Name: use of the operant orofacial pain assessment device (opad) to measure changes in nociceptive behavior
Uploaded: 2013-06-10T14:00:00
Duration: 12 min 20 s
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Instituto Nacional sobre el Abuso de Drogas, NIH 5R44DA026220-03

Aquí el uso de la OPAD (Stoelting Co., Wood Dale, IL) se describe en términos generales para un experimento de ejemplo usando la capsaicina. El operador tiene la libertad para programar numerosos experimentos con muchas opciones y modelos de dolor, sin embargo. Por ejemplo, la administración de analgésicos reducen medidas nociceptivo 6,3,4,5,7 y otros modelos de dolor como producto lesión por constricción crónica y la inflamación aumenta las conductas nociceptivas 3,9. Estos modelos se pueden adaptar fácilmente con el siguiente protocolo. Para todos los experimentos, se utilizaron ratas maleSprague-Dawley (250-300 g, Charles River, Raleigh, NC). Estos se encuentran en pares en 22 ° C de temperatura y 31% de humedad controlados habitaciones con un ciclo normal de luz / oscuridad de 12 h (06 a.m.-6 p.m. luces) y tuvieron libre acceso a los alimentos y el agua, excepto cuando ayunas. Sesiones de comportamiento se realizaron durante la fase de luz. Estas instalaciones fueron AAALAC acreditado y se aprobaron todos los procedimientos by la Universidad de Florida IACUC. 1.Formación y Base Sesiones <ol><li> Comida rápida roedores la noche antes de cada sesión OPAD (ej. 15 + / - 1 hora para este experimento). </li><li> Roedores primero deben ser entrenados hasta que se observa un comportamiento coherente a temperaturas no aversivos (por ejemplo 33-37 ° C). Por lo general, alrededor de seis sesiones (tres veces por semana durante dos semanas) es suficiente para capacitar a los ratones o ratas a lamer unos 600-1000 o 2000 veces por sesión, respectivamente. </li></ol> 2. Pretest Preparación y Tratamiento de capsaicina <ol><li> Roedores sin pelo son los mejores para todos los procedimientos operantes, si esto no es posible, deben roedores tienen su pelo facial (pelo bucal solamente y no almohadilla de vibrisas / bigotes ya que esto tiene un efecto en la navegación de un roedor) eliminó 1-2 días antes de la prueba para la precisa la grabación del comportamiento. </li><li> Actos pelo bucales como aislante de temperatura y hace calor y el frío menos nociceptivo. Para eliminar el vello, anestesiar ratas,añadir pomada para los ojos, afeitarse el vello la mejilla con tijeras, aplique crema de depilación, esperar 2-4 minutos, luego lavar con agua. Ver Neubert et al. 3 para la metodología completo. </li><li> En el día de la prueba, anestesiar al animal (por ejemplo, 1 a 2,5% por inhalación isoflurano) y colocar ungüento veterinario opthalamic en ambos ojos para evitar que se sequen y para mantener ningún tipo de tratamientos con fármacos tópicos entre en el ojo. </li><li> Aplicar crema de capsaicina (0,1%) bilateralmente en las mejillas expuestas con un hisopo de algodón estéril. Espere 5 min. Limpie la crema con gasas empapadas en agua tibia (aproximadamente a 40 ° C). Limpie las mejillas de descuento con un algodón empapado en alcohol y establecer un temporizador de 30 min. </li><li> Permita el tiempo suficiente roedores recuperarse de la anestesia antes de volver a la jaula. Esperar hasta que se pueda levantar la cabeza en una postura esternal con el fin de evitar la aspiración de ropa de cama de la jaula. </li></ol> 3. Programación del Sistema OPAD de Protocolos y Experimentos <ol><li> La clave de la innovación of el sistema OPAD a las pruebas de comportamiento es el software orofacial, un sistema impulsado por CUALQUIER-laberinto (Stoelting Co., Wood Dale, IL) que permite al usuario programar y crear nuevos experimentos. </li><li> Se proporciona un