Name: endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope
Uploaded: 2014-04-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope at JoVE.com

En Merit Grant från Department of Veteran Affairs och en T32-HL098062 bidrag från NHLBI av National Institutes of Health stött detta arbete. Vi vill tacksamt erkänna råd från Randolph H. Hasting, MD, Ph.D. samt råd och stöd i Veterinary Medical enhet för VA San Diego Healthcare System.

1. Djurpreparering <ol><li> Skaffa möss som är äldre än 8 veckor och mer än 20 g (mindre möss kan intuberade av en expert). </li><li> Anestesi <ol><li> Injicera möss med 20 mg / kg, var och en, av ketamin och xylazin intraperitonealt som en preanesthetic. (Denna dos är tillräcklig för att helt söva musen, men underlättar säker överföring, efter intubation, till mekanisk ventilation.) Kan dock justering av doser vara nödvändiga enligt anestesisvar i samråd med den institutionella veterinär.) </li><li...

<ol>
	<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. natl. Acad. Sci. U.S.A. 88, 8277-8281 (1991).</li><li>Watanabe, A., Hashimoto, Y., Ochiai, E., Sato, A., Kamei, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+confirming+correct+endotracheal+intubation+in+mice.">A simple method for confirming correct endotracheal intubation in mice.</a> Lab. Anim. 43, 399-401 (2009).</li><li>Orebaugh, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Succinylcholine:+adverse+effects+and+alternatives+in+emergency+medicine.">Succinylcholine: adverse effects and alternatives in emergency medicine.</a> Am. J. Emerg. Med. 17, 715-721 (1999).</li><li>Hastings, R. H., Summers-Torres, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Laryngoscopy+in+Mice.">Direct Laryngoscopy in Mice.</a> Contemp. Lab. Anim. Sci. 38, 33-35 (1999).</li><li>Berul, C. I., Aronovitz, M. J., Wang, P. J., Mendelsohn, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+cardiac+electrophysiology+studies+in+the+mouse.">In vivo cardiac electrophysiology studies in the mouse.</a> Circulation. 94, 2641-2648 (1996).</li><li>Ewart, S. L., Gavett, S. H., Margolick, J., Wills-Karp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclosporin+A+attenuates+genetic+airway+hyperresponsiveness+in+mice+but+not+through+inhibition+of+CD4++or+CD8++T+cells.">Cyclosporin A attenuates genetic airway hyperresponsiveness in mice but not through inhibition of CD4+ or CD8+ T cells.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 627-634 (1996).</li><li>Ewart, S. L., Mitzner, W., DiSilvestre, D. A., Meyers, D. A., Levitt, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Airway+hyperresponsiveness+to+acetylcholine:+segregation+analysis+and+evidence+for+linkage+to+murine+chromosome+6.">Airway hyperresponsiveness to acetylcholine: segregation analysis and evidence for linkage to murine chromosome 6.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 487-495 (1996).</li><li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Lab. 41, 128-135 (2007).</li><li>Boll, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+single-breath-hold+micro-computed+tomography+of+thoracic+and+abdominal+structures+in+mice+using+a+simplified+method+for+intubation.">High-speed single-breath-hold micro-computed tomography of thoracic and abdominal structures in mice using a simplified method for intubation.</a> J. Comput. Assist. Tomogr. 34, 783-790 (2010).</li><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).</li><li>Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Video-assisted+orotracheal+intubation+in+mice.">Video-assisted orotracheal intubation in mice.</a> Lab. Anim. 37, 204-206 (2003).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 8, 103-106 (2004).</li><li>Hamacher, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+wire+guide-based+orotracheal+mouse+intubation:+description,+evaluation+and+comparison+with+transillumination.">Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination.</a> Lab. Anim. 42, 222-230 (2008).</li><li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies.">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Cont. Top. Lab. Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).</li><li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).</li><li>De Vleeschauwer, S. p. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+invasive+lung+function+measurements+in+intubated+mice:+an+approach+for+longitudinal+lung+research.">Repeated invasive lung function measurements in intubated mice: an approach for longitudinal lung research.</a> Lab. Anim. 45, 81-89 (2011).</li><li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+retrograde+intubation+in+mice.">A technique for retrograde intubation in mice.</a> Lab. Anim. 35, 39-42 (2006).</li><li>Singer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left-sided+mouse+intubation:+description+and+evaluation.">Left-sided mouse intubation: description and evaluation.</a> Exp. Lung Res. 36, 25-30 (2010).</li></ol>

