Name: mouse models for graft arteriosclerosis
Uploaded: 2013-05-14T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Models for Graft Arteriosclerosis at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af NIH tilskud R01 HL109420 til WM og AHA 9320033N til LY.

Mus allograft og syngene graft transplantationer model Alle dyreforsøg blev godkendt af den institutionelle dyrepleje og bruge udvalg af Yale University. For allograft model blev segmenter af thorax aorta fra mænd, 4-5 uger gamle WT (C57BL/6J) eller IFN-yR-KO-mus indskudt i den abdominale aorta af kvindelig modtager, 8-12 uger gamle WT ved hjælp af en ende-til udgang microsurgical anastomotisk teknik (se næste for detaljer). For syngenisk graft model blev segmenter af thorax aorta fra mandl...

<ol>
	<li>George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+men:+mouse+models+and+the+molecular+mechanisms+of+post-transplant+coronary+artery+disease.">Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease.</a> J. Heart Lung Transplant. 24, 2003-2014 (2005).</li><li>Koulack, J., McAlister, V. C., MacAulay, M. A., Bitter-Suermann, H., MacDonald, A. S., Lee, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clin. Immunol. Immunopathol. 80, 273-277 (1996).</li><li>Libby, P., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+rejection.">Chronic rejection.</a> Immunity. 14, 387-397 (2001).</li><li>Lorber, M. I., Wilson, J. H., Robert, M. E., Schechner, J. S., Kirkiles, N., Qian, H. Y., Askenase, P. W., Tellides, G., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+allogeneic+vascular+rejection+after+arterial+transplantation+and+peripheral+lymphoid+reconstitution+in+severe+combined+immunodeficient+mice.">Human allogeneic vascular rejection after arterial transplantation and peripheral lymphoid reconstitution in severe combined immunodeficient mice.</a> Transplantation. 67, 897-903 (1999).</li><li>Minami, E., Laflamme, M. A., Saffitz, J. E., Murry, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracardiac+progenitor+cells+repopulate+most+major+cell+types+in+the+transplanted+human+heart.">Extracardiac progenitor cells repopulate most major cell types in the transplanted human heart.</a> Circulation. 112, 2951-2958 (2005).</li><li>Mitchell, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allograft+arteriopathy:+pathogenesis+update.">Allograft arteriopathy: pathogenesis update.</a> Cardiovasc. Pathol. 13, 33-40 (2004).</li><li>Mitchell, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graft+vascular+disease:+immune+response+meets+the+vessel+wall.">Graft vascular disease: immune response meets the vessel wall.</a> Annu Rev Pathol. 4, 19-47 (2009).</li><li>Nagano, H., Libby, P., Taylor, M. K., Hasegawa, S., Stinn, J. L., Becker, G., Tilney, N. L., Mitchell, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+arteriosclerosis+after+T-cell-mediated+injury+in+transplanted+mouse+hearts:+role+of+interferon-gamma.">Coronary arteriosclerosis after T-cell-mediated injury in transplanted mouse hearts: role of interferon-gamma.</a> Am. J. Pathol. 152, 1187-1197 (1998).</li><li>Nagano, H., Mitchell, R. N., Taylor, M. K., Hasegawa, S., Tilney, N. L., Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-gamma+deficiency+prevents+coronary+arteriosclerosis+but+not+myocardial+rejection+in+transplanted+mouse+hearts.">Interferon-gamma deficiency prevents coronary arteriosclerosis but not myocardial rejection in transplanted mouse hearts.</a> J. Clin. Invest. 100, 550-557 (1997).</li><li>Raisanen-Sokolowski, A., Glysing-Jensen, T., Koglin, J., Russell, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+transplant+arteriosclerosis+in+murine+cardiac+allografts+placed+in+interferon-gamma+knockout+recipients.">Reduced transplant arteriosclerosis in murine cardiac allografts placed in interferon-gamma knockout recipients.</a> Am. J. Pathol. 152, 359-365 (1998).</li><li>Salomon, R. N., Hughes, C. C. W., Schoen, F. J., Payne, D. D., Pober, J. S., Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Coronary+Transplantation-Associated+Arteriosclerosis+-+Evidence+for+a+Chronic+Immune+Reaction+to+Activated+Graft+Endothelial+Cells.">Human Coronary Transplantation-Associated Arteriosclerosis - Evidence for a Chronic Immune Reaction to Activated Graft Endothelial Cells.