ejemplo general de cómo programar un sencillo experimento a continuación, pero muchas más opciones para los protocolos de ajuste de temperatura y modelos de dolor que la capsaicina disponibles. </li><li> Los experimentos pueden ser diseñados y guardar en cualquier punto. Encienda OPADs y el software libre. Encienda el ruido blanco para el control de ruido ambiental. En &quot;Archivo&quot;, seleccione nuevo experimento. Bajo el subtítulo &quot;Protocolo&quot; el nombre del protocolo y seleccionar si desea ser cegado. </li><li> En &quot;jaulas orelleno&quot;, seleccione &quot;New jaula OPAD&quot; y luego &quot;Añadir todas las jaulas orelleno conectados.&quot; En &quot;Salidas&quot; selectos &quot;Temperature Controllers&quot; y luego &quot;elemento térmico&quot;. Ajustar la temperatura de inicio (por ejemplo, un neutro 33-37 ° C). </li><li> Si es necesario, ajustar la temperatura de rampa en &quot;ciclo de temperatura OPAD.&quot; Con el fin de cambiar la temperatura de punto muertocaliente para ajustes hacen frío aquí. </li><li> Para el &quot;1&quot;, &quot;Ajuste de temperatura hasta (° C)&quot; = 45 &quot;, la duración de rampa&quot; = 30 seg, y &quot;Permanecer en valor para&quot; = 3 min. Para el &quot;2&quot;, 33, 30 seg, y 3 min. Para el &quot;3&quot;, 7, 60 segundos y 3 minutos. Para el &quot;4&quot;, 33, 60 segundos y 3 minutos. Marque la casilla &quot;Después del siguiente período de tiempo:&quot; y seleccione 3 min. </li><li> En &quot;Fields&quot; agregue cualquier nota adicional acerca de los temas. Por ejemplo, crea un área de identificación de los animales mediante la opción &quot;Nuevo Campo&quot; y cambie el nombre a &quot;Identificación Animal.&quot; A continuación, seleccione &quot;Animales&quot;, &quot;texto&quot;, y &quot;Use este campo como la identificación de los animales.&quot; </li><li> En &quot;Stage&quot;, la OPAD creará automáticamente una &quot;primera etapa.&quot; Establecer la duración del período de prueba y el nombre de la etapa, si es necesario. Para esta sesión de rampa, ajuste esta a 18 min. </li><li> Una nota sobre las etapas: en la mayoría de los experimentos, las sesiones de comportamiento no deben durar más de 10 a 20 min. Después de eso, los roedores están saciados. Para los experimentos durante varios días, las etapas adicionales se pueden agregar para cada día para hacer el análisis de datos más simple. </li&gt; <li> En la sección &quot;Cálculos&quot; seleccionar &quot;Nuevo cálculo&quot; y el nombre &quot;L / F&quot; para lamer / cara ratio. En la sección titulada &quot;Entre el cálculo en el área por debajo de&quot; ajustar a decir &quot;Lick: número de activaciones / Contacto: número de activaciones&quot;. </li><li> Para crear períodos de tiempo para un análisis de datos más sencillo seleccionar &quot;Análisis&quot; y &quot;Nuevo período de tiempo&quot;. Nombre un &quot;33 ° C&quot; y seleccione la casilla &quot;Este período es el mismo en todas las etapas&quot; For &quot;Empieza en:&quot; escriba 0 y &quot;Termina en:&quot; poner 3 min. </li><li> Repita el paso anterior para cada período de tiempo. Nombre: &quot;Rampa 33-45 ° C.&quot; Empieza en: 3 min. Acaba en: 3.5 min. &quot;45 ° C&quot;, 3,5 min, 6,5 min. &quot;Rampa 45-33 ° C&quot;, 6,5 min, 7 min. &quot;33 ° C&quot;, 7 min, 10 min. &quot;Rampa 33-7 ° C&quot;, 10 min, 11 min. &quot;7 ° C&quot;, 11 min, 14 min. &quot;Rampa 7-33 ° C&quot;, 14 min, 15 min. &quot;33 ° C&quot;, 15 min, 18 min. </li><li> Guardar y el nombre del protocolo. Nota: Los protocolos guardados se pueden volver a utilizar en los nuevos experimentos. </li></ol> 4. Ejecución del ensayo <ol><li> Prepare una habitación temezcla recompensa mperature y colocar en botellas orelleno. Una relación de agua 02:01: leche condensada azucarada funciona