I denna rapport beskriver vi en enkel, tillförlitlig teknik för att intubate möss som är icke traumatisk och kan användas flera gånger i samma djur. Denna teknik kan åstadkommas med enkla laboratorium eller medicinsk utrustning som kan köpas för en blygsam summa. Tekniken att direkt laryngoscopy ursprungligen rapporterades av Hastings och kollegor 4, kan också användas för en mängd olika ändamål, men främst för att exakt leverera testämnen till de nedre luftvägarna. Vi har funnit denna tekn...

Laboratoriet mus har ersatt nästan alla arter som huvudmodell av biologi och pathobiologyen däggdjur. Laboratoriet mus är den minsta däggdjursarter som har varit tydligt och utförligt visat sig vara av värde som en modell för mänskliga sjukdomar och har visat sig ovärderlig i förskott för vår förståelse för människans biologi och sjukdomar. Den korta dräktighetstiden och betydligt lägre kostnad har möjliggjort utvecklingen och studier av null och transgena möss som ett vanligt verktyg inom biomedicinsk forskning. Däremot har storleken på den genomsnittliga laboratorium mus (20-25 g) begränsat sin studie i fysiologiskt eller kirurgiskt baserade studier och därmed vissa forskare studerar större däggdjursarter. Ett hinder för att använda möss i dessa studier är svårigheten med intubation tekniker som skulle tillåta fysiologiska mätningar eller omfattande kirurgiska ingrepp under djup anestesi. Trakeostomi 1 har använts som ett standard technique istället för intubering på grund av den större lätthet att utföra denna teknik och blyg färdighet som fordras. Dock är trakeostomi inte bidrar till kroniska eller återhämtnings kirurgi studier; alltså, är det begränsat till akuta experiment. Trakeostomi kan också vara en confounding variabel i forskning där inflammation eller känsliga fysiologiska reflexer är viktiga. Vårt laboratorium har provat de flesta av de tekniker som beskrivits av andra forskare och fann dem otillräckliga för en mängd olika skäl. Trakeostomi är för traumatisk och inducerar blödning och luftvägsinflammation. Mycket mer problematisk är att den inte kan rimligen upprepas. Många relativt icke-invasiv teknik som kräver en blygsam investering i utrustning inte är tillräckligt tillförlitliga. Andra tekniker kräver dyr utrustning som är svår att motivera utan att veta om utrustningen kommer att fungera i en viss applikation. Således försökte vi utveckla en icke traumatisk teknik som krävs ingen mer tHan en blygsam investering i specialiserad utrustning, kan utföras snabbt och tillförlitligt sätt, skulle kunna upprepas i kroniska modeller, och kan användas i ett stort antal djur. Här rapporterar vi en sådan teknik.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="706">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:411px;">Operating Otoscope Head</td>
			<td style="width:144px;">Welch Allyn</td>
			<td align="right" style="width:83px;">21700</td>
			<td style="width:69px;">&#160;$188.98</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Otoscope Handle</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td align="right">71000</td>
			<td>&#160;$112.20</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Reuseable Speculum</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td align="right">22002</td>
			<td>&#160;$ 3.98</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Fine Forceps</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>18-779</td>
			<td>&#160;$107.18</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Small clamp stand to hold otoscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Optional Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling)</td>
			<td>Summit Medical</td>
			<td></td>
			<td align="right">$3,000</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Flexivent (Animal Ventilator)</td>
			<td>SCIREQ</td>
			<td></td>
			<td align="right">$35,000</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Intravenous catheter (20 ga x 1 inch)</td>
			<td>BD</td>
			<td align="right">381233</td>
			<td>&#160;$&#160; 9.62</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Polyethylene tubing (PE10) (0.011 inch I.D., 0.024 inch O.D.) 100 ft</td>
			<td>Intramedic, Clay-Adams</td>
			<td align="right">427401</td>
			<td>&#160;$115.70</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle)</td>
			<td>Butler</td>
			<td align="right">23061</td>
			<td>&#160;$10.00</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Xylazine (100 ml bottle)</td>
			<td>Vedco</td>
			<td align="right">24105</td>
			<td>&#160;$20.00</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Isoflurane (250 ml bottle)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>&#160;$15.00</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">vecuronium bromide 10 mg/10 ml</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>NDC 0069-0094-01</td>
			<td align="right">$15.00</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope

