Name: in vivo imaging of tumor angiogenesis using fluorescence confocal videomicroscopy
Uploaded: 2013-09-11T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy at JoVE.com

1. إعداد وكيل التباين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لFITC-ديكستران 70 كيلو دالتون، وجرعة حقن 500 ملغم / كغم (10 ملغ من FITC-ديكستران المخفف في 0.1 مل من المياه المالحة للماوس وزنها 20 غراما). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لا ينبغي أن يتعرض وكيل وقتا طويلا للضوء. لت...

<ol>
	<li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundamental+concepts+of+the+angiogenic+process.">Fundamental concepts of the angiogenic process.</a> Curr Mol Med. 3 (7), 643-651 (2003).</li><li>Laemmel, E., Genet, M., Le Goualher, G., Perchant, A., Le Gargasson, J. F., Vicaut, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibered+confocal+fluorescence+microscopy+(Cell-viZio)+facilitates+extended+imaging+in+the+field+of+microcirculation.+A+comparison+with+intravital+microscopy.">Fibered confocal fluorescence microscopy (Cell-viZio) facilitates extended imaging in the field of microcirculation. A comparison with intravital microscopy.</a> J Vasc Res. 41 (5), 400-411 (2004).</li><li>Charnley, N., Donaldson, S., Price, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+angiogenesis.">Imaging angiogenesis.</a> Methods Mol Biol. 467, 25-51 (2009).</li><li>Faye, N., Fournier, L., Balvay, D., Taillieu, F., Cuenod, C., Siauve, N., Clement, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+contrast+enhanced+optical+imaging+of+capillary+leakage.">Dynamic contrast enhanced optical imaging of capillary leakage.</a> Technol Cancer Res Treat. 10 (1), 49-57 (2011).</li><li>Kurose, I., Kubes, P., Wolf, R., Anderson, D. C., Paulson, J., Miyasaka, M., Granger, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+nitric+oxide+production.+Mechanisms+of+vascular+albumin+leakage.">Inhibition of nitric oxide production. Mechanisms of vascular albumin leakage.</a> Circ Res. 73 (1), 164-171 (1993).</li><li>Faye, N. F. L., Balvay, D., Thiam, R., Orliaguet, G., Clement, O., Dewachter, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macromolecular+capillary+leakage+is+involved+in+the+onset+of+anaphylactic+hypotension.">Macromolecular capillary leakage is involved in the onset of anaphylactic hypotension.</a> Anesthesiology. , (2012).</li><li>Faye, N., Fournier, L., Balvay, D., Thiam, R., Orliaguet, G., Clement, O., Dewachter, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Macromolecular Capillary Leakage Is Involved in the Onset of Anaphylactic Hypotension. Anesthesiology. 117 (5), 1072-1079 (2012).</li><li>Tozer, G. M., Kanthou, C., Baguley, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disrupting+tumour+blood+vessels.">Disrupting tumour blood vessels.</a> Nat Rev Cancer. 5 (6), 423-435 (2005).</li><li>Ntziachristos, V., Schellenberger, E. A., Ripoll, J., Yessayan, D., Graves, E., Bogdanov, A., Josephson, L., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+antitumor+treatment+by+means+of+fluorescence+molecular+tomography+with+an+annexin+V-Cy5.5+conjugate.">Visualization of antitumor treatment by means of fluorescence molecular tomography with an annexin V-Cy5.5 conjugate.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (33), 12294-12299 (2004).</li><li>Cuccia, D. J., Bevilacqua, F., Durkin, A. J., Merritt, S., Tromberg, B. J., Gulsen, G., Yu, H., Wang, J., Nalcioglu, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+quantification+of+optical+contrast+agent+dynamics+in+rat+tumors+by+use+of+diffuse+optical+spectroscopy+with+magnetic+resonance+imaging+coregistration.">In vivo quantification of optical contrast agent dynamics in rat tumors by use of diffuse optical spectroscopy with magnetic resonance imaging coregistration.</a> Appl Opt. 42 (16), 2940-2950 (2003).</li></ol>

أصبحت دراسة الورم دوران الأوعية الدقيقة الأساسية في فهم الفيزيولوجيا المرضية لنمو الورم ونشرها وردا على العلاج 1. التصوير الضوئي هو واحد من التقنيات التي يمكن استخدامها لمراقبة الشعيرات الدموية باستخدام عامل تباين الفلورسنت والمورفولوجية لقياس (الكثافة الشع...

