Name: osmotic drug delivery to ischemic hindlimbs and perfusion of vasculature with microfil for micro-computed tomography imaging
Uploaded: 2013-06-29T13:00:00
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저자는 편집 지원을위한 마이크로 CT 수술 지원 영상, 에드워드 TH 예치, MD, 레베카 바토, 박사와의 기술 지원을위한 MD 앤더슨 작은 동물 이미징 시설의 키스 미셸에게 감사의 말씀을 전합니다. 이 작품은 미국 심장 협회 (American Heart Association)에 의해 부분적으로 지원되었다.

1. 프라이밍 삼투 펌프 <ol><li> 펌프를 준비 할 때 무균 기법 (예 : 장갑, 층류 후드)를 사용합니다. 포장의 펌프와 유량 사회자를 제거합니다. 빈 펌프를 달아 무게 (MG)를 기록합니다. </li><li> 작은 1CC 주사기와 뭉툭한 팁 27G 충전 튜브를 사용하여 공기 방울을 만드는 피하기 위해 천천히 펌프를 채우십시오. 솔루션은 펌프의 상단에 도달하면 충전 중지합니다. </li><li> 과량의 용액을 닦아 채워...

<ol>
	<li>Epstein, S. E., Fuchs, S., Zhou, Y. F., Baffour, R., Kornowski, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+interventions+for+enhancing+collateral+development+by+administration+of+growth+factors:+basic+principles,+early+results+and+potential+hazards.">Therapeutic interventions for enhancing collateral development by administration of growth factors: basic principles, early results and potential hazards.</a> Cardiovasc. Res. 49, 532-542 (2001).</li><li>Esaki, J., Marui, A., Tabata, Y., Komeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+release+systems+of+angiogenic+growth+factors+for+cardiovascular+diseases.">Controlled release systems of angiogenic growth factors for cardiovascular diseases.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 4, 635-649 (2007).</li><li>Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+microcomputed+tomography+to+study+microvasculature+in+small+rodents.">The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, 1267-1279 (2002).</li><li>Golomb, B. A., Dang, T. T., Criqui, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+arterial+disease:+morbidity+and+mortality+implications.">Peripheral arterial disease: morbidity and mortality implications.</a> Circulation. 114, 688-699 (2006).</li><li>Hiatt, W. 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Med. 9, 713-725 (2003).</li><li>Hirsch, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACC/AHA+Guidelines+for+the+Management+of+Patients+with+Peripheral+Arterial+Disease+(lower+extremity,+renal,+mesenteric,+and+abdominal+aortic):+a+collaborative+report+from+the+American+Associations+for+Vascular+Surgery/Society+for+Vascular+Surgery,+Society+for+Cardiovascular+Angiography+and+Interventions,+Society+for+Vascular+Medicine+and+Biology,+Society+of+Interventional+Radiology,+and+the+ACC/AHA+Task+Force+on+Practice+Guidelines+(writing+committee+to+develop+guidelines+for+the+management+of+patients+with+peripheral+arterial+disease)--summary+of+recommendations.">ACC/AHA Guidelines for the Management of Patients with Peripheral Arterial Disease (lower extremity, renal, mesenteric, and abdominal aortic): a collaborative report from the American Associations for Vascular Surgery/Society for Vascular Surgery, Society for Cardiovascular Angiography and Interventions, Society for Vascular Medicine and Biology, Society of Interventional Radiology, and the ACC/AHA Task Force on Practice Guidelines (writing committee to develop guidelines for the management of patients with peripheral arterial disease)--summary of recommendations.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 17, 1383-1397 (2006).</li><li>Zagorchev, L., Mulligan-Kehoe, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+of+vessels+in+mouse+models+of+disease.">Molecular imaging of vessels in mouse models of disease.</a> Eur. J. Radiol. 70, 305-311 (2009).</li><li>Losordo, D. W., Dimmeler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+angiogenesis+and+vasculogenesis+for+ischemic+disease.+Part+I:+angiogenic+cytokines.">Therapeutic angiogenesis and vasculogenesis for ischemic disease. Part I: angiogenic cytokines.</a> Circulation. 109, 2487-2491 (2004).</li><li>Waters, R. E., Terjung, R. L., Peters, K. G., Annex, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+models+of+human+peripheral+arterial+occlusive+disease:+implications+for+investigation+of+therapeutic+agents.">Preclinical models of human peripheral arterial occlusive disease: implications for investigation of therapeutic agents.</a> J. Appl. Physiol. 97, 773-780 (2004).</li></ol>