</a> Am. J. Pathol. 138, 791-798 (1991).</li><li>Scott, D. M., Ehrmann, I. E., Ellis, P. S., Chandler, P. R., Simpson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+do+some+females+reject+males?+The+molecular+basis+for+male-specific+graft+rejection.">Why do some females reject males? The molecular basis for male-specific graft rejection.</a> J. Mol. Med. 75, 103-114 (1997).</li><li>Shimizu, K., Sugiyama, S., Aikawa, M., Fukumoto, Y., Rabkin, E., Libby, P., Mitchell, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+bone-marrow+cells+are+a+source+of+donor+intimal+smooth-+muscle-like+cells+in+murine+aortic+transplant+arteriopathy.">Host bone-marrow cells are a source of donor intimal smooth- muscle-like cells in murine aortic transplant arteriopathy.</a> Nat. Med. 7, 738-741 (2001).</li><li>Tellides, G., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-gamma+axis+in+graft+arteriosclerosis.">Interferon-gamma axis in graft arteriosclerosis.</a> Circ. Res. 100, 622-632 (2007).</li><li>Tellides, G., Tereb, D. A., Kirkiles-Smith, N. C., Kim, R. W., Wilson, J. H., Schechner, J. S., Lorber, M. I., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-gamma+elicits+arteriosclerosis+in+the+absence+of+leukocytes.">Interferon-gamma elicits arteriosclerosis in the absence of leukocytes.</a> Nature. 403, 207-211 (2000).</li><li>Vassalli, G., Gallino, A., Weis, M., von Scheidt, W., Kappenberger, L., von Segesser, L. K., Goy, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alloimmunity+and+nonimmunologic+risk+factors+in+cardiac+allograft+vasculopathy.">Alloimmunity and nonimmunologic risk factors in cardiac allograft vasculopathy.</a> Eur. Heart J. 24, 1180-1188 (2003).</li><li>Wang, Y., Bai, Y., Qin, L., Zhang, P., Yi, T., Teesdale, S. A., Zhao, L., Pober, J. S., Tellides, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-gamma+induces+human+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+intimal+expansion+by+phosphatidylinositol+3-kinase+dependent+mammalian+target+of+rapamycin+raptor+complex+1+activation.">Interferon-gamma induces human vascular smooth muscle cell proliferation and intimal expansion by phosphatidylinositol 3-kinase dependent mammalian target of rapamycin raptor complex 1 activation.</a> Circ. Res. 101, 560-569 (2007).</li><li>Wang, Y., Burns, W. R., Tang, P. C., Yi, T., Schechner, J. S., Zerwes, H. G., Sessa, W. C., Lorber, M. I., Pober, J. S., Tellides, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-gamma+plays+a+nonredundant+role+in+mediating+T+cell-dependent+outward+vascular+remodeling+of+allogeneic+human+coronary+arteries.">Interferon-gamma plays a nonredundant role in mediating T cell-dependent outward vascular remodeling of allogeneic human coronary arteries.</a> Faseb J. 18, 606-608 (2004).</li><li>Yacoub-Youssef, H., Marcheix, B., Calise, D., Thiers, J. C., Benoist, H., Blaes, N., Segui, B., Dambrin, C., Thomsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+vascular+rejection:+histologic+comparison+between+two+murine+experimental+models.">Chronic vascular rejection: histologic comparison between two murine experimental models.</a> Transplant. Proc. 37, 2886-2887 (2005).</li><li>Yokota, T., Shimokado, K., Kosaka, C., Sasaguri, T., Masuda, J., Ogata, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitogenic+activity+of+interferon+gamma+on+growth-arrested+human+vascular+smooth+muscle+cells.">Mitogenic activity of interferon gamma on growth-arrested human vascular smooth muscle cells.</a> Arterioscler. Thromb. 12, 1393-1401 (1992).</li><li>Yu, L., Qin, L., Zhang, H., He, Y., Chen, H., Pober, J., Tellides, G., Min, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AIP1+prevents+graft+arteriosclerosis+by+inhibiting+IFN-&#947;-dependent+smooth+muscle+cell+proliferation+and+intimal+expansion.">AIP1 prevents graft arteriosclerosis by inhibiting IFN-&#947;-dependent smooth muscle cell proliferation and intimal expansion.</a> Cir. Res. 109, 418-427 (2011).</li></ol>