الأوعية الدموية هي عملية معقدة 1 التي تنطوي على تشكيل أوعية دموية جديدة من السفن الموجودة من قبل. التغيرات المرضية في الأنسجة دوران الأوعية الدقيقة، التي تتألف من الشرايين، الشعيرات الدموية، والأوردة، وتورط في طائفة واسعة من الأمراض مثل السرطان، والتهاب، أو مرض السكري. وبالتالي فإنه لا بد من تطوير أساليب لتقييم كمي لهيكل microvessel وظيفة. التصوير تمكن من دراسة microvessels في غير الغازية أو الجزئي الطريقة، في الوقت الحقيقي والحية، والتدابير المتكررة على مر الزمن في نفس الحيوان 2. حاليا، ديناميكية محسنة النقيض (DCE) التصوير 3 يستخدم عادة لتقييم دوران الأوعية الدقيقة الأنسجة. التصوير محسنة تباين ديناميكية هو الأسلوب الذي يتبع مع مرور الوقت biodistribution من التتبع حقن عن طريق الوريد. من هذه الصفقة، المعلمات الكمي يمكن استخلاصها مما يعكس الأوعية الدموية الأنسجة. DCE التصويروقد غالبا ما تستخدم مع CT، MRI أو الموجات فوق الصوتية. ومع ذلك، وهذه تقنيات التصوير لا تسمح بالاطلاع المباشر على microvessels، منذ حلها، بخلاف مع استخدام أجهزة تجريبية محددة، وغالبا ما يبقى العيانية. في هذه الورقة، فإننا نقترح لدراسة الأوعية الدموية السرطانية على المستوى المجهري والحية باستخدام التصوير الضوئي الديناميكي محسنة النقيض من ذلك، مع فيبيريد videomicroscopy متحد البؤر. استخدمنا عامل تباين الجزيئات (FITC-ديكستران) التي لا تزال حصرا داخل الأوعية أو التسريبات من خلال حاجز غشائي في النسيج الخلالي، وفقا لثقلها الجزيئي وخصائص البطانة من الأنسجة درس 4. هذا يسمح للدراسة على حد سواء هيكل microvessel، من خلال ترسيم السفن بشكل صحيح، ونفاذية الشعيرات الدموية، من خلال تسريب وتتراكم في النسيج الخلالي.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td>Name</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Insulin serynge 
 Myjector 1ml 
 29G</td>
 <td>Terumo Europe </td>
 <td>BS-05M2913</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fluorescein isothiocyanate-dextran 70 kDa </td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>01619HH</td>
 <td>100 mg/mL 
 diluted in saline</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Fibered confocal videomicroscopy</td>
 <td>Cellvizio - MaunaKea Technologies</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Calibration and Cleaning Kit for LEICAFCM1000</td>
 <td>Leica Microsystems</td>
 <td>LSU-488</td>
 <td>Store at 4 &deg;C</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Probe ProFlexTM Z</td>
 <td>MaunaKea Technologies</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mosaicing software</td>
 <td>MaunaKea Technologies</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vessel detection software</td>
 <td>MaunaKea Technologies</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

in vivo imaging of tumor angiogenesis using fluorescence confocal videomicroscopy

فيبيريد متحد البؤر مضان في الجسم الحي التصوير مع حزمة من الألياف البصرية تستخدم نفس المبدأ الفلورسنت متحد البؤر المجهري. ويمكن ان تثير الفلورسنت في عناصر الموقعية من خلال الألياف البصرية، ومن ثم تسجيل بعض الفوتونات المنبعثة، عبر نفس الألياف البصرية. مصدر الضوء هو ليزر الذي يرسل الضوء من خلال إثارة عنصر ضمن حزمة من الألياف وكما يمسح على عينة، وبإعادة بكسل الصورة عن طريق بكسل. لأن هذا المسح هو سريع جدا، من خلال الجمع بين ذلك مع مكرسة برامج معالجة الصور، ويمكن الحصول على الصور في الوقت الحقيقي مع تواتر 12 لقطة / ثانية. قمنا بتطوير تقنية لوصف كميا التشكل الشعري وظيفة، وذلك باستخدام جهاز مضان videomicroscopy متحد البؤر. كانت الخطوة الأولى في تجربتنا لتسجيل 5 أفلام ثانية في الأرباع الأربعة من الورم لتصور شبكة الشعرية. تم تجهيز جميع الأفلام باستخدام برنامج (ImageCell، ماونا كيا التكنولوجيا، فرنسا باريس) أن ينفذ تجزئة الآلي السفن في جميع أنحاء قطر المختار (10 ميكرومتر في حالتنا). وبالتالي، فإننا لا يمكن قياس &quot;الكثافة الشعرية الفنية&quot;، والذي هو النسبة بين منطقة السفينة ومجموع المساحة الكلية للصورة. كان هذه المعلمة علامة بديلة للكثافة الاوعية الدموية الدقيقة، وعادة ما تقاس باستخدام أدوات علم الأمراض. كانت الخطوة الثانية لتسجيل الأفلام من الورم أكثر من 20 دقيقة لقياس التسرب من وكيل النقيض من الجزيئات من خلال جدار الشعيرات الدموية في النسيج الخلالي. عن طريق قياس نسبة كثافة إشارة في النسيج الخلالي على أنه في الأوعية، وحصلت على &quot;تسرب مؤشر &#39;، التي تعمل كمؤشر بديل لنفاذية الشعيرات الدموية.

