Name: assessment of gastric emptying in non-obese diabetic mice using a [13c]-octanoic acid breath test
Uploaded: 2013-03-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test at JoVE.com

Cette publication vidéo a été rendue possible grâce au financement de l&#39;Institut national du diabète et des maladies digestives et rénales (NIDDK) pour le projet de Programme de subventions &quot;pathobiologie du système entérique» DK 68055. Christopher T. Creedon a été soutenue par le public Rochester Ecoles Programme de mentorat. Nous remercions M. Gary Stoltz pour l&#39;assistance technique, Mme Kristy Zodrow pour l&#39;assistance secrétariat et le Dr Douglas Baer de Los Gatos Research, Inc (Mountain View, CA).

1. La formation et l&#39;habituation des souris <ol><li> Avant l&#39;analyse, mettre toutes les souris dans les enceintes d&#39;essai pour 2-4 heures avec débit d&#39;air constant afin de les habituer aux conditions d&#39;essai. Cela réduit considérablement le niveau de stress qui pourraient causer de détection aberrante de la vidange gastrique. Traiter les souris de la même manière que si l&#39;expérience de la vidange gastrique était en marche. Préparer le jaune d&#39;œuf (voir plus loin) sans ajouter de l...

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	<li>Yeung, C. K., McCurrie, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+to+investigate+the+inhibitory+effects+of+drugs+on+gastric+emptying+in+the+mouse+in+vivo.">A simple method to investigate the inhibitory effects of drugs on gastric emptying in the mouse in vivo.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 45, 235-240 (2001).</li><li>Osinski, M. A., Seifert, T. R., Cox, B. F., Gintant, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+of+evaluation+of+drug-evoked+changes+in+gastric+emptying+in+mice.">An improved method of evaluation of drug-evoked changes in gastric emptying in mice.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 47, 115-120 (2002).</li><li>Ghoos, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+gastric+emptying+rate+of+solids+by+means+of+a+carbon-labeled+octanoic+acid+breath+test.">Measurement of gastric emptying rate of solids by means of a carbon-labeled octanoic acid breath test.</a> Gastroenterology. 104, 1640-1647 (1993).</li><li>Symonds, E., Butler, R., Omari, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+breath+tests+can+detect+alterations+in+gastric+emptying+in+the+mouse.">Noninvasive breath tests can detect alterations in gastric emptying in the mouse.</a> Eur. J. Clin. Invest. 32, 341-344 (2002).</li><li>Symonds, E. L., Butler, R. N., Omari, T. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+gastric+emptying+in+the+mouse+using+the+[13C]-octanoic+acid+breath+test.">Assessment of gastric emptying in the mouse using the [13C]-octanoic acid breath test.</a> Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 27, 671-675 (2000).</li><li>Verhulst, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+ghrelin+in+the+relationship+between+hyperphagia+and+accelerated+gastric+emptying+in+diabetic+mice.">Role of ghrelin in the relationship between hyperphagia and accelerated gastric emptying in diabetic mice.</a> Gastroenterology. 135, 1267-1276 (2008).</li><li>Schoonjans, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+13C-octanoic+acid+breath+test:+validation+of+a+new+noninvasive+method+of+measuring+gastric+emptying+in+rats.">The 13C-octanoic acid breath test: validation of a new noninvasive method of measuring gastric emptying in rats.</a> Neurogastroenterol. Motil. 14, 287-293 (2002).</li><li>Choi, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+gastric+emptying+in+nonobese+diabetic+mice.">Determination of gastric emptying in nonobese diabetic mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 293, 1039-1045 (2007).</li><li>Atkinson, M. A., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+NOD+mouse+model+of+type+1+diabetes:+as+good+as+it+gets?.">The NOD mouse model of type 1 diabetes: as good as it gets?.</a> Nat. Med. 5, 601-604 (1999).</li><li>Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice.+Diabetic+gastroparesis.">Clinical practice. Diabetic gastroparesis.</a> N. Engl. J. Med. 356, 820-829 (2007).</li><li>Choi, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+protects+interstitial+cells+of+Cajal+from+oxidative+stress+and+reverses+diabetic+gastroparesis.">Heme oxygenase-1 protects interstitial cells of Cajal from oxidative stress and reverses diabetic gastroparesis.</a> Gastroenterology. 135, 2055-2064 (2008).</li><li>Kashyap, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbon+monoxide+reverses+diabetic+gastroparesis+in+NOD+mice.">Carbon monoxide reverses diabetic gastroparesis in NOD mice.</a> Am. J. Physiol. GI. G298, G1013-G1019 (2010).</li></ol>