De beskrevne protokoller er fokuseret på musen GA modeller. De procedurer kan anvendes til andre podede transplantation modeller. Disse modeller inkluderer humaniseret xenograft (dvs. menneskelige kranspulsåren segmenter indskudt ind i den infra-renal aorta af immunsvækkede mus) og akut afstødning muse GA model (dvs. en mus aorta fra en genetisk stamme til en anden genetisk stamme modtager). Vores beskrevne musemodeller er mere at lukke humane GA læsioner. Den første model indebærer indskydning ...

Graft arteriosclerois (GA), også kaldet allotransplantat vaskulopati, er en patologisk læsion, der udvikler sig over måneder til år i transplanterede organer karakteriseret ved diffus, periferisk stenose af hele graft vaskulære træ 7.. Tidlige stadier kan forårsage excentriske og fokal stenoser, der er mere tydelig i arterierne, således mere ligner stenoser ses i konventionel åreforkalkning. Hulrummet tab af transplantatkar resultaterne fra intimal ekspansion grund infiltration af værten T-celler og makrofager og især akkumulering af ekstracellulær matrix og på glatte muskler lignende cellerne stammede fra transplantat, vært eller begge 5, 13, 19, at er utilstrækkeligt kompenseret ved passiv fartøj remodellering. I hjerteallografter, er de mest klinisk signifikante læsioner de i epikardielle og intramyocardial koronararterier. I sidste ende vil GA af kranspulsårerne forårsage iskæmisk hjertesvigt. GA er den største årsag til sent hjerte gr.agterude tab. De stenoser GA stopper ved sutur linjer, stærkt implicerer værtsreaktionen podede alloantigener i sin patogenese og fører os til at klassificere GA som en form for kronisk afstødning 3.. Imidlertid kan andre former for arteriel skade øger risikoen for GA, enten ved at øge nettobyrde for skade eller ved at intensivere og / eller modulering af alloimmun respons. Endotelcelle (EF) foring af graft arterier er bevaret i human GA og de ​​mest overfladiske områder af intima støder op til EF foring er stedet hårdest infiltreret af værtsafledt IFN-γ-producerende T-celler og makrofager 11; i nogle patienter GA er forbundet med udvikling af donor-specifikke alloantistoffer der binder til pode EF 16 men skibene viser ringe tegn på den fibrinoid nekrose der er karakteristisk af akut antistof-medieret afstødning 11. Den mest kritiske komponent i GA patogenese denproliferation af glatte muskel-lignende celler i intima, hvis denne proces kan blive anholdt, GA er usandsynligt, at fremskridt. Tidligere arbejde fra vores gruppe havde vist, at INTIMAS af humane koronararterie segmenter indskudt i infra-renal aorta af immunsvækkede mus ekspandere som reaktion på adoptivt overførte humane T-celler allogene til arterien donor, og at denne proces kunne inhiberes ved at neutralisere humane IFN- γ 18. Desuden exogene humane IFN-γ kan forårsage intima (og mediale) vaskulære glatte muskelceller (VSMC) proliferation i disse arterielle transplantater i fravær af humane T-celler 15, 17. (Det er vigtigt at bemærke, at mennesker og mus IFN-γ ikke krydse arter, udelukker indirekte virkninger på musen vært i denne eksperimentelle system.) Disse humaniseret musemodeller har gavn af opridset human T-celle / vaskulære celleinteraktioner, og intima læsioner er hovedsagelig sammensat af human (dvs. graft-afledte celler)som er blevet observeret i kliniske prøver, men de har ikke helt gentage den kliniske situation, fordi de ignorerer den rolle vært makrofager og muligvis andre celletyper involveret i kliniske transplantation læsioner. En konventionel musemodel af denne proces kunne teoretisk løse dette problem, der supplerer de begrænsninger af det humaniserede model ved at inddrage en komplet værtimmunsystemet og giver den yderligere fordel af at tillade strømmen af ​​muse genetiske metoder, der skal anvendes til GA. De to mest anvendte musemodeller involverer heterotopisk hjerte transplantation og ortotopisk arterie transplantation 1.. De læsioner, der udvikles i arterierne i heterotopisk hjertetransplantater er overvejende udgøres af værtsceller, sandsynligvis af knoglemarv oprindelse, mens intimale celler i arterierne i humane hjertetransplantater er overvejende af graft oprindelse 5, 13, 19. Dette er en væsentlig forskel, der har ført os til at udvikle alternative musemodeller. Indskudten mus aorta fra en stamme til en anden musestamme modtageren er endnu mere begrænset som en model for kronisk afstødning hos mennesker, fordi den akutte cellemedieret afstødningsreaktion i denne musemodel helt eliminerer alle donor-afledte vaskulære celler fra transplantat under to, tre uger 19.. Derfor de efterfølgende ændringer, der ses i det indskudte karsegment alene er en respons på værts celler, der har genbefolket at decellulariserede skibet stillads, hvilket skaber en meget kunstig situation med begrænset relevans som model for ændringerne i transplantatkar der opstår i klinikken. Vi har for nylig udviklet to nye musemodeller at omgå disse problemer 21.. Den første model indebærer indskydning af et fartøj segment fra en mandlig mus i en kvindelig modtager af samme indavlede stamme (C57BL/6J). Den anden model indebærer indskyde en arterie segment fra en vildtype C57BL/6J mus donor i en vært mus af samme stamme og køn, der mangler receptor for IFN-γ (IFN-yR-KO) efterfulgt af administration af muse IFN-γ (leveret via infektion af museleverens med en adenovirusvektor. Her beskriver vi detaljerede protokoller og fordelene ved vores mus GA modeller.