باستخدام البيانات التي تم جمعها، ونحن يمكن تحليل كمي معلمات مختلفة تعكس دوران الأوعية الدقيقة. درسنا في الجسم الحي على شبكة الأوعية الدموية الطرفية وجود ورم القولون زرعها في الفئران BALB ج باستخدام نظام متحد البؤر مضان videomicros...

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy at JoVE.com

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

في هذه الورقة، نقدم طريقة لتحليل microvessels الورم في الجسم الحي باستخدام ديناميكية محسنة النقيض مضان videomicroscopy. تم الحصول على معلمتين الكمية: الكثافة الشعرية الفنية التي تعكس الأوعية الدموية للورم، وتسرب مؤشر يعكس التسرب من الجدار البطانية.

في الجسم الحي التصوير من ورم الأوعية الدموية باستخدام الإسفار متحد البؤر Videomicroscopy

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

في الجسم الحي الأدنى الإسفار التصوير بالأشعة تحت الحمراء داخل الأوعية (NIRF) الجزيئية من البلاك التهابية ، وهو النهج المتعدد الوسائط إلى التصوير من تصلب الشرايين

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

في ضوء بارد التصوير حيوية الجسم الحي من نقص الأكسجة ورم من الدماغ الانبثاث سرطان الثدي في نموذج الفأر

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

داخل الجمجمة وزراعة المجسم<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير Bioluminescent من الأعضاء المستمدة من الحيوانات ورم في النظام النموذجي ماوس من الأشكال ورم أرومي دبقي

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

ومتعددة الوسائط التصوير من الأوعية الدموية في نموذج الفئران عاري من سرطان الثدي الإنبثاث العظام باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي، الحجمي التصوير المقطعي والموجات فوق الصوتية

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

رواية عالية الدقة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; تقنية التصوير لدراسة الاستجابة الديناميكية للمنشآت داخل القحف لنمو الورم والتداوي

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

في الجسم الحي 19 F التصوير بالرنين المغناطيسي لتتبع الخليوي

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

In Vivo Optical Imaging of Brain Tumors and Arthritis Using Fluorescent SapC-DOPS Nanovesicles

In Vivo Optical Imaging of Brain Tumors and Arthritis Using Fluorescent SapC-DOPS Nanovesicles

في فيفو التصوير الضوئي من أورام الدماغ والتهاب المفاصل عن طريق نيون SapC-DOPS Nanovesicles

We describe a multi-angle rotational optical imaging (MAROI) system for in vivo monitoring of physiopathological processes labeled with a fluorescent ...

Validation of Nanobody and Antibody Based In Vivo Tumor Xenograft NIRF-imaging Experiments in Mice Using Ex Vivo Flow Cytometry and Microscopy

Validation of Nanobody and Antibody Based In Vivo Tumor Xenograft NIRF-imaging Experiments in Mice Using Ex Vivo Flow Cytometry and Microscopy

التحقق من Nanobody والجسم المضاد القائم<em&gt; في فيفو</em&gt; التجارب ورم طعم أجنبي NIRF التصوير في الفئران عن طريق<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; التدفق الخلوي والميكروسكوب

This protocol outlines the steps required to perform ex vivo validation of in vivo near-infrared fluorescence (NIRF) xenograft imaging experiments in mice ...

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

في فيفو ديناميات الشبكية دبقية التنشيط خلال تنكس عصبي: متحد البؤر Ophthalmoscopic التصوير والقياس الشكلي خلية في الماوس الزرق

Microglia, which are CNS-resident neuroimmune cells, transform their morphology and size in response to CNS damage, switching to an activated state with ...

Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo: A Model of Single Vessel Stroke

Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo:  A Model of Single Vessel Stroke

روز البنغال Photothrombosis بواسطة التصوير الضوئي متحد البؤر<em&gt; في فيفو</em&gt;: نموذج لسفينة واحدة السكتة الدماغية

In vivo imaging techniques have increased in utilization due to recent advances in imaging dyes and optical technologies, allowing for the ability to ...