La technique décrite ici permet d&#39;répétées et non invasive la mesure in vivo de la vidange gastrique solide chez la souris. Ce système présente l&#39;avantage que les animaux ne sont pas retenus dans la chambre de mesure, ce qui leur permet de se déplacer et de tourner librement. Comme il s&#39;agit d&#39;un environnement peu familier, les souris ont encore besoin d&#39;être formés et habitués aux chambres d&#39;essais pour prévenir les effets du stress sur la vidange gastrique. En gén?...

Ce manuscrit décrit les considérations techniques et méthodologiques liées à la mesure non invasive de la vidange gastrique chez la souris. En suivant le protocole décrit ici, les enquêteurs de façon fiable et reproductible suivre l&#39;évolution de la vidange gastrique due au développement de la maladie, d&#39;étudier l&#39;impact des agents pharmacologiques sur la vidange gastrique et le suivi de la réponse de la vidange gastrique pour le traitement de maladies sous-jacentes ou les défauts 6,8, 11,12. Dans les publications antérieures, l&#39;application de 13 C tests d&#39;haleine acide octanoïque a été montré pour être un moyen utile de mesurer la vidange gastrique chez les humains et les animaux 3,8. Ce document décrit en détail les procédures nécessaires pour obtenir des données fiables sur la 8 6 à mois nécessaires pour une étude longitudinale de la vidange gastrique chez des souris atteintes de diabète. Les avantages de suivre ce protocole par rapport aux méthodes déjà publiées sont que l&#39;enquêteur ne peut être assuré le obtaine donnéesd sera fiable et reproductible. En outre, le système automatisé de collecte et d&#39;analyse des échantillons de gaz décrit ici augmente le nombre d&#39;animaux qui peuvent être suivis simultanément dans une étude. Dans l&#39;ensemble, l&#39;objectif de cet article est d&#39;identifier les facteurs clés qui maintiennent l&#39;habituation des souris à l&#39;épreuve et que réduire la variabilité des résultats obtenus. Pour la mesure in vivo de la vidange gastrique, les souris sont mises à jeun pendant la nuit et placés dans les chambres d&#39;essai en plastique transparent avec débit d&#39;air constant. Après les souris se habitué aux tubes, base 13 CO exhalé 2 niveaux sont déterminés et le débit ajusté en conséquence. Ensuite, on administre un repas d&#39;épreuve composé de jaune d&#39;oeuf mélangé à 13 C marqué par l&#39;acide octanoïque. Parce que les souris sont mises à jeun et formés, ils mangent généralement le repas test à moins de 2 min. L&#39;administration d&#39;acide octanoïque n&#39;est pas absorbé dans l&#39;estomac, mais sera repris dans le duodénum und obtiendrez métabolisé dans le foie en 13 CO 2, qui est libéré et expiré, résultant en un enrichissement de 13 CO 2 dans l&#39;air ambiant. Des échantillons d&#39;air sont prélevés à des intervalles de temps déterminés et analysés par l&#39;analyseur isotopique du carbone. L&#39;étape limitante dans tout ce processus est la vidange gastrique et l&#39;excrétion pulmonaire de 13 CO 2 correspond directement avec la vidange gastrique du repas étiquetés. <img src="/files/ftp_upload/50301/50301fig1.jpg" alt="Figure 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50301/50301fig1highres.jpg"/> Figure 1. Schéma du dispositif de vidage gastrique. Après une nuit de jeûne, les souris sont placées dans des chambres transparentes leur permettant de se déplacer et de tourner librement. Un tube d&#39;entrée d&#39;air permet afflux fraîche et constante et une sortie mène à l&#39;analyseur isotopique pour mesurer la 13 C-à-12Rapport C dans l&#39;air expiré. La chambre dispose également d&#39;un orifice central pour la livraison de denrées alimentaires contenant [13 C]-octanoïque.