<table border="1" >
<tbody>
 <tr>
 <td>Name of the Reagent</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue Number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>C57BL/6J (H-2b)</td>
 <td>Jackson Laboratories 
 (Bar Harbor, ME)</td>
 <td>000664</td>
 <td>Donor (5 weeks) 
 Recipient (8-12weeks)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ketamine Hydrochloride Injection </td>
 <td>Hospira Inc.</td>
 <td>NDC 0409-2053</td>
 <td>Storage Solution(50 mg/ml) 
 Working Solution(5 mg/ml)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Xylazine Sterile Solution</td>
 <td>Lloyd Inc.</td>
 <td>NADA# 139-236</td>
 <td>Storage Solution(100 mg/ml) 
 Working Solution(1 mg/ml)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ketoprofen</td>
 <td>Fort Dodge Animal Health</td>
 <td>NDC 0856-4396-01</td>
 <td>Storage Solution(100 mg/ml) 
 Working Solution-oral 
 (0.027 mg/ml)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heparin Sodium</td>
 <td>Sagent Pharmaceticals</td>
 <td>NDC 25021-400</td>
 <td>Storage Solution(1000 U/ml) 
 Working Solution(100 U/ml)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Saline solution (Sterile 0.9% Sodium Chloride)</td>
 <td>CareFusion</td>
 <td>AL4109</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>0.9% Sodium Chloride Injection</td>
 <td>Hospira Inc.</td>
 <td>NDC 0409-4888-10</td>
 <td>To prepare the anesthetic </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Petrolatum Ophthalmic Ointment </td>
 <td>Dechra Veterinary Products</td>
 <td>NDC 17033-211-38</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Iodine Prep Pads </td>
 <td>Triad Disposables, Inc.</td>
 <td>NDC 50730-3201-1</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Alcohol Prep Pads</td>
 <td>McKesson Corp.</td>
 <td>NDC 68599-5805-1</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microscope</td>
 <td>Leica</td>
 <td>MZ95</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro Scissors</td>
 <td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
 <td>RS-5693</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Spring Scissors</td>
 <td>F.S.T</td>
 <td>15009-08</td>
 <td>To transect the aorta of donor or recipient </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Narrow Scissors</td>
 <td>F.S.T</td>
 <td>14088-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Needle Holder/Forceps</td>
 <td>MICRINS</td>
 <td>MI1542</td>
 <td>To hold the needle</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fine Forceps</td>
 <td>F.S.T </td>
 <td>11254-20</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Forceps</td>
 <td>F.S.T</td>
 <td>11251-35</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Standard Pattern Forceps</td>
 <td>F.S.T</td>
 <td>11000-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Forceps</td>
 <td>F.S.T </td>
 <td>13011-12</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>LANCASTER Eye Speculum</td>
 <td>Zepf Medical Instruments</td>
 <td>42-1209-07</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro Vascular Clip</td>
 <td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
 <td>RS-6472</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro Clip Applying Forceps With Lock</td>
 <td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
 <td>RS-5440</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Black Polyamide Monofilament Suture</td>
 <td>AROSurgical Instruments Corporation</td>
 <td>Cat #T4A10Q07</td>
 <td>10-0 suture, Needle=70 microns</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Black Monofilament Nylon Suture</td>
 <td>Syneture 
 (Covidien)</td>
 <td>SN-1956</td>
 <td>6-0 suture</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Non-Woven Songes</td>
 <td>McKesson Corp.</td>
 <td>Reorder No. 94442000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 ml Syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 309659</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>3 ml Syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 309657</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml Syringe</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 309604</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>18G 1 1/2, 
 Hypodermic Needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 305196</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>25G 7/8, 
 Hypodermic Needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 305124</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>27G 1/2, 
 Hypodermic Needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 305109</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30G 1/2, 
 Hypodermic Needle</td>
 <td>BD</td>
 <td>REF 305106</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Hearting Pad</td>
 <td>Sunbeam</td>
 <td>Z-1228-001</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Trimmer</td>
 <td>Wahl</td>
 <td>9854-500</td>
 <td></td>
 </tr>
<tr>
<td></td>
<td></td>
<td></td>
<td>Table 2. Specific reagents and equipment.</td>
</tr>
 </tbody>
</table>

