Name: prp as a new approach to prevent infection: preparation and in vitro antimicrobial properties of prp
Uploaded: 2013-04-09T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about PRP as a New Approach to Prevent Infection: Preparation and In vitro Antimicrobial Properties of PRP at JoVE.com

Författarna tackar Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis, och Suzanne Smith för experimentell stöd och Suzanne Smith för korrekturläsning. Författarna tackar också John Thomas, PhD för att ge de bakteriella kliniska isolat och John B. Barnett, PhD för hans stöd och användningen av den biologiska säkerheten labbet vid institutionen för mikrobiologi, immunologi och cellbiologi vid West Virginia University. Författarna erkänner ekonomiskt stöd från Osteosyntesmaterial och Trauma Care Foundation och National Science Foundation (# 1.003.907). Mikroskop experiment och bildanalys utfördes också i West Virginia University Imaging Facility, som stöds delvis av Mary Babb Randolph Cancer Center och NIH bidrag P20 RR016440. Djur används för blod drar godkändes av West Virginia University Institutional Animal Care och användning kommittén. Alla experiment utfördes i enlighet med alla relevanta guidelines, förordningar och tillsynsmyndigheter.

1. Beredning och aktivering av PRP 1,1 blodprovstagning <ol><li> Söva kaninen genom inandning av isofluran (2% i O 2 för induktion och 1% för underhåll). </li><li> Rita 2 ml 0,129 M tri-natriumcitrat (en anticoagulent lösning) i en 20 ml spruta. Tri-natriumcitrat-lösning framställs genom att lösa 1,897 g trinatriumcitrat i 50 ml destillerat H 2 O och filtrering med en 0,22 um sterilt filter. </li><li> Sterilisera kaninörat användning av 70% etanol. </li><li> Dr...

