM unless otherwise stated. BDM, 2,3-Butanedione monoxime. *Protease XXIV is included in Enzyme solution E1 only.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Table I. Solutions.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Nylon mesh (200 &mu;m)</td>
 <td>VWR-Germany</td>
 <td>510-9527</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Jacketed reaction beaker</td>
 <td>VWR</td>
 <td>KT317000-0050</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Table II. Specific equipment.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dimethyl-sulphoxide</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>D2650</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fluo-3 AM (special packaging)</td>
 <td>Invitrogen</td>
 <td>F-1242</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Pluronic F-127</td>
 <td>Invitrogen</td>
 <td>P6867</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Table III. Substances for loading of myocytes with Fluo-3 AM.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Bath solution</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>4-aminopyridine*</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A78403</td>
 <td>Bath solution: 5</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>BaCl2*</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>342920</td>
 <td>Bath solution: 0.1</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>CaCl2 &times; 2H2O</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>C5080</td>
 <td>Bath solution: 2</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glucose</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>G8270</td>
 <td>Bath solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>HEPES</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>H9136</td>
 <td>Bath solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>KCl</td>
 <td>Merck</td>
 <td>1049360250</td>
 <td>Bath solution: 4</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MgCl &times; 6H2O</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>M0250</td>
 <td>Bath solution: 1</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>NaCl</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>S3014</td>
 <td>Bath solution: 140</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Probenecid</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>P8761</td>
 <td>Bath solution: 2</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Bath solution: 7.35</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>adjusted with</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Bath solution: 1 M HCl</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Table IV. Bath solution for patch-clamp. *4-aminopyridine and BaCl were included for voltage-clamp experiments only.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Pipette solution</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DL-aspartat K+-salt</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A2025</td>
 <td>Pipette solution: 92</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>EGTA</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>E4378</td>
 <td>Pipette solution: 0.02</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>GTP-Tris</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>G9002</td>
 <td>Pipette solution: 0.1</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>HEPES</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>H9136</td>
 <td>Pipette solution: 10</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>KCl</td>
 <td>Merck</td>
 <td>1049360250</td>
 <td>Pipette solution: 48</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MgATP</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A9187</td>
 <td>Pipette solution: 1</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Na2ATP</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>A2383</td>
 <td>Pipette solution: 4</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fluo-3**</td>
 <td>Invitrogen</td>
 <td>F3715</td>
 <td>Pipette solution: 0.1</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>7.20</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>adjusted with</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>1 M KOH</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>Table V. Pipette solution for patch-clamp*. *On experimental days pipette solution is stored on ice until use. **Fluo-3 is added from a 1 mM stock solution on experimental days.</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

isolation of human atrial myocytes for simultaneous measurements of ca2+ transients and membrane currents

पैच दबाना तकनीक और हृदय सेलुलर 2 सीए के अन्वेषण के साथ हृदय आयन चैनल के electrophysiological गुणों का अध्ययन + निपटने असामान्यताएं अलग cardiomyocytes की आवश्यकता है. इसके अलावा, इन तकनीकों का उपयोग कर रोगियों से myocytes की जांच करने की संभावना ऐसे अलिंद (वायुसेना) के रूप में हृदय रोगों की आणविक आधार को स्पष्ट करने के लिए एक अमूल्य आवश्यकता है. यहाँ 1 हम दोनों के लिए उपयुक्त हैं जो मानव आलिंद myocytes के अलगाव के लिए एक विधि का वर्णन पैच दबाना पढ़ाई और intracellular सीए 2 + सांद्रता का एक साथ माप. सबसे पहले, ओपन हार्ट सर्जरी के दौर से गुजर रोगियों से प्राप्त सही आलिंद उपांग छोटे ऊतक हिस्सा (&quot;हिस्सा विधि&quot;) में कटा और + मुक्त समाधान 2 सीए में धो रहे हैं. तब ऊतक मात्रा 20 माइक्रोन सीए 2 + के साथ समाधान युक्त collagenase और प्रोटीज में पचा रहे हैं. इसके बाद अलग myocytes harve हैंऊतक निलंबन की निस्पंदन और centrifugation द्वारा sted. अंत में, सेल भंडारण समाधान में सीए 2 + एकाग्रता 0.2 मिमी तक चरणबद्ध निकाला जाता है. हम संक्षेप + और ​​सीए 2 + अलगाव की प्रक्रिया के दौरान बफरिंग और भी कार्रवाई क्षमता और झिल्ली धाराओं के प्रतिनिधि रिकॉर्डिंग प्रदान करते हैं, दोनों एक साथ एक साथ सीए 2 + क्षणिक माप, इन अलग myocytes में प्रदर्शन के साथ 2 सीए के अर्थ पर चर्चा की.