mouse models for graft arteriosclerosis

Graft arteriosclerois (GA), også kaldet allotransplantat vaskulopati, er en patologisk læsion, der udvikler sig over måneder til år i transplanterede organer karakteriseret ved diffus, periferisk stenose af hele graft vaskulære træ. Den mest kritiske komponent i GA patogenese, er spredningen af ​​glatte muskel-lignende celler i intima. Når en human koronararterie segment er indskudt i den infra-renale aorta af immunsvækkede mus, kunne INTIMAS kunne ekspandere som reaktion på adoptivt overførte humane T-celler allogene til arterien donor eller exogene humane IFN-γ i fravær af humane T-celler. Overdrage en mus aorta fra en stamme til en anden musestamme modtager er begrænset som en model for kronisk afstødning hos mennesker, fordi den akutte cellemedieret afstødningsreaktion i denne musemodel helt eliminerer alle donor-afledte vaskulære celler fra transplantat under to, tre uger. Vi har for nylig udviklet to nye mOuse modeller til at omgå disse problemer. Den første model indebærer indskydning af et fartøj segment fra en mandlig mus i en kvindelig modtager af samme indavlede stamme (C57BL/6J). Afstødning i dette tilfælde kun er rettet mod mindre histokompatibilitetsantigener kodes af Y-kromosomet (stede i den mandlige men ikke kvindelige) og afstødningsreaktion at ensues er tilstrækkelig indolent at bevare donor-afledte glatte muskelceller i flere uger. Den anden model indebærer indskyde en arterie segment fra en vildtype C57BL/6J mus donor i en vært mus af samme stamme og køn, som mangler receptoren for IFN-γ efterfulgt af administration af muse IFN-γ (leveret via infektion af mus lever med en adenovirusvektor. Der er ingen afvisning i dette tilfælde som både donor og recipientmus er af samme stamme og køn, men donor glatte muskelceller proliferere som respons på cytokinet mens værtsafledt celler, der mangler receptor fordette cytokin er afvisende. Ved tilbagekrydsning yderligere genetiske ændringer i skibets donor, kan begge modeller anvendes til at vurdere effekten af ​​specifikke gener på GA progression. Her beskriver vi detaljerede protokoller for vores mus GA modeller.