bien a pesar de soluciones de sacarosa o sacarina también se pueden usar. </li><li> Coloque la bandeja líquida captura, jaula de plexiglás, y suelos de rejilla de metal en la máquina OPAD. Conecte el cableado a la jaula. </li><li> Coloque la botella recompensa en pie y ajustar lo que el pico se puede llegar por el roedor. Inicialmente, la botella se puede colocar más hacia atrás en la jaula a continuación retirado para producir contactos mejor faciales. </li><li> Cargue el experimento en el software OPAD. Sume el número de animales sometidos a prueba. Bajo el subtítulo &quot;Experimento&quot; añadir un &quot;Título&quot; y luego añadir los grupos de tratamiento (capsaicina y control). Añadir el número de animales en cada grupo. </li><li> Bajo el subtítulo &quot;Pruebas&quot;, seleccione &quot;Tratamientos de animales y datos&quot;. Añadir la carta del tratamiento (A, B, C, etc) y la identificación de los animales. Las cajas deben tener ahora la identificación de los animales designados en sus pantallas. </li><li> Pulse el botón en el cuadro de OPAD. Esta voluntadajustar los termodos a la temperatura adecuada. Cuando se apaga la luz naranja, colocar los roedores dentro y pulse el botón de nuevo. Para este experimento, las ratas se comenzaron 30 minutos después de la crema de capsaicina fue borrado. </li><li> La luz verde se encenderá. Ajustar la distancia de la botella es de la caja para que la rata debe hacer contacto con los termodos en su bucal, no Vibrisas, de región a ser capaz de lamer. El ajuste adecuado se traducirá en una caja roja sólida para lamer por encima de una caja de color naranja indica los contactos. </li><li> La colocación correcta de la botella recompensa es de vital importancia para el ensayo. Si la botella está demasiado cerca de la rata o bien se lame sin hacer un contacto o de tocar su nariz a la botella de recompensa por lo que muchos licks aparecerán como una sola (indicado por un cuadro rojo destaca por licks en lugar de una caja sólida). </li><li> Una vez que la sesión de evaluación es el OPAD alertará al experimentador con un tono. Volver al roedor a su jaula. Si otro roedor se va a probar después, el cuadro se indicaTE su ID de animal. Repetir los pasos 4.5 a 4.7, según sea necesario hasta que el experimento es completa. </li></ol> 5. Analizar, gráficos, y análisis estadístico de los datos con el software OPAD <ol><li> Bajo el subtítulo &quot;Resultados&quot;, seleccione si desea ver un texto, gráfico o informe de análisis estadístico. </li><li> En el cuadro de &quot;Graph informe de configuración&quot;, seleccione la variable a estudiar. Por ejemplo, en &quot;Los resultados de cálculo&quot;, marque la casilla de &quot;L / F&quot;. </li><li> Especifique &quot;En el show del eje x&quot; como &quot;período de tiempo&quot; y &quot;Mostrar diferentes series de&quot; como &quot;tratamiento&quot;. Seleccione &quot;Ver el informe&quot;. Guardar, imprimir, copiar o enviar por correo electrónico el informe se puede hacer en este momento. Ciertos puntos de datos pueden ser excluidos en la caja debajo de la agrupación paso si es necesario. </li><li> Bajo el subtítulo &quot;Datos&quot; es un listado ajustable de los datos en bruto de la experiencia en forma de hoja de cálculo, si es necesario. Nota: todos los datos se guarda y se puede manipular y analizar en un momento posterior. </li></ol> 6. Limpiar <ol><li> Apague la máquina y retire el cableado jaula. Lave y desinfecte la chimenea, caja, botella, y la bandeja de líquido. Estos componentes se pueden lavar a mano o en el lavaplatos. </li></ol>

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Richard Mills y Chris Lloyd son empleados de Stoelting Co. La producción y el libre acceso a este artículo es patrocinado por Stoelting Co.