<ol>
	<li>Gristina, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterial-centered+infection:+microbial+adhesion+versus+tissue+integration.">Biomaterial-centered infection: microbial adhesion versus tissue integration.</a> Science. 237, 1588-1595 (1987).</li><li>Gristina, A. G., Costerton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+adherence+to+biomaterials+and+tissue.+The+significance+of+its+role+in+clinical+sepsis.">Bacterial adherence to biomaterials and tissue. The significance of its role in clinical sepsis.</a> J. Bone Joint Surg. Am. 67, 264-273 (1985).</li><li>Everts, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reviewing+the+structural+features+of+autologous+platelet-leukocyte+gel+and+suggestions+for+use+in+surgery.">Reviewing the structural features of autologous platelet-leukocyte gel and suggestions for use in surgery.</a> Eur. Surg. Res. 39, 199-207 (2007).</li><li>Marx, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+(PRP):+what+is+PRP+and+what+is+not+PRP.">Platelet-rich plasma (PRP): what is PRP and what is not PRP.</a> Implant. Dent. 10, 225-228 (2001).</li><li>Toscano, N., Holtzclaw, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+considerations+in+the+use+of+platelet-rich+plasma.">Surgical considerations in the use of platelet-rich plasma.</a> Compend. Contin. Educ. Dent. 29, 182-185 (2008).</li><li>Cieslik-Bielecka, A., Gazdzik, T. S., Bielecki, T. M., Cieslik, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+the+platelet-rich+gel+has+antimicrobial+activity?.">Why the platelet-rich gel has antimicrobial activity?.</a> Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod. 103, 303-306 (2007).</li><li>Yeaman, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+platelets+in+antimicrobial+host+defense.">The role of platelets in antimicrobial host defense.</a> Clin. Infect. Dis. 25, 951-970 (1997).</li><li>Tang, Y. Q., Yeaman, M. R., Selsted, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides+from+human+platelets.">Antimicrobial peptides from human platelets.</a> Infect Immun. 70, 6524-6533 (2002).</li><li>El-Sharkawy, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma:+growth+factors+and+pro-+and+anti-inflammatory+properties.">Platelet-rich plasma: growth factors and pro- and anti-inflammatory properties.</a> J. Periodontol. 78, 661-669 (2007).</li><li>Krijgsveld, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombocidins,+microbicidal+proteins+from+human+blood+platelets,+are+C-terminal+deletion+products+of+CXC+chemokines.">Thrombocidins, microbicidal proteins from human blood platelets, are C-terminal deletion products of CXC chemokines.</a> J. Biol. Chem. 275, 20374-20381 (2000).</li><li>Trowbridge, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+platelet+gel+and+its+effects+on+infection+in+cardiac+surgery.">Use of platelet gel and its effects on infection in cardiac surgery.</a> J. Extra Corpor. Technol. 37, 381-386 (2005).</li><li>Gristina, A. G., Naylor, P., Myrvik, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infections+from+biomaterials+and+implants:+a+race+for+the+surface.">Infections from biomaterials and implants: a race for the surface.</a> Med. Prog. Technol. 14, 205-224 (1988).</li><li>Subbiahdoss, G., Kuijer, R., Grijpma, D. W., vander Mei, H. C., Busscher, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+biofilm+growth+vs.+tissue+integration:+"the+race+for+the+surface"+experimentally+studied.">Microbial biofilm growth vs. tissue integration: "the race for the surface" experimentally studied.</a> Acta Biomater. 5, 1399-1404 (2009).</li><li>Klevens, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+infections+in+the+United+States.">Invasive methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in the United States.</a> JAMA. 298, 1763-1771 (2007).</li><li>Foster, T. E., Puskas, B. L., Mandelbaum, B. R., Gerhardt, M. B., Rodeo, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma:+from+basic+science+to+clinical+applications.">Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications.</a> Am. J. Sports Med. 37, 2259-2272 (2009).</li><li>Carlson, N. E., Roach, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma:+clinical+applications+in+dentistry.">Platelet-rich plasma: clinical applications in dentistry.</a> J. Am. Dent. Assoc. 133, 1383-1386 (2002).</li><li>Man, D., Plosker, H., Winland-Brown, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+autologous+platelet-rich+plasma+(platelet+gel)+and+autologous+platelet-poor+plasma+(fibrin+glue)+in+cosmetic+surgery.">The use of autologous platelet-rich plasma (platelet gel) and autologous platelet-poor plasma (fibrin glue) in cosmetic surgery.</a> Plast. Reconstr. Surg. 107, 229-237 (2001).</li><li>Fridkin, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiological+and+microbiological+characterization+of+infections+caused+by+Staphylococcus+aureus+with+reduced+susceptibility+to+vancomycin,+United+States,+1997-2001.">Epidemiological and microbiological characterization of infections caused by Staphylococcus aureus with reduced susceptibility to vancomycin, United States, 1997-2001.</a> Clin. Infect. Dis. 36, 429-439 (1997).</li><li>Jackson, C. R., Fedorka-Cray, P. J., Davis, J. A., Barrett, J. B., Frye, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence,+species+distribution+and+antimicrobial+resistance+of+enterococci+isolated+from+dogs+and+cats+in+the+United+States.">Prevalence, species distribution and antimicrobial resistance of enterococci isolated from dogs and cats in the United States.</a> J. Appl. Microbiol. 107, 1269-1278 (2009).</li><li>Murray, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+multidrug-resistant+bacteria+from+combat+personnel+evacuated+from+Iraq+and+Afghanistan+at+a+single+military+treatment+facility.">Recovery of multidrug-resistant bacteria from combat personnel evacuated from Iraq and Afghanistan at a single military treatment facility.</a> Mil. Med. 174, 598-604 (2009).