Name: a simple method of mouse lung intubation
Uploaded: 2013-03-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple Method of Mouse Lung Intubation at JoVE.com

Stöds av NIH HL-10.342.

1. Förberedelser inför förfarande Man måste först få och förbereda följande: <ol><li> Kanylen. För intubering av 20-35 g möss använder vi en 1 eller 1,5 tum lång, 20 gauge intravenös kateter (BD Insylte, Sparks, MD eller Jelco Optiva, Carlsbad, CA). En ny steril kateter kan användas för varje mus, men katetrar kan också återanvändas efter sterilisering genom blötläggning i 70% etanol över natten. Även om varken svalget eller luftstrupen av musen är s...

<ol>
	<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).</li><li>Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cellular+profile+and+lung+function+with+repeated+bronchoalveolar+lavage+in+individual+mice.">Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice.</a> Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).</li><li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies.">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).</li><li>Hamacher, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+wire+guide-based+orotracheal+mouse+intubation:+description,+evaluation+and+comparison+with+transillumination.">Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination.</a> Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).</li><li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).</li><li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+retrograde+intubation+in+mice.">A technique for retrograde intubation in mice.</a> Lab Animal. 35, 39-42 (2006).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).</li><li>Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Video-assisted+orotracheal+intubation+in+mice.">Video-assisted orotracheal intubation in mice.</a> Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).</li><li>Hastings, R. H., Summers-Torres, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Laryngoscopy+in+Mice.">Direct Laryngoscopy in Mice.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).</li><li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).</li><li>Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+system+mechanics+in+mice+measured+by+end-inflation+occlusion.">Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion.</a> Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).</li><li>MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+Mechanics+in+Heterozygous+CF+Mice+after+Repeated+LPS+Dosing.">Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930 (2007).</li></ol>

Förfarandet beskrivet här har flera fördelar. Först anordningen är enkel och relativt billig .. Tillverkningen av anordningen kräver inte några speciella verktyg eller dyrbar utrustning. Användningen av en kateter införs som också är ljuskällan innebär att man aldrig förlorar ur sikte trakeala öppning som införingsanordningen närmar sig trakeala öppningen. Användningen av en 0,5 mm införare tjänar även till att minimera trauma som kan uppstå med en initial insättning av en större kanyl. Vi noter...

Under 1999, publicerade Brown et al. Ett dokument som beskriver en metod för intubation av muslunga 1. En sådan teknik har stor nytta av att göra upprepade lungfunktion eller bronkoalveolär lavage i enskilda möss i longitudinella studier 2. Sedan den ursprungliga papper har det funnits flera andra tidningar som har beskrivit olika metoder för mus intubering 3-9. Även om alla dessa metoder kan användas med framgång, kräver de oftast stora utbildning eller kostnader. En av de viktigaste frågorna med sådan intubering är att eftersom strategierna intuberingskanyl närmar luftstrupen väntan införing blockerar kanylen själv ljuset och därmed visualisering av där den måste gå. Sålunda, blir insättningen blinda vid den mest kritiska tiden. I denna artikel visar hur man enkelt och billigt eliminera detta visualisering problem och därigenom säkerställa framgångsrika intubering med relativt liten utbildning ellererfarenhet.

<table border="1"><tbody><tr><td> Material </td><td> Företag </td><td> Katalog # </td><td> Kommentar </td></tr><tr><td> Intubationskanyl </td><td> BD Insylte, Sparks, MD eller Jelco Optiva, Karlsbad </td><td></td><td> 1-in-långa, 20-gauge intravenös (IV) kateter </td></tr><tr><td> Fiberoptisk kabel </td><td> Edmund Optics, Barrington, NJ </td><td> # NT02-542 </td><td> Ungefär 2-ft längd av 0,5-mm optisk fiber (Kommunikation grad plastfiber). Kanten av fiberänden som sätts in i luftstrupen bör mjukt rundade genom att hålla fibern ≈ 2 cm från slutet och sedan göra små cirklar medan du drar spetsen under några sekunder på 1000-grit Emory papper. </td></tr><tr><td> Ljuskälla </td><td> Volpi </td><td> NCL-150 </td><td> Även om vi använder en 150-W källa halogenljus, någon motsvarande ljuskälla, även med mycket lägre effektkan användas. </td></tr><tr><td> Silikongummi propp </td><td></td><td></td><td> En # 1 silikongummi propp passar den ljuskälla som används i denna demonstration. Olika ljuskällor kan kräva en annan storlek. </td></tr><tr><td> Liten silikongummirör </td><td> Cole-Palmer </td><td> EW-96.410-13 </td><td> En ≈ 1,5 cm stycke av silikongummislang (0,8 innerdiameter, 4 mm ytterdiameter) </td></tr><tr><td> Vinklad stödstativ </td><td></td><td></td><td> Vår är constucted från plexiglas, men allt material som en tråd eller tråd kan fästas för att hålla musen på en nästan vertikal vinkel kan användas. </td></tr></tbody></table>