El sistema OPAD es una herramienta fácil de usar, ensayo de alto rendimiento capaz de detectar cambios en la percepción del dolor en roedores. La naturaleza de alto rendimiento de este sistema significa que numerosos animales pueden ser probados en un solo día por una sola persona. Esto se debe a que el sistema de software OPAD ya que permite un máximo de 16 cajas que se ejecutan simultáneamente en un solo equipo. Esto significa que después de que el tiempo de configuración inicial, aproximadamente 48 carreras operantes (en 18 min por ciclo) pueden llevarse a cabo de una hora, aún más si el tiempo de la sesión se establece en menos tiempo por etapa. Esto permite que para las pruebas de dolor en cientos de animales un día. Esta cantidad de pruebas no sería práctico con los ensayos de dolor más tradicionales. De acuerdo con nuestro trabajo anterior, el comportamiento de roedores se altera en condiciones dolorosas. Durante los períodos no nocivos roedores suelen tener largos períodos de consumo en el que mantener el contacto con los termodos. Durante aversivo 45 ° C o 7 ° C condiciones, laroedores tienen episodios mucho más cortos, ya que no pueden mantener contacto durante largos períodos de tiempo. Por lo tanto el lamer / relación de cara (número de lame dividido por el número de contactos faciales dentro de una sesión) altera con el dolor. La capsaicina aumenta la sensibilidad para calentar el dolor como lo demuestra una relación L / F más baja en los roedores tratados frente a no tratados en la 45 ° C de temperatura. Los analgésicos pueden regresar esta relación lamer / frente a niveles similares a condiciones no dolorosas 3. A pesar de las condiciones de dolor que se producen fácilmente en la piel (como la aplicación de la crema de capsaicina) son los métodos más sencillos de detectar el dolor en este ensayo, los modelos animales de dolor profundo tejido neural más clínicamente relevante, como la neuralgia del trigémino también pueden alterar el comportamiento en ensayos orofaciales operantes 9 . En conjunto, estos datos apoyan la evidencia de que OPAD es sensible a las alteraciones en calor y dolor frío, los umbrales de dolor, y los agentes químicos nocivos como la capsaicina, además de la operantecapacidad dolor orofacial de ensayo para detectar numerosas otras condiciones de dolor y analgesia 6,3,8,17,10,5,12,18,11,9. El sistema del OPAD del dolor de medida es un método clínicamente más relevante, significativa y humana de detectar el dolor de las medidas de reflejo de base. Estas medidas tradicionales de la nocicepción, como la retirada de la pata con los filamentos de von Frey 19 y el ensayo de retirada de la cola 20 se han utilizado durante más de un siglo, pero sólo medir la respuesta a un estímulo experimentador-infligida. El animal tiene poco control y la &quot;nocicepción&quot; se localiza principalmente a la médula espinal. Para los seres humanos, la experiencia subjetiva del dolor también es importante ya que las personas se les pide simplemente para informar de sus niveles subjetivas de dolor. La capacidad de los animales a la libre reportar su dolor en los procedimientos basados ​​en operante sería un gran avance para la investigación del dolor básica 1. Con el OPAD, los animales se les da la opción de si para responder durante apainful estímulo o no. Si es demasiado doloroso, animales simplemente reducir sus intentos de llegar a la recompensa y así limitar su exposición al dolor. Se trata de un ensayo mucho más humano y menos estresante en comparación con muchas de las medidas reflejo de base en el que los animales suelen restringir sus movimientos y no tienen ningún control sobre la cantidad de estímulos dolorosos a los que están expuestos. La necesidad de escapar del dolor es una unidad inherente a todos los animales y la OPAD incorpora este comportamiento en lugar de compensar por ella como otros ensayos nociceptivo. El movimiento de alejamiento de las medidas de reflejo sobre el dolor en tareas operantes se está volviendo más común en