</li><li>Durr, M., Peschel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+meet+defensins:+the+merging+concepts+of+chemoattractants+and+antimicrobial+peptides+in+host+defense.">Chemokines meet defensins: the merging concepts of chemoattractants and antimicrobial peptides in host defense.</a> Infect Immun. 70, 6515-6517 (2002).</li><li>Hancock, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptide+antibiotics.">Peptide antibiotics.</a> Lancet. 349, 418-422 (1997).</li><li>Dohan Ehrenfest, D. M., Rasmusson, L., Albrektsson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification+of+platelet+concentrates:+from+pure+platelet-rich+plasma+(P-PRP)+to+leucocyte-+and+platelet-rich+fibrin+(L-PRF).">Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF).</a> Trends Biotechnol. 27, 158-167 (2009).</li><li>Kalen, A., Wahlstrom, O., Linder, C. H., Magnusson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+content+of+bone+morphogenetic+proteins+in+platelets+varies+greatly+between+different+platelet+donors.">The content of bone morphogenetic proteins in platelets varies greatly between different platelet donors.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 375, 261-264 (2008).</li><li>Weibrich, G., Kleis, W. K., Hafner, G., Hitzler, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+factor+levels+in+platelet-rich+plasma+and+correlations+with+donor+age,+sex,+and+platelet+count.">Growth factor levels in platelet-rich plasma and correlations with donor age, sex, and platelet count.</a> J. Craniomaxillofac. Surg. 30, 97-102 (2002).</li><li>Mazzucco, L., Balbo, V., Cattana, E., Guaschino, R., Borzini, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Not+every+PRP-gel+is+born+equal.+Evaluation+of+growth+factor+availability+for+tissues+through+four+PRP-gel+preparations:+Fibrinet,+RegenPRP-Kit,+Plateltex+and+one+manual+procedure.">Not every PRP-gel is born equal. Evaluation of growth factor availability for tissues through four PRP-gel preparations: Fibrinet, RegenPRP-Kit, Plateltex and one manual procedure.</a> Vox Sang. 97, 110-118 (2009).</li><li>Lei, H., Gui, L., Xiao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+anticoagulants+on+the+quality+and+biological+efficacy+of+platelet-rich+plasma.">The effect of anticoagulants on the quality and biological efficacy of platelet-rich plasma.</a> Clin. Biochem. 42, 1452-1460 (2009).</li><li>Redler, L. H., Thompson, S. A., Hsu, S. H., Ahmad, C. S., Levine, W. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+therapy:+a+systematic+literature+review+and+evidence+for+clinical+use.">Platelet-rich plasma therapy: a systematic literature review and evidence for clinical use.</a> Phys. Sportsmed. 39, 42-51 (2011).</li><li>Whitman, D. H., Berry, R. L., Green, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+gel:+an+autologous+alternative+to+fibrin+glue+with+applications+in+oral+and+maxillofacial+surgery.">Platelet gel: an autologous alternative to fibrin glue with applications in oral and maxillofacial surgery.</a> J. Oral Maxillofac. Surg. 55, 1294-1299 (1997).</li><li>Anitua, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+rich+in+growth+factors:+preliminary+results+of+use+in+the+preparation+of+future+sites+for+implants.">Plasma rich in growth factors: preliminary results of use in the preparation of future sites for implants.</a> Int. J. Oral Maxillofac. Implants. 14, 529-535 (1999).</li><li>Whitman, D. H., Berry, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+improving+the+handling+of+particulate+cancellous+bone+and+marrow+grafts+using+platelet+gel.">A technique for improving the handling of particulate cancellous bone and marrow grafts using platelet gel.</a> J. Oral. Maxillofac. Surg. 56, 1217-1218 (1998).</li><li>Currie, L. J., Sharpe, J. R., Martin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+fibrin+glue+in+skin+grafts+and+tissue-engineered+skin+replacements:+a+review.">The use of fibrin glue in skin grafts and tissue-engineered skin replacements: a review.</a> Plast. Reconstr. Surg. 108, 1713-1726 (2001).</li><li>Nikulin, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+calcium,+thrombin+and+nucleotides+(ADP,+cAMP,+cGMP)+on+blood+platelet+glycolysis+and+energy+metabolism.">Effect of calcium, thrombin and nucleotides (ADP, cAMP, cGMP) on blood platelet glycolysis and energy metabolism.</a> Farmakol. Toksikol. 43, 585-590 (1980).</li><li>Hantgan, R. R., Taylor, R. G., Lewis, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelets+interact+with+fibrin+only+after+activation.">Platelets interact with fibrin only after activation.</a> Blood. 65, 1299-1311 (1985).</li><li>Hantgan, R., Fowler, W., Erickson, H., Hermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+assembly:+a+comparison+of+electron+microscopic+and+light+scattering+results.">Fibrin assembly: a comparison of electron microscopic and light scattering results.</a> Thromb. Haemost. 44, 119-124 (1980).</li><li>Li, B., Jiang, B., Boyce, B. M., Lindsey, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilayer+polypeptide+nanoscale+coatings+incorporating+IL-12+for+the+prevention+of+biomedical+device-associated+infections.">Multilayer polypeptide nanoscale coatings incorporating IL-12 for the prevention of biomedical device-associated infections.</a> Biomaterials. 30, 2552-2558 (2009).</li><li>Li, B., Jiang, B., Dietz, M. J., Smith, E. S., Clovis, N. B., Rao, K. M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+local+MCP-1+and+IL-12+nanocoatings+for+infection+prevention+in+open+fractures.">Evaluation of local MCP-1 and IL-12 nanocoatings for infection prevention in open fractures.</a> J. Orthop. Res. 28, 48-54 (2010).</li><li>Boyce, B. M., Lindsey, B. A., Clovis, N. B., Smith, E. S., Hobbs, G. R., Hubbard, D. F., Emery, S. E., Barnett, J. B., Li, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Additive+effects+of+exogenous+IL-12+supplementation+and+antibiotic+treatment+in+infection+prophylaxis.">Additive effects of exogenous IL-12 supplementation and antibiotic treatment in infection prophylaxis.</a> J. Orthop. Res. 30 (2), 196-202 (2012).</li></ol>