a simple method of mouse lung intubation

En enkel procedur för att intubera möss för lungfunktion mätningar skulle ha flera fördelar i longitudinella studier med ett begränsat antal eller dyra djur. En av anledningarna till att det inte görs mer rutinmässigt är att det är relativt svårt, trots att det finns flera publicerade studier som beskriver olika sätt att uppnå det. I detta dokument visar vi ett förfarande som eliminerar en av de stora hindren i samband med denna intubationen, som visualisera luftstrupen under hela tiden för intubering. Det tillvägagångssätt använder en 0,5 mm fiberoptiskt ljuskälla som fungerar som ett införingsorgan för att styra intuberingskanyl in musen luftstrupen. Vi visar att det är möjligt att använda detta förfarande för att mäta lungmekanik i individuella möss under ett tidsförlopp för åtminstone flera veckor. Tekniken kan ställas in med relativt liten kostnad och expertis, och det kan rutinmässigt genomföras med relativt lite utbildning. Detta bör makE det möjligt för alla laboratorier att rutinmässigt utföra denna intubation, varigenom longitudinella studier i enskilda möss, vilket minimerar antalet nödvändiga möss och öka den statistiska strömmen med varje mus som sin egen kontroll.

Som en utvärdering av metoden, använde vi fyra 20 veckor gamla BALB / c möss med medelvikt (± SEM) av 27,7 ± 0,40 gram. De studerades på fem på varandra följande veckor, där lungmotstånd uppmättes med användning av ett system såsom tidigare beskrivits 11. Varje mus bedövades med ketamin (100 ug / g kroppsvikt) och xylazin (15 pg / g kroppsvikt) i saltlösning via IP-injektion. De därefter intuberades såsom beskrivits ovan. Om det finns några tvivel om huruvida kanylen är i luftstrupen och in...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Method of Mouse Lung Intubation at JoVE.com

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Detta dokument beskriver en striaghforward och effektiv metod för intuberande möss för lungfunktion mätningar eller pulmonell instillation som gör att mössen att återhämta sig och studeras vid senare tillfällen. Förfarandet innebär en billig fiberoptisk ljuskälla som direkt belyser luftstrupen.

En enkel metod för mus Lung Intubation

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

En modell av Disturbed Flow-Induced ateroskleros hos mus Carotid Artery genom partiell Ligation och en enkel metod för RNA Isolering från Carotid endotelet

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

Riktlinjer för valbara Pediatric fiberoptisk Intubation

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

A Simple Guide Screw Method for Intracranial Xenograft Studies in Mice

En enkel guide Skruv Metod för Intrakraniell xenograft studier på möss

The grafting of human tumor cells into the brain of immunosuppressed mice is an established method for the study of brain cancers including glioblastoma ...

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

Noninvasiv Intratrakeal Intubation att studera patologi och fysiologi Mouse Lung

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Implantation of Fibrin Gel on Mouse Lung to Study Lung-specific Angiogenesis

Implantation av fibringel på Mus Lung att studera Lung specifika angiogenes

Recent significant advances in stem cell research and bioengineering techniques have made great progress in utilizing biomaterials to regenerate and ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-medierad Intratrakeal (IMIT) Instillation: en icke-invasiv, Lung specifik Delivery System

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

Mus Pneumonectomy Modell av Kompensatorisk Lung Tillväxt

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Metod för Isolerad<em&gt; Ex vivo</em&gt; Lung Perfusion i en råttmodell: Lärdomar från Utveckla en Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

En enkel enhet för att snabbt förbereda hela Mounts av mus tarm

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

En förbättrad metod för Rapid Intubation av luftstrupen hos möss

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...