여기에서 우리는 뒷다리 허혈의 마우스 모델에서 삼투압 약물 / 물질 전달을위한 방법을 제시한다. 또한, 우리는 우리가 혈관 네트워크 분석을위한 3D 재구성을 생산하는 Microfil을 사용하고있는 주조 기술을 설명합니다. 허혈의 수준이나 정도는 동맥 결찰술 / 절단이 이루어진 위치에 따라 다릅니다. 우리는 profunda 대퇴 및 epigastrica 동맥의 기원에 인접 일반적으로 대퇴 동맥?...

말초 동맥 질환 (PAD)는 다리 4 불충분 한 혈액 공급을 일으키는 동맥 경화성 질환입니다. 그것은 8-12000000 미국인에 영향을 미치는, 그리고 현재의 의료 치료는 제한된 구제 5,6을 제공합니다. 다리에 혈액 순환을 개선하는 새로운 치료제는 질병의 진행을 억제뿐만 아니라 삶의 질을 향상하지 않을 것입니다. 종종 노인 환자에서 볼 수 감소 신장과 간 기능이 약의 대사를 감소시키고 조직 관리와 부작용을 증가시킬 수 있기 때문에 PAD의 발생 50 세 이상의 사람에서 더 높은, 그래서 지역 약물 치료는 더 바람직한 치료 방법이다. 따라서, 우리는 로컬에서 관리 에이전트가 혈관 및 미세 혈관의 리모델링을 촉진하여 뒷다리 허혈을 완화 여부를 검사하는 PAD의 마우스 모델을 만들었습니다. 특히, 우리는 지속적으로 치료제를 제공 할 catheterized 삼투 펌프를 사용쥐의 허혈성 허벅지 근육. 우리의 배달 시스템을 사용하여, 우리는 로컬 환경에서 약물의 최적 농도를 유지할 수 있었다;이 방법은 적절한 약물 생리 활성을 허용 가능한 전신 부작용을 피하고, 전신 관리와 관련된 제한 지역 마약 액세스의 단점을 극복한다. 또한, 로컬 관리 에이전트가 시술을 촉진 여부를 평가하기 위해, 우리는 진보 된 주조와 미세 혈관의 변화를 정량화를 가능하게 고화질 영상 기법을 사용했다. 종합적으로,이 비디오 문서에서 사용되는 방법론의 조합은 PAD 환자에 7-9 약리학 유도 시술을 이해하는 데 도움이되는 전임상 연구에 유용합니다.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagent/Material</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td></td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Puritan sterile cotton swabs</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-029-499</td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Betadine (povidone-iodine)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-065534</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>70% Alcohol pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9926371</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-516F</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>6-0 prolene suture</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>8709</td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>8-0 prolene suture</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>2775</td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td></td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Osmotic pump</td>
			<td>ALZET</td>
			<td>1002</td>
			<td>Type: Tool, 14 day release</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Vinyl catheter</td>
			<td>ALZET</td>
			<td>7760</td>
			<td>Type: Tool</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Heparinized saline (0.9%)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B0944</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Neutral buffered formalin</td>
			<td>Richard-Allan Scientific</td>
			<td>5705</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Microfil (silicone rubber contrast agent)</td>
			<td>Flowtech</td>
			<td>MV-112</td>
			<td>Type Reagent, Microfil White</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Cal-Ex II (formic acid solution)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>CS511-1D</td>
			<td>Type: Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Buprenex</td>
			<td>CIII</td>
			<td>7571</td>
			<td>Type: Analgesic</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Bupivicaine</td>
			<td>Hospira, Inc.</td>
			<td>381</td>
			<td>Type: Analgesic</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Carl Zeiss Microimaging</td>
			<td>Zeiss Stemi 2000-C</td>
			<td>Type:Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Laser Doppler perfusion imager</td>
			<td>Perimed Inc.</td>
			<td>Periscan PIM3 </td>
			<td>Type:Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Micro-CT imaging system</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>Explore Locus SP </td>
			<td>Type:Equipment</td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

osmotic drug delivery to ischemic hindlimbs and perfusion of vasculature with microfil for micro-computed tomography imaging