Trombocytrik plasma har blivit allt vanligare för kliniska tillämpningar på grund av dess läkande-främjande egenskaper 15-17. I den aktuella studien har PRP presenteras som en ny strategi för infektionsbekämpning. PRP befanns ha starka antimikrobiella egenskaper mot MRSA, MSSA, grupp A-streptokocker, och Neisseria gonorrhoeae. De stora fördelarna med PRP, jämfört med konventionella antibiotikabehandlingar för infektionsbekämpning inkluderar: (1) Aktuella antibiotika behandlingar ...

Implantat-associerad infektion är en signifikant klinisk komplikation. Staphylococcus aureus (S. aureus) är en av de vanligaste mikroorganismer som isolerats från implantat-associerade infektioner. Det är kapabel att producera en biofilm som täcker ytorna av implantat och kan leda till antibiotika-resistenta infektioner 1,2. Behandling av implantat-associerade infektioner kräver ofta långvarig sjukhusvård för upprepade debridements och långvarig parenteral antibiotikabehandling. I antibiotikaresistenta fall kan avlägsnande av implantatet vara nödvändig. Den ökande bakteriers resistens mot antibiotika har också hänvisat till Centers for Disease Control and Prevention (CDC) som &quot;en av världens mest akuta hälsoproblem.&quot; Med tiden utan att utveckla nya och effektiva antimikrobiella behandlingar, är det möjligt att multiresistenta patogener är behandlingsbart med konventionella antibiotika. Förebyggande av implantat-associeradeinfektion är därför viktigt och nya profylaktiska medel eller metoder behövs för att förhindra sådana infektioner. Blodplättsrik plasma (PRP) är en koncentration av autologt blod som innehåller över 30 tillväxtfaktorer som kan hjälpa till med ben och bentransplantat helande 3-5. Tillämpningen av PRP för att förbättra benuppbyggnad och mjukvävnad mognad har alltmer rapporterats i kliniker på grund av dess höga koncentration av olika tillväxtfaktorer som frisätts av trombocyter. Flera egenskaper hos PRP indikerar att PRP även kan ha antimikrobiella egenskaper 6-9. PRP innehåller ett stort antal blodplättar, en hög koncentration av leukocyter (som kan ha värd-försvar åtgärder mot bakterier och svampar), och flera antimikrobiella peptider 7,8,10. I en nyligen genomförd studie av en stor kohort av hjärt kirurgiska patienter visade det sig att intraoperativ användning av PRP-gel under tillslutning av sår betyär markant minskade förekomsten av ytlig och djup bröstbenet infektion 11. Av dessa skäl och observationer, hypotes vi att PRP, förutom de väl studerade läkande-främjande egenskaper har antimikrobiella egenskaper. De potentiella fördelarna med att använda PRP för att förhindra infektion kan innefatta: (i) PRP är mindre troligt att framkalla resistens jämfört med konventionella antibiotikabehandlingar. (Ii) PRP har också egenskaper som främjar läkning, som kan ha en synergistisk effekt på infektionsbekämpning, PRP helande-främja egenskaper kan ge en tätning för att förhindra bakteriell infästning därigenom minska oddsen för infektion som patogener och mänskliga celler racing för implantatytor 12 , 13. (Iii) PRP är i sig biokompatibel och säker och fri från risken för smittsamma sjukdomar. Vårt långsiktiga mål är att använda PRP som en ny strategi för att förhindra implantat-associerade infections. Syftet med denna studie var att förbereda PRP med en dubbelt centrifugering tillvägagångssätt att undersöka PRP s in vitro antimikrobiella egenskaper, och beskriva protokollen för utvärdering av sådana antimikrobiella egenskaper.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Bovine thrombin</td>
 <td>King Pharmaceuticals, Inc </td>
 <td>60793-215-05</td>
 <td>Thrombin (bovine origin)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Calcium chloride</td>
 <td>King Pharmaceuticals, Inc</td>
 <td>60793-215-05</td>
 <td>10% calcium chloride</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ethanol</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>E7023</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Isoflurane</td>
 <td>Baxter</td>
 <td>1001936060</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mueller Hinton broth</td>
 <td>Becton, Dickinson and Company</td>
 <td>275710</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Phosphate-buffered saline</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>D8662</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Tri-sodium citrate</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>W302600</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Tryptic soy agar</td>
 <td>Fisher Scientific</td>
 <td>R01202</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Centrifuge</td>
 <td>Kendro Laboratory Products</td>
 <td>750043077</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Syringe filter</td>
 <td>Millipore</td>
 <td>SLGP033RS</td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