el campo. Otros grupos han utilizado medidas no-reflex de base como el examen de duración comida 21,22,23 y térmicas dolor calor paradigmas de escape 24 (Para una revisión de otras medidas de dolor le sugerimos nuestra primera referencia 1). La OPAD es capaz de combinar elementos de estos en una medida unificada, la relación Lick / cara, quich examina la ingesta de alimentos y la necesidad de escapar de los estímulos dolorosos. Otra ventaja es que este ensayo es capaz de medir el dolor durante largos períodos de tiempo (1-2 meses) sin perder sensibilidad 7,9. Debido a sus ventajas con respecto a las pruebas de reflejos basado en este ensayo sea menos estresante y más humano se adapta bien a la medición de los cambios a largo plazo en el comportamiento nociceptivo en roedores. Mide el dolor operante a menudo dan resultados diferentes en comparación con las medidas de reflejo de base en materia de efectos de las dosis de opioides y los umbrales de dolor. Mientras que las altas dosis de opioides se utilizan típicamente para medidas reflejo basadas en 25 varios estudios indican que se necesitan dosis más bajas para las respuestas en ensayos operantes 26,27,28. Las dosis altas de drogas también podrían interferir con las medidas operantes pero son detectables con la OPAD 6. Otros estudios también han demostrado que los umbrales para escapar de un estímulo doloroso son diferentes para operante versus medidas reflex basados ​​29,2,30 sugieren una gran diferencia entre la percepción de un animal de dolor en comparación con la velocidad de sus reflejos espinales. A beneficio de la OPAD es que el roedor puede elegir si desea o no realizar la tarea, esto permite que el roedor para expresar escape o comportamiento de evitación. Este comportamiento complejo requiere hacer para controlar la cantidad de la nocicepción el roedor se siente 14,29,15,30 decisión cortical. Mientras que las conductas de escape y evitación pueden interferir con las medidas basadas en reflejos estas conductas de dolor son un componente integral de la OPAD. Las diferencias en los umbrales de dolor y las dosis más bajas de opioides necesarios para los ensayos de operantes sugieren una mayor sensibilidad al dolor y analgesia que refleja las medidas tradicionales basados ​​en. Aunque el OPAD puede medir el dolor más directamente que los ensayos tradicionales, varias condiciones experimentales y medicamentos podría tener un efecto adverso en este ensayo y debe ser controlada para. Modificacións en la motivación apetitiva pueden alterar el comportamiento de este ensayo. Esto podría ser reflejada por una diferencia en la propia 31 recompensa o por la motivación para la recompensa 6. Se debe tener cuidado para asegurar que la motivación de los animales para la recompensa es constante como muchos fármacos pueden interferir con la motivación. Por ejemplo, altas dosis de morfina y otros opioides pueden causar hiperfagia para sustancias grasas, dulces 32 que alterarán de responder en el ensayo operante orofacial 6. Si bien esto sugiere que este operante paradigma basado en la recompensa de un conflicto tiene implicaciones más amplias en las que figure el campo de la ansiedad y la adicción (es decir, cambiar los aspectos gratificantes de la presencia de un estímulo doloroso dado) es importante para el control de las alteraciones apetito durante el dolor sesiones de prueba. Estas alteraciones en la motivación no aparecen en estas dosis más bajas clínicamente relevantes pero los efectos analgésicos se mantienen intactos 3. Una forma de control para este posible confundir es para asegurar la dosis de la droga dada no aumenta el comportamiento a una temperatura neutra (33-37 ° C). Prueba de un fármaco frente a un grupo sin fines de drogas a una temperatura de punto muerto debe ser el primer paso antes de agregar un componente de dolor. Además, dado que varias sesiones de línea de base son posibles dentro de una sesión de prueba utilizando el OPAD estas cuestiones pueden ser detectados y se pueden controlar por