चित्रा 2A पृथक मानव अधिकार आलिंद myocytes से तीन प्रतिनिधि उदाहरण दिखाता है. हम एक CellFinder खुर्दबीन स्लाइड (पर सेल निलंबन (कदम 5.5) का 10 μl विंदुक सेल उपज यों <a href="http://www.antenna.nl/microlab/index-uk.html" target="_blank">http://www.antenna.nl/microlab/index-uk.html</a> ). 16.5 ± 3.1 cells/10 μl (एन 29 =) बनाम 5.1 ± 2.3 cells/10 μl: चित्रा 2B में औसतन सेल पैदावार स्पष्ट रूप से पुरानी वायुसेना (सीएएफ) में कम सेल पैदावार की प्रवृत्ति रोगी के नमूने (ट्यूब एक संकेत मिलता है कि (एन = 10) क्रमश: एसआर और सीएएफ में, पी &lt;0.05, ट्यूब बी: 17.9 ± 3.9 cells/10 μl (एन 29 =) बनाम 5.9 ± एसआर और सीएएफ में 2.0 cells/10 μl (एन = 9), क्रमशः, पी = 0.107). एक्शन से संभावित माप और साइटोसोलिक सीए 2 + यात्रियों के एक साथ रिकॉर्डिंग के प्रतिनिधि उदाहरण चित्रा 3 में दिए गए हैं. जांच की कोशिकाओं, टी के 90% के बारे मेंवह एक्शन से संभावित ट्रिगर सीए 2 + रिहाई स्पष्ट और नियमित रूप से सेल संकुचन का कारण बनता है. जैसा कि पहले बताया, सेल अखंडता के लिए एक स्वीकृत सूचक है जो आराम झिल्ली क्षमता, -73.9 बारे में औसतन ± 2.7 एम वी (एन = 23/10 myocytes / रोगियों) और -77.7 ± 1.8 एम वी (एन = 19/8 myocytes / रोगियों ) क्रमश एसआर और सीएएफ (पी&gt; 0.05) में. 15 चित्रा 4 वोल्टेज gated एल प्रकार सीए 2 + धाराओं और साइटोसोलिक सीए 2 + यात्रियों के प्रतिनिधि एक साथ रिकॉर्डिंग से पता चलता है. गैर चयनात्मक β-adrenoceptor एगोनिस्ट isoprenaline (1 माइक्रोन) के आवेदन बरकरार β-एड्रीनर्जिक संकेत पारगमन झरना, सुझाव है कि मैं सीए, एल और साइटोसोलिक सीए 2 + यात्रियों दोनों के आयाम बढ़ जाती है. <img alt="चित्रा 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50235/50235fig1.jpg" /> एफigure 1. myocytes Fluo-3 का फ्लो चार्ट (कदम 6.1-6.5 देखें) प्रोटोकॉल लोड हो रहा हूँ. एम / वी, जन / मात्रा. <img alt="चित्रा 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50235/50235fig2.jpg" /> चित्रा 2. भंडारण समाधान में एक घंटे के बाद एक, पृथक मानव अधिकार आलिंद myocytes. बी, भंडारण समाधान में कोशिकाओं के 10 μl में गिना सेल उपज का ± SEM (कदम 5.5 देखें) मतलब. एन प्रत्येक समूह के भीतर तैयारियों की संख्या दर्शाता है. * पी &lt;0.05. <img alt="चित्रा 3" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50235/50235fig3.jpg" /> एक्शन से संभावित ट्रिगर 2 सीए एक साइनस लय से एक आलिंद myocyte में + यात्रियों (कैट) और एक chr की चित्रा 3. प्रतिनिधि रिकॉर्डिंगonic अलिंद रोगी. ऊपर: इंजेक्शन उत्तेजना (0.5 हर्ट्ज) के लिए इस्तेमाल वर्तमान झिल्ली (मैं एम). नीचे: झिल्ली क्षमता (वी एम), और चालू होने वाले कैट (नीचे) की एक साथ रिकॉर्डिंग. (वोइट एट अल से अनुमति के साथ Replotted. 2012) 15 <img alt="चित्रा 4" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50235/50235fig4.jpg" /> एल प्रकार 2 सीए पर isoprenaline (1 माइक्रोन) प्रभाव का आंकड़ा 4. प्रतिनिधि रिकॉर्डिंग + वर्तमान ट्रिगर 2 सीए एक साइनस लय और एक पुरानी अलिंद रोगी से एक आलिंद myocyte में + यात्रियों (कैट). टॉप: वोल्ट दबाना प्रोटोकॉल (0.5 हर्ट्ज). नीचे: वर्तमान कुल शुद्ध झिल्ली की एक साथ रिकॉर्डिंग (मैं एम), मुख्य रूप से एल प्रकार सीए 2 + वर्तमान (मध्य) और ट्रिगर कैट (नीचे) को दर्शाती है. (वोइट से अनुमति के साथ Replotted,एट अल. 2012) 15 <img src="/files/ftp_upload/50235/50235table1.jpg" alt="तालिका 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235table1highres.jpg" /> टेबल मैं समाधान. <img src="/files/ftp_upload/50235/50235table2.jpg" alt="तालिका 2" fo:content-width="2in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235table2highres.jpg"/> तालिका II. विशिष्ट उपकरण. <img src="/files/ftp_upload/50235/50235table3.jpg" alt="तालिका 3" fo:content-width="2in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235table3highres.jpg"/> टेबल तृतीय. Fluo-3 के साथ myocytes की लोडिंग के लिए पदार्थ AM. <img src="/files/ftp_upload/50235/50235table4.jpg" alt="तालिका 4" fo:conteNT के चौड़ाई = &quot;2.5in&quot; के लिए: src = &quot;/ files/ftp_upload/50235/50235table4highres.jpg&quot; /&gt; टेबल चतुर्थ. पैच दबाना के लिए स्नान समाधान. <img src="/files/ftp_upload/50235/50235table5.jpg" alt="5 तालिका" fo:content-width="2.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50235/50235table5highres.jpg"/> पैच दबाना * के लिए टेबल वी. पिपेट समाधान.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents at JoVE.com