<table border="1"><tbody><tr><td> NOM </td><td> ENTREPRISE </td><td> NOMBRE CAT </td><td> COMMENTAIRES </td></tr><tr><td> Une source d&#39;amenée d&#39;air constant, le débit et la composition </td><td> alimentation en air centrale dans le centre de recherche </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 130 ml chambre d&#39;échantillonnage qui a l&#39;air d&#39;admission, de sortie d&#39;air, et l&#39;ouverture administration des produits alimentaires Tubes en plastique pour alimentation en air </td><td> In-house construit </td><td></td><td></td></tr><tr><td> L&#39;acide octanoïque </td><td> Cambridge Isotope Laboratories (Andover, MA) </td><td> CLM-293-1 </td><td></td></tr><tr><td> Pour préparer le repas d&#39;œufs: <ul><li> petit bécher </li><li> Tube de 50 ml en plastique </li><li> Bec Bunsen </li><li> œuf </li><li> spatule </li></ul></td><td> Tout fournisseur </td><td></td><td> Tâcher deêtre cohérent avec le fournisseur oeuf puisque le contenu nutritionnel et la palatabilité des œufs peuvent affecter la vidange gastrique et l&#39;ingestion du repas </td></tr><tr><td> Le dioxyde de carbone isotope analyseur </td><td> Los Gatos Research Inc (Mountain View, CA) </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

assessment of gastric emptying in non-obese diabetic mice using a [13c]-octanoic acid breath test

Gastriques études vidange chez la souris ont été limités par l&#39;incapacité à suivre les changements de vidange gastrique chez le même animal, depuis les techniques les plus couramment utilisées nécessitent l&#39;abattage des animaux et la récupération post-mortem de l&#39;1,2 repas. Cette approche empêche études longitudinales afin de déterminer les modifications de la vidange gastrique avec l&#39;âge et la progression de la maladie. L&#39;couramment utilisés [13 C]-octanoïque test respiratoire à l&#39;acide pour l&#39;homme 3 a été modifié pour une utilisation chez les souris et les rats 06.04 7 et nous avons précédemment montré que ce test est fiable et sensible aux variations de la vidange gastrique en réponse à la drogue et au cours de progression de la maladie diabétique 8. Dans cette vidéo de présentation du principe et de la mise en œuvre pratique de ce test modifié est expliqué. Comme dans l&#39;étude précédente, les souris NOD LTJ sont utilisés, un modèle de diabète de type 1 9. Une partie de ces souris développent les symptômes de la gastroparésie, une complication de diabetes caractérisé par la vidange gastrique retardée, sans obstruction mécanique de l&#39;estomac 10. Cet article montre comment former les souris pour le test, la façon de préparer le repas test et obtenir 4 h gastriques données vidange et comment analyser les données obtenues. L&#39;analyseur d&#39;isotopes du carbone utilisé dans la présente étude est approprié pour le prélèvement automatique des échantillons d&#39;air à partir de 12 souris en même temps. Cette technique permet au suivi longitudinal de la vidange gastrique des grands groupes de souris atteintes de diabète ou d&#39;autres maladies de longue date.

A données représentatives établies à partir de trois différentes souris est illustré à la figure 2. Le graphique noir représente les points de données provenant d&#39;une souris avec la vidange gastrique normale. Elle montre la fraction de 13 C qui est récupérée dans l&#39;air expiré, exprimée en pourcentage de la dose administrée par heure, exprimée en fonction du temps. La courbe bleue est d&#39;une souris avec une accélération de la vidange gastrique avec une valeur moiti...

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Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

Détermination de la vidange gastrique avec un non-invasive [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-octanoïque test respiratoire à l&#39;acide pour la gastroparésie suivi dans des souris femelles NOD LTJ.

Évaluation de la vidange gastrique chez des souris diabétiques non obèses aide d&#39;un [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-octanoïque test respiratoire à l&#39;acide

Gastric emptying studies in mice have been limited by the inability to follow gastric emptying changes in the same animal since the most commonly used ...

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Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

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