dentro de una única sesión de comportamiento. A medida que el programa de ayuno puede alterar la motivación en este ensayo es importante para mantener esta constante. Por lo general hacemos una noche de ayuno, pero otros horarios son posibles. Por ejemplo, se ha experimentado con un corto ayuno diario de 6 horas antes (resultados no publicados). Esto permite probar al día en lugar de cada dos días. Además, las ratas unfasted también han respondido bien en el ensayo 9. Lo técnicas de ayuno se utiliza es principalmente importante mantenerlo constante a través de las pruebas para el control de los factores de motivación. <p class=&gt; &quot;Jove_content&quot; En conclusión, la OPAD es una herramienta fácil de usar ensayo operante que mide el dolor a un nivel mucho más similar a la condición humana que los ensayos de dolor tradicionales. La característica clave de este sistema es la integración de los parámetros experimentales y protocolos, adquisición de datos y análisis / medidas de resultado utilizando un sistema controlado por software. Esto proporcionará una gran cantidad de opciones controladas por el usuario y los parámetros para recopilar y analizar numerosas medidas de resultado en una forma de alto rendimiento. Esto contrasta con los sistemas de pruebas de dolor comúnmente utilizados (por ejemplo, retirada de la cola, filamentos de von Frey) que no son ni por software ni de alto rendimiento. El sistema basado en software proporciona un avance significativo de cómo están diseñados los estudios de comportamiento y la forma en que se recogen los datos y se analizaron y un aumento en el uso de este ensayo permitirá la investigación básica dolor para ser más clínicamente traducible en el futuro. Se espera que este sistema tenga un impacto significativo en Advancing futuras investigaciones relacionadas con el dolor, porque estos estudios conductuales operantes pueden proporcionar el vínculo necesario para la comprensión de la influencia de las estructuras de orden superior en el comportamiento global del dolor.

Crónica, el dolor no controlado sigue siendo un importante problema de salud pública y la novela tratamientos analgésicos no suelen traducir del laboratorio al paciente. Esta falta de éxito se debe en parte a la utilización de ensayos de comportamiento ineficientes en medidas basadas en reflejos de dolor que no necesariamente o completamente modelar la condición de dolor humano 1,2, y específicamente, la falta de un sistema fiable, de alto rendimiento, comercialmente disponibles , ensayo de evaluación del dolor in vivo, tanto para ratas y ratones, en. Presentamos aquí un alto rendimiento, fácil de usar la versión de nuestro ensayo basado en la nocicepción operante. Este nuevo sistema se basa en nuestra anterior operante ensayo de dolor orofacial que se ha demostrado ser sensible a la detección de diferentes modalidades de dolor, como el calor, el frío, y mecánica 3,4,5. A partir de estas medidas, se ha estudiado una amplia variedad de campos, incluyendo analgésicos 6,3,4,5,7, condiciones de dolor como la inflamación, hiperalgesia y alodinia <shasta&gt; 3,8, la neuralgia del trigémino 9, y periférico nociceptivo modulación a través de los canales TRP con la capsaicina, resiniferatoxina, mentol, y icillin 8,10,5,11. Los efectos psicológicos como modulación del dolor 12 y el efecto placebo 13 ansiedad inducida también se han demostrado con pruebas operante orofacial lo que sugiere que puede ser apropiado para la medición de la experiencia completa de dolor y no simplemente la nocicepción. El dispositivo Evaluación del dolor orofacial (EAOP) utiliza un ensayo de recompensa / conflicto que permite un roedor para elegir entre la recepción de una recompensa de refuerzo o escapar de un estímulo aversivo controlando de este modo la cantidad de dolor que se siente durante una sesión de 14,15. Los roedores son entrenados primero para presionar por sus rostros en termodos temperatura controlada con el fin de tener acceso a una botella de alimentos que contienen