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

हम intracellular सीए के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है जो मानव आलिंद myocytes के अलगाव का वर्णन<sup&gt; 2</supElectrophysiological पैच दबाना अध्ययन के साथ संयोजन में&gt; माप.

सीए के एक साथ माप के लिए मानव आलिंदी myocytes का अलगाव<sup&gt; 2</sup&gt; यात्रियों और झिल्ली धाराओं

The study of  electrophysiological properties of cardiac ion channels with the patch-clamp  technique and the exploration of cardiac cellular Ca2+ ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

Isolation and Genetic Manipulation of Adult Cardiac Myocytes for Confocal Imaging

Confocal इमेजिंग के लिए वयस्क कार्डिएक Myocytes के आनुवंशिक हेरफेर अलगाव

Cardiac myocytes isolated from adult hearts are widely accepted as a model somewhere half way between embryonic and neonatal muscle cells on one side and ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Ca इमेजिंग तकनीक के लिए 2 + मानव शुक्राणु में संकेतन

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Isolation and Kv Channel Recordings in Murine Atrial and Ventricular Cardiomyocytes

और murine अलिंद और Ventricular cardiomyocytes में अलगाव केवी चैनल रिकॉर्डिंग

KCNE genes encode for a small family of Kv channel ancillary subunits that form heteromeric complexes with Kv channel alpha subunits to modify their ...

Isolation of Mitochondria from Minimal Quantities of Mouse Skeletal Muscle for High Throughput Microplate Respiratory Measurements

उच्च Throughput Microplate श्वसन माप के लिए माउस कंकाल की मांसपेशी की कम मात्रा से माइटोकॉन्ड्रिया के अलगाव

Dysfunctional skeletal muscle mitochondria play a role in altered metabolism observed with aging, obesity and Type II diabetes. Mitochondrial ...

Development and Characterization of In Vitro Microvessel Network and Quantitative Measurements of Endothelial [Ca2+]i and Nitric Oxide Production

Development and Characterization of In Vitro Microvessel Network and Quantitative Measurements of Endothelial [Ca2+]i and Nitric Oxide Production

विकास और की विशेषता<em&gt; इन विट्रो</em&gt; Microvessel नेटवर्क और endothelial की मात्रात्मक मापन [सीए<sup&gt; 2 +</sup&gt;]<sub&gt; मैं</sub&gt; और नाइट्रिक ऑक्साइड उत्पादन

Endothelial cells (ECs) lining the blood vessel walls in vivo are constantly exposed to flow, but cultured ECs are often grown under static conditions and ...

Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

वयस्क चूहों से अलगाव, संस्कृति, और sinoatrial नोड myocytes के कार्यात्मक विशेषताओं के लिए तरीके

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). ...

Simultaneous Measurement of Mitochondrial Calcium and Mitochondrial Membrane Potential in Live Cells by Fluorescent Microscopy

Mitochondrial कैल्शियम और mitochondrial झिल्ली के साथ माप फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा जीवित कोशिकाओं में संभावित

Apart from their essential role in generating ATP, mitochondria also act as local calcium (Ca2+) buffers to tightly regulate intracellular Ca2+ ...

Simultaneous Mapping and Quantitation of Ribonucleotides in Human Mitochondrial DNA

मानव Mitochondrial डीएनए में Ribonucleotides की एक साथ मैपिंग और Quantitation

Established approaches to estimate the number of ribonucleotides present in a genome are limited to the quantitation of incorporated ribonucleotides using ...

Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

हौसले से अलग और बरकरार माउस सेरेब्रल Endothelium में Intracellular कैल्शियम और झिल्ली क्षमता का एक साथ माप

Cerebral arteries and their respective microcirculation deliver oxygen and nutrients to the brain via blood flow regulation. Endothelial cells line the ...

Preparation and Utilization of Freshly Isolated Human Detrusor Smooth Muscle Cells for Characterization of 9-Phenanthrol-Sensitive Cation Currents

9-फेनांथ्रोल-संवेदनशील Cation धाराओं के लक्षण वर्णन के लिए हौसले से अलग मानव Detrusor चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं की तैयारी और उपयोग

Detrusor smooth muscle (DSM) cells present within the urinary bladder wall ultimately facilitate urine storage and voiding. Preparation of the viable, ...