Möss, både vildtyp och transgena, är den huvudsakliga däggdjursmodellen i den biomedicinska forskningen idag. Intubation och mekanisk ventilation är nödvändig för hela djurförsök som kräver kirurgi under djup anestesi eller mätningar av lungfunktionen. Trakeostomi har varit standard för intuberande luftvägarna i dessa möss för att möjliggöra mekanisk ventilation. Orotracheal intubation har rapporterats men har inte använts framgångsrikt i många studier på grund av den betydande tekniska svårigheter eller krav på högspecialiserad och dyr utrustning. Här rapporterar vi en teknik för direkt laryngoscopy använder en otoskop försedd med en 2,0 mm spekulum och med användning av en 20 G intravenös kateter såsom en endotrakealtub. Vi har använt denna teknik i stor omfattning och tillförlitligt intubera och genomföra korrekta bedömningar av lungfunktionen hos möss. Denna teknik har visat sig vara säker, med i stort sett inget djur förlust i erfarna händer. Dessutom är denna teknikkan användas för upprepade studier av möss i kroniska modellerna.

Intubation med ovanstående teknik är pålitlig och snabb. Lämplig placering av endotrakealtub är lättast att konstatera genom att observera expired gas bubblande från den nedsänkta utandnings delen av den av ventilatorkretsen (vanligtvis i ett PIP fälla) och negativa omläggningar på en luftvägstryck spårning (Figur 1). De negativa nedböjningar på luftvägstryck spårning är de mest tillförlitliga. Andra har använt förflyttning av en liten vätskedroppe i intravenösa slangen ansluten t...

Watch this Scientific Journal Video about Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope at JoVE.com

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Vi har utvecklat en enkel, pålitlig och relativt billig metod för endotrakeal intubation hos möss via direkt laryngoskopi använder ett otoskop med en 2,0 mm spekulum. Denna teknik är atraumatisk och kan användas för upprepade mätningar i kroniska experimenten. Vi tycker att det är bättre att trakeostomi eller tidigare rapporterade icke-kirurgiska tekniker.

Luftstrupsintubation i möss<em&gt; Via</em&gt; Direkt laryngoskopi Använda ett otoskop

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

Riktlinjer för valbara Pediatric fiberoptisk Intubation

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Använda kvantitativ realtids-PCR för att avgöra Engraftment donatorcellen i en konkurrenskraftig Murine Bone Marrow Transplantation Modell

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

En enkel metod för mus Lung Intubation

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Heterotopisk Mucosal Engrafting Förfarande för direkt Drug Delivery till hjärnan hos möss

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

En förbättrad metod för Rapid Intubation av luftstrupen hos möss

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Uncontrolled Hemorrhagic Shock Modeled via Liver Laceration in Mice with Real Time Hemodynamic Monitoring

Okontrollerad hemoragisk shock modellerad via leverlackering i möss med realtidshemodynamisk övervakning

Uncontrolled hemorrhage is an important cause of preventable deaths among trauma patients. We have developed a murine model of uncontrolled hemorrhage via ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

Mellersta Cerebral artärocklusion att låta Reperfusion via gemensamma halspulsådern reparation hos möss

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

Inducera akut lung skada hos möss genom direkt Intratracheal Lipopolysaccharide instillation

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

Upprepad Orotracheal Intubation hos möss

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

Blind Endotracheal Intubation in Neonatal Rabbits

Blind endotracheal intubation hos neonatala kaniner

The newborn rabbit is a useful animal model for various pathologies and procedures. Airway management of the rabbit is complex due to its anatomical ...