una recompensa líquido. Después de la formación, la temperatura de estímulo puede ser calentado o enfriado y diferencias en recorrespondiente puede indicar el nivel de la nocicepción o analgesia percibe el animal. La OPAD también es capaz de cambios bruscos de temperatura que permite pruebas de referencia y la evaluación del dolor a temperaturas frías y calientes en una sola sesión de evaluación. Aquí se presenta un protocolo simple que destaca la capacidad de la OPAD para detectar cambios en el dolor causado por el calor, el frío y el TRPV1 agonista capsaicina 16. La capsaicina se utiliza a continuación como agente sensibilizante térmica, ya que tiene varios beneficios para este ensayo, ya que es perjudicial no-tejido y se ha demostrado previamente para inducir la alodinia facial y la hiperalgesia en modelos de roedores 8. Vamos a demostrar cómo el software OPAD puede obtener rápidamente, analizar, graficar y realizar análisis estadísticos sobre los datos de comportamiento de roedores.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sweetended Condensed Milk</td>
 <td>Borden</td>
 <td>5272910108</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Capzasin-HP 0.1%</td>
 <td>Chattem, Inc.</td>
 <td>0032648-02</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isopropyl alcohol</td>
 <td>CVS</td>
 <td>5042826245</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane</td>
 <td>Piramal Healthcare</td>
 <td>66794-013-25</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Opthalamic vet ointment</td>
 <td>Dechra</td>
 <td>17033-211-38</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Hair remover lotion</td>
 <td>Church and Dwight Co., Inc</td>
 <td>NRLBB-22339-04</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>OPAD System</td>
 <td>Stoelting</td>
 <td>67500</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Additional OPAD cages</td>
 <td>Stoelting</td>
 <td>67501</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Granulated cylinder</td>
 <td>Cole-Parmer</td>
 <td>EW-34512-11</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Paper towels</td>
 <td>ANY</td>
 <td>ANY</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cotton tipped applicators</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>23-400-101</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fluotec 4 Vaporizer</td>
 <td>Ohmeda</td>
 <td>39711</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Hair clippers</td>
 <td>Oster</td>
 <td>78005-010</td>
 <td></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

use of the operant orofacial pain assessment device (opad) to measure changes in nociceptive behavior

Se presenta un sistema operante para la detección de dolor en despiertos, roedores conscientes. El dispositivo Evaluación del dolor orofacial (EAOP) evalúa los comportamientos de dolor de una manera más clínicamente relevante al no depender de las medidas de reflejo de base de la nocicepción. Comida ayunó, roedores sin pelo (o rebajado) se colocan en una cámara de plexiglás que tiene dos termodos Peltier basados ​​en que pueden ser programadas a cualquier temperatura entre 7 ° C y 60 ° C. El roedor está capacitado para hacer contacto con estos con el fin de acceder a una botella de recompensa. Durante una sesión, una serie de resultados de dolor de comportamiento se graba y se guarda automáticamente. Estas medidas incluyen el número de activaciones de botellas de recompensa (lame) y los estímulos faciales de contacto (contactos cara), pero las medidas de encargo como el lamer / relación de la cara (número total de lame por sesión / número total de contactos), también se puede crear. La temperatura estímulo puede ser ajustado a una temperatura única o múltiples temperaturas dentro de una sesión. La OPADes un alto rendimiento, fácil de usar ensayo operante lo que conducirá a una mejor traducción de la investigación del dolor en el futuro, ya que incluye la entrada cortical en lugar de confiar en la columna vertebral ensayos nociceptivo reflejo de base.