Mus allograft åreforkalkning (GA) model: I denne model er en mandlig donor aorta transplanteret ind kvindelig modtager, så at værten inducerer alloreaktive T-cellemedieret alloimmun responser mod en mindre Y-antigen (den mandlige-specifikke mindre histokompatibilitetsantigen HY) udtrykt på transplantatet 12, og til gengæld T-celle-producerede IFN-γ drev VSMC proliferation 20 som observeret i andre allotransplantation modeller 2, 6, 8-10, 14,. Et segment af thorakal...

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Models for Graft Arteriosclerosis at JoVE.com

Mouse Models for Graft Arteriosclerosis

Vi beskriver protokoller for vores mus graft arteriosclerois (GA) modeller, der involverer overdrage en mus karsegment ind i en modtager af samme indavlede stamme. Ved tilbagekrydsning yderligere genetiske ændringer i skibets donor kan modellen vurdere effekten af ​​specifikke gener på GA.

Musemodeller for Graft Åreforkalkning

Graft arteriosclerois (GA),  also called allograft vasculopathy, is a pathologic lesion that develops over  months to years in transplanted organs ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Models of Bone Metastasis

Modeller af knoglemetastaser

Bone metastases are a common occurrence in several malignancies, including breast, prostate, and lung. Once established in bone, tumors are responsible ...

Time-lapse Imaging of Primary Preneoplastic Mammary Epithelial Cells Derived from Genetically Engineered Mouse Models of Breast Cancer

Time-lapse Imaging af primære præneoplastiske brystepitelceller celler afledt fra gensplejsede musemodeller for brystkræft

Time-lapse  imaging can be used to compare behavior of cultured primary preneoplastic  mammary epithelial cells derived from different genetically ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

MR og PET i musemodeller af myokardieinfarkt

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Production of Apolipoprotein C-III Knockout Rabbits using Zinc Finger Nucleases

Produktion af Apolipoprotein C-III Knockout Kaniner hjælp zinkfinger Nucleaser

Apolipoprotein (Apo) C-III (ApoCIII) resides on the surface of plasma chylomicron (CM), very low density lipoprotein (VLDL) and high density lipoproteins ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Implantation af ringere Vena Cava indskydning Graft i musemodel

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Mus nyretransplantation: modeller af allotransplantatafstødning

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

Højfrekvente Ultrasound Imaging af Mouse Cervikal lymfeknuder

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

Mouse Model of Alloimmune-induced Vascular Rejection and Transplant Arteriosclerosis

Musemodel for alloimmune-induceret vaskulær Afvisning og Transplant åreforkalkning

Vascular rejection that leads to transplant arteriosclerosis (TA) is the leading representation of chronic heart transplant failure. In TA, the immune ...

Bioluminescence-Based Tumor Quantification Method for Monitoring Tumor Progression and Treatment Effects in Mouse Lymphoma Models

Bioluminescens-Based Tumor Kvantificering Metode til overvågning Tumor Progression og behandling effekter i mus Lymfom Modeller

Although bioluminescence imaging (BLI) shows promise for monitoring tumor burden in animal models of cancer, these analyses remain mostly qualitative. ...

Cutaneous Surgical Denervation:  A Method for Testing the Requirement for Nerves in Mouse Models of Skin Disease

Kutan Kirurgisk Denervation: En metode til afprøvning af Krav om Nerver i musemodeller af Skin Disease

Cutaneous somatosensory nerves function to detect diverse stimuli that act upon the skin. In addition to their established sensory roles, recent studies ...