prp as a new approach to prevent infection: preparation and in vitro antimicrobial properties of prp

Implantat-associerad infektion blir mer och mer utmanande att sjukvården i världen på grund av ökande antibiotikaresistens, överföring av antibiotikaresistenta bakterier mellan djur och människor, och de höga kostnaderna för behandling av infektioner. I denna studie beskriver vi en ny strategi som kan vara effektiva för att förhindra implantat-associerad infektion baserad på de potentiella antimikrobiella egenskaperna hos blodplättsrik plasma (PRP). På grund av dess väl studerade egenskaper för att främja läkning har PRP (en biologisk produkt) alltmer används för kliniska tillämpningar, inbegripet ortopedisk kirurgi, periodontala och muntliga operationer, maxillofacial kirurgi, plast operationer, idrottsmedicin, etc. PRP kan vara ett avancerat alternativ till konventionella antibiotikabehandlingar att förebygga implantat-associerade infektioner. Användningen av PRP kan vara fördelaktig jämfört med konventionella antibiotiska behandlingar since PRP är mindre troligt att framkalla antibiotikaresistens och PRP s antimikrobiella och helande-främja egenskaper kan ha en synergistisk effekt på infektionsbekämpning. Det är väl känt att patogener och mänskliga celler racing för implantatytor, och PRP: s egenskaper för att främja läkning kunde förbättra människors cellvidhäftning varigenom oddsen för infektion. Dessutom är PRP sig biokompatibel och säker och fri från risken för smittsamma sjukdomar. För vår studie har vi valt flera kliniska bakteriestammar som är vanliga i ortopediska infektioner och undersökte om PRP har in vitro antimikrobiella egenskaper mot dessa bakterier. Vi har förberett PRP med en dubbelt centrifugering strategi som gör det möjligt för samma blodplättskoncentration kan erhållas för samtliga prover. Vi har uppnått konsekvent antimikrobiella fynd och fann att PRP har starka in vitro antimikrobiella egenskaper mot bakterier som methicillin-känslig och meticillinresistenta Staphylococcus aureus, grupp A-streptokocker, och Neisseria gonorrhoeae. Därför kan användningen av PRP har potential att förhindra infektion och minska behovet av kostsamma postoperativ behandling av implantat-infektioner.