Los resultados típicos se ilustran por el comportamiento de un solo roedor en la OPAD en las figuras 1A-D. El número de lame es alto para todos los segmentos de la sesión en el neutro 33 ° C de temperatura, pero baja para los aversivos (45 ° C y 7 ° C) como se ilustra en la Figura 1A. Como muestra la Figura 1B demuestra, largos períodos de contacto se realizan a 33 ° C, como es típico de temperaturas estímulos no nociceptivos. La duración disminuye y aumenta el número de contactos durante períodos en los que las temperaturas son dolorosas. Figura 1C es un diagrama del protocolo de la rampa, el OPAD fue programado para usar para todas las sesiones de prueba. Figura 1D muestra la cantidad total de recompensa ingerido a través del tiempo en gramos . Del mismo modo que el número de lame, los animales prefieren las temperaturas neutras más de los dolorosos. El lama / relación nominal (L / F) para la sesión de línea de base se calculó mediante la OPAD y se ilustra enFigura 1E. Esta proporción es mucho más alta durante los tres no dolorosa 33 ° C sesiones (20-46 lame por contacto facial) que en las sesiones dolorosas de 45 ° C (3 lame por contacto facial) y 7 ° C (1 lamida por contacto facial ). A Medidas repetidas ANOVA One-Way fue significativa (F (4,52) = 6,2182, p &lt;0,001) para un efecto de la temperatura sobre la relación L / F. Prueba de Bonferroni fueron significativas cuando se comparan 33 ° C vs 7 ° C (p &lt;0,05), 45 ° C vs 33 ° C (2) (p &lt;0,01), y 33 ° C (2) frente a 7 ° C ( p &lt;0,01). N = 16 para todas las temperaturas. En la Figura 1F los roedores tratados con capsaicina (N = 8) no fueron significativamente diferentes de las ratas ingenuas (N = 8) en cualquiera de los neutro 33 ° C de temperatura. La capsaicina roedores tratados tenía una relación L / F significativamente inferior a 45 º C (prueba de la t, t (13) = 2,9350, p = 0,012). El grupo de la capsaicina tenía mayor L / F ratios a 7 ° C, pero esto no fue significativo. <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = &quot;always&quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50336/50336fig1.jpg" alt="Figura 1" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50336/50336fig1highres.jpg"/> Figura 1. Nocicepción medición con la OPAD. El comportamiento de una sola de roedores en la OPAD se representa por A) número de lame, B) Contactos, C) de temperatura del thermode durante la sesión, y D) la ingesta de recompensa en gramos. E) El lamen / la cara proporción es alta durante los tres no dolorosa 33 ° C sesiones y es significativamente menor en las sesiones dolorosas de 45 ° C y 7 ° C (medidas repetidas ANOVA de una vía, F (4,52) = 6,2182, p &lt;0,001, prueba de Bonferroni 33 ° C vs 7 ° C (p &lt;0,05, #), 45 ° C vs 33 ° C (2) (p &lt;0.01, **), y 33 ° C (2) vs 7 ° C (p &lt;0,01, # #). F) capsaicina roedores tratados tenían una relación L / F significativamente inferior a 45 º C (prueba de la t, t (13) = 2,9350, p = 0,012, *), pero enninguna de las temperaturas neutras. N = 16 para 1E y N = 8 de capsaicina y N = 8 para ingenuos para 1F. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/50336/50336fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver más grande la figura</a> .

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Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device OPAD to Measure Changes in Nociceptive Behavior (Video) | JoVE

Se presenta un sistema operante fácil de usar y de alto rendimiento para la evaluación de los comportamientos de dolor en roedores despierto, consciente. El Dispositivo de Evaluación del Dolor Orofacial (OPAD) puede evaluar el dolor a través de un paradigma de recompensa / conflicto proporcionando así una forma más humana de las pruebas. Este protocolo dará más datos clínicos relevantes y de la traducción de los roedores.

El uso del Dispositivo de Evaluación Dolor Orofacial operante (OPAD) para medir los cambios en el comportamiento nociceptivo

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Research

JoVE Journal

Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

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