말초 동맥 질환의 동물 모델에서 전임상 연구는 미세 혈관을 자극하도록 설계 치료제의 효능을 테스트하는 중요한 역할을합니다. 투여 경로 뿌리깊은 이러한 에이전트 1,2의 생리 활성과 효능에 영향을주기 때문에 이러한 에이전트에 대한 배송 방법의 선택이 중요합니다. 이 문서에서는, 우리는 로컬 catheterized 삼투 펌프를 사용하여 허혈성 뒷다리에있는 물질을 관리하는 방법을 보여줍니다. 이 펌프는 시간이 할당 된 기간 동안 지속적으로 수용액의 정량을 제공 할 수 있습니다. 우리는 또한 왼쪽 뒷다리에 profunda 대퇴 및 epigastrica 동맥의 기원에 인접 일반적으로 대퇴 동맥의 결찰에 의한 일방적 인 뒷다리 허혈 우리의 마우스 모델을 제시한다. 마지막으로, 우리는 Microfil, 실리콘 방사선 불 투과성 캐스팅 에이전트 infrarenal 복부 대동맥과 뒷다리의 혈관의 관류의 생체 도관 및 결찰에 대해 설명합니다. Microfil이 붓는다 및 채우기 전체 혈관 침대 (동맥과 정맥), 우리는 출구의 주요 혈관 도관 결찰했기 때문에 에이전트는 작은 표본 마이크로 CT 3의 사용과 향후 생체 이미징 혈관에서 유지 될 수있다 .

애니메이션은 프로토콜에 설명 된 삼투 펌프 삽입 및 뒷다리 허혈 수술을 보여줍니다. 그림 1은 허혈을 확인, 뒷다리의 관류의 레이저 도플러 영상을 보여줍니다. Microfil와 혈관 캐스팅 후 혈관 네트워크의 3D 마이크로 CT 이미지 Microfil (그림 2A) 효과적으로 혈관을 채울 수 있음을 보여줍니다하지만 불연속 (예를 들면, 기포의 부족으로 여러 절차 요인으로 인해 <stron...

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Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

우리는 여기서 보여<em&gt; 생체 내</em일정한 지역 약물 전달 및 마우스 모델에서 뒷다리 허혈의 생성을위한 삼투 펌프&gt; 삽입. 또한, 뒷다리의 혈관은 미세 전산화 단층 촬영 (마이크로 CT) 영상을 준비하기 위해, Microfil, 실리콘 방사선 불 투과성 에이전트와 관류 있습니다.

마이크로 컴퓨터 단층 촬영 영상에 대한 Microfil와 허혈성 뒷발과 혈관의 관류에 삼투의 약물 전달 (Drug Delivery)

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

마이크로 계산된 Tomography 이미징을위한 준비로서 역행 관류 및 마우스 관상 Vasculature의 작성

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

연구

의학

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

마이크로 컴퓨터 단층 촬영과 누드 마우스에 인간의 지방 주입의 생존 능력의 평가

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

종양 개발의 평가를 위해 마이크로 컴퓨터 단층 촬영을 사용하고 후속 치료에 대한 반응의를 폐암의 마우스 모델에서

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

마우스 동정맥루 내피에 관내 약물 전달

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

직접 대뇌 Thromboemboli 시각화를위한 결합 된 근적외선 형광 이미징 및 마이크로 계산 된 단층 촬영

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

쥐 간 문부 클램프 모델을 사용하여 직접 분절 인트라 간 납품 방법

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The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

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