PRP är reproducerbart med användning två gånger centrifugering strategi (Figur 1). PRP visar sig utgöra stark (upp till 100-faldig minskning i CFU) in vitro antimikrobiella egenskaper mot meticillinresistent S. aureus (MRSA) (Figur 3), som vanligen finns på sjukhus över hela världen 14. Likaså, har PRP starka antimikrobiella egenskaper mot meticillin känslig S. aureus (MSSA), grupp A-streptokocker, och Neisseria gonorrhoeae.</...

Watch this Scientific Journal Video about PRP as a New Approach to Prevent Infection: Preparation and In vitro Antimicrobial Properties of PRP at JoVE.com

PRP as a New Approach to Prevent Infection: Preparation and In vitro Antimicrobial Properties of PRP

Implantat-associerad infektion är en signifikant klinisk komplikation. Denna studie beskriver en metod med blodplättsrik plasma (PRP) för att förhindra implantat-associerade infektioner presenterar protokollet för att förbereda PRP med konstant blodplättskoncentration, och rapporterar de nyligen identifierade antimikrobiella egenskaper PRP och relaterade protokoll för att undersöka sådana antimikrobiella egenskaper<em&gt; In vitro.</em

PRP som en ny metod för att förhindra infektion: Förberedelser och<em&gt; In vitro</em&gt; Antimikrobiella egenskaper hos PRP

Implant-associated infection is becoming more and more challenging to the healthcare industry worldwide due to increasing antibiotic resistance, ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

PRP as a New Approach to Prevent Infection: Preparation and In vitro Antimicrobial Properties of PRP

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Retroviral Transduction av T-cell receptorer i Mus T-celler

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Introduktion Shear stress i studien av bakteriell vidhäftning

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Simple and Robust in vivo and in vitro Approach for Studying Virus Assembly

Simple and Robust in vivo and in vitro Approach for Studying Virus Assembly

Enkel och robust In vivo Och In vitro Tillvägagångssätt för att studera Virus Assembly

In viruses with positive-sense RNA genomes pathogenic to humans, animals and plants, progeny encapsidation into mature and stable virions is a cardinal ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Användning av artificiell Sputum Medium för att testa antibiotika effekt mot<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; I villkor som är mer relevanta för cystisk fibros Lung

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

Ett<em&gt; In vitro</em&gt; Modell för att studera skillnader mellan de mänskliga makrofagdifferentiering och polarisation

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Användning av<em&gt; Galleria mellon</em&gt; Som modellorganism för att studera<em&gt; Legionella pneumophila</em&gt; Infektion

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Övervaknings Förändringar i Membrane polaritet, Membrane Integritet och intracellulära jonkoncentrationer i<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Med hjälp av fluorescerande färger

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

A Simple and Efficient Approach to Construct Mutant Vaccinia Virus Vectors

En enkel och effektiv strategi för att konstruera Mutant vacciniavirus vektorer

The CRISPR-associated endonuclease Cas9 can edit particular genomic loci directed by a single guide RNA (gRNA). The CRISPR/Cas9 system has been ...

Retroviral Transduction of Helper T Cells as a Genetic Approach to Study Mechanisms Controlling their Differentiation and Function

Retroviral Transduction av Helper T-celler som en genetisk strategi för att studera mekanismer som styr deras differentiering och funktion

Helper T cell development and function must be tightly regulated to induce an appropriate immune response that eliminates specific pathogens yet prevents ...

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

A Novel Feeder-free System for Mass Production of Murine Natural Killer Cells In Vitro

En roman Feeder-fria System för massproduktion av murina naturliga mördarceller In Vitro

Natural killer (NK) cells belong to the innate immune system and are a first-line anti-cancer immune defense; however, they are suppressed in the tumor ...